血清糖化脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳测定法初探

β脂蛋白的非酶糖化（即糖化β－Ｌｐ）可促使动脉粥样硬化,而血清中糖化β－脂蛋白的浓度取决于高血糖的程度及病程。因此,测定血清中ｇＬｃ－β－Ｌｐ对糖尿病的动脉粥样硬化及微血管病的诊断具有重要的价值。我们参照ＣＬＩＮＣＨＥＭ．３６／ＩＫｕｎｉｏ等的方法对部分关键步骤做了改进,实验结果比较满意。１资料与方法１．１材料（１）ｐＨ８．６的Ｔｒｉｓ－巴比妥－巴比妥钠缓冲液（μ＝０．０６）;（２）０．１ｍｏｌ／Ｌ碳酸盐缓冲液（ＰＨ１０．３）;（３）５ｍｍｏｌ／ＬＮＢＴ溶液（ｐＨ１０．３）称取ＮＢＴ２０４．４３…     

改良琼脂糖凝胶电泳法测定血清LDH同工酶的应用

目的 寻求更加准确、简便、快速、实用的乳酸脱氢酶同工酶（LDH）测定方法。方法 据LDH同工酶等电点不同,选择琼脂糖胶作支持物,对以往LDH同工酶测定方法进行改进,将五型LDH同工酶进行分离并定量测定。结果 改进后的LDH同工酶测定方法稳定,区带清晰,重复性好,结果可靠,试剂可长期保存。结论 改良琼脂糖凝胶电泳法测定血清LDH同工酶应用前景良好。     

琼脂糖凝胶电泳法测定糖化血红蛋白及其临床应用

目的　采用琼脂糖凝胶电泳的方法测定糖化血红蛋白 (Hb Alc) ,了解 Hb Alc与空腹血糖的关系。方法　取正常人及糖尿病人 EDTA- K2抗凝全血 2 32例 ,制成血红蛋白溶液 ,使用法国 sebia公司 sebia HYDRASYS电泳仪及光密度计扫描仪 ,用琼脂糖凝胶进行电泳分离和光密度计扫描定量测定 Hb Alc;在全自动生化分析仪上用己糖激酶法测定空腹血糖。结果　对照组的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=5 .4 1± 0 .94 ,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=4 .92± 0 .87;糖尿病人的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=11.0 6± 4 .3,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=10 .86± 3.0 4 ,P<0 .0 1,血糖值与Hb Alc值有显著相关性 ,r=0 .985 ,回归方程 Y=1.10 15 x 1.815。结论　该方法标本用量少 ,分辨率高 ,重复性好 ,结果不受温度及胎儿血红蛋白的影响 ,Hb Alc可作为糖尿病控制的指标     

乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖凝胶电泳的改良

临床实验室测定乳酸脱氢酶（ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）同工酶的方法目前分为二类，一类是应用免疫抑制法在自动生化分析仪上测定，另一类是做各种载体的电泳来分离区带。我们对醋酸纤维膜和琼脂糖两种载体进行实验，改良了琼脂糖凝胶电泳的方...     

琼脂糖凝胶电泳法快速筛选轮状病毒

本文用琼脂糖凝胶电泳检测轮状病毒RNA,并与聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果相比较,结果43份聚丙烯酰胺凝胶电泳阳性的标本,琼脂糖凝胶电泳亦均为阳性。两种方法检测轮状病毒RNA的敏感度一致,而琼脂糖电泳省时、简便、经济。可作为一种快速方法用于轮状病毒感染的筛选和快速诊断。     

尿蛋白琼脂糖凝胶电泳及临床应用

1997年底我们引进了法国 Sebia公司的全自动电泳扫描系统 ,建立了尿蛋白琼脂糖凝胶电泳技术并应用于临床。现报告如下。1　仪器、试剂与方法1.1　 Hydrasys自动程控电泳系统 ,Hyrys光密度仪购自法国 Sebia公司 ;琼脂糖凝胶板、浓缩电泳缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品预染液购自 Sebia公司 ;15 %醋酸脱色液、15 %甘油贮存液自配。1.2　方法1.2 .1　尿蛋白定量 :磺基水杨酸—硫酸钠浊度法。1.2 .2　尿蛋白电泳 :收集 2 4小时新鲜尿液 ,蛋白浓度控制在 2 g/ L以内 ,尿液经预染液预染后 ,加 5μl样品于凝胶片加样槽中 ,扩散 10 m in,将加样端…     

