HSP 90在原发性肾病综合征发生和治疗中的意义

【目的】热休克蛋白90(HSP90)是糖皮质激素受体(GR)的伴侣蛋白,本研究探讨HSP90在原发性肾病综合征(INS)发生和糖皮质激素(GC)在治疗中的作用本质。【方法】以INS患者和GC敏感、抵抗的细胞株为研究对象,分析其HSP90、GR表达水平及HSP90的亚细胞分布;并采用HSP90特异性阻断剂研究HSP90对GC反应性的影响。【结果】与对照组比较,INS患者HSP90mRNA表达水平明显增高;而且INS患者中GC抵抗组HSP90mRNA表达显著高于GC敏感组(P<0.05)。深入研究发现对照组的HSP90主要分布在细胞浆中,核内仅有微量分布;INS患者的HSP90表达有所增加,并且GC抵抗组与敏感组比较,HSP90明显趋向细胞核内分布(P<0.001)。用HSP90特异性阻断剂后发现激素敏感细胞株的GC反应性也显著下降(P<0.01)。【结论】研究表明HSP90的异常表达及亚细胞分布变化可能是导致GC抵抗的重要机制,其一方面可能影响内源性GC对神经-内分泌-免疫网络的功能调节,进而影响机体免疫内环境的稳定,从而参与INS等免疫损伤性疾病的发病;另一方面则可能干预患者对外源性GC的治疗反应,影响临床疗效。     

儿童原发性肾病综合征外周血糖皮质激素受体β及热休克蛋白90的变化及其意义

目的探讨原发性肾病综合征（PNS）患儿外周血单个核细胞（PBMC）上糖皮质激素受体β（GRβ）及热休克蛋白90（HSP90）与糖皮质激素治疗效应之间的关系。方法以30例PNS患儿作为观察组,根据随访结果分成激素耐药型肾病综合征（SRNS）和激素敏感型肾病综合征（SSNS）2组,各15例。10例健康儿童作为正常对照组。应用RT-PCR检测了各组PBMC上GRβmRNA及HSP90mRNA的表达;并分析以上指标与肾脏病理及相关临床实验室指标的关系。结果 （1）SSNS组患儿PBMC上GRβmRNA、HSP90mRNA的表达均高于对照组（均P〈0.05）。（2）SRNS组患儿PBMC上GRβmRNA、HSP90mRNA的表达均高于SSNS组（均P〈0.01）。（3）SRNS组患儿PBMC上GRβmRNA的表达与肾脏病理分级成等级正相关（r=0.496,P〈0.05）;与24 h尿蛋白定量（24 h UTP）成等级正相关（r=0.458,P〈0.05）。（4）SSNS组患儿PBMC上GRβmRNA的表达与24 h UTP无相关性（P〉0.05）。结论 GRβ及HSP90可能参与了SRNS的发生与发展。GRβ可以作为监测PNS患儿病情以及预后的指标之一。     

热休克蛋白90与肿瘤关系的研究进展

热休克蛋白90是存在于细胞内的最为广泛的分子伴侣之一,它能与细胞内的一些辅分子伴侣结合成各种不同的多蛋白复合体,并通过维持其"受体蛋白",如Akt、Raf-1、HER-2/neu等的稳定和活性间接调控细胞内多条与细胞增殖、分化、存活以及凋亡有关的信号转导通路,其独特的性质使其成为抗肿瘤治疗的良好靶点。     

HSP90在肿瘤中的研究

热休克蛋白90(HSP90)是一组结构高度保守的蛋白质,作为分子伴侣参与细胞的发育、生长和分化,近年来因HSP90与肿瘤发生发展、生物学行为及其预后有较密切的关系,而成为抗癌药物作用的靶点。很多癌基因蛋白均为HSP90的作用靶点,HSP90抑制剂将促使在肿瘤生长信号通路中起重要作用的HSP90效应蛋白降解,从而阻断肿瘤增殖信号通路的多个靶点,有效阻止肿瘤的生长,体内外实验也证实了HSP90抑制剂的抗肿瘤活性。     

HSP90β基因突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系

目的:筛选肾病综合征患者热休克蛋白90β(heat shock protein 90, HSP90)基因突变,并分析该突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系.方法:提取300例经糖皮质激素治疗的肾病综合征患者血液DNA,采用聚合酶链反应 (polymerase chain reaction)和自动荧光测序方法, 对HSP90基因intron 9, exon10, intron 10, exon11,3'非编码区域DNA 序列进行突变分析,结合临床资料探讨突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系.结果:在肾病综合征患者中发现了2个HSP90β基因点突变,分别为intron 10的7489 C＞T和3'非编码区的7612 C＞T,其发生频率在糖皮质激素敏感和不敏感患者中分别为(2.44%,3.68%)和(2.44%,2.94%),两组患者的突变频率无统计学差异(P＞0.5).结论:在肾病综合征患者中发现9例7489 C＞T和8例7612 C＞T突变,在敏感和不敏感组的发生频率无显著差异,提示HSP90β表达量与GC治疗敏感性无显著相关.     

