不同细菌浓度及离心条件对大肠杆菌透射电镜观察的影响

目的:探讨不同的光密度(Optical density,OD)值、离心速度及时间对大肠杆菌透射电镜样品制备及超微结构观察的影响.方法:按照正交试验设计原则,将不同OD600值的大肠杆菌分成9个不同的离心速度和时间组,比较各组制样难度及电镜下超微形态及纵、横切面比的变化.结果:各种OD600值和离心条件对大肠杆菌超微结构影响不大,但OD600值为0.8,离心时间为15 min时,样品中细菌多呈纵切形态而更适宜观察分析.结论:离体培养大肠杆菌透射电镜样品制备及观察的最佳OD600值为0.8,离心时间为15 min,离心速度为5 000～12 000 r/min.     

提高外周血淋巴细胞梯度离心分离率

为提高外周血淋巴细胞密度梯度离心法的分离率，采用不同的采血容器、离心管径、离心温度/速度、离心机、取样工具、洗涤的离心速度和时间等实验条件，观察外周血淋巴细胞分离的数量和存活率。结果表明采用带盖试管储存抗凝血，小口径(9mm)离心管，台式水平离心机(r=15cm)22℃1 900r/min，离心20min；1mL注射器吸取淋巴细胞，1 600r/min及1 500r/min各洗涤10min，是较好的组合。采血3mL，可分离淋巴细胞6×106个以上，存活率＞95%。提示注意实验操作中的一些技巧和方法，可以提高分离率。     

外周血淋巴细胞染色体标本制片室内质量控制

目的了解外周血淋巴细胞染色体标本制片的影响因素,寻找出最佳的室内质量控制制作条件。方法比较制片过程中不同的接种血量、培养温度、低渗时间以及离心速度对外周血中染色体标本制作的影响情况。结果外周血染色体制片过程中最佳的室内质量控制条件是接种血量0.7×32规格注射器针头20~25滴;培养温度应该严格控制在37℃±0.5℃;最佳低渗时间是15~20 min;最佳离心速度1 500 r/min~2 000 r/min;固定液应在使用前临时配置,放置1 h应废弃;玻片冷藏处理的效果比热水处理后的好。结论外周血淋巴细胞染色体标本制片的室内质量控制条件有接种血量、培养温度和低渗时间等,相关实验室应予关注,对辐射防护作出正确的评价。     

二次离心法制备富血小板血浆离心条件的比较

 目的 探讨二次离心法制备富血小板血浆（PRP）的最佳离心条件和方法。方法 从新西兰大白兔耳背中央动脉取血2.7 mL,按照不同离心条件（转速：1 000~2000 r/min,时间：5~20 min）离心2次,比较不同条件下PRP中血小板浓度和血小板回收率。结果 多种离心条件均能成功制备PRP。初次离心：在形成白膜前的临界条件下（转速1 400 r/min,10 min）取得上层血浆的操作简单,且血小板回收率最高（＞85%）。再次离心：转速1 400 r/min,＞10min时,即可制得符合要求的PRP（浓缩率＞5倍）。结论 初次离心条件和上清液的获取方法对PRP的回收率和浓缩率影响较大,在产生白膜前的临界条件下提取上清液操作简单,无需特殊设备,血小板浓度和回收率高,避免了离心速度过高或离心时间过长导致的血小板活化、聚集。该方法是制备PRP简便、有效的方法。     

消化酶浓度和消化时间对幼鼠心肌细胞培养的影响

目的观察不同浓度消化酶和消化时间对幼鼠心肌细胞培养的影响。方法用0.08g/L和0.25g/L胰蛋白酶液消化幼鼠心肌组织,时间分别为5、8、15min,用差时贴壁法分离、提纯、收取细胞进行培养,倒置显微镜下观察细胞形态和活力。结果 0.08g/L胰蛋白酶液消化8min的心肌细胞第2天出现明显的搏动现象,第3～4天细胞伸出伪足相互接触交织成网,逐渐形成细胞簇或细胞单层,搏动呈同步性,收缩明显有力,搏动频率为120～180min-1;而经其他浓度胰蛋白酶和消化时间处理得到的心肌细胞形态和活力均不理想。结论选择适宜的消化酶浓度和消化时间可获得形态、活力良好的心肌细胞。     

大鼠肾小球系膜细胞体外培养及鉴定的实验研究

目的:探索一种重复性好、传代次数多的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)体外培养和鉴定的方法.方法:麻醉状态、无菌条件下取得大鼠的肾脏,用3种不同目数的不锈钢筛网提取肾小球,搜集到的肾小球分别加入2.5 g/L、0.5异/LⅣ型胶原酶及2 g/L Ⅱ型胶原酶各5 mL,分别在37 ℃水浴箱中振荡消化20 min、30 min、25min,然后接种肾小球,比较不同培养条件下肾小球系膜细胞的生长状况.结果:Ⅱ型、Ⅳ型胶原酶3种不同浓度作用不同的消化时间,细胞的生长速度及生长状况不同,Ⅳ型胶原酶(2.5 g/L)消化20 min的为最佳.结论:培养的细胞为肾小球系膜细胞,用Ⅳ型胶原酶(2.5 g/L)消化20 min的肾小球系膜细胞生长状态最佳.     