尿蛋白琼脂糖凝胶电泳分析及临床应用

电泳法分离鉴定尿蛋白具有重要的临床意义。目前临床常用醋酸纤维素薄膜电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定尿蛋白。前一种电泳法虽操作简单,但敏感度低,后一种电泳法虽分辩率高,但操作繁琐。我们采用薄层平板琼脂糖凝胶电泳分离鉴定尿蛋白,既克服上述两种电泳法的缺点,又取得较好的效果,易于在一般实验室推广应用。     

谈琼脂糖凝胶电泳标本的拍摄方法

本文详细介绍了琼脂粮凝胶电泳标本的拍摄方法，并提出获得高质量图片的具体措施。     

血清中正常或偏低胆固醇冠心病患者的脂蛋白谱分析

目的　探讨血清总胆固醇 (TC)正常或低于平均水平的冠心病 (CHD)患者的脂蛋白谱特点。方法　观察诊断明确的男性CHD 2 2 5例 ,以年龄 ,生活水平相似的健康男子 2 2 5例为对照 ,均排除与脂代谢有关的疾病及用药 ,对血脂作多指标综合分析。结果　CHD患者中TC高于 5 17mmol/L者 10 8例 ( 4 8% ) ,低于此水平者 117例( 5 2 % ) ,高TC组的血脂特点以LDL -C和apoB增高为重 ,低TC组的特点是HDL -C偏低 ,尤以apoAI低下最明显 ,多数HDL -C低的病例并无TG增高 ,部分病例以低HDL(包括HDL -C·apoAI)为单一的血脂异常。结论　低TC组在LDL致动脉硬化作用明显减弱的情况下 ,低TC组在LDL致动脉硬化作用明显减弱的情况下 ,低HDL成为主要的 (独立的 )脂类危险因素     

琼脂糖脂蛋白电泳结合酶显色测定血清各脂蛋白中甘油三酯及其临床应用

目的 :建立一种定量各种脂蛋白中甘油三酯 ( TG)的简便方法。　 方法 :通过脂蛋白电泳分离脂蛋白 ,用 TG酶试剂 ( GPO- Trinder反应法 )与电泳后区带中 TG反应而呈色。在 52 0nm波长处扫描得各种脂蛋白区带中 TG的百分率。以总 TG浓度乘以各自百分率 ,得各脂蛋白中TG的含量。　 结果:与超离法比较相关系数分别为 HDL- TG:r=0 .873,VL DL- TG:r=0 .955,L DL - TG:r=0 .912。高、中、低浓度平均批内、批间变异系数 ( CV)分别为 :HDL - TG:9.93%、14.1% ;VL DL- TG:5.3%、7.1% ;L DL- TG:5.6%、7.0 7%。平均回收率分别为 HDL- TG:88.8% ,VL DL- TG:93.4 % ,LDL- TG:91.7%。　 结论 :该法简便易行 ,是精确定量脂蛋白中 TG的理想方法。该法测定 116例健康人及 54例冠心病患者的结果显示 :总 TG、L DL- TG、L DL- TG/ L DL- C比值为冠心病有价值的指标     

低密度脂蛋白胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇的比值与动脉粥样硬化的关系

目的探讨低密度脂蛋白胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇的比值(LDL-C/HDL-C比值)与早期动脉粥样硬化的关系。方法共连续收集2006年5月至2010年6月在第二军医大学长征医院贵宾诊疗科健康体检者1 320例,其中男性885例,女性435例,平均年龄(49.0±10.0)岁,利用多元逐步回归法了解LDL-C/HDL-C比值与颈动脉内中膜厚度的相关性。结果 LDL-C/HDL-C比值与颈动脉内中膜厚度独立相关(男性:β=0.067 3,P=0.005;女性:β=0.033 2,P<0.001),而且在女性患者中,即使LDL-C水平在合适范围内(<3.37mmol/L),该相关性仍然存在(β=0.100 9,P=0.015)。结论 LDL-C/HDL-C比值是颈动脉粥样硬化的独立危险因素;相对于LDL-C而言,LDL-C/HDL-C比值是一项更有价值的临床预测指标。     