GR和HSP70在大鼠严重多发伤后肝组织中的变化及其意义

目的 从组织细胞受体水平探讨糖皮质激素受体（GR），热休克蛋白70（HSP70）在严重多发伤后肝脏中的变化及其作用。方法 采用严重胸部撞击伤伴单侧股骨肌折模型，肝组织GR采用放射配体结合分析法测定最大结合容量，免疫印迹法测定其蛋白含量，HSP70采用免疫印变法测定其蛋白含量，并进行计算机图像分析。结果 严重多发伤后肝组织GR的最大结合容量及蛋白含量均显著下降，12h降至最低，24h有所恢复；，HSP70在伤后迅速增加，8h达到峰值，24h仍持续在较高水平。但肝脏病理无明显改变；血清生化指标ALT，TB的改变呈逐渐增高的趋势，但无显著意义。结论 GR在严重多发伤后肝组织细胞的抗损伤机制方面可能起着重要作用，HSP70可能参与了肝组织细胞抗损伤机制的启动。     

GP73和HSP90α在低浓度甲胎蛋白原发性肝癌诊断中的应用价值

目的 探讨高尔基体蛋白73(GP73)和热休克蛋白90α (HSP90α)在低浓度甲胎蛋白(AFP)原发性肝癌(PHC)诊断中的应用价值.方法 收集150例血清,其中AFP低浓度PHC患者50例,肝硬化患者30例,肝炎患者30例,健康对照者40例.采用ELISA方法检测各组人群血清GP73和HSP90α含量,比较各组间...     

血清HSP90、sPD-1、suPAR水平联合检测在原发性肾病综合征发作期患儿诊断中的效能

目的：分析血清热休克蛋白90(HSP90)、可溶性程序性死亡受体1(sPD-1)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（suPAR水平联合检测在原发性肾病综合征（PNS）发作期患儿诊断中的效能。方法：回顾性分析2020年5月至2022年5月该院收治的80例PNS患儿的临床资料,根据疾病活动度将其分为发作期组（n=40）、缓解期组（n=40）,另选取同期40名健康体检儿童作为对照组。比较三组血清HSP90、sPD-1、suPAR水平,采用Spearman相关性分析血清HSP90、sPD-1、suPAR水平与疾病活动度的相关性,绘制受试者工作特征曲线（ROC）分析血清HSP90、sPD-1、suPAR水平单项及联合检测诊断PNS患儿发作期的效能。结果：发作期组血清HSP90、sPD-1、suPAR水平均高于缓解期组和对照组,且缓解期组高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;Spearman相关性分析结果显示,血清HSP90、sPD-1、suPAR水平与疾病活动度均呈正相关（r>0,P<0.05）;ROC曲线分析结果显示,血清HSP90、sPD-1、suPAR水平单项及联...     

HSP70和HSP90α在人膀胱癌中的表达及意义

目的　探讨热休克蛋白70(heat- shockprotein70,HSP70)和热休克蛋白90α(heat shockprotein90α,HSP90α)在 膀胱癌中的表达及临床意义。方法　应用免疫组化技术检测HSP70、HSP90α和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearan tigen,PCNA)在50例膀胱癌组织和14例正常膀胱粘膜组织的表达。结果　膀胱癌中HSP70、HSP90α阳性表达率分别为 56%(28 50)和66%(33 50)。HSP70和HSP90α在膀胱癌病理分级、临床分期、生存率等方面具有显著性差异(P<0.05)。 HSP70、HSP90α和PCNA在膀胱癌中表达呈正相关。结论　HSP70、HSP90α与膀胱癌细胞分化,肿瘤的浸润深度有关,在膀 胱癌发生和发展中起重要作用。HSP70、HSP90α可以作为判断膀胱癌预后的新指标。     

