天然细胞生长调控因子对原代培养神经细胞生长影响的实验研究

目的：观察天然细胞生长调控因子（NCGCF）对原代培养的神经细胞生长的影响，探讨其作用机理。方法：取Wistar大鼠乳鼠的大脑皮层神经细胞作原代细胞培养，将培养皿编号后分别在奇数孔加入NCGCF，偶 孔加入对照剂，倒置相差显微镜下观察两组神经细胞的生长情况。结果：加入NCGCF的实验组的神经细胞其突起长度较对照组长，生存时间也较对照组延长，差别均有显著性意义（均P＜0．01）。结论：NCGCF具有促进神经细胞突起的生长并延长神经细胞生存时间的作用。     

dd—PCR法研究中草药促神经生长过程中的基因差异表达

目的 :为探讨中药促神经生长的分子机理提供实验依据。方法 :采用 dd-PCR方法 ,从体外培养大鼠背根神经节细胞加中药组和不加中药组中获得两者的差异表达片段 ,并克隆测序分析。结果 :获得 7个差异条带 ,其中 2个条带的 c DNA序列分别与酪氨酸磷酸酶受体 ( PTPR) m RNA、促生长素抑制素受体 ( SSTR) m RNA的序列部分同源。结论 :在中药促神经生长过程中 ,神经元基因具有选择性表达的变化     

大鼠胚胎脊髓神经细胞的原代培养及其神经营养素受体表达的初步研究

目的：建立哺乳动物胚胎脊髓神经细胞体外培养的细胞模型，提高培养用脊髓神经细胞的产率以及活性，使实验的细胞模型有良好的一致性和可比性。方法：18d的大鼠胚胎的脊髓经取材、分离、消化后作原代细胞培养，从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程。应用免疫细胞化学技术，观察了神经营养素受体TrKA、TrKB、TrKC在脊髓神经细胞的表达。结果：大鼠胚胎的脊髓神经细胞在体外条件下，可良好存活并有正常的表型分化，TrKA、TrKB、TrKC在细胞膜上呈阳性反应。其细胞数量(集落数)与形态以及存活周期可满足体外实验的基本要求。结论：这种分离培养方法简便、成功率高、稳定性强、细胞产量高且质量好，有助于离体研究的开展。     

神经再生素对神经细胞生长影响的实验研究

目的：探讨神经再生素（NRF）对离体培养的PC12细胞、背根神经节细胞、大脑皮层细胞生长影响的分子生物学机制。方法：采用细胞体外培养、半定量RT-PCR、Western blot方法，观察和比较NRF组（添加NRF）、NGF组（添加NGF）和空白对照组（基础培养基）中细胞生存状况及相关基因mRNA及其蛋白水平的表达变化。结果：NRF作用于离体培养的PC12细胞，可促使其分化；作用于背根神经节细胞，GAP-43和NF-L mRNA表达在不同时间呈不同程度的上调；作用于大脑皮层细胞，GAP-43和NF蛋白亦比对照组表达量为高。结论：NRF具有维持细胞生存和促进神经细胞突起生长的作用，并可使神经元GAP-43和NF mRNA表达及其蛋白合成上调。     

中药抗缺氧性神经细胞凋亡保护作用的研究

脑中风严重威胁着人类的健康．且发病率有增长趋势。脑中风包括脑出血和脑梗塞，两者引起中枢神经系统的损伤都具有神经细胞缺血／缺氧的病理发展过程。以往的研究认为脑缺血／缺氧后神经细胞的损伤属于坏死过程．近年来研究表明脑缺血／缺氧后神经细胞的死亡有许多属于细胞凋亡，特别是急性缺血的半暗区和慢性脑缺血．因此认为凋亡     

阿糖胞苷对新生Wistar大鼠海马神经细胞体外培养的影响

目的探讨阿糖胞苷对新生大鼠海马神经细胞培养的影响作用。方法利用高糖DMEM常规培养神经细胞，在不同的培养时间(0d，1d，3d，5d，7d)分别加入一定量(0．8μg/ml)的阿糖胞苷以及在培养一定时间(5d)时加入不同剂量的阿糖胞苷(0μg/ml，0．4μg/ml，0．8μg/ml，1．6μg/ml，3．21μg/ml)。结果一定浓度的阿糖胞苷对神经细胞生长有促进作用，对胶质细胞的生长有抑制作用。结论阿糖胞苷对神经细胞的抑制表现出时间依赖性和剂量依赖性，在诱导剂量下，可诱导神经细胞的分化增殖。     