制备条件对白蛋白纳米粒表征的影响

目的 通过进行白蛋白纳米载体制备工艺的研究,考察固化温度、固化时间、搅拌速度对纳米粒制备的影响,确定白蛋白纳米粒制备的优化条件.方法 在其他制备条件固定的情况下,分别采用不同的固化温度、固化时间、搅拌速度.比较不同条件下制备的纳米粒的形态和粒径.结果 ①搅拌速度2 000 r/min时的粒径分布范围明显小于500、1 000、1 500和2 500 r/min时的范围;②固化温度120℃时的粒径分布范围明显小于60、80和100℃时的范围;③固化时间时粒径分布的影响较小.结论 白蛋白纳米粒制备的优化条件为:搅拌速度2000 r/min、固化温度120℃、固化时间20min.     

影响E活性花环试验因素的探讨

本文对Ea-RFC试验有关实验条件影响因素进行了实验,实验结果表明:无钙镁Hanks液适宜的pH为7.2～7.6。用0.78％NH_4Cl溶液去除淋巴细胞悬液中红细胞优于其它方法。离心速度以500r/min 5min最佳。绵羊红细胞与淋巴细胞比例为15:1～20:1。绵羊红细胞因个体有差异,同一实验室应固定绵羊个体。试验中加入羊、牛、兔、人(AB型)血清可以增加Ea-RFC的形成率。不同种血清结果一致,因而可以任意选择血清品种。     

大鼠成肌细胞体外培养及其自发收缩特性

目的: 体外培养大鼠成肌细胞,并详细描述成肌细胞的体外培养的自主收缩特性. 方法: 采用1 g/L胶原酶消化法分离细胞及非连续密度梯度离心法(Percoll分离液)分离纯化细胞,在收缩的细胞中加入异丙肾上腺素(isoproterenol, IP)使终浓度为0.1 μmol/L. 结果: 成肌细胞融合后2～3 d可发生自发收缩,大部分频率约50～160/min,最快的可达200/min. 加入IP后细胞收缩频率平均增加约18.4/min. 结论: 成肌细胞具有自发收缩特性,且IP对其存在正性变时作用,心脏内移植具有良好的前景.     

改良的小鼠原代肝细胞分离纯化方法

目的:建立一种简便、经济、高效的小鼠肝细胞分离和纯化方法。方法:对传统的两步原位胶原酶灌流法进行改进,缩短消化时间和改变灌注方式;分离的小鼠肝细胞,采用低速离心(300 r/min,1min,3～5次)纯化,台盼兰染色检测活率,糖原染色鉴定肝细胞,并与单密度梯度离心纯化法进行比较。结果:原代肝细胞经低速离心纯化后,活率达到90%左右,纯度达95%以上,与密度梯度离心法效果相近。结论:建立了一种新的小鼠原代肝细胞的分离纯化方法。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

十二指肠损伤的治疗体会

目的：提高十二指肠损伤的诊治水平，方法：回顾总结该院1999年－2001年间收治的十二指肠损伤7例临床经验。结果：合并其他腹部脏器损伤86％（6／7），单纯十二指肠损伤14％（1／7）。损伤部位以十二指肠降部为多占71％（5／7），水平部和球部各占14％（1／7），术后并发症发生率28％（2／7）、病死率14％（1／7）。结论：掌握十二指肠损伤的特点，早诊断、早手术、术中认真探查，掌握好检查指征，选择合理恰当术式，加强术后管理，可提高治愈率。     

断指再植的护理体会

随着医疗水平的提高,显微手外科技术在各基层医院已得到广泛开展,所收治的此类患者在逐年增加.随机统计了近两年我院20份34指的病例,通过观察认为手术的成功与否不但取决于损伤的局部条件、术中的操作和术后的治疗,同时与术前、术后的护理也密不可分.对离断指及伤口的妥善处理,积极的术前准备和术后的精心护理,特别是术后对血运的密切观察,同时通过术前术后的健康教育使患者对该疾病的知识有了一定的掌握,认识了康复训练的重要性从而使功能达到最大限度的恢复.     

法乐氏四联症的外科治疗34例分析

目的：总结法乐氏四联症外科治疗经验。方法：共34例，年龄2～16岁，32例在中低温体外循环、胸部正中切口行法乐氏四联症根治术，1例在非体外循环下行改良B-T分流术，1例行根治术同时行双向Glenn分流术。结果：术后早期死亡1例，死亡原因为低心排综合征，无远期死亡。结论：本症应争取早日行根治术，肺动脉发育差者应行改良B-T分流术，右室发育不良者在行根治术同时行双向Glenn分流术，死亡原因以低心排综合征多见，应采取合适的手术方式及围术期多种方法预防。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。