缺氧对神经细胞缺氧诱导因子—1αmRNA表达的影响

目的：提示在缺氧状态下神经细胞缺氧诱导因子－1α（HIF-1α）mRNA表达的时空规律。方法：对分离的新生SD大鼠在脑皮质神经细胞分别进行常规和缺氧培养,采用定量逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）检测神经细胞在不同缺氧时间HIF－1αmRNA的表达,结果：神经细胞在常氧下HIF－1αmRNA有极低的表达,在缺氧30min时表达显著上升,60min达到高峰,90min后逐渐下降。与对照组比较,各缺氧组HIF－1αmRNA的表达均有显著性差异（P＜0．01）。结论：神经细胞在缺氧早期HIF－1αmRNA表达有短暂、迅速的增加。     

缺氧诱导因子1表达抑制使缺氧-复氧的PC12细胞氧自由基生成增加

目的：研究：PC12细胞化学性缺氧-复氧以及缺氧诱导因子1α(HIF1α)反义寡核苷酸对HIF1α蛋白表达和氧自由基生成的影响。方法：制造化学缺氧-复氧模型，用含或不含氯化钴的DMEM培养液孵育PC12细胞。封闭HIF1α基因表达，用含HIF1α反义寡核苷酸和氯化钴的DMEM培养液孵育PC12细胞。HIF1α寡核苷酸进行同样处理和只用含氯化钴的DMEM培养液孵育PC12细胞作为对照。采用免疫细胞化学染色法检测HIF1α蛋白表达，并用激光共聚焦显微镜进行半定量。检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量，间接反映氧自由基的生成量。结果：与缺氧组相比，缺氧-复氧组复氧后HIF1α蛋白表达受到抑制，同时氧自由基生成增加。HIF1α反义寡核苷酸亦可抑制HIF1α蛋白表达和升高氧自由基水平。结论：抑制HIF1α的表达可导致氧自由基大量生成，加重缺氧-复氧PC12细胞的损伤。     

不同缺氧方法诱导BeWo细胞缺氧诱导因子1α表达的实验研究

【目的】探讨用于滋养细胞缺氧研究的缺氧方法及滋养细胞模型。【方法】滋养细胞来源的BeWo细胞系,分4组培养:正常对照组、低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组。培养4 8h后收集细胞,应用实时定量PCR方法,检测BeWo细胞HIF- 1αmRNA表达水平;应用Westernblot方法,检测BeWo细胞HIF -1α蛋白的表达水平。【结果】与正常对照组相比,低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组的HIF- 1α蛋白和mRNA表达均明显升高;与低氧浓度组比较,二氯化钴组和去铁敏组HIF 1α蛋白和mRNA表达水平无明显差异。【结论】环境缺氧和细胞缺氧均可诱导BeWo细胞HIF 1α的表达,二氯化钴或去铁敏可以作为缺氧方法用于滋养细胞缺氧方面的研究,BeWo细胞也可作为一种细胞模型用于HIF -1α表达的研究。     

柴胡注射液对小鼠灌流肝脏缺氧复氧损伤的保护作用

采用小鼠离体肝灌流术在Krebs－Henseleit（K－H）灌流液中加入柴胡注射液，观察柴胡对肝缺氧（1h）复氧（1h）的影响。结果表明：柴胡组与缺氧组相比，光镜电镜下肝组织损伤较轻，且肝组织乳酸脱氢酶（LDH）漏出量显著减少，脏／体比、还原型谷胱甘肽（GSH）及黄嘌呤氧化酶（XOD）含量有显著性差异，丙二醇（MDA）生成延迟。揭示柴胡对小鼠离体灌流肝缺氧复氧损伤有明显拮抗作用，其机制与抑制氧自由基形成有关。     

