MTT法分析培养成骨细胞的存活和增殖能力

用ＭＴＴ法测定离体培养的成骨细胞存活与增殖能力。并观察１３７Ｃｓγ线对成骨细胞生长的影响。细胞接受０、３、６、９、１２Ｇｙ照射，培养至第７天，增殖率分别为４１６、３３６、２７５、１４７、１０８％。结果表明：１３７ＣＳγ线剂量高于３Ｇｙ成骨细胞增殖受到显著抑制，９Ｇｙ以上，则基本抑制其增殖。     

辛伐他汀对成骨细胞增殖和矿化功能影响的实验研究

目的：研究辛伐他汀对原代培养大鼠颅骨成骨细胞增殖和矿化功能的影响。方法:酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞,分别用空白培养基、不同浓度辛伐他汀及不同浓度的rhBMP-2作用24h后,MTT法测量药物对细胞增殖活性的影响,细胞接种到培养板连续培养7d,von Kossa染色观察成骨细胞矿化结节,采集图像并转换处理后计算矿化结节面积的百分比。结果:辛伐他汀对成骨细胞增殖活力的增加呈剂量依赖方式,而且可使成骨细胞矿化面积百分比显著增加,与rhBMP-2的作用相当。结论:辛伐他汀可促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞的增殖和矿化,从而发挥促进骨形成的作用。     

MTT法分析PDGF对鼠成骨细胞生长作用的影响

目的：观察ＰＤＧＦ对鼠成骨细胞增殖能力的影响及其与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ联合应用对细胞的生长有否协同作用。方法：酶消化分段收集法分离培养出鼠成骨细胞，利用ＭＴＴ法检测活细胞产生甲月替结晶的含量多少，反映细胞的增殖能力和生长情况。结果：ＰＤＧＦ能促进成骨细胞的增殖生长，其有效浓度为１～１００ｎｇ／ｍｌ，以１００ｎｇ／ｍｌ作用最大；ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ联合应用可明显增强成骨细胞的增殖能力。结论：ＰＤＧＦ可以刺激成骨细胞的增殖，且与ＢＭＰ、ｂＦＧＦ有协同作用。ＭＴＴ法是测定成骨细胞增殖能力较理想的方法     

氟化物对体外培养的小鼠成骨细胞增殖能力的影响

目的:观察氟化钠对体外培养的成骨细胞的增殖能力的影响。方法:采用四唑盐(MTT)比色法,观察不同剂量氟化钠在不同时间对体外培养的小鼠成骨细胞增殖活力的影响。结果:剂量为2.5、5.0mg/L的氟化钠作用2d时,可使成骨细胞增殖活力较对照组明显增强;≥20mg/L时随着氟化钠剂量的增加和作用时间的延长,成骨细胞的增殖活力明显减弱。结论:氟化钠对成骨细胞的增殖呈现双向调节,且随时间的延长对细胞增殖能力的抑制逐渐增强。     

P物质对体外培养成骨细胞增殖和活性的影响

目的: 观察P物质(substance P,SP)对体外培养的成骨细胞增殖和活性的影响. 方法: 采用新生大鼠颅盖骨消化法培养成骨细胞,再加入不同浓度的SP,观察细胞生长数量,测定碱性磷酸酶活性及观察细胞周期变化. 结果: 浓度范围从1×10-12～1×10-6 mol/L的SP对成骨细胞的增殖和活性都有促进作用,在浓度为1×10-8 mol/L对成骨细胞增殖和活性的促进作用最强. 结论: SP对成骨细胞增殖和活性有促进作用.     

Leptin对人成骨细胞增殖和功能的影响

目的　观察瘦素 (leptin)对人成骨细胞增殖和功能的影响。方法　培养人成骨细胞 ,并观察其形态及功能变化。采用 MTT比色法检测不同浓度的 L eptin对人成骨细胞增殖的影响 ,同时观察不同浓度 L eptin条件下骨钙素浓度的变化 ,并用细胞总蛋白较正。结果　体外培养的人成骨细胞大多呈长梭型 ,碱性磷酸酶组织化学染色、骨钙素免疫荧光组织化学染色阳性、培养液中加入 β-甘油磷酸及 L-抗坏血酸后钙茜素红染色阳性。在加入不同浓度 L eptin后第 1、2、3天 ,人成骨细胞增殖无显著变化。L eptin可刺激骨钙素分泌 ,呈浓度依赖性 (P<0 .0 5 ) ,但无时间依赖性 (P>0 .0 5 )。结论　 L eptin对人成骨细胞增殖无影响 ,但可刺激人成骨细胞功能。     

