乏氧和营养缺乏及低pH诱发中国仓鼠V79细胞抗药性

本实验结果表明，乏氧，营养缺乏和低ｐＨ都能使Ｖ７９细胞对亚德里亚霉素（ＡＤＲ）产生抗性，提示实体瘤内此类细胞可能是影响化疗效果的重要因素。乏氧细胞对活性氧的敏感性降低以及其ＡＤＲ抗性不为钙通道阻断剂所逆转，说明其抗药机理可级机理可能与质膜有关，面晃同于多药抗性（ＭＤＲ）。     

乙型肝炎患者AMLR及非T细胞Ia抗原表达

本文用氚标胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法检测１０２例各种类型乙肝病毒感染者自身混合淋巴细胞反庆（ＡＭＬＲ）、并以单克隆抗体（ＭｃＡｂ）Ｗｕ３５（ＨＬＡ－ＤＲ）和Ｗｕ２２（ＨＬＡ－ＤＱ），经ＰＡＰ免疫酶组化技术测定非Ｔ细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ及ＨＬＡ－ＤＱ抗原。结果提示乙肝患者ＡＭＬＲ降低与刺激细胞表面ＤＲ和ＤＱ抗原表达障碍有密切关系，与反应性Ｔ细胞无关。这可能是乙型肝炎疾病过程中细胞免疫功能障碍     

川芎嗪逆转肿瘤抗药性与谷胱甘肽过氧化物酶的关系

采用５，５′一二硫对硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）直接法对艾氏腹水癌（ＥＡＣ）及对阿霉素产生抗药性的ＥＡＣ耐药细胞（ＥＡＣ／ＡＤＲ）内谷胱甘肽过氧化物酶的活性进行测定。结果，ＥＡＣ／ＡＤＲ细胞内谷胱甘肽过氧化物酶的活性较ＥＡＣ细胞明显增高，分别依次为：（３７８±０１５）Ｕ及（０２９±００５）Ｕ；川芎嗪不同剂量与阿霉素合用，则能使ＥＡＣ／ＡＤＲ细胞部分恢复其敏感性，且谷胱甘肽过氧化物酶的活性也随之降低。结论：川芎嗪降低ＥＡＣ／ＡＤＲ细胞内谷胱甘肽过氧化物酶的活性，可能是其逆转肿瘤抗药性的机制之一。     

自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞缺氧预处理的延迟保护作用

目的；观察缺氧预处理（ＰＣ）对于自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）缺氧复氧（Ｈ／Ｒ）损伤的延迟保护作用，并探讨其可能机制，方法：对ＶＳＭＣ于缺氧ＰＣ２４ｈ后进行Ｈ（２ｈ）／Ｒ（１ｈ）结束实验时测定其Ｈ／Ｒ后细胞存活率，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放和ＡＴＰ含量，并测定其金属硫蛋白（ＭＴ）量，结果：缺氧ＰＣ明显减轻Ｈ／Ｒ造成的ＳＨＲ的ＶＳＭＣ存活率下降，ＡＴＰ耗竭和ＬＤＨ释放，并使细胞内     

过敏性接触性皮炎皮损部位细胞HLA—DR和CD45Ro抗原的表达

目的：观察ＨＬＡ－ＤＲ和ＣＤ４５Ｒｏ抗原法在过敏性接触性皮炎（ＡＣＤ）患皮损细胞上的表达。方法：ＡＣＤ患１８例，正常对照３例，应用免疫组织化学方法，结果：ＡＣＤ皮损单一核细胞以Ｔ细胞为多，角朊细胞（ＫＣ）在ＡＣＤ中可异常表达ＨＬＡ－ＤＲ，且在表皮损害严重部位有ＨＬＡ－ＤＲ，ＫＣ数增多，ＨＬＡ－ＤＲ，ＫＣ数与对应对真皮中ＨＬＡ－ＤＲ＾＋Ｔ细胞数呈正相关，结论：（１）ＨＬＡ－ＤＲ＾＋ＫＣ数增多伴有     

