RLFmRNA在妊娠大鼠卵巢中的表达

目的:观察松弛素样因子(RLF)基因在妊娠大鼠卵巢中的表达,探讨RLF在大鼠妊娠中的作用.方法:采用RT-PCR方法.结果:妊娠第1天卵巢RLFmRNA高水平表达,妊娠第3天RLFmRNA水平最低,随着妊娠的进展,卵巢RLFmRNA的表达逐渐增加,至中期达到高水平,持续到妊娠后期.分娩前后RLFmRNA的水平出现波动,临近分娩RLFmRNA升高明显.结论:RLF参与妊娠的全过程.     

RLF mRNA在不同阶段大鼠卵巢中的表达

目的 探讨松弛素样因子(RLF)在啮齿类动物的正常卵巢中有无表达以及与卵巢功能的关系，对RLF在大鼠卵巢动情周期、假孕模型中的表达进行研究。方法 采用RT-PCR方法。结果 在成年大鼠整个动情周期中都有RLF的表达，RLF的表达强度在动情前期、动情期卵巢较强，动情间期和动情后期卵巢较弱；未成年大鼠，激素处理使卵泡发育至窦前期、排卵前期时，RLF呈现持续的强表达，在黄体早期RLF的表达明显升高，而黄体中期、黄体晚期中RLF表达下降。结论 RLF与卵泡发育、排卵、黄体形成和退化密切相关。     

卵巢和输卵管

051702RLF mRNA在不同阶段大鼠卵巢中的表达/程丹玲…∥哈尔滨医科大学学报·—2005,39(1)·—4~13本实验采用RT-PCR方法检测松驰素样因子(RLF)在啮齿类动物的正常卵巢中有无表达并探讨其与卵巢功能的关系,对RLF在大鼠卵巢动情周期、假孕模型中的表达进行研究。结果在成年大鼠整个动情周期中都有RLF的表达,RLF的表达强度在动情前期、动情期卵巢较强,动情间期和动情后期卵巢较弱;未成年大鼠,激素处理使卵泡发育至窦前期、排卵前期时,RLF呈持续的可表达,在黄体早期RLF的表达明显升高,而黄体中期、黄体晚期中RLF表达下降。作者认…     

转录因子Ets-1在大鼠动情周期卵巢中的表达

目的检测转录因子Ets-1在大鼠动情周期卵巢组织中的表达规律，探讨其在卵泡发育、黄体形成及退化中的作用。方法分别在动情周期的不同时期收集大鼠卵巢标本，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化的方法观察Ets-1 mRNA在大鼠动情周期各不同时期表达水平的差异，以及Ets-1蛋白在大鼠动情周期卵巢组织中的表达分布情况。结果RT—PCR结果显示，Ets-1 mRNA在大鼠动情周期各不同时期均有表达，卵泡发育过程中Ets-1 mRNA表达逐渐增强，在动情前期表达最强，动情后期最弱；免疫组化结果显示，Ets-1蛋白在卵巢各级卵泡和黄体中表达，主要表达于卵母细胞、颗粒细胞和黄体细胞。结论Ets-1可能在大鼠动情周期中的卵泡发育、黄体生成及退化过程中起着重要的调节作用。     

罗格列酮对高胰岛素血症大鼠卵巢的影响

目的：探讨罗格列酮对高胰岛素血症大鼠卵巢的影响及作用机制.方法：18只成年雌性SD大鼠随机分成3组：正常对照组、高胰岛素血症组、罗格列酮干预组.建立模型,药物干预后,测定空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、HOMA-IR指数及血睾酮（T）水平,观察卵巢病理变化,并采用免疫组化方法检测卵巢11β-羟基类固醇脱氢酶1型（11β-HSD-1）的表达.结果：（1）与高胰岛素血症组比较,干预组大鼠血FINS显著降低（P＜0.01）,T、HOMA-IR指数均下降（P＜0.05）.（2）高胰岛素血症组卵巢各级发育卵泡减少,成熟卵泡几乎未见,间质细胞增生.干预组各级发育卵泡增多,间质正常,可见成熟卵泡.（3）免疫组化显示高胰岛素血症组卵巢间质11β-HSD-1表达增高（P＜0.01）,干预组表达下降（P＜0.01）.结论：罗格列酮可抑制卵巢11β-HSD1表达,解除高胰岛素血症所致的卵泡发育阻滞现象,抑制间质细胞增生,恢复卵巢排卵功能,这些作用可能部分与其改善IR有关.     

