蝮蛇毒硷性纤溶酶的性质研究

用 DEAE—纤维素(DE_(52))柱层析从蝮蛇A.b.brevicaudus 毒中分离得到至少10个具有酪蛋白水解活性的峰,其中8个显示纤维活性。将硷性纤维酶进一步用磷酸纤维素柱层析及SephadexG—75柱层析提纯,经 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,显示一条区带。硷性纤溶酶     

人血清HDL载脂蛋白A—I的分离纯化

用序列超速离心法从血清中分离高密度脂蛋白(HDL),经0.5％琼脂糖凝胶电泳显示为一条区带。HDL载脂蛋白(apoHDL)先经Sephadex G—200凝胶过滤柱层析,取峰Ⅱ中部洗脱液,再通过DE—52离子交换柱层析分离出载脂蛋白A—Ⅰ(apoA—Ⅰ),用0.1％SDS—PAGE证实为单一区带,分子量为28000道尔顿。     

蝮蛇蛇毒类纤溶酶的分离纯化及一些特性的研究

蝮蛇(Agkistrodon haly palls)蛇毒先用Sephadex G-100柱层析分离出有纤溶活性的第2、3峰,再用DEAE-Sephadex A-50分离有纤溶活性的第14峰,经PAA圆盘电泳仍有多条区带.该组分用高效液相配用Mono-Q阴离子交换柱层析二次纯化,得有纤溶活性的第2峰,PAA圆盘电泳为第二条紧靠的区带,SDS/PAGE测得该纤溶组分分子量为21000±1000;pI为3.9±0.05,对酪蛋白有一定水解能力,EDTA能降低酶活性,氨基酸组成分析为酸性氨基酸居多的蛋白质.     

车前草超氧化物歧化酶的分离纯化及种类鉴定

目的从车前草中分离纯化超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)。方法采用40%乙醇作为提取液,经过丙酮沉淀,CM-Sepharose Fast Flow和Sephadex G-75柱层析,收集活性峰,冷冻干燥后即得。结果纯化的SOD经SDS-PAGE显示单一条带,亚基分子量为20.1 KDa;抑制试验显示为Fe-SOD。结论通过两步柱层析从新鲜车前草提取液中纯化得到Fe-SOD,其亚基分子量、颜色、紫外吸收与文献报道相近。     

孕妇血清中早孕因子的纯化及其部分特性研究

采用DEAE纤维素(Whatman产)柱层析Sephadex G-100凝胶过滤、聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳(Disc-PAGE)、SDS-聚丙烯酰胺凝胶平板电泳(SDS-PAGE)对50例妊娠3～8周妇女混合血清中早孕因子(EPF)进行纯化提取及部分特性研究,并采用花结抑制试验(Ea-RIT)检测EPF活性,结果表明:(1)EPF存在于早孕妇女血清中;(2)早孕血清中EPF的活性形式主要为21.2KD、26.3KD的蛋白多肽;(3)EPF有明显的免疫抑制活性。     

流感病毒血凝素和神经氨酸酶的分离提纯

用甲醛化鸡红细胞吸附释放及葡聚糖G150柱层析,继之以高速离心沉淀制备纯化甲型流感病毒,纯度达3×10~5HAu/毫克蛋白。再经1～2％脱氧胆酸钠于37℃裂解后,用葡聚糖G150及DEAE纤维素(Cl-型)柱层析,经NaCl梯度洗脱,HA及NA分别洗脱于二个洗脱峰。圆盘电泳的结果表明,纯制的HA和NA在聚丙烯酰胺凝胶上于病毒的HA和NA各呈现单一的区带。     

猪眼晶体钙结合蛋白的分离、纯化及其性质的研究

用疏水性苯基琼脂糖、Sephacryl S—200和DEAE纤维素柱层析从猪眼晶体中提纯了五种钙结合蛋白(CaBP)。DEAE纤维素柱采用了两种不同梯度的洗脱体系。纯化的CaBP的分子量子别为11,000、12,000、18,000、72,000和87,000,故分别称之为CaBP_(11)、CaBP_(12)、CaM、CaBP_(72)和CaBP_(87)。在SDS—PAGE中,除CaBP_(72)显示出三条不同区带外,其他均为单一区带。晶体CaM对环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)的刺激作用与牛脑和猪脑CaM相同。CaBP_(11);CaBP_(12)对CaBP_(72)抗体的交叉反应率小于0.1％,但CaBP_(11)和CaBP_(12)的混合物与CaBP_(72)抗体的交叉反应率明显增加。晶体CaM可与兔抗猪脑CaM抗体1:1结合。     