过敏性接触性皮炎皮损部位细胞HLA-DR和CD45Ro抗原的表达

目的：观察ＨＬＡＤＲ和ＣＤ４５Ｒｏ抗原在过敏性接触性皮炎（ＡＣＤ）患者皮损细胞上的表达。方法：ＡＣＤ患者１８例，正常对照３例。应用免疫组织化学方法。结果：ＡＣＤ皮损单一核细胞以Ｔ细胞为多，角朊细胞（ＫＣ）在ＡＣＤ中可异常表达ＨＬＡＤＲ，且在表皮损害严重部位有ＨＬＡＤＲ＋ＫＣ数增多，ＨＬＡＤＲ＋ＫＣ数与对应真皮中ＨＬＡＤＲ＋Ｔ细胞数呈正相关。结论：（１）ＨＬＡＤＲ＋ＫＣ数增多伴有表皮炎症反应程度的加重，（２）活化Ｔ细胞可刺激ＫＣ表达ＨＬＡＤＲ。     

预处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响及其机理探讨

目的观察预处理（ＰＣ）对乳鼠心肌细胞缺氧复氧（Ａ／Ｒ）损伤的影响，并探讨其机理。方法采用心肌细胞Ａ／Ｒ损伤模型，用短暂缺氧进行预处理。结果预处理能提高Ａ／Ｒ后心肌细胞存活率，减少细胞ＭＤＡ产生及ＬＤＨ和蛋白质的漏出，激活心肌细胞ＰＫＣ活性。ＰＫＣ抑制剂完全阻断了ＰＣ的细胞保护作用。结论离体心肌细胞存在ＰＣ保护现象，其保护机理与ＰＫＣ激活有关     

卵巢癌细胞株耐药谱的体外实验研究

用卵巢癌细胞系Ａ２７８０在体外分别与化疗药物长春新碱（ＶＣＲ）、顺铂（ＤＤＰ）和阿霉素（ＡＤＭ）作用，获得Ａ２７８０／ＶＣＲ，Ａ２７８０／ＤＤＰ和Ａ２７８０／ＡＤＭ３个耐药细胞亚株，通过体外细胞毒性实验（ＭＴＴ法），观察Ａ２７８０与药物作用后的耐受情况及耐药细胞株对１０种化疗药物的敏感性。结果：三株细胞对ＶＣＲ、ＤＤＰ和ＡＤＭ均有耐药，对１０种作用机制不同的化疗药的耐药指数相差很大。提示：三株卵巢     

肿瘤化疗药物对人LAK细胞活性的影响

用四氮唑（ＭＴＴ）法分别检测顺氨氯铂（ＰＤＤ），丝裂霉素－Ｃ（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＭＤ）、氟尿嘧啶（５－Ｆｕ），阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ），长春新碱（ＶＣＲ）对ＩＬ－２诱导人外周血ＬＡＫ细胞活性的影响，及其与ＬＡＫ细胞对胃癌细胞的相加杀伤作用。①ＭＭＣ、ＡＤＭ、５－Ｆｕ、ＶＣＲ对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性稍有下降，Ａｒａ－Ｃ能抑制ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性，ＰＤＤ对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性明显提高。     

维甲酸诱导分化小鼠淋巴瘤SACIIB_2克隆细胞的作用和机理

研究了ＲＡ对ＳＡＣＩＩＢ２克隆细胞的促分化作用。结果表明，受ＲＡ处理后，ＳＡＣ－ＩＩＢ２克隆细胞形态的改变及生长抑制不因培养液中去除ＲＡ而立即消失，瘤细胞酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）染色阳性率明显升高，细胞内嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）活性明显升高，而腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）活性明显降低，末端脱氧核苷酰转移酶（ＴｄＴ）的表达有所减弱，而ＲＡ处理前后瘤细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶谱型无明显改变，提示ＲＡ对ＳＡＣＩＩＢ２克隆细胞有一定程度的诱导分化作用。对ＲＡ处理前后ＳＡＣＩＩＢ２，细胞３－ｆｏｓ基因表达情况也作了初步观察和分析。     

