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相似文献
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1.
目的:探讨亚硒酸钠能否诱导胃上皮肿瘤SGC 7901细胞凋亡,以及凋亡诱导与细胞周期改变的关系。方法:亚硒酸钠溶液不同浓度、不同作用时间分别处理SGC 7901细胞,应用电子显微镜观察亚硒酸钠溶液作用后细胞形态变化,应用DNA末端原位标记染色法 (TUNEL)及流式细胞仪技术分析细胞凋亡及细胞周期的改变。结果:亚硒酸钠作用于SGC 7901细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化:细胞核固缩、染色质凝集、呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。TUNEL染色法细胞凋亡指数在8.4%~33.4%。结论:亚硒酸钠能够诱导SGC 7901细胞凋亡,亚硒酸钠诱导SGC 7901细胞凋亡与细胞周期阻滞密切相关。  相似文献   

2.
亚硒酸钠诱导K562细胞凋亡作用及机制探讨   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨亚硒酸钠诱导K562细胞凋亡的作用及机制.方法:不同浓度亚硒酸钠作用K562细胞后,MTT法检测细胞增殖抑制,电镜和TUNEL法检测K562细胞的凋亡,RT-PCR检测Bcl-2和Bax的mRNA表达变化,分光光度法检测Caspase-3的活性变化.结果:亚硒酸钠能抑制K562细胞的生长增殖,诱导其凋亡.20μmol/L亚硒酸钠作用K562细胞48h后,Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显升高,Caspase-3活性升高,与对照组相比具有显著的统计学意义(P<0.01).结论:亚硒酸钠能够诱导K562细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2,上调Bax,活化Caspase-3有关.  相似文献   

3.
目的 研究亚硒酸钠对体外培养的HepG2.2.15细胞株凋亡的影响.方法 采用体外培养的方法,流式细胞仪分析细胞DNA水平及细胞周期,并测定细胞凋亡情况.结果 2.0mmol/L亚硒酸钠作用72h,HE切片可见核固缩、染色质边集等改变;4mmol/L亚硒酸钠作用72h,G0/G1期和S期细胞明显减少,在细胞周期G1前期可见典型的细胞凋亡峰.结论 高剂量亚硒酸钠可诱导HepG2.2.15细胞株发生凋亡.  相似文献   

4.
郑刚  郜朝霞  宋海滨 《铁道医学》2013,(11):808-812
目的:探讨亚硒酸钠杀伤结肠癌HCT116细胞的潜在机制。方法:应用MTS方法和DCFH-DA法分别检测亚硒酸钠对人结肠癌细胞系HCT116存活率和细胞内活性氧水平的影响,同时应用小分子干扰RNA片段研究JNK1和p53在亚硒酸钠介导的细胞死亡过程中的作用。结果:亚硒酸钠可显著提高HCT116细胞内的活性氧水平,使细胞发生氧化应激,激活应激相关蛋白JNK1和p53,从而达到杀伤肿瘤细胞的作用。结论:亚硒酸钠能有效杀伤结肠癌肿瘤细胞,同时JNK1和p53在亚硒酸钠介导的细胞死亡过程中发挥了重要作用。  相似文献   

5.
目的研究在体外染毒条件下硒对镉转化人支气管上皮细胞系16HBE凋亡和癌基因表达的影响。方法用0.625、1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞24h,用流式细胞术检测凋亡,用RT-PCR检测p53,bcl-2和bax表达。结果 0.625、1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞后,随硒剂量升高细胞凋亡率增高,相关系数r=0.987 9(P<0.01),并且在1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠剂量组的凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。亚硒酸钠可以抑制镉转化16HBE细胞p53和bcl-2的表达(P<0.05或P<0.01),bax表达虽有所增强但P>0.05。进行相关性分析,细胞凋亡与p53和bcl-2表达呈负相关,相关系数r分别为-0.923 6(P<0.01)和-0.862 1(P<0.05),而细胞凋亡与bax表达呈正相关,相关系数r=0.781 8(P<0.05)。p53表达和bcl-2表达呈正相关,相关系数r=0.894 1(P<0.05)。p53、bcl-2表达和bax表达之间呈显著负相关,相关系数分别为-0.822 2(P<0.05)和-0.961 3(P<0.01)。结论亚硒酸钠处理镉转化16HBE细胞,通过使p53和bcl-2表达下调、bax表达上调,诱导细胞凋亡从而起到抑制细胞恶性转化的作用。  相似文献   