鼠神经细胞和巨噬细胞的体外联合培养生长特性的研究

目的 探讨鼠神经细胞和巨噬细胞在体外的联合培养条件,为研究神经系统疾病的炎症发病机制奠定实验基础。方法 取大鼠小脑的神经细胞和小鼠腹腔的巨噬细胞进行联合培养,观察联合培养细胞的生长特性,采用免疫组化法检测神经细胞的微管相关蛋白-2(microtubule-associated protein 2,MAP-2)。结果 大鼠小脑的神经细胞和小鼠腹腔的巨噬细胞联合培养后不影响各自的生长状况和形态结构,神经细胞的MAP-2免疫组化显示神经细胞的形态无明显变化。结论 鼠神经细胞和巨噬细胞在体外培养条件下可以共生长,这一联合培养的方法可以作为神经系统疾病研究的一种新的实验方法。     

胎鼠脊髓神经细胞的分离培养与生长分化

体外原代神经细胞培养,是一较好的神经生物学和神经药理学体外实验模型,近年来颇受重视。目前国内外以脑神经细胞培养的研究居多,而脊髓神经细胞培养的文献报道较少。为深入探讨脊髓损伤及其继发损伤的病理生物学机制和药物防治措施,我们建立了体外原代脊髓神经细胞分离培养方法,并观察了神经细胞的生长分化。     

神经生长液的安全性评价

神经生长液是南通医学院神经科学研究所经过多年的努力 ,在传统经验方的基础上 ,运用现代生物学技术 ,按照中医学理论配伍 ,科学制作而得的口服液 (中国专利号 :ＺＬ 991 2 0 671 .1 ) ,其主药为 :当归、黄芪、红花、菟丝子、牛膝等 ,动物实验和临床初步研究结果提示 ,该合剂可有效地促进损伤神经修复( 1) 。本研究采用急性和慢性毒性试验 ,对神经生长液的毒性作用进行分析 ,以期为临床合理安全使用该药提供实验依据。1 材料实验动物　健康成年ＩＣＲ小鼠 ,体重 1 8～ 2 2ｇ ,雌雄各半 ;ＳＤ大鼠 6周龄 ,体重 (1 2 0± 2 0 )ｇ,雌雄各半 ,…     

周围神经65KD蛋白对培养鼠胚脊髓运动神经元的影响

目的：为了解周围神经损伤后期远侧端特异性表达的６５ＫＤ蛋白对鼠胚脊髓神经元的影响。方法：选用ＳＤ大鼠坐骨神经横断后２周的动物模型，自然凝胶系统电泳分析损务后神经远侧端中的蛋白组分，将６５ＫＤ蛋白区带胶条与１４天鼠胚脊髓运动神经元联合培养，结果：损伤后２周的坐骨神经元侧端中特异性地出现表达增强的６５ＫＤ蛋白；与含６５ＫＤ蛋白区带胶条联合培养的脊髓运动神经元细胞存活数量多，突起生长旺盛，结论：坐骨神经     

神经生长因子偶联物对拟痴呆大鼠的作用

目的 :采用静脉注射神经生长因子偶联物 (NGF- Tf)的方法 ,研究其对痴呆 (AD)大鼠的影响。方法 :选用手术切断大鼠双侧隔——海马胆碱能通路的方法建立 AD动物模型 ,每天从大鼠尾静脉注射 NGF- Tf。分别以跳台试验和水迷路试验观察大鼠的学习记忆以及方向辨别能力 ;并对相应海马和隔区行神经组织学检查。结果 :模型组跳台试验错误次数增加 ,在训练期与正常组比较有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;NGF- Tf组错误次数较少 ,与模型组比较 ,在训练期差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,测验期错误次数减少率亦可达 5 0 %。水迷路试验中 ,NGF- Tf组在 1 0 s内抵达平台的正确反应平均数提高 ,与模型组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。光镜下 ,NGF- Tf组隔区仅见轻微萎缩性改变 ,而模型组隔区萎缩性改变较明显 ,表现为神经元数目明显减少 ,细胞轮廓不清 ,有胶质细胞增生。正常对照组、NGF- Tf组和模型组的海马区未见明显病理性改变。结论 :NGF-Tf能穿透血脑屏障 ,有效防止模拟 AD病变的大鼠的基底前脑胆碱能神经元的变性和死亡 ,改善其学习记忆能力 ,促进其胆碱能神经元的功能恢复     