核受体NR4A1蛋白在大鼠卵泡发育中的定位及其表达规律

目的：通过研究核受体NR4A1蛋白在正常雌性SD大鼠不同卵巢功能周期和不同发育阶段卵泡及黄体细胞中的表达，推测其在卵泡发育中的生物学作用。方法：利用阴道涂片的方法，按不同的卵巢功能周期将实验大鼠24只分为四组，采集不同时期卵巢标本，采用免疫组织化学方法观察卵巢中NR4A1蛋白的定位及其表达情况。结果：NR4A1蛋白主要表达于卵巢卵泡膜细胞和黄体细胞胞质中，且在成熟卵泡卵泡膜细胞的表达量显著高于生长卵泡（P〈0．01）；在新鲜黄体细胞中表达量最高，显著高于动情前期和动情期的生长卵泡和成熟卵泡以及陈旧黄体细胞中的表达水平（P〈0．01）。结论：核受体NR4A1蛋白表达与卵泡的发育、成熟、闭锁、黄体萎缩有明显的相关性。     

肥胖通过抑制SIRT1信号加速大鼠卵泡的发育与消耗

目的：研究肥胖与能量限制（CR）对大鼠卵泡发育和卵巢寿命的影响及其作用机制。方法：雌性SD大鼠随机分为对照（NC）组（自由取食）、高脂（HF）组（自由取食添加20%猪油的标准饲料）、CR组（摄食NC组70%的饲料）,每周测重,每天检测进食量和阴道涂片观察大鼠动情周期;苏木精-伊红染色观察卵泡发育和各级卵泡计数,Western blot检测SIRT1和其下游靶分子FOXO3a蛋白表达水平。结果：HF组体质量、内脏脂肪和卵巢质量均高于NC和CR组（P〈0.05）。HF组存活卵泡总数与NC组比无统计学意义,但原始卵泡数（22.1±0.7）及比例（10.3%±0.2%）相对于NC组（43.6±0.6,23.0%±0.2%）显著减少（P〈0.05）,而发育卵泡数（106.8±2.5 vs 81.0±1.8;P〈0.01）、闭锁卵泡数（79.2±0.9 vs 63.6±1.0;P〈0.01）和黄体数（36.1±1.4 vs 20.5±1.8;P〈0.05）均增多。CR组存活卵泡总数（138.9±1.2）、黄体数（28.6±1.5）和原始卵泡数（62.8±1.4）及比例（32.7%±0.4%）均显著增加,闭锁卵泡数（53.2±0.9）及比例（27.4%±0.3%）均减少。Western blot结果显示HF组卵巢SIRT1和FOXO3a蛋白表达低于NC组（P〈0.05）,而CR组SIRT1和FOXO3a表达高于NC组（P〈0.05）。结论：肥胖可能通过抑制SIRT1信号加速卵巢卵泡的发育与消耗,从而导致卵巢早衰;相反CR可能通过激活SIRT1信号抑制原始卵泡的发育启动以及各级卵泡的发育与闭锁,保持卵巢中卵泡的储备量,以此延长卵巢寿命。     