高效液湘色谱检测高密度脂蛋白转运荷脂巨噬细胞内胆固醇的生物学活性

目的应用U937泡沫细胞模型建立一种新的检测高密度脂蛋白（HDL）外运细胞内胆固醇生物学活性的方法。方法将U937细胞与100μg／mL氧化低密度脂蛋白孵育36h后，分别用不同浓度高密度脂蛋白处理24h，应用高效液相色谱（HPLC）检测细胞内胆固醇和胆固醇酯含量。结果经氧化低密度脂蛋白处理后的U937细胞，HPLC检测细胞内总胆固醇增加，胆固醇酯含量大于胆固醇含量；经高密度脂蛋白处理后，细胞内胆固醇含量减少，不同厂家及不同批次的高密度脂蛋白外运胆固醇的生物学活性有所不同。结论经氧化低密度脂蛋白处理后的U937细胞可以作为检测高密度脂蛋白外运胆田醇生物学活性的方法。     

老年脑梗死患者血清胆固醇、高密度脂蛋白及其图谱的变化

目的观察老年脑梗死患者血清胆固醇、高密度脂蛋白及其图谱的变化。方法采用改良的双梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测118例老年脑梗死患者和60例健康老年人的血清脂蛋白谱(SLPG),同时测定血清总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量。结果与对照组比较,老年脑梗死组血清HDL-C含量[(1.0±0.3)mmol/L]显著降低(P<0.001),TC/HDL-C(5.3±1.4)显著增高(P<0.001),而TC 含量](5.0±1.5)mmol/L]则无显著统计学差异。老年脑梗死组SLPG异常率为86.4%,不管HDL-C含量降低与否,α脂蛋白在SLPG的表现均显著异常(P<0.001~0.05)。结论血清HDL-C水平降低、TC/HDL-C增高以及SLPG异常可能是老年脑梗死发病的危险因素,其中α脂蛋白图谱较HDL-C更具敏感性,而TC水平的预警作用可能不大。     

琼脂糖凝胶区带电泳应用于蛋白尿的分析

目的：运用琼脂糖凝胶区带电泳进行蛋白尿的分析。方法：采用血清琼脂糖凝胶区带电泳技术分析未经处理和处理后的蛋白尿样本。结果：通过对95例临床尿蛋白阳性标本进行琼脂糖凝胶区带电泳，可粗略区分出溢出性蛋白尿2例、选择性蛋白尿30例、非选择性蛋白尿63例，5例健康组未检出蛋白峰。结论：该法简便快速，在蛋白浓度较高时有很好的重复性，可用于尿蛋白的分析，经透析浓缩处理后的样本电泳效果更好。     

血清高密度脂蛋白胆固醇测定方法的评价

目的：为了探讨血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）各种测定方法的优劣性，选择更加符合临床要求的方法：方法：磷钨酸镁沉淀法（PTA－Mg^2 )法，改良磷钨酸镁沉淀法（简称改良法），聚乙二醇沉淀法（PEG法），选择性遮蔽法（直接测定法）结果：各种方法的批内精密度除PEG法外均小于5％，其中直接法小于2％，批间精密度除直接法小于2％外，余均大于5％，直接法，改良法与PTA－Mg^2 法测定结果一致性好，其相关系数r分别为0．988和0．990，在HDL－C浓度为2．85mmol/L范围内各种方法的线性均良好。结论：PTA－Mg^2 法准确性基本符合临床要求，成本低，适合于手工分析，直接法简便快捷，易操作，适于自动化分析。     

