rhBMP-2对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血恢复的促进作用

探究了人重组骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)对再障小鼠的治疗作用。采用5-FU联合白消安建立小鼠再障模型,通过干预rhBMP-2进行治疗。考察了各实验组小鼠白细胞数、骨髓单核细胞数、体重、存活率、脾系数、粒系-巨系细胞集落(CFU-GM)数以及骨髓单核细胞中CD34⁺细胞比例,进行股骨、脾脏HE切片分析。结果表明,相较于再障对照组,rhBMP-2治疗组小鼠的白细胞数、存活率、CFU-GM集落数及骨髓单核细胞数显著提高,并且骨髓单核细胞中的CD34⁺细胞含量也提高,显著改善脾脏功能和缓解骨髓抑制,证实rhBMP-2能够促进再障小鼠造血损伤的修复。     

经扩增的脐血细胞在小鼠体内短期造血重建的研究

目的 探讨体外扩增后人脐血细胞在小鼠体内的短期造血重建能力。方法 采用脾结节形成法和祖细胞培养等技术,观察受体小鼠外周血、脾脏和骨髓的短期造血恢复情况。结果 照射小鼠脐血移植后其生存时间延长,外周血象恢复加速。脾脏有多系细胞组成的造血结节(CFU-S-13d),移植后d30骨髓中培养出粒单系(CFU-GM)和红系祖细胞(CFU-E),且CFU-S、CFU-GM和CFU-E计数较新鲜脐血细胞组无明显差异。从30d活存的小鼠外周血液中检出了人核型血细胞。结论 经扩增的人脐血造血细胞同新鲜细胞一样能够在致死性照射小鼠体内短期造血重建。     

ABO血型不合骨髓移植的骨髓粒单祖细胞和造血功能的动态研究

作者通过两例ABO血型不合骨髓移植的骨髓粒单祖细胞(CFU-GM)和造血功能(外周血和骨髓)的定期连续观察,并与ABO血型相同的异基因骨髓移植比较,发现ABO血型不合骨髓移植不影响骨髓粒单祖细胞和造血功能恢复的速度,而骨髓CFU-GM恢复最快,可能成为植活的最早观察指标。     

血小板因子4的辐射防护作用

目的：研究血小板因子4(PF4)对全身照射小鼠的辐射防护作用．方法：实验分为两部分．第一部分．小鼠随机分为4组，第二部分分为3组，小鼠总数为70只．照射组和PF4保护组接受7．5Gy^60Coγ射线全身照射．观察小鼠30d存活率和存活天数．用自动细胞计数仪计数外周血细胞．测定骨髓单个核细胞数和CFU-GM的形成能力．用紫外分光光度计测定骨髓细胞内DNA的含量．用流式细胞仪测定细胞周期的变化．测定小鼠的体、脾脏和胸腺的质量．结果：PF4能够增加照射小鼠的生存率．增加骨髓细胞内．DNA的含量及骨髓单个核细胞数，提高CFU-GM的形成能力，降低造血细胞的增殖指数，增加照射小鼠的脾体比和胸体比．结论：PF4在小鼠全身照射前使用能够减少骨髓和淋巴组织的辐射损伤．可作为辐射防护剂．     

登革Ⅱ型病毒对人骨髓粒—单祖细胞生长及集落SCE影响的研究

目的：为探讨登革出血热患者粒细胞减少的原因。方法：采用人骨髓料-单系祖细胞（CFU-GM）培养和姊妹染色单体互换（SCE）技术，观察28例Ⅱ型登革病毒（D2V）对人骨髓CFU-GM生长及其集落SCE的影响。结果：与对照组比较，显示D2V感染组CFU-GM集落产率明显减少（P＜0．01），而CM-GM集落染色体工E率显著升高（P＜0．01）。结论：证实D2V能抑制人骨髓CFU-GM生长并损伤其染色体，揭示登革出血热患者粒细胞减少与CFU-GM受DV损伤有关。     