PCOS大鼠卵巢中 kisspeptin／kiss1r 系统的表达变化及对卵泡发育的影响

目的：对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠卵巢中kisspeptin／kiss1r系统的表达变化及对卵泡发育的影响进行研究。方法采用腹腔注射来曲唑构建PCOS大鼠模型,酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清中性激素水平,苏木精‐伊红（H‐E）染色检测卵巢的形态学改变,免疫组化检测卵巢中kisspeptin／kiss1r、卵泡刺激素受体（FSHR）的蛋白水平变化。结果从灌胃后第10天开始,PCOS组大鼠体重明显增加,血清中睾酮（T）、黄体生成素（LH）的水平明显升高,卵泡刺激素（FSH）水平无明显改变;大鼠卵巢皮质中含有较多的小卵泡及闭锁卵泡,多数卵泡成囊性扩张,颗粒细胞层数明显减少;卵巢中kisspeptin／kiss1r、FSHR均在细胞质表达,kisspeptin／kiss1r主要在颗粒细胞、膜细胞和黄体中表达,而FSHR仅表达在颗粒细胞。PCOS组卵巢中kisspeptin／kiss1r、FSHR表达明显减少。结论在PCOS卵泡发育中,卵巢表达的kisspeptin／kiss1r系统发挥重要的作用,为PCOS的临床治疗和基础研究提供新思路。     

内皮素—1在大鼠卵巢内的分布

在研究用免疫细胞化学的方法观察了内皮素-1（endothelin-1,ET-1）在大鼠卵巢内的分布。结果：在未成年大鼠卵巢可见到ET-1免疫染色阳性颗粒分布在卵泡的外周膜细胞；成年动情前期大鼠卵巢ET-1阳性颗粒主要分布在卵泡或黄体周围的膜细胞，亦分布在卵泡血管内皮细胞中；假孕大鼠和妊娠大鼠卵巢可观察到ET-1免疫染色阳性颗粒分布在膜细胞和黄体中央腔内，妊娠10d大鼠卵巢内膜细胞染色的阳性反应较妊娠5d的大鼠显著增强，黄体中央腔内染色呈较强的阳性反应，提示ET-1可能参与卵泡发育、卵巢颗粒细胞机能和黄体退化过程的调控。     

雷帕霉素通过抑制mTOR信号延长成年雌性大鼠卵巢的寿命

目的探讨雷帕霉素对成年雌性大鼠卵泡发育及卵巢寿命的影响,并研究mTOR信号在其中的作用。方法将16只8周龄雌性SD大鼠随机分为对照组和雷帕霉素干预组,观察两组大鼠动情周期的变化;10周后取大鼠卵巢,组织切片经苏木精-伊红染色,计数不同发育阶段的各级卵泡数;用蛋白免疫印迹（Western-blot）检测卵巢中mTOR和其磷酸化的靶分子S6K的蛋白表达水平。结果雷帕霉素干预组大鼠健康卵泡数（225.0±16.2）显著多于对照组（178.4±5.3）,差异有统计学意义（P〈0.05）。其中原始卵泡数（132.5±13.7）是对照组（59.6±5.2）的2倍多,而窦状卵泡和闭锁卵泡数则明显低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。雷帕霉素干预组mTOR和P-P70S6K蛋白表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论雷帕霉素可能通过抑制mTOR信号,从而抑制原始卵泡向发育卵泡转化,保存原始卵泡储备,由此使卵巢的寿命延长。     

人睾丸发生过程中表皮生长因子受体表达的研究

目的 :研究表皮生长因子受体 (EGFR)在人胚胎睾丸发生过程中的表达。方法 :收集 30例 12～ 32周龄胎儿睾丸标本 ,免疫组织化学 ABC法染色检测 EGFR,以正常羊血清代替一抗为阴性对照 ,光镜观察。结果 :EGFR在人胚胎睾丸间质细胞、支持细胞、管周肌样细胞呈阳性表达 ,曲细精管内精原细胞未见表达 ;EGFR在 12周龄睾丸组织未见表达 ,16周时是表达的高峰 ,此后呈逐渐下降趋势 (P<0 .0 5 )。结论 :EGF可能通过与其受体结合在人睾丸发生过程中起重要作用。     

