抗生素S632A3在体外抗柯萨奇病毒B3m株作用的研究

目的 :体外测定抗生素S632A3 抗柯萨奇病毒B3m 株的作用 ,为筛选新型抗病毒药物提供参考依据。方法 :用不同稀释度的抗生素S632A3 抑制柯萨奇病毒B3m 株对Vero细胞的感染作用 ,48h后观察细胞病变效应 ,并用MTT法测定细胞活性。结果 :抗生素S632A3 能明显抑制柯萨奇病毒对Vero细胞的致病变作用 ,使细胞存活率升高。结论 :该药物有较显著的抗柯萨奇病毒B3m 株的作用 ,且对细胞的毒性低 ,但该药物对柯萨奇病毒B3m 株无预防作用 ,是一种具有潜在开发前景的药物。     

草苁蓉提取物对感染柯萨奇B3病毒的大鼠心肌细胞抗氧化作用的影响

[目的]探讨草苁蓉提取物对柯萨奇B3病毒感染的大鼠心肌细胞的抗氧化作用。[方法]取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞,培养48h后接种10^3TCID50柯萨奇B3病毒做为实验性病毒性心肌炎模型。[结果]草苁蓉提取物明显减轻感染柯萨奇B3病毒的心肌细胞病变,使细胞搏动增强,明显降低心肌细胞内的丙二醛含量,显升高超氧化物歧化酶活性。[结论]草苁蓉提取物对感染柯萨奇B3病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有显的抗氧化作用。     

牛磺酸对培养大鼠心肌细胞感染柯萨奇B_3病毒的影响

[目的 ]探讨牛磺酸对由柯萨奇B3 病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 ,为该药的临床应用提供理论依据 .[方法 ]取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种10 3TCID5 0的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]牛磺酸明显减轻感染柯萨奇B3 病毒心肌细胞的病变 ,使细胞搏动增强 ;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性 ,降低乳酸脱氢酶活性 ;抑制心肌细胞感染柯萨奇B3 病毒后导致的乳酸脱氢酶和谷草转氨酶释放 .牛磺酸提高正常心肌细胞和感染柯萨奇B3 病毒的心肌细胞存活率 ,其作用具有剂量依赖性 .[结论 ]牛磺酸对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠搏动心肌细胞具有一定的抗病毒和保护心肌细胞的作用     

5种中药提取物体外抗病毒药效学研究

目的:探讨中药板兰根、黄芪、贯众、紫花地丁、大黄提取物体外抗病毒作用机制。方法:采用体外细胞培养法、染料摄入法检测5种中药抗病毒作用,以改变给药时间、途径,探讨5种中药抗病毒作用环节。结果:5种中药具有明显的抗呼吸道合胞病毒(RSV)、抗柯萨奇病毒A16、柯萨奇病毒B1、柯萨奇病毒B3、柯萨奇病毒B4的作用。结论:5种中药有较强的抗病毒作用。     

重组蓝藻抗病毒蛋白N抗柯萨奇B3病毒的体外实验研究

目的:研究重组蓝藻抗病毒蛋白N (CV-N)体外抗柯萨奇病毒B组3型(CVB3)的作用. 方法:通过观察药物毒性、细胞病变效应(CPE)、MTT比色法检测细胞增殖,判断CV-N的细胞毒性及抗病毒效果. 结果:CV-N对Vero细胞毒性较低(TC50为359 μg/ml),对CVB3无直接灭活作用,对阻止CVB3病毒吸附细胞的作用优于病毒唑,而对病毒的复制无明显抑制作用. 结论:CV-N作用于CVB3病毒感染的早期,有可能作为柯萨奇病毒感染的预防药物.     

虎杖蒽醌提取物抗柯萨奇B3型病毒作用及机制研究

目的研究虎杖蒽醌提取物抗柯萨奇B3型病毒(Coxsackie B3virus,CoxB3)的作用。方法通过对病毒性心肌炎致病有关的CoxB3型病毒体感染模型,观察虎杖蒽醌提取物对CoxB3型病毒感染宿主细胞的抑制作用及对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用。结果虎杖蒽醌提取物对感染细胞的治疗指数(TI)分别为6.73(Vero)和4.00(原代培养心肌细胞);对照品抗病毒口服液组TI为4.01(Vero)和3.56(原代培养心肌细胞);虎杖蒽醌提取物对CoxB3病毒感染细胞的TI高于抗病毒口服液(P<0.05)。小鼠感染病毒后,各给药组血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转移酶(ASTase)、肌酸激酶(CK)水平显著降低(P<0.001)。结论虎杖蒽醌提取物对由CoxB3型病毒引起的病毒性心肌炎具有一定的治疗作用。     

