黄芪、当归多糖促生细胞因子作用研究综述

目的对黄芪、当归多糖促生细胞因子的作用进行综述,为临床应用、中药开发提供理论基础。方法查阅近几年文献,从免疫调节、抑制肿瘤、调节造血细胞、促进细胞因子基因表达方面,总结黄芪、当归多糖促生不同细胞因子的作用。结果黄芪、当归多糖能通过促生不同细胞因子,进行免疫调节、抑制肿瘤、调节造血细胞、促进细胞因子基因表达。结论黄芪、当归多糖促生细胞因子的作用显著。     

系统性红斑狼疮患者Th1／Th2相关转录因子的基因表达

目的：探讨转录因子对T细胞分化的影响及它们和细胞因子在系统性红斑狼疮（SEE）发病机制中的作用。方法：利用实时荧光定量PCR技术检测SLE患者、正常人外周血单核细胞（PBMC）中T—bet和GATA-3 mRNA表达状况;用ELISA检测SLE患者、正常人血清中IL-10和TGF-β水平。结果：SLE患者T—bet mRNA表达低于正常人,差异具有显著性（P〈0．05）;SLE患者GATA-3mRNA表达明显高于正常人,具有统计学差异（P〈0．05）。SLE患者IL-10明显高于正常人,差异具有统计学意义（P〈0．05）;SLE患者TGF-8与正常人差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：SLE患者Th1／Th2免疫不平衡占优势,调节Th1细胞的转录因子T—bet表达降低。调节Th2细胞的转录因子GATA-3表达升高,细胞因子IL-10水平升高,TGF—β没有明显变化。     

哮喘患儿转录因子T-bet/GATA-3 mRNA比值及其与Th1/Th2平衡间的关系

【目的】研究转录因子T-bet/GATA-3在小儿哮喘发病以及Th1/Th2失衡中的作用。【方法】本实验拟通过半定量RT-PCR检测部分哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）中T-bet、GATA-3 mRNA表达情况,同时采用三色荧光流式细胞仪检测哮喘患儿的Th1、Th2细胞数量,并对T-bet、GATA-3 mRNA表达水平与Th1、Th2细胞比率进行相关分析,了解T-bet/GATA-3对哮喘患儿的Th细胞分化的调节作用。【结果】哮喘患儿外周血淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于正常对照组,其中哮喘发作组显著低于缓解组（P〈0.05）;转录因子GATA-3 mRNA表达水平显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组（P〈0.05）。哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群Th1百分率显著低于正常对照组,其中哮喘发作组又显著低于缓解组（P〈0.05）;Th2细胞百分率显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组（P〈0.05）。哮喘患儿T-bet mRNA表达量与Th1细胞比率呈正相关（r=0.731）,与Th2细胞比率呈负相关（r=-0.685）;GATA-3 mRNA表达量与Th1细胞比率呈负相关（r=-0.692）,与Th2细胞比率呈正相关（r=0.717）;T-bet/GATA-3 mRNA比值与Th1细胞比率呈正相关（r=0.793）,与Th2细胞比率呈负相关（r=-0.639）,与Th1/Th2比值呈正相关（r=0.801）。【结论】哮喘患儿T-bet/GATA-3 mRNA表达水平失调,与哮喘患儿Th1/Th2失衡密切相关,可作为衡量Th1/Th2平衡的新指标。     

哮喘患者PBMC中Th1/Th2类细胞因子m-RNA的表达

为观察哮喘患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中Ｔ辅助细胞两个亚群的功能状态,采用ＲＴ－ＰＣＲ技术,以ＩＬ－２ 和ＩＦＮ－γ代表Ｔｈ１ 类细胞因子,ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０ 代表Ｔｈ２ 类细胞因子,检测了１６ 例哮喘患者和１０ 例健康志愿者ＰＢＭＣ中上述各种因子ｍ －ＲＮＡ的表达。结果表明,哮喘患者ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０的ｍ －ＲＮＡ 阳性表达数分别为１３／１６、１３／１６ 和６／１６,ＩＬ－２ 和ＩＦＮ－γ的ｍ －ＲＮＡ阳性表达数分别为１２／１６ 和０／１６,而健康志愿者ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０ ｍ －ＲＮＡ 阳性表达数分别为０／１０、２／１０ 和１／１０,ＩＬ－２ 和ＩＦＮ－γ的ｍ －ＲＮＡ 阳性表达数均为１／１０。与健康对照相比,哮喘患者ＰＢＭＣ中的Ｔｈ２ 类细胞因子阳性表达率显著增高,若以ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４ 来衡量哮喘患者ＰＢＭＣ中Ｔｈ１／Ｔｈ２ 之间的平衡,其细胞因子的表达呈现Ｔｈ２ 方向的偏移状态。Ｔｈ２ 类细胞因子的强势表达在哮喘的气道炎症过程中可能具有重要意义     