6.
目的:探讨氟尿嘧啶(Fu)联合渥曼青霉素(wortmannin)对人野生型及突变型p53结肠癌细胞株(HCT-116和SW-480)增殖和凋亡的影响,阐明p53对人结肠癌细胞增殖和凋亡的作用。方法:将处于对数生长期的 HCT-116和SW-480人结肠癌细胞株分为空白对照组、氟尿嘧啶组、氟尿嘧啶联合渥曼青霉素组和氟尿嘧啶联合渥曼青霉素及p53抑制剂(PFT-α)组,分别给予氟尿嘧啶、渥曼青霉素及PFT-α,采用噻唑盐比色法(MTT)、Annexin V-FITC流式细胞术(FCM)检测各组细胞12、24和48 h的存活率和细胞凋亡率。结果:与氟尿嘧啶组比较,渥曼青霉素联合氟尿嘧啶组HCT-116和SW-480细胞存活率显著降低(P<0.05),并随时间延长而逐渐降低;流式细胞术(FCM)检测,各组细胞凋亡率随时间的延长而增高(P<0.05);与渥曼青霉素联合氟尿嘧啶组比较,氟尿嘧啶联合渥曼青霉素及PFT-α组HCT-116细胞存活率及细胞凋亡率无明显变化(P>0.05),而SW-480细胞48 h的存活率显著降低(P<0.05),凋亡率显著增高(P<0.05)。结论:渥曼青霉素能显著增强氟尿嘧啶对人结肠癌细胞增殖的抑制作用并促进结肠癌细胞凋亡;抑制p53表达能进一步增强渥曼青霉素联合氟尿嘧啶对p53突变型SW-480细胞增殖的抑制作用并促进细胞凋亡。
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7.
亚硒酸钠对HL-60细胞增殖、凋亡影响及作用机制探讨   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:以人急性髓细胞性白血病细胞系HL-60为模型,探讨亚硒酸钠对HL-60细胞增殖及凋亡的影响。方法:以不同浓度的亚硒酸钠作用于HL-60细胞后,分别采用台盼蓝拒染法计数活细胞,MTT法检测细胞增殖抑制;通过光镜及双染流式细胞检测分析细胞凋亡;检测线粒体膜电位变化。分光光度法检测caspase-3的活性变化,RT-PCR检测Bcl-2的mRNA的表达。结果:(1)用台盼蓝染色和MTT方法证实亚硒酸钠(>5μmol/L)能抑制HL-60细胞的生长及存活。(2)HL-60细胞经亚硒酸钠处理后,形态学上出现凋亡细胞特征性改变,双染流式细胞检测证实,亚硒酸钠能有效诱导HL-60细胞凋亡。(3)亚硒酸钠处理HL-60细胞后,流式细胞仪检测线粒体膜电位下降,分光光度法显示caspase-3活性升高,凋亡基因Bcl-2的mRNA的表达明显降低。结论:亚硒酸钠能有效抑制HL-60细胞的增殖及存活,且能够诱导其凋亡,抑制率及凋亡率与药物剂量呈相关。线粒体介导的凋亡途径是亚硒酸钠诱导HL-60细胞凋亡的可能机制。  相似文献   

