丁基苯酞对大鼠缺血脑组织NGF及BDNF表达的影响

目的 研究丁基苯酞对大鼠缺血脑组织中脑源性神经生长因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠,用大鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)建立永久性缺血模型,按照Zea-Longa的方法对动物的神经功能进行评分,选取1～3分的大鼠按随机数字表随机分成2组:丁基苯酞治疗组(A组),大脑中动脉永久缺血对照组(B组),每组各20只.A组于术后予以丁基苯酞,每天2次,每次25 mg/kg,B组给予相应剂量食用油灌胃给药,72 h后行神经功能评分,然后处死,分别取脑梗死周围、海马区和梗死区脑组织作免疫组化染色检测BDNF、NGF蛋白表达变化,原位杂交检测BDNF mRNA、NGF mRNA的表达.结果 丁基苯酞治疗组神经功能评分(1.35±0.81)低于对照组(1.75±0.55),差异有统计学意义(P=0.04).丁基苯酞治疗组BDNF和NGF蛋白BDNF mRNA和NGF mRNA在梗死区周围和海马区表达均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),在梗死区差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 丁基苯酞可上调大鼠梗死区周围和海马区缺血脑组织中BDNF和NGF的表达,并可能通过此机制起到保护作用.     

术后24 h给予莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠保护作用的研究

目的研究莫诺苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后24 h给药对血管新生相关因子及神经功能的影响。方法健康成年雄性SD大鼠,用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,术后随机分为假手术组,模型组,莫诺苷小(30 mg/kg)、中(90 mg/kg)、大(270 mg/kg)剂量组,术后24 h开始给予莫诺苷,每天灌胃1次,连续给药7 d。通过检测神经功能行为学评分,脑梗死体积百分比,皮层血管新生相关蛋白的表达,研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后24 h给予莫诺苷对血管新生相关蛋白及神经功能恢复的影响。结果与假手术组相比,模型组神经功能评分和脑梗死体积百分比显著增加(P0. 001),给药7 d后,莫诺苷大剂量组与模型组相比,明显降低了神经功能评分(P0. 01),且能显著降低脑梗死体积(P0. 05)。与假手术相比,皮层血管新生相关蛋白CD34和Ang-1的表达均增加(P0. 05,P0. 05)。与模型组相比,莫诺苷大剂量组皮层血管新生相关蛋白CD34和Ang-1的表达显著增加(P0. 05,P0. 01),其中莫诺苷中剂量组也能促进Ang-1的表达(P0. 05)。结论莫诺苷给药时间窗扩大至局灶性脑缺血再灌注后24 h,其大剂量组可以降低神经功能评分,减小脑梗死体积,对CD34及Ang-1血管新生相关蛋白有调节作用。     

阿替普酶溶栓后联合丹参多酚酸治疗急性脑梗死的疗效及安全性

目的探讨阿替普酶溶栓联合丹参多酚酸治疗急性脑梗死患者的临床效果及安全性。方法选择新乡市中心医院2015年1月至2017年12月收治的136例急性脑梗死患者为研究对象,将患者随机分为观察组(n=68)和对照组(n=68)。2组患者均给予对症治疗,观察组患者在对症治疗基础上给予阿替普酶50 mg静脉滴注进行溶栓,然后给予丹参多酚酸0. 13 g静脉滴注,每日1次,共治疗3周;对照组患者在对症治疗基础上仅给予阿替普酶50 mg静脉滴注进行溶栓。分别于治疗前后评估患者的凝血功能、神经元损伤情况、神经功能及脑梗死体积;比较2组患者的临床疗效及不良反应发生情况。结果观察组和对照组患者总有效率分别为83. 8%(57/68)、64. 7%(44/68),观察组患者总有效率显著高于对照组(χ2=7. 342,P <0. 05)。治疗前2组患者凝血酶时间、活化凝血酶时间及血浆纤维蛋白原水平比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。2组患者治疗后凝血酶时间、活化凝血酶时间及血浆纤维蛋白原水平均低于治疗前(P <0. 05),治疗后观察组患者血浆纤维蛋白原水平显著低于对照组(P <0. 05),治疗后2组患者凝血酶时间、活化凝血酶时间比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。治疗前2组患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及血浆内皮素(ET)水平比较差异无统计学意义(P> 0. 05);治疗后2组患者血清NSE、血浆ET水平低于治疗前,血清SOD水平高于治疗前(P <0. 05);治疗后,观察组患者血清NSE、血浆ET水平显著低于对照组,血清SOD水平显著高于对照组(P <0. 05)。治疗前2组患者的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及脑梗死体积比较差异无统计学意义(P> 0. 05),治疗后2组患者NIHSS评分及脑梗死体积均低于治疗前(P <0. 05);治疗后,观察组患者NIHSS评分和脑梗死体积均显著低于对照组(P <0. 05)。观察组和对照组患者不良反应发生率分别为5. 9%(4/68)、8. 8%(6/68),2组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(χ2=5. 487,P> 0. 05)。结论阿替普酶溶栓联合丹参多酚酸治疗急性脑梗死临床疗效显著,在改善患者凝血功能、修复神经元损伤及减少脑梗死体积方面优于单用阿替普酶治疗。     