咳嗽变异性哮喘患者Th1/Th2相关上游转录因子及细胞因子的表达

0.57±0.06),较对照组的(0.45±0.03)增高(t=7.018,P<0.01);病例组与对照组比较,INFγ/IL-4及T-bet/GATA-3比值均降低(t分别为-2.208,-3.170,P均<0.05).结论:CVA患者体内存在Th1/Th2平衡的紊乱,且以Th2亚群亢进为主.     

T-bet对Th1/Th2分化调节作用与恶性肿瘤的关系

T-bet是T-box基因家族的新型转录因子,选择性地表达于Th1细胞,能诱导干扰素γ的产生,在Th1细胞的分化中起决定性的作用。在生理条件下,机体Th1和Th2细胞的免疫功能处于动态平衡态,这种平衡的偏离,对肿瘤发生、发展有重要的影响。现已发现,肿瘤宿主体内Th1/Th2向Th2漂移,Th2优势状态与肿瘤的免疫逃逸密切相关。研究表明,将T-bet基因导入肿瘤细胞,可将Th2细胞逆转为Th1细胞,这将对肿瘤的免疫治疗具有重要的意义。     

儿童斑秃Th1/Th2型细胞因子关系的临床研究

目的:探讨Th1/Th2细胞因子平衡失调在斑秃发病中的作用,以及Th1型细胞功能与斑秃发病的关系.方法:对45例斑秃患儿按其严重程度分为局限性斑秃(Localizef aiopecia areata patients,LAA)活动期组35例,全秃(Alopecia totalis patients,AT)及普秃(Alopecia universalis patients,AU)为一组10例,并以25例健康儿童为正常对照组作为研究对象.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测在卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)治疗前后3个月血清中IFN-γ、IL-12及IL-4、IL-10水平.结果:①斑秃患儿存在Th1/Th2细胞因子平衡紊乱,表现为血清中IFN-γ均明显高于正常组儿童,且AT/AU组明显高于LAA组;IL-12水平在LAA组与正常组儿童无显著差别,但AT/AU组明显高于正常对照组;而IL-4、IL-10水平在LAA组及AT/AU组与正常对照组相比均无显著性差异.②BCG-PSN治疗后可使斑秃患儿血清中IFN-γ水平较治疗前明显下降,同时IL-12水平在LAA组较治疗前也明显下降,但AT/AU组治疗前后无显著差别.而IL-4、IL-10水平治疗前后均无显著性差异.③血清中IFN-γ与IL-12水平成显著正相关.结论:①斑秃的发病与Th1/Th2细胞因子平衡失调有关,表现为Th1型细胞反应亢进,其中可能主要与IFN-γ、IL-12水平有关.②血清IFN-γ、IL-12水平高低可以作为提示斑秃病情严重性的指标.     

哮喘患儿转录因子T-bet/GATA-3 mRNA比值及其与Th1/Th2平衡间的关系

 【目的】 研究转录因子T-bet/GATA-3在小儿哮喘发病以及Th1/Th2失衡中的作用。【方法】 本实验拟通过半定量RT-PCR检测部分哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）中T-bet、GATA-3 mRNA表达情况，同时采用三色荧光流式细胞仪检测哮喘患儿的Th1、Th2细胞数量，并对T-bet、GATA-3 mRNA表达水平与Th1、Th2细胞比率进行相关分析，了解T-bet/GATA-3对哮喘患儿的Th细胞分化的调节作用。【结果】 哮喘患儿外周血淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于正常对照组，其中哮喘发作组显著低于缓解组（P<0．05）；转录因子GATA-3 mRNA表达水平显著高于正常对照组，哮喘发作组又显著高于缓解组（P<0．05）。哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群Th1百分率显著低于正常对照组，其中哮喘发作组又显著低于缓解组（P<0．05）； Th2细胞百分率显著高于正常对照组，哮喘发作组又显著高于缓解组（P<0．05）。哮喘患儿T-bet mRNA表达量与Th1细胞比率呈正相关（r＝0．731），与Th2细胞比率呈负相关（r＝-0．685）；GATA-3 mRNA表达量与Th1细胞比率呈负相关（r＝-0．692），与Th2细胞比率呈正相关（r＝0．717）；T-bet/GATA-3 mRNA比值与Th1细胞比率呈正相关（r＝0．793），与Th2细胞比率呈负相关（r＝-0．639），与Th1/Th2比值呈正相关（r＝0．801）。【结论】 哮喘患儿T-bet/GATA-3 mRNA表达水平失调，与哮喘患儿Th1/Th2失衡密切相关，可作为衡量Th1/Th2平衡的新指标。     