人胎儿发生过程中PCNA在睾丸组织细胞的表达

目的:观察人胎儿发生过程中PCNA在睾丸组织细胞的表达特征，探讨PCNA在睾丸发生中的作用。方法：用SP免疫细胞化学技术检测了人胎儿12－32周睾丸间质细胞、支持细胞、生殖细胞PCNA阳性细胞表达率。结果：PCNA在胎儿睾丸间质细胞、支持细胞、生殖细胞有不同程度表达，16－20周为表达高峰，阳性细胞核为桔黄色或棕黄色，随着胎龄的增长呈逐渐下降趋势（P＜0．01）。结论：人胎儿发育过程中PCNA在睾丸间质细胞、支持细胞、生殖细胞有不同程度的表达。     

人胎儿不同发育时期睾丸间质细胞的增殖与凋亡

目的:观察不同胎龄人胎儿睾丸间质细胞增殖与凋亡的特征和规律,探讨二者在睾丸发生中的意义。方法:利用SP免疫细胞化学方法和改进的石蜡切片原位末段标记法(TUNEL法)观察了人胎儿12～32周龄睾丸间质细胞增殖与凋亡阳性细胞表达率。结果:细胞凋亡在胎儿16～32周龄睾丸间质细胞呈阳性表达,16～20周为表达高峰,阳性细胞定位于细胞核为桔黄色或棕黄色;PCNA在胎儿16～20周龄睾丸间质细胞呈阳性表达,16～20周为表达高峰,阳性细胞核为桔黄色或棕黄色,随着胎龄的增长呈逐渐下降趋势(P<0.01)。结论:细胞增殖与凋亡在人胎儿睾丸发育过程中有不同程度的表达;表明细胞增殖与凋亡在睾丸组织发育过程中起着重要的作用。     

卵巢上皮性癌PTEN和PCNA的表达

目的: 探讨卵巢上皮性癌中PTEN和PCNA蛋白的表达及相关性. 方法: 采用免疫组织化学SABC法检测了128例卵巢上皮性癌,46例卵巢良性肿瘤和20例正常卵巢组织中PTEN和PCNA的蛋白表达,分析不同组织中PTEN及PCNA表达的差异及二者的相关性. 结果: 卵巢上皮性恶性肿瘤中PTEN蛋白表达水平明显低于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,而PCNA蛋白表达水平与PTEN相反,随正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤和卵巢恶性上皮性肿瘤顺序依次增髙,两者表现出明显的负相关(r=-0.511, P=0.000),且PTEN和PCNA蛋白表达与病理分化程度及临床分期有关(P<0.05). 结论: PTEN蛋白的表达下降与卵巢癌的发生、发展相关,而PCNA蛋白的表达增强则与卵巢癌组织的增殖及恶性程度有关.     

急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞白细胞介素18mRNA的表达及其意义

目的：动态观察急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡巨噬细胞白细胞介索-18(IL-18)mRNA表达的变化,初步探讨IL-18mRNA的变化与ALI发生、发展的关系。方法：采取创伤性休克手段建立ALI大鼠动物模型,采用RT-PCR方法,检测肺泡巨噬细胞IL-18mRNA的表达。结果：正常大鼠肺泡巨噬细胞表达一定水平的IL-18mRNA,而遭受创伤性休克打击后,肺泡巨噬细胞IL-18mRNA表达迅速升高,4h达高峰,8h后即恢复到正常水平。结论：正常大鼠肺泡巨噬细胞可表达一定水平的IL-18mRNA,在ALI早期,IL-18mRNA表达异常增高,可能引起过度炎症反应,从而促进ALI的发生。     