急性脑梗死与血浆脂蛋白相关磷脂酶A2的相关性研究

目的研究血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)水平与脑梗死患者患者神经功能缺损程度和脑梗死体积之间的关系。方法选用2012年1月~2014年4月我院收治的急性脑梗死患者108例作为研究组和97例体检健康者作为对照组,使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中Lp-PLA2的浓度。计算脑梗死体积和对神经功能缺损程度评估。结果脑梗死体积与血浆中Lp-PLA2浓度呈正相关,差异具有统计学意义(P0.05);Lp-PLA2与神经功能缺损程度呈正相关,差异具有统计学意义(P0.05);急性脑梗死组血浆Lp-PLA2明显高于健康组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论血浆Lp-PLA2浓度身高与神经功能缺损程度以及脑梗死体积有关。     

脑动脉硬化与脑梗死病人认知电位P300的检测

①目的　观察脑动脉硬化 (CAS)及脑梗死病人认知电位P30 0变化特点及意义。②方法　对CAS组、脑梗死 <2周组 (A组 )、脑梗死 6月～ 4年组 (B组 )、对照组认知电位P30 0进行检测。③结果　CAS组、A组、B组与对照组相比P30 0潜伏期均显著延长 (F =8.6 93,q =8.2 4 0～ 9.796 ,P <0 .0 1) ,B组与CAS组比较P30 0潜伏期显著延长 (q =4 .2 6 8,P <0 .0 5 ) ;A组和B组P30 0波幅均显著小于对照组 (F =4 .985 ,q =4 .310、4 .6 93,P <0 .0 5 )。④结论　脑动脉硬化和脑梗死病人均存在认知电位P30 0异常 ,脑梗死病人随病程延长表现为加重趋势。     

川芎嗪注射液治疗急性脑梗死的临床研究

目的　分析川芎嗪注射液对急性脑梗死的治疗效果。方法　将同时期治疗的 10 2例患者随机分为治疗组(n =5 2 )和对照组 (n =5 0 )。治疗组给予川芎嗪注射液 10 0ml静滴 ,bid ;对照组给予丹参注射液 16ml静滴 ,qd。两组疗程均为 14d。于治疗前和治疗后进行神经功能缺损评分和临床疗效评定。结果　治疗组神经功能缺损评分和临床疗效评定均优于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　川芎嗪注射液治疗急性脑梗死 ,疗效显著 ,值得临床推广。     

