牙周病正畸牙齿移动的动物实验研究

目的 研究牙周炎患牙正畸治疗的时机。方法 将实验动物分为3组,正常矫治对照组(A),牙周病治疗矫治组(B),牙周病矫治组(C),分别对3组动物正畸牙齿移动后进行组织学观察。结果 病理组织切片显示：C组兔牙牙周组织明显破坏,可见大量破骨细胞及炎细胞浸润,加重了原有的牙龈炎和牙周炎症;而A、B两组组织切片均为正常牙齿移动所见,且于B组可见膜内化骨现象。结论 对于轻度牙周炎,在菌斑得到控制及拥有良好的牙周维护的前提下,牙周组织对于正常范围内的正畸力的反应与正常牙齿移动未见明显差别;而未经治疗的轻度牙周炎不能进行正常力值下的牙齿移动。     

人牙周膜弹性模量的测定

作者用正常成年人的新鲜颌骨制成人牙周膜的实验标本共１３５个，其中拉伸实验试件１００个，压缩实验试件３５个，并初步测定了人牙周膜的弹性模量，得出了牙周膜的拉伸弹性模量为３．３５～４．５９ＭＰａ；压缩弹性模量为Ｏ．５４０２（土０．３４８）ＭＰａ。     

人牙周膜细胞在弹性牵张力作用下核心结合因子的表达

目的：探讨人牙周膜细胞在张应力作用下的成骨特性和核心结合因子(coxe—bindingfactoral，cbfal)在正畸成骨中的作用机制．方法：人牙周膜细胞体外原代培养，弹性膜及体外培养细胞加载系统加载弹性牵张力，免疫组化方法检测cbfal多克隆抗体在人牙周膜细胞的表达．结果：未加力的正常人牙周膜细胞cbfal抗体检测为阴性，弹性牵张力作用下人牙周膜细胞有cbfal阳性表达．结论：弹性牵张力可以诱导人牙周膜细胞向成骨样细胞分化；cbfal可能是正畸成骨的调控途径之一。     

牙周膜微血管构筑的实验研究

墨汁灌注狗颈总动脉，火棉胶连续切片光镜观察牙周膜微血管构筑，图像分析仪进行半定量分析，甲基丙烯酸甲酯铸型扫描电镜观察。结果，狗的下颌前磨牙牙周膜内微血管分为２层，靠近牙槽骨壁侧主要为纵行的管径较粗的血管，靠近牙根侧为毛细血管网。     

实验动物外科手术教学方法的探讨

利用实验动物学习外科手术操作是外科教学的一个重要环节,是医学生进入外科临床实习的必要前提,合理制定教学计划,激发学生兴趣和培养团结协作精神,注重严格无菌观念的树立,坚持实验操作与临床实际相结合,并改革考核制度,对于改良手术学教学方法,提高教学质量具有重要意义.     

犬正畸牙移动过程中张力侧牙周膜肌成纤维细胞的表达研究

目的 初步探讨正畸牙移动过程中牙周膜肌成纤维细胞是否存在及其表达规律.方法 Beagls犬5只,采用自制的加力装置用镍钛螺旋拉簧加力100 g,远中移动犬第一前磨牙,主动加力4周, 4周后去除加力装置,分别于加力后1、2、3、4、8周各处死1只.测量实验牙移动距离;取正畸牙张力侧牙周膜,采用免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;透射电镜观察α-SMA染色阳性区域细胞的超微结构.结果 实验牙移动距离第1周达到高峰,第2周开始牙齿移动速度减慢,到第3周降至最低,第4周又有所加快.免疫组化结果α-SMA的表达从加力开始至第2周达到最大值,到第4周基本恢复正常.透射电镜观察可见胞浆内有密体结构出现.结论 肌成纤维细胞存在于正畸牙牙周膜中,其表达改变可能是受到正畸力的刺激.肌成纤维可能起到对抗张力限制牙齿移动的作用.     

实验动物环境卫生学的课程建设

《实验动物环境卫生学》是实验动物专业本科生的专业课程之一。人类使用和培育实验动物的历史进程,伴随着实验动物环境改造过程,实验动物的繁育和应用都离不开环境卫生,所以,实验动物专业开设《实验动物环境卫生学》是非常必要的。实验动物环境与质量的关系是实验动物环境卫生学研究的主要内容。     

在中医药学中动物实验与实验动物的选择

在医学发展过程中,动物实验为现代医学的发展与进步作出了巨大贡献,每一种新药及其替代品的产生和每一种新治疗手段的发现,都离不开动物实验.实验动物是活的精密仪器,在动物实验中,选择适当的动物作为该项中药实验的实验动物对于实验的成败至关重要.     