血清脂蛋白胆固醇电泳法与传统法的比较

目的 :比较电泳法与传统法在测定血清脂蛋白胆固醇中的优缺点。方法 :电泳法用Helena电泳系统测定 4种脂蛋白胆固醇 ,用磷钨酸 镁沉淀法或直接法测定高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C) ,用F 公式计算低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)。结果 :电泳法可清楚地分离 4种脂蛋白区带 ,6 8份正常人标本中 ,仅 6例可见LP(a)区带 ,占 8.82 %。血清HDL C ,LP(a) C ,VLDL C及LDL C参考值分别为 :1.16～ 2 .19,0～ 0 .2 2 ,0 .0 7～ 0 .4 7及 1.86～ 3.4 6mmol·L-1。电泳法与沉淀法测定HDL C ,二者比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但用F 公式计算LDL C ,则二者比较差异有显著性 (P<0 .0 5 )。电泳法与直接法比较 ,无论是HDL C或LDL C的测定均差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :F 公式计算LDL C不适宜临床应用。电泳法一步直接定量测定 4种脂蛋白胆固醇浓度 ,方法简便 ,适宜常规使用     

3种低密度脂蛋白胆固醇均相测定方法的评价

目的 :对表面活性剂清除法 (SUR法 )、可溶性反应法 (SOL法 )和过氧化氢酶清除法 (CAT法 )3种低密度脂蛋白胆固醇 (LDL -C)均相测定方法进行评价。方法 :3种均相法与聚乙烯硫酸盐 (PVS)沉淀法、Friedewald公式计算法进行比较 ,分析各自的精密度、准确性、特异性和干扰因素。结果 :3种均相法均具有较好的精密度 (批内、批间、总变异系数均<3.2% ) ,3种均相法线性范围均可达10.22mmol/L ,最低检测浓度为0.02～0.03mmol/L ,回收率为98.4 %～101.9 %。3种均相法与PVS法、Friedewald公式计算法相关良好 (相关系数为0.9246～0.9974)。高密度脂蛋白(<4.12mmol/L)、血红蛋白(<2g/L)、甘油三酯(<11.4mmol/L)、胆红素(<200mg/L)对3种均相法的检测无影响 ,而CAT法受高TG、高血红蛋白、高胆红素影响均较小。结论 :3种LDL -C均相测定法简便、快速、准确 ,适于临床实验室自动化分析。     

A possible mechanism linking hyperglycemia and reduced high-density lipoprotein cholesterol levels in diabetes

This study investigated the role of glucose in the biogenesis of high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C).Mouse primary peritoneal macrophages were harvested and maintained in Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM) containing glucose of various concentrations.The cells were divided into 3 groups in terms of different glucose concentrations in the cultures:Control group(5.6 mmol/L glucose),high glucose concentration groups(16.7 mmol/L and 30 mmol/L glucose).ATP-binding cassette transporter A1(ABCA1) mRN...     

两种高密度脂蛋白胆固醇均相测定法的临床评价

目的对选择性抑制法(PPD法)和PEG修饰法(PEGME法)两种高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均相测定法进行临床评价。方法将上述两种方法与传统的磷钨酸镁沉淀法(PTA-Mg2 法)进行比较,分析各自的精密度、准确性、特异性和干扰因素。结果上述两种均相测定法均具有较好的精密度(批内、日间及总变异系数均小于4%),两均相法与PTA-Mg2 法(X)具有良好相关性犤PPD法(Y):Y=0.9316X 0.1063,相关系数r=0.9762;PEGME法(Y):Y=0.9106X 0.1368,r=0.9894犦。两法线性范围均较宽(线性均至4.14mmol/L),最低检测浓度均为0.08mmol/L,回收率为94.1%～106.2%。两均相法基本不受极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白和血红蛋白的影响(偏差均小于5%),甘油三酯浓度在17.0mmol/L以下对两法基本无影响,胆红素高于200mg/L时可使两法测定结果偏低。结论两种HDL-C均相测定法简便、快速、结果准确,易于自动分析,适合在临床实验室常规检测应用。