沙蚕纤溶酶的一种纯化方法

目的 从双齿围沙蚕体内提取并纯化一种新的纤溶酶。方法 应用硫酸铵沉淀、透析、凝胶柱层析（Sephadex G-100）以及电泳等生化手段对沙蚕纤溶酶进行分离纯化。用平板法测定它降解纤维蛋白的活性。结果 得到纯的沙蚕纤溶酶,测出其等电点为4．5左右,由两条边组成,其相对分子量分别为33000u和14400u。结论 该酶为首次从沙蚕中发现的一种新的纤溶酶。     

广西产圆斑蝰蛇毒神经生长因子的分离纯化及鉴定

目的 从蝰蛇蛇毒中分离纯化神经生长因子(NGF)。方法 粗毒采用CM52阳离子交换柱层析，DEAE Sephadex A-50阴离子交换柱层析及Sephadex G-75凝胶过滤进行分离纯化。洗脱峰利用PCI2细胞测定活性，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)，聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦圆盘电泳(EFG)等方法，进行理化性质的鉴定。结果 从粗毒6．0g中得到电泳纯的神经生长因子3．64mg，分子量为36kD，由两个亚基通过二硫键交联组成二体结构。等电点pI为6．7，在0．5～5．0μg／mL时，对PCI2细胞有良好的促进分化作用。结论 本法可从广西产圆斑蝰蛇毒粗毒中得到电泳纯的神经生长因子。     

鸭血清脂蛋白的研究Ⅵ.鸭HDL-apo CⅡ的分离纯化及鉴定

鸭血清HDL用DS和CaCl_2沉淀浓缩,再经角头密度梯度超速离心纯化。纯化的HDL经低温下脱脂得到apo HDL。然后经过Sephadex G-200柱层析和DEAE-纤维素离子交换柱层析得到apo CⅡ。后者经PAGE和SDS-PAGE鉴定为纯品。所获HDL-apo CⅡ可有效地激活LPL酶。     

海马提取物的药理实验研究

对海马水提取物（ＷＥＨ）和乙醇提取物（ＥＥＨ）中氨基酸和微量元素含量进行了分析比较，测得两提取物中含有多种氨基酸和Ｆｅ，Ｚｎ，Ｃｕ，Ｍｎ等元素。两提取物（５００，１０００ｍｇ／ｋｇ，ｉｐ）能增加正常小鼠和免疫受抑小鼠脾重，提高碳粒廓清率和吞噬指数，提高外周血液淋巴细胞ＡＮＡＥ阳性百分率，促进血清溶血素抗体的生成。体外实验可提高小鼠脾淋巴细胞增殖，其量效关系呈双向变化。结果表明，海马提取物具有促进小鼠免疫功能的作用。此外两提取物（５００，１０００ｍｇ／ｋｇ，ｉｇ）对小鼠血清ＭＤＡ含量和游泳持续时间无明显影响。     

羊蹄角提取物对心脏的影响

羊蹄角总提取物和组份Ⅰ对离体蛙心和豚鼠在体衰竭心脏有兴奋作用;对离体蛙心的兴奋作用在一定范围内随剂量的增加而增强。这两种提取物都不能使豚鼠在体衰竭心脏的收缩幅度恢复至正常水平。组份Ⅱ对离体蛙心和豚鼠在体心脏有抑制作用,对离体蛙心的抑制作用随剂量的增加而增强,剂量增加至一定限度后,可导致心跳停止或各种类型的心律失常。     

犬脑缺血模型的建立及动脉内溶栓的研究

目的 建立犬脑缺血模型,通过比较溶栓前后数字减影成像(digital subtraction angiography,DSA)和磁共振(magnetic resonance,MR)弥散成像及灌注成像来探讨应用尿激酶动脉内溶栓治疗超早期脑缺血的疗效,进一步探讨MR弥散及灌注成像的潜在应用价值.方法 对24只家犬通过股动脉插管将自体凝血块导入大脑中动脉制作成脑栓塞模型,随机分为两组,治疗组15只早期应用尿激酶进行动脉内溶栓治疗,对照组9只使用生理盐水,溶栓前后不同时间进行DSA、弥散成像(diffusion-weighted imaging,DWI)、灌注成像(perfusion-weighted imaging,PWI)、磁共振血管成像(magnetic resonance angiography,MRA)检查.结果 模型建立简便,DSA及MRA能直观显示大脑中动脉闭塞及再通,溶栓前后PWI能定量显示局部脑血流量下降、动脉内溶栓改善脑缺血、恢复脑血流再灌注的程度,并且与DSA检查一致,溶栓治疗组溶栓前后比较有显著性差异(P＜0.01).DWI显示缺血区早期表现扩散系数比率(apparent diffusion coefficient ratio,ADCR)值下降,并出现异常高信号,溶栓治疗组ADCR上升时间提前,异常高信号轻微缩小或保持不变,对照组ADCR值升高明显滞后,异常高信号范围增大,与治疗组比较有明显差异.结论 早期使用尿激酶进行动脉内溶栓在犬超早期脑缺血模型中疗效肯定,能完全或部分恢复脑血管再通、减少脑梗塞面积,PWI和DWI可追踪观察治疗过程中缺血脑组织的演变过程,预测脑功能恢复.     