脑缺血再灌注大鼠海马区神经营养因子的表达及桃红四物汤的干预

目的 观察脑缺血再灌注后大鼠海马区不同时间神经营养因子表达的变化及桃红四物汤的干预作用。方法 采用大脑中动脉线栓法构建大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将实验动物随机分为假手术组、模型组、桃红四物汤组和尼莫地平组。采用TTC染色法检测脑梗死体积,酶联免疫吸附法测定大鼠海马区脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor, BDNF）、神经生长因子（nerve growth factor,NGF）、神经营养因子3（neurotrophin-3,NT-3）的表达水平。结果 与假手术组相比,模型组术后12 h、24 h、7 d、14 d脑梗死体积明显增大。与模型组相比,桃红四物汤组在术后7 d和14 d脑梗死体积显著减小,尼莫地平组术后12 h、24 h、7 d和14 d脑梗死体积显著减小。与假手术组相比,模型组术后12 h海马区BNDF表达水平显著提高,术后24 h海马区NGF表达水平显著提高,各时点NT-3表达水平的差异无统计学意义;与模型组比较,术后7 d和14 d,桃红四物汤组、尼莫地平组BDNF表达水平显著提高,术后24 h和7 d,尼莫地平组NGF表达水平显著提高,桃红四物汤组NGF和NT-3各个时间点的表达水平无明显差异。结论 大鼠脑缺血再灌注一定时间后海马区BDNF和NGF的表达水平增高,有利于受损的神经细胞恢复,桃红四物汤通过促进BDNF的表达而保护神经细胞。     

尿激酶静脉溶栓治疗急性脑梗死疗效分析

目的 :探讨尿激酶静脉溶栓治疗急性脑梗死的有效性、安全性及可行性。方法 :将急性脑梗死患者 80例随机分为治疗组和对照组各 40例 ,两组均给予脱水、抗凝、扩管治疗。治疗组另外给予尿激酶治疗 ,分别观察治疗后 2h、1天、2天、7天及 14天神经功能缺损恢复程度及治疗效果。结果 :溶栓后神经功能缺损评分较治疗前有显著性差异 (P <0 .0 1) ,治疗组总有效率为 90 % ,对照组为 65 % ,两组相比有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 :尿激酶静脉溶栓治疗急性脑梗死是一种有效的方法     

中药海马提取物对实验性脑缺血再灌注损伤的药理作用

目的:观察中药海马提取物对实验性脑缺血再灌损伤的药理作用。方法:本研究通过采用相对于人类缺血性卒中较为类似的大鼠大脑中动脉阻断(MiddleCerebralArteryOcclusionMCAO)致大鼠局灶性脑缺血/再灌注(Ischemia/ReperfusionI/R)的模型,研究中药海马提取物对大鼠I/R后神经行为学(神经功能评分NeurologicalDeficitScoreNDS)、脑梗死体积、脑含水量等指标的药理作用。结果:大鼠I/R后各时间点内均有程度不同的神经功能缺失,海马提取物用药组神经功能评分明显低于对照组(P <0 .0 5 ) ,假手术组大鼠均无神经功能缺失,脑水肿情况均较对照组明显改善(P <0 .0 5 ) ,脑梗死体积与生理盐水对照组相比有显著性差异(P <0 .0 5 ) ,而假手术组均未见有梗死灶。结论:中药海马提取物具有保护大鼠I/R后受损脑组织的作用。     

嗅觉障碍小鼠嗅上皮组织中Nogo受体及其配体Nogo-A的表达及意义

目的探讨Nogo受体(NgR)及其配体Nogo-A在嗅觉障碍小鼠嗅上皮组织中的表达及意义。方法将100只BALB/C小鼠随机分为对照组(n=20)和模型组(n=80)。模型组小鼠给予体积分数0. 7%Triton X-100100μL双侧鼻腔注射建立嗅觉障碍模型,对照组小鼠给予等体积生理盐水。于造模后3、7、21、49 d采用埋藏食物颗粒实验检测2组小鼠觅食时间。取对照组及模型组小鼠造模后3、7、21、49 d嗅上皮组织,免疫组织化学法检测小鼠嗅上皮组织中NgR蛋白表达,反转录-聚合酶链反应检测小鼠嗅上皮组织中Nogo-A、NgR mRNA的表达,Western blot法及酶联免疫吸附试验分别检测嗅上皮组织中NgR蛋白、Nogo-A蛋白相对表达量。结果模型组小鼠造模后3、7、21 d觅食时间长于对照组及造模后49 d(P <0. 05)。模型组小鼠造模后49 d觅食时间与对照组比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。模型组小鼠造模后3、7、21、49 d嗅上皮组织中NgR阳性表达率显著高于对照组(P <0. 05)。模型组小鼠造模后3、7、21、49 d嗅上皮组织中NgR、Nogo-A mRNA及NgR、Nogo-A蛋白相对表达量均高于对照组(P <0. 05)。结论嗅觉障碍小鼠嗅上皮组织中NgR、Nogo-A表达上调,NgR与其配体Nogo-A相互作用可能参与了小鼠嗅觉障碍的形成。     