黄芪多糖和黄芪总甙调控LX-2细胞因子分泌

目的:用黄芪多糖和黄芪总甙对LX-2细胞分泌的与纤维化相关的主要细胞因子进行研究,以探讨黄芪抗纤维化的确切分子机制。方法:不同浓度的黄芪多糖和黄芪甙作用于LX-2细胞,以Real Time Cell Electronics Sensing技术实时检测细胞增殖状态;分别再以25μg/ml和300μg/ml的黄芪多糖和黄芪总甙作用LX-2细胞24 h,提取细胞mRNA,以荧光定量PCR测定转化生长因子1(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)、基质金属蛋白酶2(MMP2)及基质金属蛋白酶9(MMP9)mRNA的变化。结果:300μg/ml的黄芪多糖可抑制LX-2的增殖(P<0.05,94.7 h),但不同浓度的黄芪总甙对LX-2细胞均有促进增殖的作用(P<0.05);25μg/ml的黄芪多糖和黄芪总甙在TGF-β1促进分泌的同时,也上调其它抗纤维化因子,其中黄芪多糖对MMP2的上调(104.9倍)、黄芪总甙对IL-10的上调(550.65倍)最为显著;300μg/ml的黄芪多糖可抑制TGF-β1及HGF、MMP9、IL-10的表达,但仍然上调MMP2的表达,300μg/ml的黄芪总甙也可抑制TGF-β1的表达,但对抗纤维化因子MMP2、MMP9及IL-10仍有明显的上调作用。结论:低浓度(25μg/ml)和高浓度(300μg/ml)的黄芪多糖和黄芪总甙可通过不同的分子机制调控肝星状细胞因子的分泌而发挥抗纤维化作用;黄芪多糖主要以促进MMP2分泌为主,而黄芪总甙则主要通过上调MMP2、MMP9及IL-10的分泌而发挥作用。高剂量的黄芪多糖和总甙抗纤维化效果优于低剂量组。     

结核患者外周血PBMC中T-bet和Eomes表达的检测

目的初步探讨T-bet和Eomes的表达与结核病发生的关系。方法分析比较结核患者(TB)与健康对照(HC)、结核菌潜伏感染者(LTBI)以及细菌性肺炎患者(PN)外周血PBMC中T-bet和Eomes的m RNA表达水平,并观察结核患者在抗结核治疗前及抗结核治疗3、6、9和12个月后,外周血PBMC中T-bet和Eomes的m RNA表达水平的变化。结果结核患者(TB)外周血PBMC中T-bet和Eomes的m RNA表达水平显著低于健康对照(HC)、结核菌潜伏感染者(LTBI)以及细菌性肺炎患者(PN)(P0.05)。同时,在抗结核治疗12个月后,T-bet的表达水平较治疗前显著升高(P0.05),Eomes的表达水平较治疗前升高,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 T-bet和Eomes两个基因表达水平的下降可能与结核病的发生有关。     

黄芪多糖对大鼠胰岛素敏感性和脂肪细胞因子的影响

目的观察黄芪多糖对高脂饮食诱导的大鼠胰岛素敏感性和脂肪细胞因子的影响。方法将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=12)和高脂模型组(n=36),分别给予普通饲料和高脂饲料。模型建立成功后,高脂模型组随机分为高脂对照组、盐酸吡格列酮组和黄芪多糖组,每组12只。分别给予生理盐水、盐酸吡格列酮20mg.kg-1.d-1和黄芪多糖400mg.kg-1.d-1,干预8周。随机选取各组中的一半大鼠进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,测定稳态期葡萄糖输注率(GIR)。同时测定另一半大鼠空腹胰岛素(FINS)、血脂、白细胞介素6(IL-6)、瘦素、抵抗素、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、脂联素(APN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及游离脂肪酸(FFA)水平。结果与正常对照组比较,高脂对照组GIR降低(P<0.01);与高脂对照组比较,盐酸吡格列酮组和黄芪多糖组GIR升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与正常对照组比较,高脂对照组FINS、FFA、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、IL-6、瘦素、抵抗素、hs-CRP及TNF-α升高,高密度脂蛋白(HDL)、APN降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。与高脂对照组比较,盐酸吡格列酮组和黄芪多糖组的FINS、FFA、TC、TG、LDL、IL-6、瘦素、抵抗素、TNF-α降低,APN升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪多糖可以提高大鼠胰岛素敏感性,改善其胰岛素抵抗,其机制可能与其调节血脂水平和脂肪细胞因子水平有关。     