血清HSP90α和癌组织基因HSP90AA1在肺癌中的高表达及预后价值

目的 探讨肺癌患者血清热休克蛋白90α(HSP90α)和癌组织基因HSP90AA1在肺癌中的高表达及其预后价值。方法 收集109例肺癌患者为实验组;36例肺部炎症患者为参照组;以及30例健康体检者为对照组,比较三组间血清HSP90α水平的差异;分析HSP90α与临床参数的关系;从癌症基因图谱(TCGA)数据库下载数据分析HSP90AA1在癌组织中的表达,同时探讨HSP90AA1与患者临床病理资料的相关性及对预后的影响。结果 实验组血清HSP90α水平高于参照组和对照组(P<0.05);HSP90α诊断肺癌的ROC曲线下面积是0.898(P<0.05);肺鳞癌组、小细胞癌组HSP90α表达高于腺癌组(P<0.05);肺癌患者治疗缓解期HSP90α表达降低,病情进展期HSP90α表达显著升高(P<0.05);TCGA数据分析显示HSP90AA1表达癌组织高于癌旁组织,且肺鳞癌癌组织HSP90AA1表达高于肺腺癌(P<0.05);HSP90AA1表达与肺癌患者的年龄、性别、临床分期、肿瘤残余均无关;K-M生存分析单因素、多因素Cox回归分析显示HSP90AA1高...     

热休克蛋白90在防治肿瘤方面的研究进展

热体克蛋白90是热休克蛋白家族中重要的蛋白之一,其作为分子伴侣参与调控、维持细胞内多种蛋白的构象和功能,在调节细胞生长、分化和凋亡等方面发挥重要的作用。近年发现,热体克蛋白90作为伴侣蛋白对肿瘤的恶性转变、生长、增殖及侵袭有着重要的作用,因而成为肿瘤治疗中的很有希望的药物作用分子靶点。本文对热体克蛋白90与肿瘤的关系及其抑制剂在肿瘤治疗中的应用进展进行了简要综述。     

热休克蛋白90在人脑恶性胶质瘤的表达及其作用

目的　探讨热休克蛋白90 (HSP90 )在人脑恶性胶质瘤的表达及其在肿瘤增殖、分化中的作用。　方法　应用免疫组织化学法对4 5例人脑恶性胶质瘤的HSP90表达进行观察,并与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达对比分析。　结果　低度恶性与高度恶性胶质瘤HSP90α阳性细胞分别为(36 .0±7.1) %和(6 6 .6±6 .8) % ;HSP90 β阳性细胞百分比分别为(46 .0±7.3) %和(89.0±3.6 ) % ,两种HSP90异构体在高度恶性组中的表达均高于低度恶性组(P <0 .0 5 )。HSP90 β在高度恶性组血管内皮细胞的阳性率(6 9.9% )明显低于低度恶性组(9.1% )。HSP90α的表达与PCNA指数密切相关(P <0 .0 5 )。　结论　HSP90两个同功异构体的作用有所不同;HSP90α与胶质瘤细胞增殖有关,HSP90 β通过促进肿瘤血管生成促进胶质瘤细胞恶性分化。     

热休克蛋白27通过降低内质网应激抑制硼替佐米诱导的骨髓瘤细胞凋亡

目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞热休克蛋白27(HSP27)表达对硼替佐米诱导凋亡的影响及机制。 方法 人MM细胞株U266细胞暴露于硼替佐米,实时荧光定量PCR检测HSP27 mRNA,蛋白质印迹法检测HSP27、磷酸化-HSP27(p-HSP27)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3/9(cl-Caspase 3/9)表达。收集12例初治和10例复发MM患者骨髓瘤细胞,荧光原位杂交法检测染色体异常,比较HSP27 mRNA和蛋白表达差异。将U266细胞分为观察组和对照组,分别转染HSP27-siRNA和NC-siRNA,流式细胞术检测硼替佐米诱导的细胞凋亡率。慢病毒介导HSP27基因在U266细胞过表达,蛋白质印迹法检测硼替佐米诱导的GRP78和cl-Caspase 3表达。 结果 硼替佐米暴露显著上调U266细胞HSP27 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),上调GRP78和p-PERK表达(P<0.05),活化Caspase-3和Caspase-9(P<0.05); 4-苯基丁酸预处理显著抑制硼替佐米诱导的Caspase-3和Caspase-9活化(P<0.01)。复发MM患者HSP27 mRNA和蛋白的表达显著高于初治MM患者(P<0.01)。沉默HSP27表达显著增加硼替佐米诱导的U266细胞凋亡(P<0.01)。慢病毒介导HSP27过表达显著抑制硼替佐米诱导的GRP78表达和Caspase-3活化(P<0.01)。 结论 HSP27负反馈抑制内质网应激,减少硼替佐米诱导的MM细胞凋亡。     