GSH对乳鼠缺氧/复氧心肌细胞中MDA、IL-1β和TNF-α的影响

目的：探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对缺氧／复氧培养大鼠心肌细胞损伤后MDA、IL-1β和TNF-α的影响。方法：将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为对照组、模型组和GSH组，GSH组缺氧、复氧前均给予160mg／L浓度GSH，缺氧2h，复氧1h。复氧1h后，用比色法检测丙二醛（MDA）含量，用RT-PCR法检测细胞内IL-1βmRNA和TNF-αmRNA水平。结果：与对照组相比，模型组MDA水平、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达显著升高（P ＜ 0．01）。GSH预处理可以减轻MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的上调（P ＜ 0．01 vs 模型组）。MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达在各组间均呈正相关（P ＜ 0．05）。结论：在缺氧／复氧损伤的过程中，炎性细胞因子和氧自由基的作用相互联系，还原型谷胱甘肽能清除氧自由基，抑制IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的升高，从而保护缺氧／复氧损伤的心肌细胞。     

缺氧预处理对新生大鼠缺氧缺血性脑细胞凋亡的影响

目的 :研究缺氧预处理对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA及脑细胞凋亡的影响。方法 :新生 7日龄SD大鼠随机分为空白对照组 (n =12 )、假手术组 (n =12 )、缺氧缺血组 (HIBD组 ,n =15 )和缺氧预处理后缺氧缺血组 (HPC组 ,n =2 1) ,缺氧预处理组在行HIBD模型前 2 4h吸 8%浓度氧 3h。各组大鼠均于 14日龄处死。观察大鼠脑组织神经病理学变化 ;采用末端脱氧核苷酸介导的X DUTP缺口末端标记法测定神经元凋亡的情况 ;采用定量逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)法测定大鼠脑组织HIF 1αmRNA的表达。结果 :HPC组脑皮层神经细胞变性坏死较HIBD组减轻 ,HPC组大鼠脑组织HIF 1α基因的表达较HIBD组下降 ,HPC组脑细胞凋亡数目较HIBD组减少。结论 :缺氧预处理可保护新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 ,减弱HIF 1αmRNA的表达 ,减少脑细胞凋亡     

聪圣胶囊对拟缺血再灌注大鼠原代培养皮层神经细胞的保护作用

目的：研究聪圣胶囊对大鼠原代培养皮层神经细胞拟缺血再灌注损伤的影响。方法：采用血清药理学和流式细胞仪的方法，观察聪圣胶囊含药血清对缺糖缺氧（3h）拟缺血再灌注（0，3，6，18h）损伤神经细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出及神经细胞凋亡率的影响。结果：聪圣胶囊含血清（2，4，8g/kg）可抑制缺糖-缺氧3h再灌（0，3，6和18h）引起的神经细胞内LDH的释放。降低缺糖-缺氧3h再灌18h导致的凋亡细胞率。结论：聪圣胶囊可减轻缺血性脑损伤。     

二氮嗪后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞保护作用的体外研究

目的研究线粒体ATP-敏感性钾通道（mitoKTP）开放剂二氮嗪（diazoxide,DZ）后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞的影响。方法体外培养原代成年大鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,随机分为5组：Normal组（在CO2培养箱中持续培养6h）;H／R组（缺氧3h复氧3h）;DZ组（缺氧3h复氧3h,在复氧5min时给予100mol／LDZ）;DZ＋5-羟葵酸盐（5-hydmxydecanoate,5-HD）组（缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100mol／L选择性mitoK。通道阻断剂5-HD,然后在复氧5min时给予100mol／LDZ）;5-HD组（缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100mol／L5-HD）。复氧3h末检测各组培养基中乳酸脱氢酶（LDH）漏出量和丙二醛（MDA）含量,TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数、测定心肌细胞收缩幅度。结果与Normal组相比,其他4组培养基中LDH漏出量和MDA含量明显升高,心肌细胞凋亡指数也显著增高,心肌细胞收缩幅度降低（P〈0．05）;与H／R组比较,DZ后处理使培养基中LDH漏出量及MDA含量减少、心肌细胞凋亡指数降低,复氧后心肌细胞收缩幅度明显增高（P〈0．05）,但是缺氧末即刻给予5-HD可以逆转DZ的作用（P〈0．05）;5-HD组与H／R组相比各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Dz后处理可以通过开放mitoK。通道对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞发挥保护作用。     