长春新碱诱导人脑胶质瘤细胞的耐药性

本文报告以细胞周期特异化疗药长春新碱（ＶＣＲ）对人脑胶质瘤Ｕ２５１ＭＧ细胞进行体外分步诱导法造成细胞的耐药性。细胞集落实验表明，经ＶＣＲ诱导的胶质瘤细胞Ｕ２５１ＶＲ—４０在１０～４０ｎｇ／ｍＬＶＣＲ培养液中，其细胞形成相当率是未诱导组Ｕ２５１ＭＧ细胞的２～１３倍（Ｐ＜０．０１）。同时，耐ＶＣＲ的Ｕ２５１ＶＲ—４Ｑ细胞对阿霉素（ＡＤＭ）亦有交叉耐药性，但与卡氮芥（ＢＣＮＵ）无耐药性产生。另外，５ｕｇ／ｍＬ尼卡地平（ＮＣＤＰ）能使其反转成药敏细胞。诱导过程中还发现，Ｕ２５１ＭＧ胶质瘤细胞直接在高浓度ＶＣＲ（６０ｎｇ／ｍＬ培养液中被杀伤和发生明显形态变化后，仍有少数细胞在无化疗药培养环境７～１０天可以复苏并且再增殖。研究结果不仅表明ＶＣＲ诱导的胶质瘤细胞能够产生多药耐受性（ＭＤＲ），而且提示该胶质瘤细胞中可能还存在一种修复微管系统的抗药机理。     

葡萄籽多酚对人乳腺癌细胞株MCF-7/ADR的体内外耐药逆转作用

目的：研究葡萄籽多酚(grape seed polyphenol，GSP)对人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7／ADR的体内外耐药逆转作用。方法：采用MTT法检测1．2mg/L和2．4mg/L GSP对MCF-7／ADR的体外耐药逆转倍数。建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型，实验分为4组：对照组，GSP组，阿霉素(adriamycin，ADR)组和ADR GSP组，观察GSP对肿瘤细胞的体内耐药逆转作用；采用流式细胞术测定不同用药组P-糖蛋白(Pgp)表达变化。结果：体外1.2mg／LGSP即可有效逆转耐药，2．4mg／LGSP的逆转倍数为9．44；体内裸鼠抑瘤实验显示，GSP有一定抑瘤作用，联用ADR可显著抑制肿瘤生长，20mg/kg GSP可有效逆转CF-7／ADR细胞的耐药性，抑瘤率为54．64％。流式细胞术结果显示，联用GSP与ADR组肿瘤细胞Pgp表达明显低于单独使用ADR组。结论：GSP能在体内外逆转MCF-7／ADR细胞的耐药性，此作用可能是通过抑制Pgp表达实现的。     

中西药联合对胃癌SGC-7901/ADR细胞MRP介导的耐药性研究

目的：探讨中西药联合逆转胃癌多药耐药亚系SGC-7901/ADR细胞MRP介导的耐药性作用。方法：以SGC-7901/ADR细胞为靶细胞,以不加药组为阴性对照组,5-FU组、斑贞1号组、班贞1号＋5-FU组、班贞1号＋5-FU＋TMP组为实验组,采用半定量RT-PCR法检测SGC-7901/ADR细胞在不同药物作用下MRP mRNA的表达情况。结果：5-FU组与阴性对照组比较,耐药细胞MRP mRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）,提示MRP参与SGC-7901/ADR细胞对5-FU的多药耐药性;其他实验组组间比较及与阴性对照组比较,MRP mRNA表达差异均有统计学意义（P〈0.01）,中西药联合组（斑贞1号＋5-FU＋TMP）MRP mRNA表达量最低（仅为0.07）。结论：中西药联合可以克服SGC-7901/ADR细胞由MRP介导的多药耐药性,为当前胃癌的治疗提供了新的理论依据。     

