光周期对大鼠松果体细胞超微结构的影响

目的研究大鼠松果体细胞褪黑素的合成与光周期的关系。方法用透射电镜观察大鼠松果体细胞的超微结构。结果光周期（L：D=1：23）大鼠松果体细胞增大，明、暗两种细胞不易区分，内质网明显增多，高尔基复合体扁囊扩大，线粒体增多、大小悬殊，脂滴巨大。成群分布，细胞体及其突起内清亮小泡明显增多。结论光周期（L：D=1：23）松果体细胞超微结构改变是其功能活跃的形态学依据，初步证实松果体细胞褪黑素的合成与光周期密切相关。     

金黄地鼠松果体内酪氨酸羟化酶样神经分布的免疫电镜法研究

本文用儿茶酚胺合成酶之一的酪氨酸羟化酶(TH)抗体,用不标记抗体过氧化物酶——抗过氧化物酶(PAP)法包埋前免疫电镜技术观察了金黄地鼠松果体内的单胺类神经分布.结果发现松果体内有TH样免疫反应阳性神经纤维和TH样兔疫反应阳性神经元.TH样免疫反应阳性的经元散在于松果体实质内.其细胞体呈卵圆形或梭形,最大直径为15～20μm,具有一个或两个短的细胞突起.细胞核大,呈圆形.细胞质内有线粒体,核糖体和高尔基复合体.TH样免疫反应阳性神经元与松果体细胞体、松果体细胞突起、TH免疫反应阳性或阴性神经终末相接触,但无明显的膜特化的结构.在TH免疫反应阳性神经终末内有许多颗粒小泡和无颗粒小泡.TH免疫反应阳性神经纤维与松果体细胞相接触,但无明显的膜特化结构.     

猴桃果体毛细血管和分泌颗粒的超微结构特征及其意义

目的 探讨松果体内毛细血管和松果体细胞分泌颗粒的超微结构特征及其意义。方法 采用常规生物电镜样品制备技术,对成年日本猴桃果体进行了透射电镜观察。结果 猴松果体血管及毛细血管只存在于被囊和小叶间隔的结缔组织内,松果体实质小叶内并无血管。毛细血管内皮为窗孔型,外有基膜与血管周围结缔组织分隔。松果体实质小叶主要由松果体细胞和少数胶质细胞组成。松果体细胞的突起终止于血管周隙内;分泌颗粒大量存在于松果体细胞     

大鼠下丘脑弓状核的超微结构

本文用醛—锇酸固定法对大鼠下丘脑弓状核的超微结构进行了研究。结果表明,正常大白鼠的弓状核有两型细胞。这两型细胞中都存在着中心密度不同的颗粒小泡,这些小泡和高尔基复合体的密切关系表明,其形成和细胞结构有关。并提示颗粒小泡含有单胺成分前体和释放因子。     

新生大鼠松果体细胞体外分离培养及增殖情况观察

目的:分离培养并鉴定新生大鼠松果体细胞,观察其体外增殖情况。方法:选择30只新生SD大鼠,处死后分离松果体组织,采用多聚赖氨酸对培养板予预包被处理胰酶消化、经差速贴壁分离等方法,对新生大鼠松果体细胞进行体外分离培养并传代。观察50 d内体外培养的松果体细胞的形态变化,培养7 d时采用免疫荧光法,观察原代松果体细胞5-羟色胺(5-HT)及微管相关蛋白-2(MAP-2),实时定量PCR法检测N-乙酰基转移酶(AANAT)及生长抑素(SS)mRNA。分别取传代第1、3、5代对数生长期细胞测定细胞增殖情况。结果:新生大鼠松果体细胞呈圆球形或多角形,培养21 d时松果体细胞体积明显增大,胞质内可见深色细小囊泡状颗粒。培养7、14、21、28 d时,随培养时间延长,松果体细胞AANAT mRNA的相对表达量逐渐降低(P0.05),松果体细胞SS mRNA的相对表达量先升高后降低(P0.05)。细胞传代后第1、3代细胞生长曲线近似"S"形,且第3代细胞增殖最为旺盛;随传代次数增加,第5代细胞生长曲线近似平缓,细胞逐渐衰老、死亡。结论:采用胰酶消化、差速贴壁分离等方法并结合含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,可获得纯度较高且有增殖潜力的大鼠松果体细胞,细胞在体外增殖活跃,且具有一定的生物学功能。     