人牙周膜成纤维细胞的体外培养

目的：建立人牙周膜成纤维细胞体外培养的方法。方法：采用组织块贴附法原代培养人牙周膜成纤维细胞并传代。结果：牙周膜成纤维细胞体外培养成功率为20％。5代后细胞生长旺盛。经免疫组织化学SABC法证实为来源于中胚层的成纤维细胞。结论：采用组织块贴附法培养原代人牙周膜成纤维细胞。胰酶消化传代后，生长状况良好，可作为人牙周膜成纤维细胞的实验模型。     

purmorphamine促进人牙周膜干细胞应力成骨

目的研究purmorphamine在动态张应力促人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,PDLSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养鉴定PDLSCs,在矿化诱导环境中加入purmorphamine,采用Flexcell FX-4000T应力加载系统对细胞加力24 h,以Real-time PCR检测成骨相关指标Runx2、alkaline phosphatase(ALP)以及Hedgehog(Hh)通路的标志物GLI1、Pathed1(PTCH1)、Smoothend(SMO)。结果动态张应力作用24 h后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GLI1、PTCH1、SMO的表达水平明显升高(P<0.05);加入purmorphamine后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GLI1、PTCH1、SMO的表达水平较加力组均有增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 purmor-phamine可能通过激活Hh通路,进而增强人PDLSCs应力条件下向成骨细胞分化。     

TAZ在张应力促进人牙周膜细胞骨向分化中的作用

目的：探索PDZ结合基序转录共激活因子（TAZ）参与张应力促进间充质干细胞（MSCs）骨向分化的调控作用及分子机制。方法：原代培养人牙周膜细胞（hPDLCs）。利用Flexcell系统对hPDLCs体外加载12%,0.5 Hz张应力,实时荧光定量PCR及Western blot检测hPDLCs中TAZ及成骨标志物核心结合因子α1（Cbfα1）、I型胶原（COL I）、骨钙素（OCN）、锌指结构转录因子（OSX）的表达变化;蛋白质免疫共沉淀检测TAZ与Cbfα1的结合情况。结果：加载12%,0.5 Hz张应力24 h及48 h时显著促进hPDLCs的TAZ、Cbfα1、COL I、OSX、OCN mRNA及蛋白表达水平（P＜0.05）。蛋白质免疫共沉淀证实TAZ与Cbfα1的结合量显著增加。hPDLCs转染TAZ siRNA 72 h,加载12%,0.5 Hz张应力24 h,TAZ蛋白水平及张应力所促进的细胞成骨蛋白表达下降。结论：张应力作用下TAZ通过上调Cbfα1的表达与转录活性诱导hPDLCs骨向分化。     

猫恒前磨牙牙周膜微血管构筑的实验研究

目的：研究猫恒前磨牙牙周膜（PDL）微血管床的解剖形态。方法：对猫上颌恒前磨牙进行墨汁灌注，火棉胶包埋。连续切片，光镜下观察PDL徽血管形态，用图像分析仪进行定量分析。结果：颈部PDL微血管与牙龈具有丰富的吻合支，PDL内微动脉血管分支成毛细血管下行，可见“发卡式”结构的毛细血管。中段，纵行微静脉下行过程中彼此相互吻合，未见微动脉血管。根尖牙周膜可见“栅栏状”结构的微静脉网。结论：猫恒前磨牙血流来源于牙龈动脉和牙槽骨动脉。静脉引流方向主要是经中段的微静脉汇入牙槽骨静脉。“发卡式”结构的毛细血管有利于颈部PDL的物质交换，抵御外界侵袭，促进组织修复。微静脉网使PDL可以抵抗强大的垂直向力。     

丁酸对人牙周膜细胞增殖的影响

目的:探讨丁酸对人牙周膜细胞增殖的影响.方法:用含不同浓度丁酸(0 mol/L,2 mol/L,4 mol/L,8mol/L)的培养液培养人牙周膜细胞,通过MTT法测定其增殖.结果:人牙周膜细胞进入指数生长期后,丁酸以剂量依赖的方式抑制人牙周膜细胞的增殖.结论:丁酸可能通过抑制人牙周膜细胞的增殖,进而影响牙周膜的改建和更新,促进牙周袋形成和牙周组织破坏.     