氧化苏木素抑制ABCB1介导肿瘤多药耐药活性的研究

目的探讨氧化苏木素对ABCBl介导的肿瘤多药耐药活性的影响抑制。方法MTT试验检测氧化苏木素对人白血病K562及其耐药K562／ADR（ABCBl高表达）细胞的细胞毒作用;AnnexinV／PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生。结果氧化苏木素对耐药的K562／ADR细胞具有高效的细胞毒作用,氧化苏木素对K562和K562／ADR细胞的IC50值分别为（5．45±0．36）和（5．62±0．43）μmol／L,二者无显著性差异。流式细胞仪检测凋亡的结果显示：0、5、10、20Ixmol／L的氧化苏木素分别处理K62和K562／ADR细胞后。K562细胞的凋亡率从（3．41±0．55）％依次升高到（24．67±2．08）％、（40．33±3．51）％和（66．67±3．64）％,K562／ADR细胞的凋亡率从（2．82±0．57）％依次升高到（23．01±3．60）％、（38．23±4．06）％和（65．77±5．51）％。结论氢化苏木素克服了ABCBl介导的肿瘤多药耐药活性．诱导耐药细胞凋亡是茸作用的机制．     

PEP-1-SOD1融合蛋白预处理对大鼠骨髓间充质干细胞在缺氧无血清条件下的保护作用

目的:研究PEP-1-SOD1融合蛋白转导入大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的能力及其在缺氧无血清条件下对MSCs的保护作用。方法:将纯化后的SOD1和PEP-1-SOD1蛋白分别加入到培养及鉴定后的第3代MSCs中,免疫荧光法和Western blot分析PEP-1-SOD1穿透入MSCs的变化,黄嘌呤氧化酶法分析其SOD酶活性。将2.5μmol/L PEP-1-SOD1预处理MSCs 45 min后去除PEP-1-SOD1,缺氧无血清条件下再处理24 h,Annexin V/PI双染标记,流式细胞术分析MSCs凋亡情况。结果:PEP-1-SOD1融合蛋白可以转导入MSCs,呈时间和剂量依赖性分布于胞浆和胞核,缺氧无血清条件下MSCs凋亡率明显降低(P<0.05)。结论:PEP-1-SOD1融合蛋白可以高效、稳定转导入MSCs,并对缺氧无血清所诱导的MSCs凋亡具有显著保护作用。     

蛋白激酶C活性、表达及亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药相关性的研究

目的研究多药耐药肿瘤细胞PKC活性、PKC亚型的表达和亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药的关系。方法MTT法检测敏感株KB和耐药株KBV200细胞的耐药性；印掺入法测定PKC的活性；Western blot法检测KBV200及其亲本KB细胞株PKC亚型的表达和亚细胞分布。结果长春新碱（VCK）和阿霉素（ADK）对KBV200细胞的IC50值分别高于KB细胞（P〈0．01）；耐药指数（RI）分别为65．03和19．8。KBV200细胞的膜组分、浆组分的PKC活性均较KB细胞高,KBV200细胞的总PKC活性是KB细胞的2．12倍。Western blot结果发现KBV200和KB细胞膜组分及浆组分均有PKCq的表达，且KBV200细胞的表达较KB明显增强。PMA可升高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性，降低浆组分PKC活性、表达（P〈0．01）；PMA可升高VCR、ADK对KBV200细胞的IC50值（P〈0．01）。SP可降低PKC活性；SP预孵育使PKCα膜组分和浆组分的表达均降低，可降低VCR、ADK对KBV200细胞的IC50值（P〈0．01）。结论KBV200细胞的PKC活性、表达、亚细胞分布与KB细胞有明显差别，这种差别可能与KBV200耐药性的变化密切相关，在PKC亚型中，PKCα的表达明显高于其他亚型，且高于亲本株，提示KBV200细胞中PKCα与多药耐药相关。     