HLA单倍型相合骨髓移植的骨髓粒单祖细胞和造血功能的动态观察

本文报告1例HLA单倍型相合急性淋巴细胞白血病骨髓移植成功造血功能恢复情况。通过与HLA相合者比较,HLA单倍型相合骨髓移植后不影响骨髓粒单祖细胞(CFU-GM)和造血功能恢复速度;急性严重移植物抗宿主病(GVHD)可抑制CFU-GM生长和造血功能的恢复。骨髓CFU-GM测定不但是骨髓移植植活的最早观察指标,而且可能是骨髓抑制的最早反应。     

血必净注射液对2Gy照射小鼠造血系统的保护作用

目的:探讨血必净注射液对辐射诱导小鼠造血系统损伤的影响。方法:将ICR小鼠分为对照组、照射组、血必净组。对照组接受假照射,对其余两组进行2Gy全身照射。血必净组小鼠0.4ml/kg腹腔注射,照射前3d开始给药,持续给药8d。血必净末次给药24h后处死小鼠,取外周血和单侧股骨细胞进行计数,取胸腺和脾脏计算脏器指数,检测骨髓细胞CFU-GM。结果:与对照组比较,照射组小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞计数、胸腺和脾脏指数、CFU-GM均明显下降(P<0.05),而血必净组小鼠除胸腺指数外也均显著下降(P<0.05)。与照射组相比,血必净组小鼠外周血白细胞、胸腺指数及CFU-GM有显著提高(P<0.05)。结论:血必净注射液对辐射引起的造血系统损伤有一定的保护作用。     

P物质体外对骨髓CFU-GM和CFU-C21的影响

目的:探讨P物质(SP)与造血的关系.方法:采用甲基纤维素半固体造血祖细胞培养法检测正常血浓度的SP以及不同浓度的SP 对骨髓CFU-GM和CFU-C21的作用.结果:10-10 mol*L-1和10-11 mol.L-1 SP组CFU-GM的产率分别为193±19和206±40,与对照(136±17)相比具有显著差异(P<0.05); 10-10mol.L-1和10-11mol.L-1 SP对CFU-C21也有明显刺激作用,前者CFU-C21为143±16,后者为153±15,与对照(80.3±31)相比具有显著性差异 (P<0.05);高于或低于上述浓度时,SP对CFU-GM和CFU-C21的刺激作用均减弱,与对照相比无显著性差异(P＞0.05).结论:适当浓度的SP对体外CFU-GM和CFU-C21具有明显的刺激效应.SP对正常骨髓造血具有重要的意义.     

碳酸锂对抗三尖杉酯碱抑制造血的作用

实验证明三尖杉酯碱(Ha)可抑制小鼠骨髓CFU-S 与CFU-GM增殖;而碳酸锂(Li_2C_3O)则能明显的促进 CFU-S与CFU-GM增殖,并对抗三尖杉酯碱对小鼠骨髓粒系造血的损伤作用,碳酸锂可能是通过某种体液因素如集落刺激因子来实现这种作用的。     

儿童再生障碍性贫血骨髓祖细胞的测定和意义

目的通过对再生障碍性贫血(AA)患儿红系(BFU-E、CFU-E)、粒单核系(CFU-GM)及巨核系(CFU-Meg)祖细胞培养,了解骨髓祖细胞增殖情况.方法抽取47例AA患儿骨髓分别作四类祖细胞培养,在7、14 d测定其集落数.结果 47例AA患儿中,四类集落数均值与对照组比较均有显著下降(P<0.05,P<0.01),且四类集落数均值在AA三种类型中,基本上随病情加重均值逐步下降,其中四类集落数低于对照组下限的患儿分别为BFU-E 36.17%、CFU-E 85.11%、CFU-GM 74.47%、CFU-Meg 91.49%.BFU-E、CFU-GM和CFU-Meg随着患儿疾病的加重,低于对照组下限的患儿百分比同步上升,且三者的表现与外周血三系表现一致,而CFU-E却未见上述现象.结论在部分AA患儿中存在着四类祖细胞培养集落数的下降,且基本上与患儿病情成正比;BFU-E的变化较CFU-E更能代表患儿骨髓红系祖细胞的变化.     