INTRANASAL DELIVERY OF NERVE GROWTH FACTOR TO PROTECT THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM AGAINST ACUTE CEREBRAL INFARCTION

Objective To confirmed reliability and feasibility of intranasal nerve growth factor (NGF) bypassing the blood-brain barrier and its potential neuroprotective effects on acute cerebral ischemia. Methods (1) To assay NGF concentrations in different brain regions after middle cerebral artery occlusion (MCAO).Rats were randomly divided into intranasal (IN) NGF, intravenous (IV) NGF, and untreated group (n = 4). The concentrations of NGF of different brain regions in the three groups after MCAO were measured by ELISA. (2) To observe neuroprotective action of NGF on focal cerebral ischemic damage. Rats were randomly assigned to 4 groups: IN vehicle, 1N NGF,1V vehicle, 1V NGF (n = 8). Treatment was initiated 30 minutes after onset of MCAO and given again 24 hours later. Three neurologic behavioral tests were performed 24 and 48 hours following onset of MCAO. Corrected infarct volumes were determined 48 hours after onset of MCAO. Results The olfactory bulb in IN NGF group obtained the highest concentration (3252 pg/g) of NGF among all regions, followed by the hippocampus. The NGF concentrations in the olfactory bulb and hippocampus in IN NGF group were markedly higher than that in 1V NGF and control groups. The infarct volume in IN NGF group was markedly reduced by 38.8% compared with IN vehicle group. IN NGF group vestibulum function markedly improved compared with IN vehicle group at 24 and 48 hours after onset of MCAO (P24h = 0.02 and P48h = 0.04, respectively), Conolmion Intranasal NGF could pass through the blood-brain barrier, reach the central nervous system, reduce infarct volume, and improve neurologic function in rats following MCAO. Intranasal delivery of NGF may be a promising treatment for stroke.     

大鼠大脑中动脉缺血再灌注后不同时间点梗死体积的变化

目的:在局灶缺血模型中,研究再灌注后0 h、6 h、24 h、48 h、72 h对大鼠梗死灶体积的影响。方法:将大鼠分为假手术组(sham组)和实验组,实验组在激光多普勒血流仪的监测下进行手术,术后有3分症状的入主,然后随机分为0 h组、6 h组、24 h组、48 h组、72 h组。在不同的时间点处死大鼠,行TTC染色,然后计算梗死体积。结果:再灌注24 h之前,随着再灌注时间的延长梗死体积逐渐增大,0～24 h,梗死体积变化有显著性差异;但再灌注24 h之后,梗死体积不再发生实质性的增加,24～72 h,梗死体积无显著性差异。结论:在研究局灶脑缺血梗死体积的实验中,24 h是一个非常重要的时间点。     