黄芪多糖对NOD鼠胰岛细胞因子基因表达的影响

目的　探讨黄芪多糖 (APS)以NOD小鼠 1型糖尿病免疫干预的分子机制。方法　应用RT CPR技术分别检测APS处理组和对照组NOD小鼠所有胰腺组织内 15条细胞因子mRNA的表达水平。结果　与对照组相比 ,APS组IL 1β、IL 2、IL 6、IL 12、TNF α、INF γ、Fas、iNOS的mRNA表达水平明显下调 ,IL 4、IL 5、IL 10、TGF β、Bcl 2、SOD的mRNA表达水平明显上调。结论　APS能纠正NOD小鼠Th1/Th2型细胞 /细胞因子的免疫失衡状态 ,预防或延缓 1型糖尿病的发生     

转录因子T-bet,GATA-3对食管癌患者免疫状态的影响

目的:研究食管癌患者转录因子T-bet,GATA-3的基因表达及其对患者免疫状态的影响。方法:根据其CT分期将40例食管癌患者分为两组:一组为第Ⅰ,Ⅱ期患者,另一组为第Ⅲ,Ⅳ期患者;荧光定量PCR技术检测40例食管癌患者及20例健康对照者外周血单核细胞T-bet,GATA-3 mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中辅助性T细胞1型(Th1)细胞因子IFN-γ及辅助性T细胞2型(Th2)细胞因子IL-4。结果:食管癌组较对照组T-bet mRNA表达明显降低,GATA-3 mRNA表达明显升高,IFN-γ表达明显降低,IL-4表达明显升高,不同期别食管癌组间差异不显著。T-bet,GATA-3分别与IFN-γ,IL-4呈正相关。结论:食管癌患者Th1型细胞因子表达降低,Th2型细胞因子表达升高,即Th1/Th2平衡被打破,发生了向Th2方向的漂移,免疫功能受损;这种改变受到转录因子T-bet,GATA-3的调控,T-bet表达的减少在这种调控中可能起着关键的作用。     

小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的克隆和序列分析

目的：克隆小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的全长编码区cDNA。方法：利用RT-PCR方法,从Balb／c小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,并将其连接到pGEM-T载体上,进行测序和核酸分析。结果：扩增得到的小鼠T-bet基因cDNA全长1592bp,编码530个氨基酸,包含一个189个氨基酸残基组成的能与T盒DNA结合的结构域;blast结果分析表明,该cDNA与Genbank中发表的序列具有99．8％的同源性。结论：获得小鼠T-bet基因的克隆,为进一步研究转基因免疫干预奠定了基础。     

燮痹方对佐剂大鼠Th1/Th2型细胞因子的调节作用

目的 :探讨燮痹方抑制大鼠佐剂性关节炎与调节Th1/Th2型细胞因子平衡作用。方法 :采用具有平调寒热、燮理阴阳、通经除痹作用的燮痹方 ,以火把花根为阳性对照组 ;建立AA大鼠模型 ,随机分为燮痹方高剂量组、燮痹方低剂量组、芬必得组、火把花根片组、模型组、正常组 6组 ,观察各组对大鼠关节肿胀度和Th1/Th2型细胞因子及IL 1β、IL 2、TNF α的影响。结果 :燮痹方各组与模型组、火把花根片组、芬必得组相比 ,能显著减轻关节肿胀度 ,明显降低IL 1β、TNF α ,尤其能明显降低IFN γ/与IL 4比值。结论 :燮痹方能提高抗炎作用 ,并与调节Th1/Th2型细胞因子失衡有关。     

黄芪对慢性乙型肝炎患者外周血Th1/Th2功能平衡的影响

目的探讨黄芪对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血Th1/Th2功能平衡的影响。方法CHB患者和健康人的外周血单个核细胞体外经黄芪作用,培养48h后,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测培养上清中Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)的含量变化。结果在黄芪诱导下:①健康对照组和CHB患者组Th1类细胞因子明显增高(P<0.01),Th2类细胞因子水平无明显变化(P>0.05);②CHB患者组IFN-γ水平明显高于健康对照组(P<0.01),IL-2水平两组比较差异无统计学意义(P>0.05);③Th2类细胞因子水平CHB患者组比健康对照组高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论黄芪可明显提高CHB患者Th1类细胞因子(IFN-γ、IL-2)的产生水平,改善CHB患者Th1/Th2功能失衡状态,可使CHB患者Th2优势应答状态部分得到纠正。     