脐带血造血干细胞的采集、浓缩与低温冷冻保存

目的 :探讨脐带血造血干细胞库建立中的脐带血采集、分离、低温冻存的方法。方法 :自 1997年 7月至2 0 0 0年 7月已冻存经过HLA配型的脐带血 (cordblood ,CB) 3 74 4份。CB采自经检查符合要求的足月顺产或剖宫产新生儿 ,经 (citratephosphateadeninedextnse ,CPD A)抗凝 ,用密闭式血袋采集法采集。采集后置于室温保存 ,18h内处理。用羟乙基淀粉 (hydroxythylstarch ,HES)沉降后一次分离方法去除绝大多数红细胞及大部分血浆。采用以二甲亚砜 (dimethylsulfoxide ,DMSO)为主的冷冻保剂 ,冷冻保存CB。DMSO的终质量分数为 10 %。经序控降温后 ,置于 - 196℃液氮中保存。结果 :分析了 3 74 4份冻存CB ,平均采集量为 (93± 2 2 )ml(45～ 198ml)。浓缩后平均体积为 (3 8± 8)ml(3 0～ 60ml) ;浓缩前后有核细胞数 .浓缩前平均有核细胞数为 11.2× 10 8± 5 .3× 10 8(4.5× 10 8～ 4 5 .1× 10 8) ;采用HES沉降一次离心浓缩去除红细胞后的平均有核细胞数为 9.7× 10 8± 4 .6× 10 8(3 .1× 10 8～ 3 0 .5× 10 8) ;平均有核细胞回收率为 79%。质控检测 4 0份标本细胞活率为 88.2 % ,CFU GM回收率和CD3 4 +细胞计数分别为 97.6%和 86.4 %。结论 :本研究采用的CB采集、冻存及造血干细胞和病原生物检测的方法是安     

脾脏和胸腺淋巴细胞亚群对移植肿瘤的反应——流动细胞测量仪检测结果的分析

BALB/c小鼠移植EMT—6肉瘤细胞后一个月内,随着肿瘤生长,脾脏肿大,胸腺萎缩。用流动细胞测量仪和单克隆抗体间接荧光免疫技术检查了肿瘤生长过程中脾脏和胸腺淋巴细胞亚群的动态变化。带瘤小鼠与同龄对照相比,全脾有核细胞中IgM~+,Lyt_1~+和Lyt_2~+细胞均显著地持续增加;每毫克脾组织中IgM~+细胞稍有增多,但Lyt_1~+和Lyt_2~+细胞均于肿瘤生长的后期减少,Lyt_1~+和Lyt_2~+两个T淋巴细胞亚组的比例则呈进行性下降。胸腺中Lyt_1~+和Lyt_2~+细胞均随肿瘤生长而逐渐减少。讨论了淋巴细胞亚群变化的功能意义。     

组胺和甲氰咪胍对粒-单系祖细胞的影响

用体外琼脂培养法研究组胺和甲氰咪胍对小鼠粒-单系祖细胞的影响,结果表明,10~(-9)M～10~(-5)M 组胺和10~(-8)M～10~(-4)M 甲氰咪胍分别作用时,对粒-单系祖细胞的产率没有影响,用甲氰咪胍阻断 H_2-受体后,组胺可增加粒-单系祖细胞的产率和自杀率。对此结果的理论意义和临床意义进行了讨论。     

有机锗对造血系统的作用

用Ge-132给小鼠灌胃10天以后,骨髓造血十分活跃,股骨中有核细胞数明显升高,细胞分裂活动也显著加强。在用药为500mg/kg时,小鼠脾脏中出现了大量的以巨核和红白系为主的髓外造血灶。若药量为250mg/kg,外周血中单核巨噬细胞也显著地高于对照组。在腹腔中,可以看到白细胞总数、巨噬细胞、淋巴细胞和粒细胞呈现剂量反应的曲线关系;腹腔中的白细胞总数、巨噬细胞数比对照组增高约三倍;淋巴细胞仅在用药为500mg/kg时,高于对照组约为一倍。结果表明给正常小鼠服Ce-132以后,骨髓和脾脏的造血活动均获得加强,在剂量适当时,亦能升高巨噬细胞和淋巴细胞的数量。     