冲击波对体外培养的鼠成骨细胞增殖分化的影响

目的：探讨冲击波对体外培养的鼠成骨细胞的增殖及分化能力的影响。方法：将原代培养的成骨细胞随机分成冲击波组和对照组,用不同能量（5、10、15、20 kV）冲击波处理后接种于96孔培养板,根据细胞存活率和增殖情况确定最佳的冲击波能量值。将传4代成骨细胞用冲击波处理后,用CCK-8法、细胞分泌碱性磷酸酶试剂盒、茜素红染色对两组细胞增殖及分化进行测定。结果：冲击波处理体外原代培养成骨细胞的最佳能量值为10 kV（500次）,CCK-8法检测显示,冲击波组细胞增殖速度快于对照组（P〈0.001）,细胞分泌碱性磷酸酶高于对照组（P〈0.001）,茜素红染色显示,冲击波组矿化结节面积明显大于对照组（P〈0.001）。结论：最佳能量冲击波可促进成骨细胞的增殖与分化。     

成骨细胞分化及增殖调控的研究进展

在骨代谢与骨改建过程中,间充质细胞在一定条件下分化为成骨细胞,使新骨生成,正常骨改建和部分骨病理性改变与成骨细胞的分化和增殖功能的关系密切。成骨细胞在分化和增殖过程中受许多全身和局部调节因子的精细调控,本文就成骨细胞分化和增殖过程调控因素的研究进展作一综述。     

大鼠脑内成分对体外培养的成骨细胞增殖、分化和矿化的影响

目的研究大鼠脑组织固有成分对体外培养的成骨细胞增殖、分化和矿化的影响，探讨合并脑外伤骨折愈合加快的可能原因。方法提取大鼠全脑、灰质、白质、垂体、肌肉、肝脏、大鼠血清等．制成匀浆提取液．体外培养大鼠成骨细胞．与空白培养液作对照观察大鼠各组织提取液对成骨细胞增殖、分化和矿化的作用。结果对成骨细胞增殖的影响：脑内灰质和白质成分较其他提取液显著促进成骨细胞增殖（P〈0．01）。其中灰质成分最为明显；对成骨细胞分化的影响：灰质，白质，血清成分对成骨细胞ALP活性的影响明显较其它各组高（P〈0．01），其中灰质成分为最高（P〈0．01）；对成骨细胞矿化的影响：肌肉组轻度抑制成骨细胞矿化结节形成（P〈0．05），其他各组无显著性差别。结论大鼠脑组织中灰质和白质能显著促进成骨细胞增殖和分化．尤以灰质为最强，但并不能明显促进成骨细胞矿化。脑外伤后脑组织内固有成分释放入血可能和合并脑外伤的骨折愈合加速有一定关系。     

中药葛根血清对大鼠成骨细胞增殖和ALP的影响

目的 探讨葛根含药血清细胞对成骨细胞增殖和分化的影响.方法 取体重260±10g SD大鼠,雌雄各半,每组16只,同等条件下制备葛根含药血清和对照血清,分别观察不同采血时间和血清添加量对成骨细胞增殖和碱性磷酸梅(ALP)的影响.结果 末次灌胃后1～2h采血对成骨细胞增殖和ALP的作用明显增强.结论 含葛根血清可促进成骨细胞的增殖和分化.     

孕激素对成骨细胞增殖和凋亡的影响

绝经后骨质疏松症（osteoporosis，OP）采用孕激素替代治疗可促进骨形成，减少骨丢失，其机制尚未完全阐明。研究发现，成骨细胞的增殖和凋亡在骨重建过程中起重要作用。我们观察了孕酮（progesterone，P）对人成骨细胞（human osteoblast cells，hOB）增殖和凋亡的影响，旨在探讨孕激素治疗绝经后OP的作用机制。     

中药血清促进成骨细胞增殖和分化的实验研究进展

近年来,运用体外成骨细胞培养和中药血清干预实验,研究和发现骨质疏松治疗药物的报道已屡见不鲜。该法与传统的将中药粗提物直接加入反应体系中的方法相比具有明显的优势:在某种程度上克服了中药本身的理化性质不确定因素对实验结果的干扰,而且相对接近药物在体内的生物转化的真实过程,能在一定程度上揭示中药和复方在体内代谢过程中的转化和转变,有助于中药真正有效部位、活性成分的发现,能客观地阐明中药的药效和作用机理。1中药血清药理学中药血清药理学是指给动物灌胃或人服用一定量的中药单方或复方制剂,一定时间后采集血液,分离血清,…     