GLUT4mRNA在非胰岛素依赖型糖尿病大鼠心肌组织中的表达

目的：研究非胰岛依赖型糖尿病（NIDDM）大鼠心肌组织葡萄糖转运体4（glucose transporter4,GLUT4)mRNA表达变化。方法：制备NIDDM大鼠模型,用Northern blotting方法测定心肌组织中GLUT4mRNA表达量。结果：NIDDM大鼠心肌组织GLUT4mRNA表达显著低下,仅为对照组的54％（P＜0．01）。结论：NIDDM大鼠心肌GLUT4mRNA表达量低下,该反应与NIDDM大鼠体内胰岛素分泌总体水平低下有关。     

bFGF预处理对Iso致大鼠心肌损伤及Fas/FasL系统的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对异丙基肾上腺素(Isoprenaline，Iso)致大鼠心肌损伤心肌细胞凋亡及Fas／FasL系统的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成三组：对照组、Iso损伤纽、bFGF预处理组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测Fas、FasL、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显上调，bFGF预处理组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显下调。结论：bFGF可通过抑制Fas、FasL、Caspase-3的蛋白及mRNA表达，减少心肌细胞凋亡而减轻保护大鼠的心肌损伤。     

邻苯二甲酸酐哮喘大鼠模型制备及其肺组织中细胞间粘附分子-1 mRNA的表达

目的:制备邻苯二甲酸酐(phthalic anhydride, PA)大鼠哮喘模型,探讨细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)与PA哮喘气道炎症的关系.方法:用PA免疫大鼠制备哮喘模型,观察哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的变化及支气管肺组织的病理改变;用Northern杂交方法检测哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA的表达.结果:哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞数较对照组显著增加,支气管肺组织炎性细胞浸润程度较对照组增加,支气管粘膜皱缩加重;哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA 比对照组表达增高,表达量与炎性细胞的改变呈显著正相关.结论:哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA表达量的增高不仅与哮喘气道炎症的发生有关,还与哮喘气道炎性细胞浸润的严重程度有密切关系.     

Podocalyxin在大鼠嘌呤霉素肾病模型中的表达及其意义

目的:研究大鼠嘌呤霉素肾病(PAN)模型中podocalyxin的表达,探讨其在蛋白尿发生中的意义.方法:建立PAN模型,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,免疫荧光法检测podocalyxin在肾脏的表达与分布.结果:①PAN 4 d组大鼠24 h尿蛋白量较对照组升高(P＜o.01),PAN 7 d组达高峰(P＜0.001),于28 d逐渐下降至正常.②透射电镜显示PAN 4 d组大鼠足突部分融合,PAN 7 d组大鼠足突广泛融合,PAN 28 d组大鼠足突形态有所恢复.③免疫荧光显示podocalyxin在肾小球表达,PAN 4 d组podocalyxin的表达较对照组降低(P＜0.05).PAN 7 d组表达明显低于对照组(P＜0.01).PAN 28 d组podocalyxin的表达明显高于PAN 7 d组(P＜0.01),与蛋白尿产生明显相关.结论:大鼠PAN模型中,podocalyxin的表达减少可引起足突融合,并与蛋白尿产生密切相关.     

急性高眼压兔眼视网膜中过氧亚硝基阴离子的表达及葛根素对其表达的影响

目的探讨过氧亚硝基阴离子在急性高眼压兔眼视网膜中的表达及其损伤机制,并评价葛根素对其表达的影响。方法27只新西兰大白兔,随机分为正常对照组、模型组及治疗组(耳缘静脉注射葛根素),通过前房灌注建立急性高眼压模型,观察视网膜形态学变化,采用原位缺口末端标记法检测高眼压后6、12、247、2 h视网膜中凋亡细胞,应用免疫组织化学方法检测视网膜中过氧亚硝基阴离子的表达。结果模型组6 h时神经纤维层和内丛状层明显水肿,24 h视网膜变薄、神经节细胞变性、核固缩;凋亡细胞于6 h时少量表达,24 h达到高峰,72 h减少;过氧亚硝基阴离子的表达趋势与凋亡细胞一致。治疗组视网膜水肿及神经节细胞变性、核固缩程度较轻;细胞凋亡及硝基酪氨酸的表达趋势同模型组,但表达均明显低于模型组(P<0.05)。结论急性高眼压兔眼视网膜中过氧亚硝基阴离子的表达增多,并参与介导神经节细胞凋亡,葛根素通过其抗氧化作用抑制过氧亚硝基阴离子的表达,在一定程度上保护神经节细胞。