槲皮素对喉癌细胞Hep-2的抑制增殖和诱导凋亡作用

目的研究槲皮素在体外对喉癌Hep-2细胞株的生长和凋亡的影响。方法应用MTT法、电镜和流式细胞术等方法对在体外经不同浓度槲皮素处理过的Hep-2细胞进行检测,观察细胞增殖和凋亡的改变。结果①槲皮素在一定浓度范围内能明显抑制Hep-2细胞的生长,作用72 h的半数抑制浓度(IC50)是52.48μmol/L,呈剂量依赖性关系。②PB能诱导Hep-2细胞凋亡,发生G1→S期阻滞。结论槲皮素可使喉癌Hep-2细胞增殖抑制和凋亡,为槲皮素用于喉癌临床治疗提供了部分依据。      

热疗联合顺铂对喉癌Hep-2细胞的影响研究*

目的 探讨热疗联合顺铂对喉癌Hep-2细胞的影响,了解热疗与顺铂的治疗方法是否有交互作用。方法 将传代的Hep-2细胞分为对照组、热疗组、顺铂组及热疗联合顺铂组。对照组置于37℃培养箱,热疗组置于43℃培养箱,顺铂组置于37℃培养箱并加入顺铂,热疗联合顺铂组置于43℃培养箱并加入顺铂。采用MTT法、Wound-healing划痕实验和Transwell侵袭实验检测热疗联合顺铂对Hep-2细胞的增殖、迁移和侵袭力影响。结果 4组细胞在波长490?nm处光密度（OD）值分别为（1.24±0.13）、（0.99±0.11）、（0.75±0.07）及（0.31±0.07）,析因分析显示,不同温度热疗在波长490?nm处的OD值有差异（P?<0.05）,不同浓度顺铂在波长490?nm处的OD值有差异（P?<0.05）,热疗与顺铂对在波长490?nm处的OD值存在交互作用（P?<0.05）。4组细胞未愈合区百分比分别为（31.83±1.62）%、（40.47±1.52）%、（53.13±2.61）%及（79.83±0.95）%,析因分析显示,不同温度热疗对未愈合区百分比有差异（P?<0.05）,不同浓度顺铂未愈合区百分比有差异（P?<0.05）,热疗与顺铂对未愈合区百分比的影响存在交互作用（P?<0.05）。4组细胞穿过Transwell小室膜的细胞数目分别为（27.8±1.64）、（21.8±1.48）、（11.2±1.48）及（1.8±0.84）个,析因分析显示,不同温度热疗的穿膜细胞数有差异（P?<0.05）,不同浓度顺铂的穿膜细胞数有差异（P?<0.05）,热疗与顺铂对穿膜细胞数的影响存在交互作用（P?<0.05）。结论 热疗能够增强喉癌Hep-2细胞对顺铂的敏感性,热疗与顺铂联合有协同抗肿瘤作用。     

黄芪对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响

[目的]体外观察黄芪对人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2的抑制增殖和诱导凋亡作用并探讨其作用机制。[方法]用20、100、200μg/mL的黄芪作用于Hep-2细胞24 h,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,共聚焦荧光显微镜观察细胞凋亡,Western Blot检测Bcl-2和Cyclin B1的蛋白表达。[结果]黄芪对Hep-2细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量依赖性;随着黄芪浓度增高,处于G2/M期细胞的比例逐渐升高,同时伴有G0/G1期细胞减少,细胞凋亡率逐渐升高,各实验组之间及其与对照组之间的差异均有显著性意义(P<0.05);荧光显微镜观察可见典型细胞凋亡;Western Blot检测显示黄芪可剂量依赖性抑制Bcl-2和Cyclin B1的蛋白表达。[结论]黄芪可通过抑制Bcl-2和Cyclin B1的蛋白表达,引起喉癌细胞G2/M期阻滞,抑制增殖和凋亡,发挥抗癌作用。     