高温诱导淋巴细胞多肽合成与热耐受关系的探讨

将健康人外周血淋巴细胞于体外培养,观察在不同强度和方式的高温条件下,淋巴细胞热应激蛋白(Heat Shock Proteins,HSP)合成和细胞热损伤情况。结果表明,高温可诱导淋巴细胞迅速合成HSP;预热(39℃)可增强淋巴细胞HSP合成反应、提高细胞膜过氧化脂质和胞内K~+、Na~+、Ca~(2+)含量的稳定性、减轻高温对细胞亚微结构的损伤、提高淋巴细胞在高温下的存活率。     

HSP90在离体人真皮成纤维细胞热损伤中的保护作用

目的:探讨人真皮成纤维细胞热损伤变性后HSP90的保护作用.方法:培养的人真皮成纤维细胞在52℃,30 s热水损伤24 h后用免疫荧光观察HSP90表达部位的改变并与正常组比较,用Western Blot 进一步分析正常的FB和热变性的FB在3, 6, 12, 24, 48, 72, 96及120 h时相点HSP90表达量的改变.结果:用免疫荧光观察到FB热损伤后24 h胞质胞核中出现HSP90高表达.Western Blot显示3 h即有HSP90表达量升高,24 h达到高峰,维持到96 h,120 h恢复到正常.结果:FB热变性可以引起HSP90异常高表达,HSP90对FB热损伤具有保护作用.     

热休克蛋白90抑制剂对视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的 :探讨热休克蛋白 90 (heatshockprotein 90 ,Hsp90 )抑制剂对培养的视网膜色素上皮 (Retinalpigmentepithelial,RPE)细胞端粒酶活性以及RPE细胞增生的影响。方法 :用分子原位杂交方法分别检测对照组和Hsp90抑制剂组RPE细胞端粒酶活性 ;末端缺口标记 (terminalUTPnick endlabeling ,TUNEL)法分别检测上述 2组细胞中凋亡细胞的比率 ;在上述 2组细胞中分别用甲基偶氮唑蓝 (metheltetrazolium ,MTT)法检测细胞增生状况。结果 :与RPE细胞对照组相比 ,加入Hsp90抑制剂组RPE细胞端粒酶活性显著降低 ,凋亡细胞的比率明显增高 ,RPE细胞生长抑制率升高。结论 :Hsp90抑制剂可抑制RPE细胞中端粒酶的活性 ,从而抑制RPE细胞的增生并引起RPE细胞的凋亡     

新生霉素衍生物FM-NOV17抑制Her2+乳腺癌细胞的作用及其机制

目的研究新生霉素衍生物FM-NOV17对乳腺癌Skbr3细胞的作用,并探讨该作用是否与其干扰热休克蛋白90(Hsp90)分子伴侣的功能从而促进Her2降解有关。方法用蛋白免疫印迹法检测Her2的含量,采用免疫共沉淀的方法研究FM-NOV17对乳腺癌细胞Hsp90分子伴侣功能的影响。用免疫共沉淀的方法将Her2与其分子伴侣复合物沉淀下来,用免疫印迹法检测沉淀物中与Her2结合的Hsp90和辅伴侣Hsp70含量的变化。结果 FM-NOV17能降低乳腺癌细胞Skbr3中Her2的蛋白水平,FM-NOV17使Her2与Hsp90和Hsp70的结合减少,降低Her2蛋白水平,诱导细胞周期阻滞和凋亡。结论 FM-NOV17通过干扰Hsp90伴侣功能,减少Her2与Hsp90和辅伴侣的结合,降低Her2蛋白量,最终抑制乳腺癌细胞增殖。     

冷冻对G422胶质瘤HSP90α和P53基因表达的影响

目的 :研究冷冻后G4 2 2胶质瘤HSP90α和P5 3基因表达的变化及两者之间的关系 ,探讨其变化在冻化疗联合应用中的意义。方法 :G4 2 2胶质瘤接种于小鼠后下肢肌腹内 ,长到 2cm大小随机分组实施冷冻 (- 180℃冷冻 90s) ;免疫组化方法检测HSP90α和P5 3的冻前及冻后 6、12、2 4、4 8、72h的表达。结果 :HSP90α的表达在冻后 6h显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,冻后 2 4、4 8、72h其表达显著增高 ;P5 3基因表达于冻后各时点均增高 ,尤以冻后 2 4h和 4 8h最为显著 (P <0 .0 1)。结论 :冷冻影响G4 2 2胶质瘤的HSP90α及P5 3的表达 ,两者的表达呈显著正相关 ;推测冻后两者的表达变化在冻化疗联合应用中起到关键性调节作用。