低氧诱导因子1α在肝癌细胞不同缺氧时间的表达情况及其与血管生成和细胞凋亡的关系

目的：为了探讨低氧诱导因子-α（Hypoxiainducible factor-α．HIF-h）在不同缺氧时间的肝癌细胞中的表达情况及其与血管生成和细胞I鼠亡的关系。方法；用氯化钴处理HepG2肝癌细胞模拟缺氧环境。用RT—PCR技术检测缺氧0．1，2,4．6，8h肝癌细胞中的HIF-1α,VEGF,bcl-2的表达。用western blot方法检测caspase-3蛋白的表达情况．。结果：细胞在氯化钴处理后4小时。HIF-1α．VEGF。bcl-2 mRNA达到高峰，随后下降；caspase-3蛋白的表达与前三者正好相反。结论：HIF-1a通过促进VEGF,bcl-2的表达。抑制caspase-3的表达，从而抑制肝癌细胞凋亡。且与缺氧程度有关。HIF-1α在肝癌的发生发展中发挥重要作用。     

JNK介导的Bcl⁃2磷酸化调控神经细胞缺氧缺糖再复氧复糖所致的自噬性细胞死亡

目的：探讨自噬在神经细胞缺氧缺糖再复氧复糖损伤过程中的机制。方法：通过改良Takei和Endo的方法分离培养Sprague?Dawley大鼠皮层神经细胞并鉴定。培养至7 d后,将细胞随机分为4组,均培养细胞至0.5、2.0、6.0及12.0 h：①空白对照组;②实验组：即缺氧缺糖再复氧复糖组;③JNK抑制剂处理对照组：JNK特异性抑制剂SP600125处理神经细胞0.5 h;④JNK抑制剂预处理预处理+实验组：应用JNK特异性抑制剂SP600125预处理0.5 h后进行缺氧缺糖再复氧复糖。结果：噻唑蓝（MTT）结果示神经细胞的活性在实验组中随复氧复糖时间的延长而逐渐下降;JNK抑制剂预处理+实验组在12 h才出现明显降低（P < 0.05）。电镜结果表明：实验组在0.5 h及2.0 h时,神经细胞内可见大量自噬泡及自噬溶酶体形成,6 h时自噬泡数量短暂降低后,在12 h又可见新“自噬潮”和大量已排空的自噬泡;JNK抑制剂预处理+实验组中,自噬泡在0.5 h和2.0 h时大量形成,随后随着复氧复糖时间的延长而逐渐减少。实验组和JNK抑制剂预处理+实验组,LC3Ⅱ蛋白表达在6 h前无差异,均表现为先增高再降低;而实验组LC3Ⅱ蛋白表达量在12 h却再次增加,JNK抑制剂预处理+实验组则持续降低。实验组JNK、Bcl?2的磷酸化水平及Beclin?1的蛋白表达量均随着复氧复糖时间的延长而逐渐增加;而在JNK抑制剂预处理+实验组,仅在12 h时才增加（P < 0.05）。同时,Bcl?2/Beclin?1复合物在实验组呈逐渐分离的趋势,JNK抑制剂则明显抑制了这种分离。结论：JNK/ Bcl?2/ Beclin?1信号的调节可能是缺氧缺糖后复氧复糖诱导神经细胞自噬性细胞死亡的机制之一。     

低氧与骨肿瘤

生态环境中的氧含量及其他组成要素对调控干细胞和肿瘤细胞的行为起了至关重要的作用。低氧与正常发育、疾病进展以及实体肿瘤生长有关。低氧诱导因子（hypoxiainduciblefactors,HIFs）是细胞对低氧免疫应答的主要介质。本文着重对HIFs对骨肿瘤形成的作用做综述,并进一步对低氧、干细胞及其生态环境如何调控骨肿瘤的形成进行阐述。     

不同程度缺氧对大鼠急性缺氧适应形成的影响

观察不同程度缺氧ＳＤ大鼠（Ａ组：呼吸高峰减弱时刻，Ｂ组：首次端呼吸出现，Ｃ组：末次呼吸出现即缺氧耐受极限出现）的机能状态（呼吸、心率、紫绀）、缺氧耐受时间、大脑皮层电活动（诱发电位、脑电图），并进行急性重复缺氧实验。结果发现，Ａ组大鼠机能状态活跃，大脑皮层电活动逐次加强；Ｂ、Ｃ组大鼠机能状态、大脑皮层电活动逐次抑制，缺氧对Ｃ组大鼠机能状态、大脑皮层电活动的抑制程度比Ｂ组大鼠严重。Ａ组１～４次缺氧耐受时间之间无显著差异，Ｂ、Ｃ组大鼠缺氧耐受时间逐次递增，Ｃ组递增的幅度大于Ｂ组。第２、３、４次缺氧耐受时间Ａ组大鼠分别为第１次缺氧的１．０３、１．０３、１．０５倍；Ｂ组大鼠为１．２０、１．５０、２．１６倍；Ｃ组为１．４３、１．９１、２．７４倍。结果提示：大鼠急性缺氧耐受与中枢抑制有关，缺氧耐受性递增幅度与中枢抑制程度有关。     