哺乳类松果体内肽类神经分布的免疫组织化学研究

用免疫组织化学方法以光镜和电镜观察了金黄地鼠、大白鼠、沙土鼠松果体内的肽类神经分布,其中应用的第一抗体为降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)神经肽Y(NPY)、促生长激素释放抑制激素(SRIH),结果发现,SP免疫反应阳性神经纤维主要分布于松果体实质的周围部,而在松果体实质中心部较缺乏。CGRP免疫反应阳性神经纤维在松果体实质内分布较丰富。在松果体实质周围部的CGR与PSP免疫反应的阳性神经纤维分布几乎重复,电镜观察结果,CGRP免疫反应阳性神经纤维为无髓纤维,与松果体细胞相接触,但无膜特化的结构,VIP免疫反应阳性神经纤维分布于松果体实质内,为无髓纤维,与松果体细胞相接触,但无膜特化的结构。NPY免疫反应阳性神经纤维更丰富地分布于整个松果体实质内,但其实质的周围部分布较密集。NPY免疫反应阳性神经纤维为无髓纤维,其末梢内含有大颗粒小泡和小颗粒小泡,神经末梢与松果体细胞相接触,但无膜特化的结构。SRIH免疫反应阳性神经纤维主要分布于松果体实质的中心部。     

雌激素对雌性大鼠松果体细胞影响的电镜观察

本文报告了正常雌性大鼠松果体的超微结构,记述了松果体细胞中含有的多种细胞器。我们又在电镜下观察了雌激素作用后雌性大鼠的松果体细胞超微结构的改变。实验组松果体细胞中出现大量的巨大脂滴。粗面内质网和核糖体比对照组细胞更为丰富。文中讨论了松果体和性腺的相互关系。     

大鼠松果体细胞核体视学定量研究

本文采用C_5型0.5网形目镜尺,在油镜下检计正常大鼠松果体细胞核的总测试点数(Pc)为7014个,面积分数(A_A)为14.03％,估算其体积分数(V_v)亦为14.03％。为研究松果体细胞核的形态学变化奠定了基础。     

松果体分泌的神经体液调节和神经支配研究

报告本室近年研究松果体分泌的神经体液调节和神经支配的主要成绩。通过一系列动物实验探讨松果体对应激反应存在昼夜差别的原因。通过电镜等方法证明交感神经对松果体细胞有营养功能;有大量来自中枢的有髓和无髓纤维经缰核和后连合进入深部松果体;一些内含大颗粒泡的无髓纤维终末与含清亮泡的神经终末在松果体内有突触性联系;松果体细胞具有接触脑脊液的形态学基础。通过切除睾丸和注射睾酮的实验,用形态定量分析的方法,说明幼年大鼠的睾丸分泌物对松果体的功能有抑制作用,但过量的睾酮不会增加此种抑制。     

烧伤后腺垂体生长激素细胞亚微结构立体计量测定的实验研究

本实验利用立体计量学方法,对30％Ⅲ°凝固汽油体表烧伤的家兔腺垂体生长激素细胞亚微结构进行了定量分析,并用氧化酶法测定了血糖,结果表明:(1)烧伤后高尔基复合体、线粒体和粗面内质网体积密度呈双相反应;(2)GH细胞未成熟颗粒的成熟速度加快;(3)烧伤后血糖与GH细胞的某些功能活动相关明显;(4)在对照组GH细胞的自分泌对其胞吐有负反馈作用,而在烧伤组则反之;(5)新生线粒体可能来源于高尔基复合体,新生高尔基复合体可能来源于质膜成份的重利用加强。     

中医“肾应冬”的实验研究

“肾应冬”是中医四时应五脏理论的一部分。采用大鼠松果体摘除模型 ,探索了冬至、夏至SD雄性大鼠血清睾酮 (T)、黄体生成素 (LH)及卵泡刺激素 (FSH)的变化规律。结果 :血清T夏高冬低 ,LH夏至有升高趋势、FSH季节变化不明显 ;松果体摘除组血清T、LH、FSH明显增高。结论 :“肾应冬”的内涵之一是肾的生殖功能在冬季减弱 ,在夏季增强 ;松果体可能是季节与生殖联系的中介。     