一氧化氮在大鼠短暂性局灶性脑缺血损伤中对神经生长因子和脑源性神经营养因子表达的影响

目的 采用大脑中动脉梗死(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,研究大鼠脑缺血再灌注后不同时间点脑缺血半暗带区神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的变化,以及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)抑制剂 N-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-argininic methyl ester, L-NAME)对脑缺血大鼠再灌注后NGF和BDNF表达的影响,探讨脑缺血损伤的深层机制。方法 将42只健康雄性Sprague-Dawley大鼠采用数字表法随机分为7组:假手术(Sham)组;MCAO再灌注0 h(MCAO 0 h)组;MCAO再灌注6 h(MCAO 6 h)组;MCAO再灌注12 h(MCAO 12 h)组;MCAO再灌注24 h(MCAO 24 h)组;MCAO再灌注72 h(MCAO 72 h)组以及MCAO 24 h+L-NAME 组(于MCAO前30 min腹腔注射L-NAME,剂量为1 mg/kg)。每组6只大鼠。采用改良线栓法制备大鼠MCAO再灌注模型,于缺血90 min 后拔出线栓进行再灌注。免疫荧光染色法检测再灌注大鼠脑组织缺血半暗带区NGF和BDNF的表达。免疫荧光双标染色法将NO所致的组织损伤标志物3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine, 3-NT)分别与BDNF和NGF共定位。结果 MCAO组大鼠再灌注后0、6 h,脑缺血半暗带区域几乎未见NGF和BDNF阳性细胞。再灌注12 h,可见NGF和BDNF阳性细胞。再灌注24 h,半暗带区NGF和BDNF阳性细胞数较再灌注12 h组进一步增多(P<0.05)。至再灌注72 h,半暗带区NGF和BDNF阳性染细胞数较再灌注24 h组减少(P<0.05)。MCAO再灌注24 h组大鼠缺血半暗带区,3-NT分别与NGF和BDNF免疫荧光染色共定位。Sham组大鼠未见3-NT和NGF双标阳性细胞,MCAO再灌注24 h组大鼠半暗带区可见大量3-NT和NGF双标阳性细胞。给予L-NAME后,半暗带区3-NT和NGF双标阳性细胞数目比MCAO 24 h组明显减少(P<0.05)。Sham组大鼠未见 3-NT和BDNF双标阳性细胞,MCAO再灌注24 h组大鼠半暗带区可见大量3-NT和BDNF双标阳性细胞。给予L-NAME后,缺血大鼠半暗带区3-NT和BDNF双标阳性细胞数目比MCAO 24 h组明显减少(P<0.05)。结论 脑缺血再灌注可引起大鼠脑组织缺血半暗带区NGF和BDNF表达上调,最初的上调出现在再灌注12 h左右,随再灌注时间延长,NGF和BDNF表达进一步增加,至再灌注24 h达到高峰,随后在再灌注72 h下降。L-NAME通过抑制NOS活性,减少NO的产生,减少3-NT形成,进而引起NGF和BDNF表达下降,说明脑缺血再灌注过程中,NO促进NGF和BDNF的表达。     

外源性转化生长因子β1对大鼠癫痫持续状态后血脑屏障通透性的影响

目的:探讨经鼻腔给予外源性转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠癫痫持续状态(statusepilepticus,SE)后血脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性的影响。方法:建立匹罗卡品(pilocarpine)SE模型。SD大鼠252只随机分成正常对照组、模型组和TGF组,各组设计7个观察时间点,即SE后3 h、6 h、24 h、2 d、3 d、4 d、7 d。各大鼠在相应的时间点处死取材,应用化学定量的方法检测大鼠脑组织内伊文思蓝(Evans blue,EB)的含量,应用免疫组织化学法检测相应时间点海马区的zonula occluden-1(ZO-1)蛋白的表达。结果:大鼠脑内的EB含量与正常对照组相比,模型组和TGF组都先增加,24 h达到峰值,后逐渐下降,7 d接近正常;TGF组与模型组比较,脑内EB含量均低于模型组,6 h至2 d增加均有统计学意义(P0.05～P0.01)。TGF组和模型组比较,海马区ZO-1蛋白的表达都是先降后升,以24 h为最低,其中6 h、24 h、2 d差异均有统计学意义(P0.05～P0.01),TGF组明显高于模型组,低于正常对照组。结论:经鼻腔给予外源性TGF-β1能降低大鼠SE后BBB的通透性。     