CT在肺动脉栓塞治疗中的作用

目的研究CT肺动脉血管造影(CTPA)复查在肺动脉栓塞治疗中的作用。方法采用16层螺旋CT对临床拟诊肺动脉栓塞的26例病人行CTPA检查,并于溶栓治疗后复查1~4次,观察肺动脉栓塞的数目及类型变化。结果 CTPA检查示,发病10 d内给予溶栓治疗病人治疗2周后,肺动脉复通率为55.8%;发病10 d以上给予溶栓治疗病人治疗2周后,肺动脉复通率为19.6%,两组比较差异有显著性(χ2=54.27,P<0.01)。溶栓、抗凝治疗1 d、2周、1个月、3个月后,肺动脉复通率分别为30.2%、46.7%、72.2%、92.6%,差异有显著意义(χ2=24.93,P<0.01)。各级支气管动脉复通率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CTPA检查是无创、快速、敏感性和特异性均较高的肺动脉栓塞的疗效评价方法。     

rt-PA溶栓治疗急性心肌梗死的效果

①目的 观察应用重组组织型纤溶酶原激活剂（ｒｔ－ＲＡ）溶栓治疗急性心肌梗死（ＡＭＩ）的效果。②方法 按溶栓药物不同将９４例ＡＭＩ病人分为２组,ｒｔ－ＰＡ组（５５例）先给负荷量ｒｔ－ＰＡ１０～１５ｍｇ,余量３５～４０ｍｇ用微量泵于３０ｍｉｎ内泵入,继以５０ｍｇ于６０ｍｉｎ内泵入,特殊情况可适当加量,尿酸氧化酶（ＵＫ）组（３９例）将ＵＫ１５０万单位于３０ｍｉｎ内泵入,肝素不作常规应用。③结果 ｒｔ－Ｐ     

羊蹄角对动物心血管的影响

清醒大白鼠ip羊蹄角碱水解提取物1g/kg,血压无明显变化;ip 2g/kg,血压降低30～45％,持续180分钟以上。麻醉犬iv羊蹄角碱水解提取物25mg/kg,血压呈双相反应,短暂升高后逐渐降低,180分钟时基本恢复正常;iv100mg/kg,可使血压明显降低,维持4小时左右逐渐恢复,此种降压作用可被去甲肾上腺素所对抗。羊蹄角和羚羊角碱水解液,水煎液对离体蟾蜍心脏均有抑制作用。羊蹄角碱水解液可使大鼠、犬的心率减慢,在心率恢复时心电R波电压升高,可能与心率减慢、血压降低,反射性引起交感神经兴奋有关。     

银杏叶提取物抑制变形链球菌粘附作用的观察

目的;探讨银杏叶提取物抑制致龋变形链球菌的粘附作用。方法：将银杏叶提取物与含细菌的培养液混合,分别装入24只试管,采用对倍稀释,稀释成4个浓度组,另设一组不含提取物的细菌培养液为阴性对照组,一组含甲硝唑的细菌培养液为阳性对照组,均放入厌氧箱37℃培养48h,然后观察抑制致龋变形链球菌的粘附作用。结果：观察到对抑制龋变形链球菌的粘附作用有效浓度为5g/L,与对照组比较,有显著性差异（P＜0．01）,结论：天然植物银杏叶提取物具有抑制致龋变形链球菌的粘附作用。     

3种溶栓药物治疗急性心肌梗死的效果比较

①目的　比较尿酸氧化酶、链激酶和基因重组组织型纤溶酶原激活剂 (r tPA) 3种药物溶栓治疗急性心肌梗死 (AMI)的效果 ,为临床合理用药提供参考。②方法　对 1 997年 1 2月～ 2 0 0 2年 1月 1 63例AMI溶栓治疗病人的临床资料进行回顾分析。将 1 63例病人分为尿酸氧化酶组、链激酶组、r tPA组 ,溶栓治疗后 ,观察血管再通率、出血率、4周病死率、梗死后心绞痛发生率。③结果　r tPA组血管再通率最高 ,达 76 .1 % ,4周病死率、梗死后心绞痛发生率最低 (χ2 =4.341～ 6 .1 89,P <0 .0 5)。④结论　r tPA应作为AMI溶栓治疗的首选药物