缺氧预适应小鼠脑组织中缺氧诱导因子-1的表达

为探讨缺氧诱导因子-1(HIF-1)在缺氧预适应小鼠脑组织中的表达,用Western印迹法检测慢性缺氧(H)和不缺氧(C)HeLa细胞、急性重复性缺氧0次(H₀)、1次(H₁)、4次(H₄)小鼠脑组织中的HIF-1α.结果:慢性缺氧HeLa细胞中可检测到较多的HIF-1α,H₀组脑组织中检测不到HIF-1α,H₁组检测到微量HIF-1α,H₄组检测到较多HIF-1α.结果显示:脑组织中HIF-1α 的含量随缺氧预适应的产生而逐步增加,提示HIF-1可能参与缺氧预适应的形成.     

急性重复缺氧对BALB／C小鼠缺氧耐受性的影响

观察重复缺氧对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠缺氧耐受性的影响。结果在密闭缺氧的重复作用下，ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠第１次缺氧的耐受时间平均为１７．３ｍｉｎ，第２、３、４次缺氧的耐受时间分别为第１次的３、６、７倍。第４次重复缺氧后，小鼠在低氧分压和氰化钾作用下的存活时间分别较正常对照小鼠增加２６倍与２．６倍。结果提示，急性重复缺氧显著增加ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠对缺氧的耐受性。     

缺氧预适应小鼠脑组织中缺氧诱导因子-1的表达

为探讨缺氧诱导因子 1 (HIF 1 )在缺氧预适应小鼠脑组织中的表达 ,用Western印迹法检测慢性缺氧 (H)和不缺氧 (C)HeLa细胞、急性重复性缺氧 0次 (H0 )、1次 (H1)、4次 (H4 )小鼠脑组织中的HIF 1α。结果 :慢性缺氧HeLa细胞中可检测到较多的HIF 1α,H0 组脑组织中检测不到HIF 1α ,H1组检测到微量HIF 1α,H4 组检测到较多HIF 1α。结果显示 :脑组织中HIF 1α的含量随缺氧预适应的产生而逐步增加 ,提示HIF 1可能参与缺氧预适应的形成。     

Ear Oximetry during Progressive Hypoxia

Abstract

The BIOX III Pulse oximeter for measuring arterial oxygen saturation (SaO₂) was compared during rest and under progressively hypoxic conditions, with SaO₂ values based on arterial blood samples. The measurements were performed in 16 subjects undergoing tests of ventilatory response to hypoxia, by a rebreathing method. For each individual subject, there was a linear response relationship (r=0.99), while for all 126 comparative values the regression equation was: y= 0.83 × + 14.7 (r=0.98). The observed ventilatory response was lower when the calculations were based on oximeter readings. We conclude that the oximeter has acceptable correlation between the BIOX III and SaO₂ measurements for clinical use, especially when SaO₂ is above 70%.     

心脏手术后低氧血症

心脏手术后常常发生低氧血症，但常常不引起外科医牛的重视。有些低氧血疗是一过性，对机体不会造成严重影响。但有些低氧血症会明显延长心脏手术后ICU日及平均住院日，增加死亡率。常见原因有心源性、肺源性（包括原有肺的疚病或无肺的基础疾病）。本文就无肺的基础疾病的心脏手术后产生低氧血症的一些情况进行阐述。肺不张、急性肺损伤、心脏手术后隔肌麻痹、手术方式等都是引起心脏手术后低氧血症的常见原因。心脏手术后隔肌麻痹不易诊断。本文就此问题叙述了几种常用方法的利和弊。研究认为在手术早期给予恰当的呼吸末正压及肺活量充气策略可以改善氧合状态。