Pokemon基因表达与胃癌耐药性的关系

目的 探讨okemon基因表达与胃癌细胞药敏性及耐药基因的关系.方法 取60例胃癌组织和癌旁组织石蜡标本,采用免疫组化技术检测组织中pokemon蛋白及耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)、生存素(survivin)的表达,并分析pokemon蛋白与其他4种蛋白的关系.采用磺酰罗丹明B(SRB)蛋白染色法检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、奥沙利铂(L-OHP)对胃癌细胞株SGC7901、胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR、胃上皮细胞株GES-1的抑制作用;qPCR及蛋白质印迹法检测上述3种细胞株中pokemon和耐药基因的表达.合成针对pokemon的siRNA并转染SGC7901/ADR细胞,检测转染前后SGC7901/ADR细胞的化疗药敏性及耐药基因的变化.结果 胃癌组织中pokemon、P-gp、MRP1、LRP、survivin蛋白的阳性表达率均高于癌旁组织(P＜0.05);pokemon蛋白表达与P-gp、survivin蛋白表达间存在正相关关系(r=0.385 2,P=0.002;r=0.342 4,P=0.007).Pokemon、P-gp、MRP1、survivin蛋白在SGC7901/ADR细胞株中的表达高于细胞株SGC7901及GES-1;SGC7901/ADR细胞株的耐药性最强,SGC7901次之,GES-1最弱(P＜0.01).Pokemon-siRNA转染SGC7901/ADR细胞后细胞中pokemon mRNA的表达明显受到抑制;转染后化疗药物对细胞的抑制能力增强,P-gp、survivin表达减弱(P＜0.05).结论 Pokemon与P-gp、survivin通过相互调控而促进胃癌耐药性的形成.Pokemon可能成为胃癌靶向治疗的候选基因.     

Effects of cigarette smoking,hypoxia and vasoactive mediators on the production of PGI2 and TXA2 in cultured pulmonary artery endothelial cells

Summary Effects of cigarette smoke extract (CSE) and some vasoactive mediators on the production of PGI₂ and TXA₂ in normoxic and hypoxic pulmonary artery endothelial cells (PAECs) in culture were studied. The production of PGI₂ in PAECs was inhibited by hypoxia or verapamil, but promoted by angiotensin II (A II), noradrenaline (NE) or platelet activating factor (PAF), while that of TXA₂ slightly increased except when treated with PAF. The effect of A II, NE, PAF and verapamil, however, was not influenced by hypoxia. CSE inhibited the production of PGI₂ in normoxic PAECs but did not further reduce 6-keto-PGF_1α in hypoxic PAECs medium. The results suggested that a) the production of PGI₂ during hypoxia might be stimulated by vasoactive mediators produced during hypoxia, not by hypoxia directly; b) the production and release of PGI, were related to intracellular calcium, c) the augmented production of PGI₂ might be one of the mechanisms in the pulmonary vasodilating role of PAF: and d) prostaglandin production might be associated with the alteration of hypoxic pulmonary vasoreactivity after cigarette smoking.     

原癌基因c-fos在人乳腺癌耐药株MCF-7/ADR中的表达及意义

目的探讨原癌基因c-fos在人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药形成中的作用。方法采用MTT法测定化疗药物阿霉素（adriamycin,ADR）、紫杉醇、依托泊甙对人乳腺癌敏感株MCF-7和耐药株MCF-7/ADR的IC₅₀;用real time PCR法检测MCF-7/ADR和MCF-7的c-fos mRNA表达差异;用逆转录PCR（RT-PCR）和Western blot法检测ADR对MCF-7中c-fos mRNA和蛋白表达的诱导作用。结果相对于MCF,MCF-7/ADR对ADR、紫杉醇、依托泊甙的耐药倍数分别为39.94,102.34和12.16;MCF-7/ADR中c-fos mRNA表达明显高于MCF-7;ADR可诱导MCF-7中c-fos mRNA和蛋白呈时间依赖性表达。结论 c-fos在MCF-7/ADR多药耐药中起重要作用,有可能成为耐药肿瘤诊断和治疗的新分子靶点。     

缺氧对大鼠心肌脂质过氧化与心肌酶学的影响

为了观察急性重度低压缺氧对心肌脂质过氧化及心肌酶学的影响,对39只成熟健康Wistar大鼠进行了急性低压缺氧实验.结果发现,心肌组织中脂质过氧化反应并无明显增强,仅心肌潜在抗氧化能力降低,但心肌酶活力显著增高,说明急性低压缺氧对心肌有一定损伤作用.鉴于心肌脂质过氧化反应无明显增强,提示心肌损伤与脂质过氧化无明显相关.心肌酶活力增高的原因,可能是急性缺氧对心肌细胞直接作用的结果.