哮喘患者是PBMC中Th1／Th2类细胞因子m—RNA的表达

为观察哮喘患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中Ｔ辅助上亚群的功能状态,采用ＲＴＰＣＲ技术,以ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ代表Ｔｈ１类细胞因子,ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０代表Ｔｈ２类细胞因子,检测了１６例哮喘患者和１０列健康志原者ＰＢＭＣ中上述各种因子ｍ－ＲＮＡ的表达。结果表明,哮喘患者ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０的ｍ－ＲＮＡ阳性表达数分别为１３／１６、１３／１６和６／１６,ＩＬ－２和ＩＮＦ－γ的ｍ－Ｒ     

黄芪调节哮喘失衡表达转录因子T-bet/GATA-3的研究

目的:观察T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘中失衡表达,探讨黄芪对其调节作用?方法:50只雄性SPF级SD大鼠随机分为对照组(C组)?哮喘组(A组)?黄芪低(H1组)?中(H2组)?高(H3组)剂量组,20只雄性SPF级致敏SD大鼠脾脏中分离获得CD4+T细胞,分为对照组(C组),OVA干预组(A组),黄芪干预组低(H1组)?中(H2组)?高(H3组)?HE染色观察气道病理改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞因子(IL)-4,5和IFN-γ含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定法检测T-bet和GATA-3 mRNA表达;免疫印迹(Western blot)法检测T-bet和GATA-3蛋白表达?结果:在大鼠肺组织中嗜酸粒细胞(EOS)?淋巴细胞?管壁面积/支气管管腔内周长(WA/Pi)和支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/Pi)A组比C组明显增多或增厚(P均< 0.01),H1?H2?H3组中不同程度的减少或减轻(P > 0.05);血清中IL-4和IL-5含量A组高于C组(P均< 0.01),H1?H2?H3组剂量组均低于A组(P均< 0.01),血清中IFN-γ含量A组远低于C组(P均< 0.01),H1?H2?H3组明显高于A组(P均< 0.01),CD4+T细胞培养上清液中H1?H2?H3组IL-4和IL-5含量均降低,同时增加IFN-γ含量,与A组比较,差异均有统计学意义(P均< 0.01);肺组织和CD4+T细胞中T-bet mRNA和蛋白表达H1?H2?H3组高于A组(P均< 0.01);而GATA-3mRNA和蛋白表达H1?H2?H3组低于A组(P均< 0.01)?结论:T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在哮喘中失衡表达,黄芪抑制哮喘气道炎症可能通过双向调节T-bet和GATA-3平衡来实现     

口腔扁平苔藓患者外周血Th1/Th2型细胞因子表达及意义

目的：了解口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）患者外周血中 Th1、Th2 型细胞因子表达水平,探讨 Th1/Th2 平衡在 OLP 发病中的作用及意义。方法：采用流式细胞术（cytometric bead array,CBA）检测 51例 OLP 患者（网纹型 23 例,充血糜烂型 28 例）Th1 型细胞因子（TNF-α、 IFN-γ、IL-2）及 Th2 型细胞因子（IL-4、IL-6、IL-10）表达水平,并分析其与 OLP 临床特征相关性。结果：①OLP 患者血清中 Th2 型细胞因子的IL-6 与 IL-10 的表达水平明显高于正常对照组（P＜0.05）,但 Th1 型细胞因子 TNF-α、IFN-γ、IL-2 及 Th2 型细胞因子 IL-4 表达水平与正常组差异无统计学意义（P ＞0.05）;②Th2 型细胞因子 IL-6 的表达水平与 OLP 临床类型、临床体征、临床症状均成正相关,IL-10 的表达水平与 OLP 临床类型、临床体征均成正相关（相关系数0.285～0.364;P＜0.05）。结论：OLP 患者外周血中 Th1 型细胞因子的表达水平与正常对照组Th1 型细胞因子表达水平差异无明显改变,而Th2 型细胞因子升高,表现为 Th2 占优势的免疫应答;Th2 型细胞因子 IL-6、IL-10 表达与 OLP 患者病情严重程度呈正相关,对OLP 免疫治疗有一定指导意义。