红景天多糖对骨髓抑制小鼠表达凋亡相关蛋白的影响

目的观察红景天多糖对骨髓抑制小鼠表达凋亡相关蛋白的影响，并探讨其造血调控作用部分机制。方法用免疫组化SABC法分别检测骨髓抑制小鼠骨髓细胞凋亡相关蛋白Caspases-3及Fas／FasL的表达。结暴经过射线照射及化疗药物造模后，小鼠骨髓细胞表达Fas／FasL、caspase-3明显增加，用药后各组小鼠骨髓细胞Fas／FasL、caspase-3蛋白表达有不同程度的减少，以高剂量组减少明显（P〈0．01）。结论红景天多糖可通过影响骨髓抑制小鼠骨髓细胞死亡受体Fas介导的Fas／FasL-caspase-3凋亡信号通路，减少骨髓细胞凋亡，促进骨髓造血功能的恢复。     

八珍汤对骨髓抑制小鼠骨髓细胞BaxmRNA的影响

目的:观察八珍汤对骨髓抑制小鼠造血功能的影响,探讨其造血调控作用机制。方法:将实验小鼠分为正常对照组、模型组和八珍汤低、中、高剂量组,除正常组外,其它四组采用Co60γ照射和注射环磷酰胺复合制备骨髓抑制小鼠模型。造模完成的第2天开始给药,正常对照组和模型组每只小鼠灌胃0.2ml/d的生理盐水;八珍汤低、中、高剂量组分别给予5、10、15mg/kg,给药7d后采用原位杂交技术测定骨髓细胞凋亡相关蛋白BaxmRNA表达的影响。结果:八珍汤各组均能降低骨髓细胞中BaxmRNA的表达,而以中剂量组效果最为显著。结论:八珍汤能拮抗骨髓细胞凋亡、促进骨髓造血功能的恢复。     

红斑汤对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠外周血细胞及骨髓细胞CD34、CD45表达的影响

目的：探讨红斑汤对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠外周血及骨髓细胞CD34、CD45表达的影响。方法：除正常组外,其余各组给以环磷酰胺25 mg·kg^-1,隔日1次,腹腔注射2次即可造成骨髓抑制模型,正常组以生理盐水代替。观察红斑汤对小鼠外周血细胞及骨髓细胞CD34、CD45的影响。结果：与正常组相比,模型组小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板及骨髓细胞CD34、CD45均可见降低,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;红斑汤组及鲨肝醇组小鼠外周血中白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,可以认为红斑汤组与鲨肝醇组,具有促进骨髓抑制小鼠白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板的恢复,且鲨肝醇组疗效不显著优于红斑汤组（P〉0.05）;红斑汤组和鲨肝醇组骨髓细胞CD34、CD45及CD34、CD45的双阳性率也明显高于模型组,差异有统计学意义（P〈0.05）,说明红斑汤组和模型组均能促进骨髓细胞CD34、CD45的恢复,且鲨肝醇组不优于模型组（P〉0.05）。结论：红斑汤具有升高骨髓抑制小鼠外周血中白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板及骨髓细胞CD34、CD45;具有改善环磷酰胺对小鼠骨髓抑制的作用。     

慢性间断性缺氧对帕金森病模型小鼠黑质凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响

目的 探讨慢性间断性缺氧(CIH)对帕金森病模型小鼠黑质凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法 44只雄性6周龄C57BL/6小鼠,随机分为对照组、CIH组、百草枯组和百草枯+CIH组,应用免疫组织化学方法(SP法)检测小鼠中脑黑质Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果 对照组、CIH组、百草枯组、百草枯+CIH组中脑黑质Bcl-2阳性细胞计数分别为39.45±1.51、28.64±2.66、21.64±1.85、8.45±1.86,Bcl-2的表达逐渐降低,CIH+PQ组较其它3组明显降低(P＜0.01);中脑黑质Bax的阳性细胞计数分别为11.91±1.70、20.73±1.49、30.09±2.98、52.82±2.86,Bax的表达逐渐升高,CIH+PQ组较其它3组明显升高(P＜0.01).结论 慢性间断性缺氧联合百草枯暴露加重了小鼠黑质多巴胺能神经元凋亡相关蛋白Bax的上调及Bcl-2表达的下调.     