动态牵张应变对人牙周膜细胞的细胞骨架的影响

目的 研究动态牵张应变下人牙周膜细胞（HPDLCs）细胞骨架的变化。方法 体外培养HPDLCs,利用动态牵张应变细胞加载装置对HPDLCs分别加载1%、10%和20%的牵张应变,每种应变分别加载7个时间段（0.5、1、2、4、6、12、24 h）,应用激光共聚焦显微镜观察HPDLCs细胞骨架的形态结构;收集图像并运用Image-Pro Plus 4.5.0.29软件进行分析,测定HPDLCs的面积、长度与宽度比（长宽比）以及细胞骨架蛋白F-actin的积分荧光强度。结果 激光共聚焦显微镜观察发现：随着加载牵张应变的作用时间延长和应变值提高,HPDLCs细胞逐渐呈现栅栏状相互平行排列趋势,且排列方向垂直于牵张力方向,胞体被拉长。图像分析结果显示：加载动态牵张应变后,HPDLCs的细胞面积、长宽比及F-actin的表达量均发生相应的变化。结论 动态牵张应变可引起HPDLCs细胞骨架的变化,并且与施加应变的大小和应变作用时间有关。     

胰岛素样生长因子Ⅰ对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的：研究胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）对人牙周膜成纤维细胞( PDLF)增殖能力的影响，为牙周组织改建工作提供理论依据。方法：取本实验室自行制备生长状态良好的转染IGF-Ⅰ的PDLF和未转染IGF-Ⅰ的PDLF，分别用0.25%胰蛋白酶消化，制成细胞悬液，经计数后进行接种并计数，绘制成细胞生长曲线，比较2种细胞生长速度的差异；用0.25%胰蛋白酶分别消化转染和未转染IGF-Ⅰ的PDLF，培养后采用MTT法测定A值，并比较2种细胞增殖活性的差异;采用碱性磷酸酶（ALP）比色法检测比较转染和未转染IGF-Ⅰ的PDLF的ALP活性。结果：细胞生长曲线显示转染IGF-Ⅰ的PDLF的生长速度高于未转染IGF-Ⅰ的PDLF，差异有显著性（P<0.05）；转染IGF-Ⅰ的PDLF的增殖能力及ALP活性高于未转染IGF-Ⅰ的PDLF，差异有显著性（P<0.05或P<0.01）。 结论： IGF-Ⅰ可能通过PDLF发挥其调节牙周组织改建的作用。     

牛奶对脱位牙牙周膜细胞活性的影响

目的观察牙脱位后，保存在牛奶中，在不同的时间点牙周膜细胞的活性。方法采用正畸拔除的第1、第2双尖牙，拔除后立即放入牛奶中保存，在不同的时间点统计有活力牙周膜细胞的数量，并与干燥状态下保存的脱位牙有活性的牙周膜细胞数量进行比较。结果在不同时间点（0．5h-2h），牛奶中保存的脱位牙有活性的牙周膜细胞数量无显著性差异（P〉0．05），与干燥状态下保存的脱位牙有活性的牙周膜细胞数量比较有显著性差异（P＜0．01）。结论牛奶是非常应用且有效的保存脱位牙的溶液。     

茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的 观察茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响.方法 采用组织块培养法培养原代人牙周膜成纤维细胞并传代,经免疫组化SABC法检测角蛋白和波形丝蛋白鉴定,取5～8代细胞用于实验;按茶多酚不同浓度分1 mg/ml(B组)、0.5mg/ml(C组)、0.25mg/ml(D组)、0.125mg/ml(E组)、0.0625mg/ml(F组)组和空白对照组(A组),采用细胞计数法、MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞DNA含量.结果 不同浓度茶多酚均促进人牙周膜成纤维细胞的增殖和DNA合成(P＜0.05),茶多酚作用的最适浓度为0.5 mg/ml,最佳作用时间为48 h.结论 茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖具有明显的促进作用.     

干细胞因子对牙周膜细胞增殖分化能力的影响

目的探讨干细胞因子（SCF）对体外培养的人牙周膜细胞（hPDLCs）增殖、分化能力的影响。方法无菌条件下刮取因阻生或正畸需要拔除的牙齿根中1／3的牙周膜组织，采用组织块法行体外原代培养，所培养的细胞经免疫细胞化学鉴定后接种于塑料培养板，加入含0.1、1、10、100μmol／L SCF的培养液。然后采用MTT法测定细胞增殖、分化能力，并以ELISA法检测碱性磷酸酶（ALP）活性。结果原代牙周膜细胞组织块法培养的细胞生长缓慢，加入SCF后细胞生长旺盛，细胞形态为纺锤形或成纤维样，细胞质透明，状态良好。SCF在0．1、1、10、100μmol／L时对hPDLCs均有明显的促增殖作用，其中浓度为10μmol／L时促进作用最明显（P〈0.05）。此外，SCF还可以增强hPDLCs的ALP活性，其中浓度为10μmol／L时ALP OD值最高（P〈0.05）。结论SCF对hPDLCs的生物学活性有促进作用，能促使其向成骨细胞方向分化，提示SCF可能有促进牙周组织再生的作用。