季节与生殖相关性实验研究

目的　“肾主生殖 ,与冬相应” ,是中医藏象理论的重要组成部分。本实验目的是探索生殖季节性变化的生理机制。方法　本实验采用大鼠松果体摘除模型 ,运用放射配体结合分析 (RBA)方法测定冬夏季节大鼠睾丸细胞膜黄体生成素 (LH)受体变化。结果　正常组睾丸细胞膜LH受体最大结合量和结合力在冬夏季节存在明显差异 (P <0 0 1) ,表现出冬高夏低的变化 ;正常组和模型组之间睾丸细胞膜LH受体数目存在显著差异 ;模型组睾丸细胞膜LH受体最大结合量和结合力在冬夏季节不存在明显差异。结论　季节因素对大鼠睾丸LH受体有调节作用 ;松果体可能是生殖与季节联系的中介。     

季节变化与正常大鼠肺脏第二信使关系的研究

[目的]通过观察四季正常大鼠肺脏环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)和三磷酸肌醇(IP3)的含量,探讨季节变化影响大鼠肺脏第二信使的作用机制。[方法]用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肺组织cAMP、cGMP的含量,用放射免疫法检测肺组织IP3的含量。[结果]肺组织cAMP含量夏季与秋季有明显差异(P<0.05),且呈夏、春、冬、秋依次降低的整体趋势;cGMP含量春季与秋季差异非常显著(P<0.01),与冬季有显著性差异,且整体上呈秋、冬、夏、春依次降低的趋势;IP3含量四季间统计无明显差异,但冬季含量最低。[结论]大鼠秋季肺组织cAMP含量低,cGMP含量高,IP3冬季含量最低,这可能是秋冬季节呼吸系统多发病的病理生理学基础之一,而松果腺——褪黑素是此季节节律变化的中介物质基础。     

长江流域某市饮用水雌激素污染物初步研究

目的　了解饮用水雌激素污染物污染状况。方法　应用气相色谱 /质谱 (GC/MS)分析技术、人乳腺癌(MCF/ 7)细胞增殖试验和子宫湿重实验 ,对某市饮用水雌激素污染物进行检测。结果　GC/MS分析表明 ,水源水中有机污染物 10 0余种 ,出厂水中 80余种 ;其中作为可疑雌激素物质的邻苯二甲酸二 ( 2 甲基丙基 )酯、邻苯二甲酸二丁酯检出率分别为 10 0 %和 90 %。此外 ,还检出 2 ,4 二甲基酚等酚类物质。嘉陵江水源污染重于长江 ,出厂水均为丰水期污染重于枯水期 ,而以C厂和E厂出厂水水质较好。生物学评价结果显示 ,水源水、出厂水有机提取物均刺激MCF/ 7细胞增殖和大鼠子宫生长 ,而且这种作用可被tamoxifen抑制。丰水期水源水水质比枯水期水源水水质好 ;丰水期水质是长江优于嘉陵江 ,枯水期水质则是嘉陵江优于长江。丰水期水源水经水厂处理后 ,对MCF/ 7细胞增殖的刺激作用均增加 ,而枯水期则相反。枯水期A厂和B厂的出厂水水质是较好的。结论　某市饮用水中存在雌激素污染物 ,但尚不构成对人体的危害。     

Serum Levels of Interleukin-1 Beta,Interleukin-6 and Melatonin over Summer and Winter in Kidney Deficiency Syndrome in Bizheng Rats

Objective To observe the seasonal changes in serum levels of interleukin-1 beta（IL-1β）, interleukin-6（IL-6） and melatonin（MT） in Bizheng rat model, and explore the relationship between MT and the pathogenesis of rheumatoid arthritis. Methods One hundred and sixty Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups in summer（n=80） and winter（n=80） respectively： normal group, collagen-induced arthritis（CIA） model group, operation group, and sham-operation group（n=20 in each group）. The CIA model group was injected with collagen emulsion at the base of the tail to induce arthritis. The rats in the operation group received pineal gland resection, and 7 days after the first operation, underwent testectomy or oophorectomy. The rats in the sham-operation group were operated to ligature the sagittal sinus, without extracting the pineal gland. After the operations, the operation group and the sham-operation group both were immunized as the CIA group was. The serum levels of IL-1β, IL-6 and MT in different groups were measured by radioimmunoassay. Results Compared with the normal group, the serum levels of IL-1β and IL-6 increased in the CIA model, operation, and sham-operation groups both in summer and in winter（IL-1β in summer, P=0.008, P〈0.01, P=0.012; IL-1β in winter, P=0.019, P〈0.01, P=0.027; IL-6 in summer, P=0.028, P〈0.01, P=0.024; IL-6 in winter, P=0.006, P〈0.01, P=0.008）. In the operation group, the serum levels of IL-1β and IL-6 in winter were higher than in summer, but with no statistically significant differences（P=0.844, 0.679）. Compared with the normal group, the serum level of MT significantly increased in summer and winter in both the CIA model group（P=0.002, 0.008） and the sham-operation group（P=0.003, 0.007）, while significantly decreased in the operation group（P=0.023, 0.003）. There was no significant difference in MT level in the operation group between summer and winter（P=0.947）. Conclusions The increase of serum levels of IL-1?     