鼠神经生长因子对急性脑梗死患者神经功能康复的临床疗效观察

目的：观察鼠神经生长因子治疗急性脑梗死的治疗效果。方法：将120例急性脑梗死患者随机分为治疗组与对照组,各60例,对照组只进行脑梗死的常规基础治疗,治疗组在常规基础治疗的基础上加用鼠神经生长因子（NGF）（北大之路,恩经复18ug≥9000AU）,18ug,im,qd,分别于治疗前及治疗后第3周和第6周对所有患者进行神经功能缺损程度进行美国国立卫生院脑卒中量表（NIHSS）评分并比较。结果：治疗前两组脑卒中患者神经功能缺损NIHSS评分无统计学意义（P〉0．05）,治疗后第6周两组脑卒中患者神经功能缺损NIHSS评分显示治疗组显著低于对照组（P〈0．05）。结论：鼠神经生长因子（NGF）能较快速的促进患者的神经功能恢复,对急性脑梗死治疗有很大临床意义,是一种有效的治疗急性脑梗死的药物。     

重组人生长激素对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期作用的实验研究

目的 :探讨重组人生长激素 (r- h GH )对人乳腺癌细胞株 MCF- 7(MCF- 7)增殖和分化的影响。方法 :以不同浓度 r- h GH分别加入处于对数生长期的 MCF- 7进行体外培养 ,4 8h后用流式细胞仪检测细胞周期的百分比构成变化 ,并与对照组进行比较。结果 :不同浓度的 r- h GH作用于 MCF- 7后 ,其细胞周期的 G0 ～ G1 期、S期、G2 ～ M期的细胞百分比变化 ,差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :r- h GH对 MCF- 7的细胞周期无明显影响 ,既无促进 MCF- 7细胞增殖作用 ,也无抑制 MCF- 7细胞的作用。     

当归补血汤抗氧化作用的研究

对当归补血汤抗氧化作用进行研究，结果表明：该方能明显抑制由升温引起的Ｆｅ＾２＋作用下产生的小鼠肝匀浆ＬＰＯ生成的增加，灌胃给药能显著降低小鼠肝组织中ＬＰＯ含量，复方制剂与单味药比较无显著性差异。     

用快速自动比色显微分析法探讨巨噬细胞条件性培养基对小脑皮质神经元生存的影响

用快速自动比色显微分析法检测巨噬细胞条件性培养基(MΦCM)对体外培养的生后7天SD大鼠小脑皮质神经元的作用。实验结果表明,MΦCM有支持神经元生存及增强其活性的作用。此作用以细胞密度1×10~5/孔,MΦCM浓度10μl/孔为显著(P<0.05)。不同分子量的MΦCM对神经元的作用亦有不同,>10kdaltons(kDa)组分比<10KDa的作用强。     

7种治疗心血管疾病的中成药抗氧自由基作用的研究

利用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶体系或碱性二甲基亚砜生成的O_2~.与鲁米诺作用的化学发光体系,研究7种中成药水提物抗氧自由基的作用。结果表明:7种中成药水提物对酶体系产生的O_2~.都有抑制作用,其中3种对非酶体系产生的O_2~.有抑制作用,而另4种则表现出负的抑制作用。     

中药复方治疗痛风随机平行对照临床研究

①目的观察中药复方治疗痛风临床效果。②方法采用随机平行对照试验，选取痛风急性期病人70例。对照组35例，急性期给予秋水仙碱、间歇期给予别嘌呤醇治疗，共7d。中药组35例病人，给予中药复方治疗7d。观察临床积分、红细胞沉降率、C-反应蛋白和血尿酸。③结果中药组脱落1例，对照组脱落4例。中药组血尿酸下降差值高于对照组（t=6．53，P〈0．01）。两组红细胞沉降率和C-反应蛋白下降差值比较均无显著差异（t=1．66、1．49，P均〉0．05）。两组疼痛及关节肿胀评分下降值比较均无差异（t=-0．09、-1．34，P均〉0．05）。④结论中药复方通过泄浊化瘀、清热利湿发挥抗炎、镇痛、消肿作用，其疗效与秋水仙碱相当。但中药复方降低血尿酸作用优于秋水仙碱和别嘌呤醇，且没有明显不良反应。