重组人粒细胞集落刺激因子经鼻给药对脑梗死大鼠的脑保护作用

目的 探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)鼻腔给药对脑梗死大鼠的脑保护作用.方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血2h再灌注,皮下及鼻腔给予 rhG-CSF(60 μg/kg).将动物分为正常组、假手术对照组、脑梗死组、脑梗死+皮下注射rhG-CSF组、脑梗死+经鼻生理盐水组、脑梗死+经鼻rhG-CSF组,每组6只.于术后3 d进行神经功能评分及FasL免疫荧光检测.结果 除正常组、假手术对照组外,其余各组动物均于术后出现不同程度的神经功能缺损,尤以脑梗死组、脑梗死+经鼻生理盐水组最为严重,神经功能评分最高[(10.20±1.85)分,(10.30±1.76)分],海马FasL阳性细胞数最多[(41.17±3.25)个,(41.00±2.76)个],差异无显著性( P ＞0.05),rhG-CSF皮下给药组大鼠神经功能评分降低[(5.67±1.32)分,P ＜0.01],海马FasL表达减少[(32.67±1.97)分,P ＜0.01],rhG-CSF经鼻给药组大鼠神经功能评分进一步降低[(4.00±0.93)分,P ＜0.05],海马FasL表达进一步减少[(19.50±1.05)个,P ＜0.01].结论 rhG-CSF经鼻给药能预防和修复脑梗死大鼠的神经功能缺损,通过抑制FasL表达发挥脑保护作用.     

NGF预处理对全脑缺血再灌注沙土鼠海马CA1区神经细胞凋亡的影响

目的探讨NGF预处理对沙土鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经细胞凋亡的影响及最佳给药时间窗。方法采用夹闭沙土鼠双侧颈总动脉造成全脑缺血再灌注模型。NGF侧脑室注射法。蒙古种沙土鼠30只随机分为五组，每组6只：假手术组（A）、缺血再灌注损伤组（B）、NGF预处理48h、24h、12h组（C、D、E），B、C、D、E各组分别行脑缺血20min再灌注72h后处死取标本。TUNEL法观察沙土鼠脑缺血再灌注后海马CAI区神经细胞凋亡的变化。结果与缺血再灌注损伤组相比，NGF预处理各组可显著减少沙土鼠海马CA1区神经细胞凋亡数目（P〈0．05）；其中以NGF预处理48h组神经细胞凋亡指数最低。结论NGF预处理能明显减轻沙土鼠脑缺血再灌注引起的神经细胞凋亡，具有明显脑保护作用；而以NGF预处理48h脑保护效果最好。     

高血压-脑缺血-再灌注大鼠模型的建立及再灌注时间窗的探索

目的:建立高血压-脑缺血-再灌注大鼠模型,观测脑缺血再灌注损伤。方法:制备肾血管性高血压大鼠(RHR),用线栓法复制大脑中动脉梗塞(MCAO),A组:MCAO3h后再灌注21h;B组:MCAO6h后再灌注18h;C组:MCAO24h。然后测定脑梗死体积及其占全大脑体积百分比、两半球体积差值。结果:MCAO6h后再灌注18h的RHR与持续MCAO24h的RHR比较,前者的梗死灶体积及其占全大脑体积百分比、两半球体积差值均有显著性增大(P<0.01),而MCAO3h后再灌注21h的RHR10例中仅有3例出现少许梗死灶。结论:MCAO6h后再灌注则已超出有效治疗时间窗,将造成明显的再灌注损伤。     

细胞外信号调节激酶在局灶性脑缺血中的表达

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)在局灶性脑缺血再灌注海马神经元中的表达.方法:线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分成假手术组(sham组)、脑缺血再灌注组(I/R组),每组根据再灌注时间不同再分为3,6,24,48和72 h亚组,每亚组各6只鼠.在预定时间点进行HE染色观察组织学变化;TUNEL法检测CA1区细胞凋亡的动态变化规律;免疫组织化学方法研究ERK的表达特征.结果:MCAO后海马神经元存活数量较假手术组明显减少;凋亡细胞大量出现,以48 h为高峰;MCAO后3 h,磷酸化ERK在局灶性脑缺血大鼠脑组织中显著升高,6 h达到最高峰,72 h恢复到正常水平.结论:脑缺血再灌注损伤可能导致ERK活性上调,参与缺血后神经细胞凋亡过程.     