鲑鱼降钙素对体外培养鼠成骨细胞增殖及IGF-I表达的影响

目的观察鲑鱼降钙素（calcitonin,CT）对离体培养数成骨细胞（osteoblast,OB）的作用,初步探讨CT对OB增殖以及胰岛素样生长因子I（Insulin-like Growth Factor-I,IGF-I）表达的影响,为促进骨修复和再生的临床治疗提供一定的理论依据。方法取新生24hSD乳鼠颅盖骨,采用酶消化法培养OB,经酶解消化后得到原代OB,进行体外培养并鉴定。将体外培养的OB用不同浓度（1×10-12～1×10-8mol/L）的CT处理,采用MTT法（噻唑蓝染色法）观察OB的增殖;Gomori钙-钻法检测碱性磷酸酶（ALP）的表达;RT-PCR方法观察胰岛素样生长因子-I（IGF-I）mRNA的表达。结果经细胞鉴定后证实其系OB;MTT法检测表明,CT浓度为1×10-12mol/L时就可以刺激OB增殖,且随CT浓度升高其增殖能力增加,呈剂量依赖关系;Gomori钙-钻法检测结果表明随着CT浓度的升高OB分化能力增强;经RT-PCR法检测表明,IGF-I mRNA可在乳鼠OB内稳定表达,半定量分析表明,随着CT浓度的升高,IGF-ImRNA的表达量逐渐增加。结论适当浓度的CT可以促进体外培养OB的增殖;部分机制可能与CT促进IGF-ImRNA表达的增加有关。     

续断苷对人成骨细胞增殖和分化作用研究

目的:观察续断苷对体外培养人成骨细胞的增殖和分化的影响。方法:取人髂骨松质骨分离培养成骨细胞,传代后用含续断苷的培养液培养,用MTT方测定成骨细胞的增殖,并测定碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果:浓度为1,10,100μg/ml的续断苷培养液促进成骨细胞的增殖;浓度为10,100μg/ml的续断苷培养液促进成骨细胞碱性磷酸酶分泌。结论:续断苷在一定浓度范围内促进人成骨细胞的分化与增殖。     

氟化钠对成骨细胞增殖及分化影响的实验研究

观察不同剂量氟化钠(NaF)对大鼠成骨细胞增殖分化的影响。成骨细胞经酶消化法从新生24hSprague-Dawlev(SD)种乳鼠头盖骨分离得到。在10-7mol／L～5×10-4mol／LNaF中培养。用MTT测定细胞增殖,并经生化法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)及放免法测定培养液中骨钙素含量反映细胞分化。结果表明NaF对成骨细胞增殖率的影响呈双向调节,表现为小剂量NaF(10-mol／L,10-6mol／L,10-5mol／L)刺激细胞增殖,其提高增殖率分别达到11．3％、10．9％、10.6％,(P<0.05),大剂量反之,与对照组相比,10-4mol／L及5×10-4mol／LNaF降低细胞增殖率为9．6％与9．7％。细胞分化对NaF的反应表现为多样性。ALP活性的改变基本与细胞增殖率的变化相同,即小剂量刺激,大剂量抑制。然而骨钙素分泌的改变则呈单向作用,各浓度NaF均刺激细胞骨钙素分泌,其中5×10-4mo1／L组骨钙素水平最高达67.14％(P<o.05)。NaF对大鼠颅骨成骨细胞增殖的影响呈双向调节,但对细胞分化的作用成多样性。     

rhBMP-4对大鼠成骨细胞增殖及分化能力的影响

目的 探讨rhBMP-4对大鼠成骨细胞生长增殖及分化的影响.方法 取大鼠颅盖骨组织块,采用改良组织块混合酶消化法培养成骨细胞,将不同浓度的rhBMP-4加入第4代成骨细胞的培养基继续进行细胞培养,用MTT法测定细胞在第1,3,5 天的增殖情况,用碱性磷酸酶试剂盒检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性.结果 第1,3,5 天,5～40 ng/ml的rhBMP-4对成骨细胞的生长增殖能力的影响与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05);第1,3 天,5～40 ng/ml的rhBMP-4对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05),第5天,rhMP-4各浓度组与对照组比较无统计学意义.结论 在一定时间范围内,rhBMP-4对成骨细胞生长增殖及分化有促进作用.     

不同浓度二甲双胍对大鼠离体成骨细胞增殖和分化的影响

目的 观察不同浓度二甲双胍对大鼠离体成骨细胞增殖和分化的影响。方法 从SD乳鼠颅骨中分离出原代成骨细胞后进行培养和鉴定。用不同浓度(0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、800μmol/L、1 600μmol/L、3 200μmol/L)二甲双胍干预成骨细胞72 h后,检测成骨细胞的增殖情况。用不同浓度(0μmol/L、50μmol/L、200μmol/L、800μmol/L、1 600μmol/L、3 200μmol/L)二甲双胍干预成骨细胞72 h后,检测成骨细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性,以及骨形成指标ALP、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)的基因和蛋白表达水平。结果 (1)干预72 h后,与0μmol/L二甲双胍相比,经50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、800μmol/L二甲双胍干预后成骨细胞的增殖活性呈浓度依赖性增强,其中经800μmol/L二甲双胍干预的成骨细胞增殖活性最强(P<0.05),而经3 200μmol/L二甲双胍干预后成骨细胞的增殖活性降低(P<0.05)。(2...