小鼠骨髓巨噬细胞培养液的造血抑制活性研究

观察了小鼠骨髓型正常巨噬细胞株经６Ｇｙ＾６０Ｃｏ照射后细胞培养上对ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｇ同期怕影响,结果未照射和照射后Ａｎａ－１细胞培养３上清对ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的形成均垢抑制活性,但照射后抑制活性更强,上清经灭活后抑制活性减弱,结论;小鼠骨髓巨噬 培养上清对ＣＦＵ－＝Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ均的抑制活性,这种抑制活性可能是抑制因子和细胞毒共同作用的结果。     

几种组织培养上清液对造血祖细胞体外增殖分化的比较

目的：寻求既经济又有效的造血生长因子样活性物质。方法：采用造血祖细胞体外培养与造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术,检测胎肌培养上清液、骨液基质细胞培养上清液、胸腺细胞培养上清液与脾细胞培养上清液对造血祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍix增殖分化的影响。结果胎肌培养上清液和对ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＦＵ－Ｍix的体外地产殖与分化有明显刺激作用。而胸腺与脾细胞条件培养上清液对ＢＦＵ－Ｅ的生长有显著促进作用。结论：胎肌培养上清液中可能含ＧＭ－ＣＳＦ样活性物质。而胸腺与脾细胞培养上清液具有较高ＩＬ－３样活性,可以利用组织与细胞培养上清液替代重组造血生长因子进行造血细胞的实验研究和临床诊断。     

EMT—6肉瘤对脾脏抗体形成细胞的影响

BALB/c小鼠皮下接种EMT-6肉瘤后,脾有核细胞数增多,但单位重量脾组织有核细胞数保持相对稳定。接种肿瘤后1、2和4周分批腹腔注射SRBC免疫动物,免疫后4天取脾,用液相单层技术测定脾脏PFC反应。在肿瘤生长的1,2周免疫鼠PFC反应明显增强,分别相当于同龄对照鼠的185.0％和373.5％,而按定量细胞计分别相当于同龄对照鼠的126.9％和114.8％。移植肿瘤后4周免疫鼠PFC值较前者降低,相当于同龄对照鼠的291.0％和64.5％。PFC反应的增加远落后于有核细胞数的增多,说明抗原反应细胞的功能减弱。     

脐血库造血干/祖细胞的分离、保存和集落培养

目的探讨脐血库脐血分离、保存方法及造血干祖细胞的体外培养条件。方法采用建立在密度梯度离心基础上的HES分离法对脐血进行有核细胞分离、冻存及粒巨系造血祖细胞集落（CFU—GM）培养。结果离心管收集分离和四联袋采集分离的方法均可获得较高的单个核细胞量。但四联袋采集分离在回收率和浓缩程度上更为优越，且粒巨系造血祖细胞（CFU—GM）含量丰富。10％DMSO冻存液保存复苏后仍可获得较高活率和CFU—GM。结论我们建立的HES分离结合密度梯度离心分离脐血造血干祖细胞以及脐血长期冻存的方法为广泛、大规模地建立脐血库提供了基础。     

rhIL-3和rhGM-CSF对人正常骨髓造血干细胞体外维持的作用

应用重组人白细胞介素3(rhIL-3)和重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)对18例正常人骨髓造血干细胞体外悬浮培养1周后,用琼脂集落培养测定CFU-CM的增殖程度。rhIL-3组的CFU-GM增至4.9±1.9倍;rhGM-CSF组增至4.7±1.6倍;rhIL-3+GM-CSF组增至11.5±5.4倍,均高于对照组(P<0.001)。rhIL-3+GM-CSF组的CFU-GM增殖量明显高于rhlL-3组和rhGM-CSF组。结果表明:rhIL-3和rhGM-CSF均能促使造血干细胞在体外短期维持中大量增殖,二者联合应用有协同作用。