精元康胶囊对骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞表达抗凋亡蛋白的影响

目的:研究精元康胶囊对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数及骨髓有核细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响,探索精元康胶囊恢复骨髓造血功能的机制,为临床用药提供实验依据。方法:观察精元康胶囊对外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、骨髓有核细胞数的影响;用免疫组化SABC法检测小鼠骨髓有核细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达。结果:精元康胶囊具有显著提高外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板及骨髓有核细胞数,同时精元康胶囊在上调Bcl-2蛋白表达的同时,下调Bax蛋白表达,使Bcl-2/Bax比值增大,防止骨髓造血细胞凋亡。结论:精元康胶囊具有抗骨髓细胞凋亡作用,这可能是在骨髓抑制状态下,精元康胶囊促进骨髓细胞增殖和骨髓造血功能恢复的机制之一。     

红景天苷通过抑制凋亡相关蛋白的表达保护缺氧对培养神经干细胞的损伤

目的观察红景天苷对缺氧损伤成年大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)组织分离培养神经干细胞凋亡比例和Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达的影响。方法原代培养成年大鼠SVZ神经干细胞,不同浓度红景天苷预处理24 h后,干细胞厌氧工作站缺氧损伤48 h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞活力;显微镜下观察各组细胞形态;TUNEL染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2和caspase-3蛋白的表达变化。结果红景天苷预处理可显著改善缺氧损伤后的细胞生长状态和活力,降低缺氧引起的细胞凋亡率的升高(P<0.05);拮抗缺氧损伤导致的细胞Bcl-2/Bax蛋白比例的下降,降低活化的caspase-3蛋白的表达(P<0.05)。结论红景天苷通过抑制神经干细胞的凋亡,保护缺氧对神经干细胞的损伤,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspases-3的表达有关。     

缺氧刺激对人骨髓间充质干细胞凋亡基因Bcl-2和Bax的影响

目的探讨缺氧刺激对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)凋亡基因Bcl-2和Bax的影响。方法本研究将hBMSCs按不同氧浓度分为对照组(20%O_2)和低氧组(2%O_2),检测不同作用时间缺氧对hBMSCs抑凋亡基因(Bcl-2)和促凋亡基因(Bax)蛋白表达的影响。结果与对照组比较,低氧组各时间点hBMSCsBcl-2蛋白表达有明显的下调,hBMSCs Bax蛋白表达有明显的上调,差异有统计学意义(P<0.05)。且12 h时变化最明显,总体上呈现出时间依赖性特点。结论缺氧培养对hBMSCs的Bcl-2有明显的抑制作用,对hBMSCs的Bax有明显的促进作用,促使骨改建平衡向破骨方向倾斜。     

红景天苷对谷氨酸损伤海马神经元Bax和Bcl-2表达的影响

目的观察红景天苷对谷氨酸（Glu）损伤海马神经元Bax和Bcl-2基因和蛋白表达的影响。方法原代培养胚鼠海马神经元,不同浓度红景天苷（60、120、240μmol/L）预孵育24 h后,加入125μmol/L Glu损伤24 h。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组海马神经元活力;显微镜下观察各组细胞形态;Hoechst染色观察细胞凋亡情况;RT-PCR观察细胞内Bax和Bcl-2 mRNA的表达变化;Western blot观察细胞内Bax和Bcl-2蛋白的表达变化。结果红景天苷细胞可显著改善Glu损伤后的神经元生长状态和活力,降低Glu引起的细胞凋亡率（均P〈0.01）;拮抗Glu损伤导致的细胞Bcl-2/Bax mRNA及其蛋白比例的下降,此作用存在剂量效应关系,至240μmol/L时作用最显著（P〈0.05或〈0.01）。结论红景天苷可显著拮抗Glu诱导海马神经元的凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达有关。     