紫杉醇联合热疗对鼻咽癌CNE-1细胞株增殖及凋亡的影响

目的 探讨紫杉醇(Paclitaxel)联合热疗对鼻咽癌细胞株CNE-1增殖及凋亡的影响,为临床紫杉醇与热疗联合应用提供实验依据.方法 将不同温度(39℃、41℃和43℃)及不同浓度(0.01、0.10、1.00、10.00和100.00 nmol/L)紫杉醇采用分组设计(共15个组),各浓度组设37℃为对照组(共5个组).在紫杉醇对CNE-1细胞作用48h后加热30min.使用MTT法、克隆形成能力试验、细胞形态学、超微结构观察及琼脂糖凝胶电泳等方法 测定紫杉醇联合热疗对CNE-1细胞体外增殖抑制及细胞凋亡的影响.结果 加热41℃组细胞增殖率与其他不同温度同剂量组比较均降低,差异有显著性.与其他各组比较均降低,差异均有显著性(P<0.05);39℃和43℃组细胞增殖率与37℃对照组比较均升高,差异有显著性(P<0.05).琼脂糖凝胶电泳显示紫杉醇作用48h后便可出现DNA梯带,并呈时间剂量性增强.最低0.10nmol/L浓度可见DNA梯带.倒置显微镜和电镜下可见细胞损伤及凋亡细胞.结论 加热41℃时不同浓度紫杉醇对CNE-1细胞均有增殖抑制及诱导细胞凋亡作用;39℃或43℃热疗联合0.01 nmol/L紫衫醇化疗时CNE-1细胞增殖能力最强.     

柯里拉京杀伤人喉癌Hep-2细胞的体外实验研究

目的 观察柯里拉京（Corilagin）对人喉癌细胞系Hep-2的杀伤作用。方法 在体外细胞培养的基础上,通过倒置显微镜、肼比色法、流式细胞仪观察Corilagin作用后Hep-2细胞的形态学、增殖率和细胞周期的改变。结果 Corilagin作用后的Hep-2细胞形态发生了明显变化;其抑制增殖作用呈量效、时效关系;Corilagin可阻肿瘤滞细胞于S期,并可诱导细胞凋亡。结论 Corilagin能显著抑制Hep-2细胞增殖,可能与阻滞细胞于S期和诱导凋亡有关,Corilagin抗肿瘤作用值得进一步研究。     

大蒜素诱导喉癌细胞Hep-2凋亡的实验研究

目的研究大蒜素（allicin）对喉癌细胞Hep-2的凋亡作用。方法体外培养的喉癌细胞Hep-2分别加入终浓度为12．5;25．0;50．0;100．0μg／ml的大蒜素,应用光学显微镜,MTT比色法及流式细胞仪分析不同剂量大蒜素对喉癌细胞Hep-2的凋亡作用。结果光镜下可见对照组喉癌细胞生长密集,细胞成梭形或多角形。大蒜素小剂量组细胞数量明显减少,随剂量增加细胞数渐少,高剂量组可见坏死细胞。MTT结果显示大蒜素呈时间剂量依赖性抑制喉癌细胞的生长。流式细胞仪表明大蒜素作用后,可将喉癌细胞阻滞在G0／G1期,并诱导喉癌细胞的凋亡。结论大蒜素作用后,可有效抑制的喉癌细胞的生长,并可诱导喉癌细胞的凋亡。     

反义寡核苷酸抑制端粒酶活性对喉癌细胞Hep-2增殖的影响

目的:检测端粒酶的反义寡核苷酸对喉癌细胞的影响。Hep-2方法:采用法及平板集落形成实验检测靶向于端MTT粒酶的反义寡核苷酸对喉癌细胞株增殖的抑制作用。用法检测反义寡核苷酸对喉癌细胞株细胞内端粒Hep-2 PCR-ELISAHep-2酶活性的影响。结果:反义寡核苷酸明显抑制了喉癌细胞的增殖,此作用有剂量、时间依赖性。反义寡核苷酸可抑制喉Hep-2癌细胞端粒酶活性,此作用有浓度依赖性。结论:靶向于端粒酶的反义寡核苷酸能抑制喉癌细胞的增殖。Hep-2     

中药艾迪诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡的研究

目的 研究中药艾迪对人喉癌细胞Hep-2的生长抑制作用及凋亡诱导作用.方法 四亚基噻唑蓝(MTT)法测定中药艾迪对人喉癌细胞Hep-2生长的抑制作用,荧光显微镜观察人喉癌细胞Hep-2的凋亡状况,流式细胞仪技术(FCM)观察人喉癌Hep-2细胞周期及凋亡,荧光定量PCR法测定人喉癌细胞Hep-2环氧化酶(COX-2)的表达量.结果 不同浓度的中药艾迪对人喉癌细胞Hep-2生长均有抑制作用,并有明显的时间和剂量依赖性,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪分析显示中药艾迪能减少G1期的比例,增加G2和S期的比例,并能诱导细胞凋亡.中药艾迪作用人喉癌细胞Hep-2 24h后其环氧化物酶-2的表达量升高,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 中药艾迪在体外能明显抑制人喉癌细胞Hep-2生长,其机制可能是诱导细胞凋亡.     