中医"肾应冬"调控机制与褪黑素受体关系的研究

目的通过观察性腺轴褪黑素受体的季节性变化,从而深入揭示“肾应冬”的调控机制。方法采用放射性配基饱和法,检测雄性SD大鼠性腺轴褪黑素受体的最大结合量(Bm ax)和解离常数(Kd值)的冬夏变化。结果在正常生理条件下,下丘脑(P<0.05)和垂体(P<0.05)Bm ax值均表现为冬高夏低。下丘脑(P<0.05)和垂体(P<0.01)Kd值均表现为冬高夏低。摘除松果腺后,冬季手术组下丘脑(P<0.01)、垂体(P<0.01)Bm ax值都明显高于正常组,夏季手术组下丘脑(P<0.01)Bm ax值明显高于正常组。冬、夏手术组下丘脑(P<0.01)、垂体(P<0.01)Kd值都明显高于相应的正常组。而睾丸的褪黑素受体的Bm ax值和Kd值因含量极少而无法测出。结论“肾应冬”调控机制与性腺轴褪黑素受体的季节性变化有关,松果腺在此过程中起了重要的高位调节作用。     

胃肠道褪黑素的季节性变化与“脾应长夏”生理机制的相关性研究

目的探讨五季(春、夏、长夏、秋、冬)胃肠道(胃、空肠、回肠、结肠)褪黑素(Melatonin,MT)分泌的季节性变化与"脾应长夏"生理机制的关系。方法将60只健康SD大鼠随机分为10组,对照组和模型组各5组,按照春、夏、长夏、秋、冬五个季节分批饲养,每个季节均安排两组,对照组和模型组各6只,模型组行松果腺摘除手术,对照组不做任何处理。分别于五季代表时间点(春分、夏至、立秋前1 d、秋分、冬至)取胃、空肠、回肠、结肠,采用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)测定相应组织的MT含量并进行比较。结果(1)在正常生理情况下,空肠和回肠的MT水平均表现为长夏季节明显高于其他季节,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);胃MT水平五季的季节性变化不明显;结肠MT水平表现为冬季最高。(2)松果腺摘除后,胃、空肠、回肠、结肠组织的MT季节性变化规律均发生了改变。结论胃肠道MT的分泌呈现出明显的季节性波动,长夏季节空肠、回肠MT分泌增高可能是"脾应长夏"的重要生理机制。松果腺参与了胃肠道MT季节性变化规律的调节。     

综合治疗干预下维持性血液透析高血压患者季节性血压变化的影响因素

目的 探讨综合治疗干预下维持性血液透析(MHD)高血压患者季节性血压变化的影响因素.方法 选择我院血液净化中心2015年1月至2016年6月期间诊治的90例合并高血压的MHD患者为研究对象,均给予综合治疗干预,比较夏季与冬季血压、干体质量、透析间期体质量增加量(IDWG)、尿素清除分数(Kt/V)以及降压药的限定日剂量(DDD),采用Logistic回归分析方法分析夏冬季节血压变化的影响因素.结果 冬季患者收缩压、舒张压、干体质量、DDD、IDWG分别为(141.44±10.86)mmHg、(88.33±6.96)mmHg、(59.58±4.84)kg、(3.74±1.12)、(2.52±1.15)kg,均明显高于夏季的(137.52±10.43)mmHg、(84.41±6.25)mmHg、(59.58±4.84)kg、(3.42±1.03)、(2.11±0.93)kg,差异均有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,夏冬季节的干体质量差值是血压变化的独立影响因素(P<0.05).结论 在实施综合治疗干预的前提下,MHD高血压患者仍然存在季节性血压变化,干体质量增加是血压季节变化的独立影响因素.