右归丸对骨髓抑制小鼠造血功能的影响

目的：观察右归丸对骨髓抑制小鼠外周血、造血干细胞增殖能力、骨髓细胞周期和凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。方法：小鼠48只,随机分为正常组、模型组,右归丸低、中、高剂量组和阳性对照组,每组8只。除正常组外,余五组均予造模,连续3天给予腹腔注射环磷酰胺制备骨髓抑制模型。造模后各组应用相应药物治疗7天。用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、造血祖细胞培养和流式细胞术（FCM）分别检测右归丸对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、体外培养各系造血祖细胞的集落数以及骨髓细胞周期和凋亡的影响。结果：右归丸中、高剂量均能明显升高外周血红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、骨髓有核细胞（BMC）数,高剂量对血小板（PET）和白细胞（WBC）有明显升高作用。右归丸能明显提高体外培养各系造血祖细胞的集落数,以中、高剂量效果显著。右归丸低、高剂量均能促进骨髓G0／G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2／M期细胞的转化,提高G2／M期细胞比例,增殖指数（PI）明显升高。右归丸中、低剂量组的骨髓细胞凋亡比例显著下降。结论：右归丸可能通过促进G0期造血干细胞进入细胞周期,进行增殖;加速骨髓细胞修复受损的DNA,通过GI／S和S期监测点;抑制造血细胞的凋亡;调节造血细胞增殖与凋亡之间的平衡等机制,从而促进损伤骨髓造血功能恢复。     

益髓理血饮减少二甲基苯蒽诱导的骨髓增生异常综合征大鼠骨髓细胞凋亡

目的：探索中药复方益髓理血饮对二甲基苯蒽诱导的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS) 模型大鼠骨髓细胞凋亡的作用。方法：采用化学诱变剂二甲基苯蒽诱导建立大鼠MDS模型,并分为正常对照组、模 型+PBS组、模型+复方皂矾丸组、模型+益髓理血饮低剂量组和模型+益髓理血饮高剂量组,每组12 只。于造模第14 天开始分组连续给药30 d。观察各组大鼠一般情况,给药后的第31天将各组的大鼠处死,显微镜下观察骨髓细胞的病 理学改变,检测各组大鼠外周血细胞、免疫组织化学检测Bcl-2和Bax蛋白表达,流式细胞仪检测骨髓细胞凋亡情况。 结果：与正常对照组相比,模型+PBS组大鼠骨髓细胞病态造血,外周白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板下降明 显,促凋亡蛋白Bax明显增加,抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显减少(P<0.01),与模型+PBS组相比,治疗各组大鼠外周白细 胞、红细胞、血红蛋白和血小板升高,促凋亡蛋白Bax明显减少,抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加(P<0.05或P<0.01),尤 以模型+益髓理血饮高剂量组最为明显(P<0.01);与正常对照组相比,模型+PBS组骨髓细胞的总凋亡率、早期凋亡率 和晚期凋亡率均有所增加(P<0.01),治疗各组的凋亡率均有所下降(P<0.05或0.01),尤其总凋亡率和早期凋亡率下降更 为明显,仅有益髓理血饮对降低晚期凋亡率疗效明显(P<0.01),且高剂量组优于低剂量组。结论：中药复方益髓理血 饮治疗MDS能改善其外周血细胞情况,降低促凋亡蛋白Bax表达,升高抑凋亡蛋白Bcl-2表达,减少骨髓细胞凋亡。     