8.
目的 通过观察诱导分化浓度的全反式维甲酸、亚硒酸钠、三氧化二砷对肺腺癌细胞A549的肿瘤相关基因的影响,探讨诱导分化药物对肺癌细胞的作用机制.方法 体外培养肺癌A549细胞,设全反式维甲酸、亚硒酸钠和三氧化二砷处理组及对照组,药物处理24 h后以Westem Blot和Rt-PCR检测基因caspase3、p21、RARα、bcl-2、cyclinD3和nm23的表达.结果 caspase3、RARα和nm23在亚硒酸钠、三氧化二砷组中表达上调;p21在全反式维甲酸、三氧化二砷组中表达上调.bcl-2和cyclinD3在3个处理组中表达下调.结论 全反式维甲酸、亚硒酸钠和三氧化二砷能引起A549肿瘤相关基因表达的改变,诱导分化药物对肺癌的作用机制表现为增殖抑制、促进凋亡、周期阻滞、转移抑制、诱导分化敏感度增加等多方面的改变.  相似文献   

9.
用不同浓度的亚硒酸钠加入原代培养两天的新生小鼠大脑皮质神经细胞 ,在不同的作用时间用分子生物学和流式细胞仪技术观察了亚硒酸钠诱导离体神经元凋亡的时间过程和量 效反应关系 ;同时 ,进一步观察了亚硒酸钠引发凋亡时一些相关基因表达的改变。结果显示 :①提取对照组和不同剂量亚硒酸钠处理 2、4、2 4和 48h组的DNA片段 (每个样品取 3× 10 6细胞 )进行琼脂糖凝胶电泳 :除对照组外 ,在亚硒酸钠处理的几个时间点都出现了神经元凋亡的特征性改变—DNA梯型 ,有剂量 效应和效应 时间依赖性 ,而以 0 .5 μmol/L亚硒酸钠处理后 2 4h表现得最明显 ;这些改变在同时加入核酸内切酶抑制剂ATA时消失或有不同程度的减弱 ;②用流式细胞仪对每个样品分析 10 0 0 0细胞得到的DNA含量直方图表明 ,亚二倍体峰(即以“AP”标出的凋亡峰 )的出现与亚硒酸钠呈明显的剂量和时间依赖性 ,其变化趋势与琼脂糖凝胶电泳的结果相吻合 ;③用RT PCR检测技术 (提取总RNA后 ,用反转录系统将其制备成cDNA ,再用特异性引物经PCR扩增要检测的cDNA后作半定量分析 )显示 ,在亚硒酸钠处理后的不同时间 ,与细胞凋亡密切相关的bcl 2、bax、p5 3、c fos、和AChE几种基因转录的mRNA量出现不同方向的改变 :bcl 2mRNA的量在亚硒酸钠处理后 1h明  相似文献   

10.
目的 探究亚硒酸钠对肺癌细胞生物学行为的影响以及如何通过NF-κB信号通路影响肺癌凋亡的具体机制.方法 CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验观察肺癌细胞的增殖和迁移的能力;流式细胞术、qPCR和Western blot实验检测不同浓度亚硒酸钠处理后的肺癌细胞的凋亡率、凋亡标志因子Bcl-2和Bax的mRNA和NF-κB信号通路相关蛋白(NF-κB、p-NF-κB、IkBα、p-IkBα)的变化水平;细胞免疫荧光实验观察p-NF-KB在细胞内的变化水平和分布情况.结果 CCK-8细胞增殖实验和细胞划痕实验显示肺癌细胞增殖和迁移被亚硒酸钠显著抑制.流式结果显示,亚硒酸钠处理后细胞凋亡率明显增加.与对照组相比,亚硒酸钠组的 p-NF-KB、p-IkBα、Bcl-2蛋白的表达水平和Bcl-2 mRNA表达水平均下调,而Bax蛋白和mRNA表达水平则与之相反.细胞免疫荧光实验结果显示亚硒酸钠可使NF-κB的磷酸化水平受到抑制.qPCR结果显示,亚硒酸钠组与BAY11-7082(NF-κB抑制剂)均可使Bcl-2 mRNA表达水平下调,Bax mRNA表达水平则上调.结论 亚硒酸钠可能抑制肺癌细胞的增殖和迁移,同时通过抑制NF-κB信号通路诱导肺癌细胞的凋亡.  相似文献   