大麻素受体激动剂预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨大麻素(CB)受体激动剂WIN 55,212-2预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用.方法采用大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)致局灶性脑缺血模型,将50只雄性SD大鼠随机分为5组:对照组(Con组),行线栓法敛大脑中动脉栓塞(MCAO)前24 h腹腔注射生理盐水(NS)0.3ml;WIN 55,212-2预处理组(WIN1～3),分别于MCAO前24 h腹腔注射WIN 55,212-2 0.3,1和3rag/kg;DMSO组,于MCAO前24 h腹腔注射二甲基亚砜(DMSO,WIN 55,212-2的溶剂)0.3 ml.观察MCAO120 min再灌注24,48和72 h后神经功能评分(NFS)和再灌注72 h脑梗死容积百分比.结果 WIN 55,212-2预处理组大鼠NFS明显高于DMSO组和Con组(P<0.05),脑梗死容积百分比明显小于DMSO组和Con组(P<0.05).WIN2组和WIN3组的脑梗死容积百分比明显小于WIN1组,NFS明显高于WIN1组(P<0.05),WIN2组和WIN3组的NFS和脑梗死容积百分比差异无统计学意义(P=0.928),但3 mg/kg WIN 55,212-2可引起大鼠明显嗜睡和倦怠.结论 CB受体激动剂WIN 55,212-2预处理能诱导脑缺血耐受,对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,并具有一定的剂量相火性.     

R（＋）-普拉克索对大鼠短暂性局灶性脑缺血损伤的神经保护作用

目的研究R（＋）-普拉克索[ R（＋）-PPX]对短暂性局灶性脑缺血大鼠脑内活性氧自由基（ reactive oxygen species,ROS）产生以及脑损伤的影响,探讨R（＋）-PPX对脑缺血损伤的保护作用,寻找防治缺血性脑血管病的有效方法。方法采用数字表法随机将30只健康雄性SD大鼠分为：假手术组（Sham组,n=10）;大脑中动脉梗死组（MCAO组,n=10）;MCAO＋R（＋）-PPX组[于MCAO前30 min一次性腹腔注射R（＋）-PPX,剂量为1 mg/kg,n=10]。使用线栓法制作大鼠缺血90 min再灌注模型,术中监测大鼠心率、平均动脉压及肛温,使其保持在正常范围。每组分别于脑缺血再灌注后6、24 h取脑组织行TTC染色检测大鼠脑梗死体积,并制作脑组织冰冻切片,采用H2DCF-DA染色法计数半暗带区ROS阳性细胞数目并检测其平均荧光强度。结果1）在MCAO手术过程中,Sham组、MCAO组和MCAO＋R（＋）-PPX组大鼠的心率、平均动脉压及肛温差异均无统计学意义。2）Sham组大鼠无脑梗死发生。缺血再灌注6 h及24 h,MCAO组、MCAO＋R（＋）-PPX组大鼠脑梗死体积均比Sham组显著增加（P〈0.05）且随再灌注时间延长递增（P〈0.05）。再灌注6 h时,MCAO＋R（＋）-PPX组与MCAO组相比,脑梗死体积明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）,而再灌注24 h时,MCAO＋R（＋）-PPX组脑梗死体积与MCAO组相比差异无统计学意义（P 〉0.05）。3）Sham组大鼠脑内无缺血半暗带区。缺血再灌注6 h及24 h,MCAO组、MCAO＋R（＋）-PPX组大鼠脑缺血半暗带区域H2DCF-DA阳性染色细胞数目及平均荧光强度均随再灌注时间延长递增（P〈0.05）。再灌注6 h时,与MCAO组相比,MCAO＋R（＋）-PPX组的H2DCF-DA阳性染色细胞数目及平均荧光强度明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。而再灌注24 h时,MCAO＋R（＋）-PPX组大鼠H2DCF-DA阳性染色细胞数目及平均荧光强度与MCAO组相比差异无统计学意义（P〉0.05?