鱼藤酮致帕金森大鼠的脑黑质中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达改变

目的 研究鱼藤酮致帕金森病(PD)大鼠中脑黑质凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的改变.方法 Wistar大鼠每日颈背部皮下注射鱼藤酮2 mg(kg·d) (3～6周)造模,依据所建立的评分体系记录动物行为变化,在行为学有记分并停止给鱼藤酮4、10 d时,中脑黑质病理切片免疫组化染色比较黑质区域Bcl-2、Bax的表达. 结果在有行为学记分4 d时,记4分和8分的大鼠中脑黑质Bcl-2表达均显著减少;所有PD大鼠中脑黑质Bax表达均显著增加;Bcl-2/Bax比率均显著减少;有记分4 d时,行为学记分与Bcl-2/Bax比值成负相关性. 结论细胞凋亡参与了鱼藤酮帕金森模型大鼠黑质多巴胺神经细胞的损伤.     

补虚化瘀方拮抗细胞毒剂所致荷瘤小鼠骨髓抑制的实验研究

目的　观察补虚化瘀方对荷瘤小鼠化疗后骨抑制及血液流变学的影响。方法　对接种P388白血病瘤株的小鼠 ,当天即开始予补虚化瘀方灌胃 ,连用 1 3天。将给药小鼠分为高、低剂量组 ,另设正常、模型、化疗对照组。接种后第 6日、 7日分别给化疗、高剂量、低剂量组腹腔注射环磷酰胺(1 5 0mg/kg)、阿糖胞苷 (1 5 0mg/kg)联合冲击化疗。用流式细胞仪检测小鼠骨髓细胞增殖周期以及血液流变学的变化。结果 (1 )化疗使荷瘤小鼠骨髓细胞合成期 (S)细胞数降低 (P <0 0 1 ) ,在中药高剂量组骨髓细胞合成期 (S)细胞数升高 (P <0 0 1 ) ,并恢复至正常水平 (P >0 0 5 )。 (2 )小鼠荷瘤状态血液粘滞度增高 ,微循环障碍 ,化疗又进一步加重以上反应。中药高剂量组血液粘滞度降低、微循环得到改善 (P <0 0 5 )。结论　补虚化瘀方对环磷酰胺、阿糖胞苷所致荷瘤小鼠骨髓抑制有一定的保护作用 ;对异常的血液流变学有一定的改善作用     

骨髓基质细胞体外三维培养的研究

目的:建立骨髓基质细胞(BMSC)体外三维培养的方法,并观察其细胞生长形态及生物学特征。方法:制备鼠尾胶原,对BMSC进行三维培养,共聚焦显微镜观察细胞形态,MTT、ALP钙钴、苏丹Ⅲ染色观察BMSC增殖及分化。结果:三维培养的BMSC早期呈现集落生长特点,后逐渐向不同的形态转变,与二维培养相比,细胞增殖峰值提前,且向成骨及脂肪细胞分化能力增强。结论:BMSC在体外三维培养模式下生长良好,能够继续保持其自我更新能力及分化潜能。     

生长抑素对白血病患者骨髓细胞CD34抗原表达的影响

目的研究生长抑素八肽类似物奥曲肽(Octreotide,SMS;商品名善得定)对白血病患者骨髓单个核细胞CD34抗原表达的影响,探讨生长抑素对白血病细胞的调控作用.方法采用细胞培养、免疫细胞化学技术及图像分析系统,随机计数CD34阳性细胞数,观察分析SMS在白血病患者骨髓单个核细胞中CD34抗原表达的分布和含量.结果在相差倒置显微镜下,加入SMS组与对照组比较,细胞碎片增多,基质细胞减少;CD34抗原主要表达于细胞膜和核膜;SMS组阳性细胞数显著少于对照组(P＜0.01);图像分析光密度值(OD值)SMS组明显低于对照组(P＜0.01).结论在体外SMS可减少造血干/祖细胞特异抗原(CD34)的表达.提示SMS对白血病细胞的生长具有负性调控作用.     