复方金钱草清热颗粒对柯萨奇病毒体外抑制作用的研究

目的：研究复方金钱草颗粒冲剂对柯萨奇B组病毒致人喉癌细胞（Hep-2）细胞病变是否有抑制作用。方法：①Hep-2细胞感染病毒的同时给药；②Hep-2感染病毒2h后再给药；③药物与病毒作用2h后再感染Hep2细胞。结果：复方金钱草清热颗粒对柯萨奇病毒段、B5致Hep-2细胞病变有抑制作用，同时对CBVs的抑制作用明显优于CBV3。结论：金钱草对柯萨奇病毒有体外抑制作用。     

渗出性胸腔积液柯萨奇病毒B抗体的检测

目的 :明确柯萨奇病毒所致胸膜感染的发病情况及其胸液特征。方法 :应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测 131例良性渗出性胸腔积液患者血清和 或胸液中柯萨奇病毒B抗体。结果 :131例良性渗出性胸腔积液患者 ,11例检测出柯萨奇病毒B抗体 ,其中有 4例仅在胸液中检测出柯萨奇病毒B抗体 (IgG阳性 1例 ,IgM阳性3例 ) ,5例在血清中检测出柯萨奇病毒B抗体 (IgG阳性 4例 ,IgM阳性 1例 ) ,2例在胸液及血清中均检测出柯萨奇病毒BIgM。与柯萨奇病毒B抗体阴性、诊断为结核性胸腔积液的患者胸液相比 ,柯萨奇病毒B抗体阳性的渗出性胸液患者的胸液并无显著性特征。结论 :柯萨奇病毒B感染确实可致胸腔积液。由于胸液无显著性特征 ,病毒性胸腔积液极易和结核性胸腔积液相混淆     

柯萨奇病毒B_3感染小鼠心肌的病毒核酸与炎症变化之间的关系

[目的 ]研究柯萨奇病毒感染的心肌炎模型小鼠的心肌中病毒核酸与炎症变化之间的关系 .[方法 ]应用聚合酶链反应 ,于感染后 1,3,5,7,10 ,14,2 1,30d ,对 58只实验组和 32只对照组的BALB/C小鼠心肌进行柯萨奇病毒B3 RNA检查 ,并观察心肌病理变化 .[结果 ]实验组小鼠心肌柯萨奇病毒B3 RNA在感染后 3～ 30d呈阳性 ,对照组心肌柯萨奇病毒B3 RNA均阴性 .感染后 3 30d心肌聚合酶链反应与病理学两种检查结果相一致 .[结论 ]心肌中柯萨奇病毒B3 RNA的存在与心肌炎症变化之间有密切的关系 .     

贯众水提取液对感染柯萨奇B_3病毒的培养大鼠心肌细胞的影响

[目的 ]探讨贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 .[方法 ]实验取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种 10 3 TCID50 的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]贯众水提取液和炙甘草汤的同时加药组和 1h后加药组大鼠心肌细胞释放的乳酸脱氢酶和天冬氨酸转氨酶活性明显降低 ,感染 12h后加药组效果明显减弱 ,而 2 4h后加药组则无效 .[结论 ]贯众水提取液对感染柯萨奇B3 病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有抗病毒和保护作用 ,应早期应用     

复方羌芪水提液体外抗柯萨奇病毒B3作用的研究

目的：测定复方羌芪水提液的体外抗ＣＶＢ３作用，并对其抗病毒机理进行初步的探讨。方法：用含有不同浓度复方羌芪水提液的维护液培养ＣＶＢ３感染的Ｖｅｒｏ细胞，４８ｈ后用ＭＴＴ法测定细胞活性；培养上清液滴定ＴＣＩＤ５０。结果：复方氏水提液能抑制ＣＶＢ３对Ｖｅｒｏ细胞的致病变作用（ＣＰＥ），使细胞夏活率升高，培养上清病毒滴度降低；且随药物浓度及药物与病毒作用时间的延长抑制作用增强。结论：复方羌芪水提液的抗病     