11.
目的 :探讨p16,PCNA和CD4 4V6的表达与乳腺癌的淋巴道转移及与预后的关系。方法 :应用ABC法 ,对 90例乳腺癌及淋巴结转移癌进行免疫组化染色 ,同时对其中 4 3例进行随访 ,随访时间72~ 144个月。结果 :( 1)p16表达强度在有淋巴结转移组明显低于无转移组 (P =0 .0 0 3) ,PCNA的表达则相反 (P =0 .0 2 6) ,CD4 4V6的表达强度及百分比在两组间均无明显差异。 ( 2 )CD4 4V6染色百分比与患者生存时间有关 (P =0 .0 35) ,回归系数为 0 .2 4 6。结论 :淋巴结转移与乳腺癌细胞的增殖能力有关。CD4 4V6表达的百分比可作为判断患者预后的一个指标。  相似文献   

12.
位全芳  朱琼  常宇骁  杨劲 《海南医学》2014,25(6):785-787
目的siRNA靶向沉默p53蛋白后,观察其对PCNA泛素化修饰及细胞凋亡的影响。方法将p53siRNA及阴性对照siRNA通过脂质体分别转染入HeLa细胞中;转染后48h,顺铂处理不同细胞系,Westernblot法检测p53低表达对细胞PCNA泛素化修饰(ubi-PCNA)及凋亡诱导基因Caspase-3的影响。结果siRNA可显著抑制p53的表达;Westernblot结果提示,与对照组比较,顺铂损伤后p53低表达细胞系其PCNA泛素化修饰蛋白表达增加,同时Caspase-3蛋白表达下降,细胞存活率升高。结论靶向沉默p53的表达,可促进顺铂损伤诱导的PCNA泛素化修饰,降低细胞凋亡率。  相似文献   

13.
目的:研究p16在重组人肿瘤坏死因子(rmhTNF)诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。方法:用rmhTNF处理肝癌细胞,以流式细胞仪检测细胞周期变化,蛋白免疫印迹检测细胞内p16的表达变化。用siRNA干扰p16的表达后,再予流式细胞仪检测细胞的凋亡变化。结果:rmhTNF可以诱导肝癌细胞HepG2的凋亡,同时也可以诱导p16的表达的增加。干扰p16的表达可以逆转由rmhTNF诱导的肝癌细胞的凋亡。结论:p16在rmhTNF诱导的肝癌细胞的凋亡中发挥着重要的作用。  相似文献   

14.
目的探讨p16和PCNA表达产物在宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌中表达的意义。方法对正常宫颈鳞状上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织共95例,采用免疫组织化学S-P法,对宫颈癌变过程中p16和PCNA蛋白进行研究,将结果进行统计分析。结果p16蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01);PCNA蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01)。p16和PCNA两种蛋白在CIN和宫颈癌中的表达无明显差异。结论p16和PCNA蛋白的表达与宫颈癌的发生有关,提示这两种蛋白有可能成为高危人群早期筛查的一种免疫组化指标。  相似文献   

15.
应用免疫组化S P法,检测55 例胃癌组织中p21ras、p53、PCNA 蛋白的表达,结果发现:p21ras、p53、PCNA 阳性率分别为38-2% 、29-1% 、83-6% 。p21ras、PCNA过表达与胃癌浸润深度有关,p53、PCNA 过表达与胃癌淋巴结转移有关;在不同分化程度胃癌组间p21ras、p53、PCNA表达均无显著差异。PCNA和p21ras、p53 表达组间均呈正相关,且p21ras、p53 协同表达可能在胃癌发生、发展中起重要作用。  相似文献   