补肾活血方药对慢性再生障碍性贫血患者骨髓细胞体外影响的实验研究

目的　研究补肾活血方药对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者骨髓细胞体外增殖的影响 ,探讨其治疗CAA的机制。方法　采用细胞培养 ,光镜下观察补肾活血中药作用于CAA患者骨髓细胞后的形态学 ;3 H TdR掺入和液体闪烁技术方法 ,检测补肾活血中药对CAA患者骨髓细胞的增殖变化。结果　加入补肾活血中药组 ,CAA患者骨髓细胞培养第 4 8小时见细胞丛明显增多 ,72h见大量集落形成 ;3 H TdR掺入法显示 ,补肾活血中药组骨髓细胞的增殖 ,以每孔 75g L最有效。在 5 0～ 10 0g L范围内 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;2 5g L和 12 5g L组与对照组比较差异无显著性 (P <0 .0 5 )。结论　补肾活血方药在体外有促进CAA患者骨髓细胞增殖的作用 ,为补肾活血中药治疗CAA提供了实验与理论依据     

骨髓间充质干细胞在造血干细胞移植中的作用

骨髓间充质干细胞(BM-MSC)是一类具有高度自我更新及多向分化潜能的组织干细胞。目前发现BM-MSC通过分泌多种细胞因子及细胞外基质维持骨髓造血微环境的稳定,从而实现其对造血的精细调控,促进造血干细胞植入及移植后的造血重建。同时由于其具有较低的免疫原性和对异基因活化的淋巴细胞具有免疫抑制作用,在移植免疫调节中有重要作用,对异基因造血干细胞移植后的移植物抗宿主病产生影响。本文就BM-MSC在这两方面的进展及在造血干细胞移植中的应用研究予以综述。     

自体骨髓细胞移植对大鼠局灶性脑缺血区新生血管形成的作用初探

目的　探讨经颈动脉移植自体骨髓细胞对脑缺血区新生血管形成的影响。方法　复制局灶性脑缺血大鼠模型 ,实验组 (5只 )经颈动脉注入自体骨髓细胞 ,对照组 (5只 )注入生理盐水。通过免疫组织化学染色方法进行微血管计数 ,观察脑缺血区血管增生状况。结果　自体骨髓细胞移植后大鼠在皮层缺血区的微血管密度为 15 9.15±4 0 .4血管数 /mm2 ,较对照组大鼠 (81.70± 32 .18血管数 /mm2 )明显增多 ,P <0 .0 5。结论　经颈动脉注入的自体骨髓细胞能够促进脑缺血区新生血管的形成。     

人骨髓基质细胞上清液对原代白血病细胞的杀伤作用及CFU-F生成的影响

观察了人胎骨髓基质细胞上清液对6例白血病患者骨髓原代白血病细胞存活程度及CFU-F形成的影响。结果表明。骨髓基质细胞上清液对原代白血病细胞具有杀伤作用(p<0.002—0.001)。同时发现基质细胞上清液还能促进CFU-F的形成(p<0.01-0.001)。本文还对上述变化的可能机制进行了讨论。     

骨髓单个核细胞移植治疗2型糖尿病小鼠急性心肌梗死的研究

目的 研究骨髓单个核细胞(BMMNCs)对T2DM小鼠心肌梗死的疗效.方法 小鼠分为4组:正常小鼠注射盐水组(NS组),正常小鼠注射细胞组(NM组),糖尿病小鼠注射盐水组(TM组),糖尿病小鼠注射细胞组(TS组).取材后通过HE、Masson's、vWF、Isolectin、WGA免疫染色观察疗效.结果 正常组和糖尿病组细胞移植后VEGF表达水平相当,差异无统计学意义(P＞0.05);细胞组梗死面积较盐水组小,胶原面积较盐水组的少,血管密度较盐水组大,心肌细胞肥大较盐水组轻,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 骨髓单个核细胞对心肌损伤组织的修复、梗死边缘区细胞的肥大增生、血管新生方面有明显的改善作用.