新扶正除疫颗粒抗柯萨奇病毒B3作用评价

目的评价新扶正除疫颗粒抗柯萨奇病毒B3(CVB3)感染的效果。方法将60只小鼠随机分为空白对照组、病毒模型组(A组)、新扶正除疫颗粒低、中、高剂量组(B、C、D组)、阳性药物对照组(E组)。给除空白对照组以外的每只小鼠腹腔注射50μL柯萨奇病毒液(10×TCID50)。每天观察小鼠的发病体征及死亡情况,计算生存率,检测病毒滴度,观察心肺组织病理变化。结果给药第3天时D组死亡率仅10%,第7天时仅为20%,显著低于A组、B组和C组,与E组基本相同。检测不同组心、肺中病毒滴度,发现D组显著低于A组、B组和C组(P0.01)。在比较小鼠脏器组织病理观察方面,D组与E组对肺组织的影响结果相似,病理变化轻微,炎症反应明显弱于A组。结论新扶正除疫颗粒能降低柯萨奇病毒B3感染小鼠的死亡率和病毒滴度,对心肺组织有保护作用。     

黄芩甙对柯萨奇Ⅲ型病毒性心肌炎病毒复制的影响

目的采用观察细胞病理变化(CPE)的方法,探讨黄芩甙对柯萨奇Ⅲ型病毒复制的影响。方法通过细胞培养,用先吸附病毒再加入药物、先用药物处理后攻击病毒和直接灭活的方法,观察黄芩甙的药效学作用。结果在病毒先感染细胞后加入黄芩甙的实验中,低病毒感染量(10TCID50)时,显示出对柯萨奇Ⅲ型病毒有一定的抗病毒活性;在黄芩甙与病毒同时加入的实验中,在100TCID50、10TCID50时,均显示出对柯萨奇Ⅲ型病毒的抑制作用。结论黄芩甙对柯萨奇Ⅲ型病毒有一定的抗病毒活性。     

甘草甜素对HSV-1抑制作用的实验研究

目的:观察甘草甜素对单纯疱疹病毒Ⅰ型的抑制作用,为临床更为有效的治疗单纯疱疹病毒性脑炎探索新的药物.方法:体外培养Vero细胞,分成甘草甜素在病毒吸附vero细胞后加入病毒、吸附前甘草甜素预处理细胞以及吸附前甘草甜素预处理病毒,通过观察空斑形成单位来评价甘草甜素对单纯疱疹病毒Ⅰ型的抑制作用,以及作用发生于病毒感染的哪个阶段.结果:病毒吸附vero细胞后加入甘草甜素能明显抑制病毒所致的空斑形成,IC50为0.56mmol/L.吸附前甘草甜素预处理细胞以及吸附前甘草甜素预处理病毒,对病毒所致的空斑形成无明显影响.结论:甘草甜素能明显地抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型的复制,它的作用是发生在病毒穿入细胞后的阶段,不能阻止病毒对细胞的吸附,也不能直接灭活病毒.     

重组集成干扰素α体外抗病毒的药效学研究

目的：观察一种新型重组集成干扰素α(NIFN con α)对流感病毒甲型和乙型、单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型、柯萨奇病毒B1和B3的抑制作用。方法：应用细胞病变抑制法，以已上市的重组集成干扰素α(干复津)及干扰素α作为阳性对照，观察不同浓度的NIFN con α对不同病毒感染绿猴肾细胞(Vero)和狗肾细胞(MDCK)的抑制作用。结果：NIFN con α对MDCK细胞和Vero细胞的TD50分别为(>250±0)μg/ml和(>192±0)μg/ml。对单纯疱疹Ⅰ型和Ⅱ型病毒的IC50分别是(2.8×10-4±8.5×10-5) 和(1.8×10-4±8.5×10-5)μg/ml；对柯萨奇病毒B1和B3的IC50分别是(8.8×10-8±1.4×10-8)和(1.5×10-7±4.2×10-8)μg/ml，抑制流感病毒甲型和乙型的IC50分别是(2.5×10-2±1.2×10-2)和(＞10±0)μg/ml。结论：NIFN con α与干复津一样对单纯疱疹病毒、柯萨奇病毒和流感病毒均具有明显的抑制作用，与干扰素α相比，对流感病毒的抑制作用较弱，但对单纯疱疹病毒和柯萨奇病毒的抑制作用优于干扰素α。     