16.
目的 探究miR-16-5p对乳腺癌紫杉醇耐药细胞生物学活性的影响及分子机制。方法 以人乳腺癌亲本细胞(SKBR-3)与乳腺癌紫杉醇耐药细胞(SKBR-3/PR)为研究对象。实验设空白对照组、阴性对照组、miR-16-5p类似物组(miR-16-5p mimics)、miR-16-5p抑制剂组(miR-16-5p inhibitor),YWHAQ干扰组(si-YWHAQ),以及联合组(miR-16-5p mimics+si-YWHAQ)。利用qRT-PCR检测乳腺癌组织与癌旁组织、SKBR-3与SKBR-3/PR间miR-16-5p的表达水平。使用生信数据对miR-16-5p的靶基因做预测,双荧光素酶实验验证靶向结合。免疫印迹检测细胞YWHAQ、Bcl-2和Bax表达。CCK-8和Transwell检测细胞增殖迁移能力。流式细胞术检测耐药细胞周期凋亡改变。结果 qRT-PCR显示乳腺癌组织中miR-16-5p水平低于癌旁组织(-1.19±1.90 vs 1.59±1.76,P<0.01)。生物信息预测YWHAQ是miR-16-5p的靶基因,荧光素酶实验证实miR-16-5p能够靶向调节YWHAQ(P<0.01)。相对于 SKBR-3 细胞,SKBR-3/PR 细胞中 miR-16-5p 表达水平降低(P<0.01),YWHAQ 表达水平增高(P<0.05)。Western blot 结果显示 miR-16-5p 类似物能够抑制 YWHAQ 表达,miR-16-5p 抑制剂能够促进 YWHAQ 表达(P<0.01)。相对于对照组,miR-16-5p类似物能够将耐药细胞阻滞在G0/G1期([ 55.61±1.99)% vs(43.06±1.53)%,P<0.01],抑制细胞增殖和迁移能力(P<0.01),促进细胞凋亡 ([ 10.37±0.23)% vs(3.81±0.88)%,P<0.01],YWHAQ干扰组细胞迁移能力下降,凋亡率升高,miR-16-5p类似物组与YWHAQ干扰组细胞的Bax蛋白表达增加,YWHAQ与Bcl-2蛋白水平降低。相对于miR-16-5p 类似物组,联合组细胞迁移能力被抑制(75.75±29.85 vs 181.11±11.71,P<0.01),凋亡率显著升高([ 24.20±2.43)% vs (14.10±4.47)%,P<0.01]。结论 miR-16-5p能够通过靶向调节YWHAQ调控Bcl-2/Bax的表达,从而改变乳腺癌紫杉醇耐药细胞的生物学活性。  相似文献   

17.
目的:观察反义人端粒酶RNA(Human telomerase RNA components,hTR)转染的SGC-7901胃癌细胞(7901-ahTR)细胞周期调控基因表达的变化。方法 采用RT-PCR、Western印迹和免疫组化方法检测SGC-7901和7901-ahTR细胞p21、p27、p16、c-myc等基因mRNA和蛋白的表达。结果 反义hTR转染的7901细胞p21和p27表达增加,PCNA和c-myc表达下调,而cyclinD1和p16mRNA表达无明显变化。结论 抑制端粒酶活性能调节多种细胞周期调控基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖和诱导分化。  相似文献   

18.
γ刀照射后胶质瘤细胞抑癌基因p16表达的变化   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的:观察γ刀对体外培养的胶质瘤C6细胞照射后,凋亡细胞中抑癌基因产物P16蛋白表达水平的变化.方法:体外培养胶质瘤C6细胞,经Leksell γ刀照射,体外培养48 h,应用免疫组化S-P法及计算机图像分析检测γ刀照射前后C6细胞P16蛋白表达水平.结果:5.00、6.22 Gy组γ刀照射后,培养48 h的C6细胞P16蛋白表达水平明显升高(细胞灰度值分别为155.4±2.0、124.9±7.1),与对照组(细胞灰度值为167.1±6.2)比较,差异有显著性(P<0.01).结论:γ刀诱导C6细胞凋亡的机理可能与激活P16蛋白表达水平有关.  相似文献   

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