生脉散合炙甘草汤加减液对染病毒性心肌炎保护作用的实验研究

目的:探讨生脉散合炙甘草汤加减液对病毒性心肌炎的保护作用。方法:实验取新生SD大鼠心室肌制备搏动心肌细胞,培养48 h后添加103TCID50的柯萨奇B3病毒作为实验性病毒性心肌炎模型。实验分3个组进行,即正常对照组、病毒对照组、生脉散合炙甘草汤加减液组(治疗组)。结果:生脉散合炙甘草汤加减液可明显提高细胞搏动百分比,明显增加细胞内糖原颗粒数目,增强琥珀酸脱氢酶活性,降低乳酸脱氢酶活性。结论:生脉散合炙甘草汤加减液在体外对感染病毒大鼠心肌细胞具有明显的保护作用。     

贺普丁对肾脏疾患接受免疫抑制剂而激活的乙肝疗效分析

目的总结乙肝病毒(HBV)携带者,因肾脏疾患接受免抑制剂治疗所诱发的肝炎活动使用拉米夫定(贺普丁)治疗的效果.方法将HBV携带合并肾脏疾患免疫抑制治疗期间肝炎活动30例,在常规治疗基础上,加用或不加用拉米夫定治疗分成A和B两组,对治疗前后的情况进行对比.结果A组进展至重型肝炎3例(3/16),B组进展至重型肝炎9例(9/14),两组比较差异有显著性意义(P=0.01296,P＜0.05),即有合用拉米夫定组(A组)治疗效果明显好于无合用组(B组).结论乙肝病毒携带伴肾脏疾患需要接受免疫抑制治疗,合用抗病毒药(如拉米夫定)是避免发生严重肝损的重要措施.     

单纯疱疹病毒Ⅱ型在Vero细胞中培养与增殖特性的研究

目的研究单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）在非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）中培养及增殖的合适条件。方法把HSV-2接种于Vero细胞中培养和传代,于不同时间收获病毒液并测毒力,进行不同培养条件的摸索。结果pH值、残留牛血清是HSV-2在Vero细胞培养的影响因素,最佳收毒时间为36-72h。在Vero细胞上培养病毒3-5代,病毒毒力较高。结论建立了单纯疱疹病毒Ⅱ型在Vero细胞上培养增殖的初步方法,为下一步建立HSV-2的潜伏与激发细胞模型打下基础。     

新城疫病毒体外诱导S180细胞凋亡的实验研究

目的：探讨新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）体外对S180肉瘤细胞（简称S180）生长有无抑制和诱导细胞凋亡作用。方法：取培养至对数生长期的S180细胞浓度为5×104/mL和1×106/mL分别接种于96孔板和50mL培养瓶中,加入不同浓度的NDV（1∶20、1∶10、1∶5）作用24h,分别用MTT法检测NDV对S180瘤细胞的生长抑制作用,荧光显微镜和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：经上述不同浓度的NDV作用24h,对S180细胞生长的抑制率依次为10%、26%、39%,各实验组吸光度值（A490）与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。荧光显微镜观察实验组培养的S180瘤细胞,出现细胞核固缩及凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳见DNA梯形条带。结论：NDV对体外培养S180细胞增殖有明显抑制作用,可诱导S180细胞凋亡。     

CVB3心肌炎CTL亚类TCR Vβ基因取用格局分析

目的探讨柯萨奇病毒（CVB3）心肌炎细胞毒T细胞（CTL）亚类（ACTL、VCTL、MCTL）TCR CDR3 Vβ基因取用格局。方法无菌摘取72h内新生Balb／c鼠心脏，培养单层心肌细胞并将其分为三组，分别用CVB3、放线菌素D处理和不经过任何处理；实验组制备CVB3心肌炎鼠模型，处死后将其肠系膜淋巴结制成单细胞悬液，分别加入上述三组单层心肌细胞，采用免疫吸附法获取ACTL、VCTL、MCTL，对照组鼠为正常小鼠处死后取肠系膜淋巴结制成单细胞悬液；采用MTT法对实验组ACTL、VCTL、MCTL和对照组T细胞进行细胞毒鉴定；常规进行RT-PCR，判断实验组细胞及对照组细胞的TCR Vβ基因取用格局。结果对照组T细胞表达Vβ基因全部20个家族，而实验组三类CTL的Vβ基因取用格局呈现明显的限制性，ACTL优势表达Vβ36、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3，MCTL优势表达Vβ5．1、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3，而VCTL优势表达Vβ7、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3。结论CVB3心肌炎中导致心肌细胞损伤的CTL受到特异性抗原刺激后其TCR Vβ基因取用格局呈现明显的限制性。