三氧化二砷诱导喉癌Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期的影响

目的 观察三氧化二砷（AS2O3）对喉癌Hep-2细胞株诱导细胞凋亡的作用和对细胞周期的影响。方法 体外培养的Hep-2细胞与不同浓度的AS2O3作用24、48、72h，通过MTT还原法检测细胞的生长抑制率，用倒置相差显微镜、流式细胞仪、荧光显微镜研究细胞凋亡的形态学改变，检测细胞凋亡率并进行细胞周期分析。结果 As2O3可有效抑制Hep-2细胞的生长，呈时间和浓度依赖性特点。形态学观察发现，As2O3诱导Hep-2细胞凋亡。2μmol/L As2O3作用24h，S期细胞比例增高，72h后，S期细胞明显下降，细胞大量凋亡。AS2O3在低浓度时，阻滞细胞通过S期，高浓度时诱导S期细胞凋亡。结论 AS2O3可诱导Hep-2细胞的凋亡，与细胞周期阻滞有关。     

紫杉醇体外诱导人胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的 研究紫杉醇对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法 0．001－1μmol/L的紫杉醇处理SGC7901细胞后,用MTT法测定胃癌细胞的生长抑制率,通过形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率,半定量TRAP－银染法测定端粒酶活性变化。结果 不同浓度的紫杉醇对胃癌细胞均有明显抑制作用,且呈时间依赖性及剂量依赖性,光镜及流式细胞术分析表明,0．01μmol/L的紫杉醇处理后24h,细胞即出现明显的凋亡形态特征及凋亡峰,对端粒酶活性的同步检测结果显示,紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,且随紫杉醇浓度增大,抑制作用逐渐增强,24h酶活性即显著受抑制,72h变为阴性。结论 紫杉醇对胃癌细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一,端粒酶可作为肿瘤化疗的敏感性指标。     

茶氨酸对鼻咽癌细胞CNE2增殖及凋亡影响的研究

目的研究茶氨酸在体内外对鼻咽癌细胞株CNE2增殖、凋亡、抗血管生成的作用。方法体外培养鼻咽癌CNE2细胞,将其分为阴性对照组,顺铂(CDDP)组和茶氨酸实验组,分别用PBS、CDDP和不同浓度的茶氨酸处理体外培养的CNE2细胞。MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪和TUNEL法分析细胞凋亡,观察茶氨酸对CNE2细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用,免疫组织化学检测CD34、VEGF的表达情况。结果 100,200,400,800 mmol/L浓度的茶氨酸对鼻咽癌CNE2细胞作用72 h时细胞增殖抑制率达到峰值。流式细胞仪和TUNEL法检测100,200,400,800 mmol/L浓度的茶氨酸处理72 h后细胞凋亡率最高,而且随着浓度的增加,细胞凋亡率升高。茶氨酸对移植瘤的抑瘤率为44.54%。实验组与对照组相比,瘤体组织中CD34、VEGF的表达均降低,具有统计学意义。结论茶氨酸通过抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞凋亡,从而抑制鼻咽癌细胞CNE2的增殖。     

氟硝丁酰胺对喉鳞癌细胞株增殖调控的研究

目的观察氟硝丁酰胺对喉鳞癌细胞株HEP-2的生长调控作用.方法应用MTT比色法、平板集落形成法、流式细胞术检测氟硝丁酰胺对喉鳞癌细胞生长及增殖周期的影响.同时,用电子显微镜检查细胞形态学的改变.结果经氟硝丁酰胺作用后,喉鳞癌细胞株HEP-2增殖明显受到影响.与对照组比较,P<0.05.细胞抑制率达到92.08%,且有明显时间和剂量依赖性;流式细胞仪检测细胞增殖周期有滞于G0/G1期的趋势.并可见凋亡小体形成.结论氟硝丁酰胺对喉鳞癌细胞具有抑制生长和诱导凋亡的作用,为喉癌的性激素临床治疗提供了理论依据.     

Inhibitory effects of Celecoxib and Sc-58125 on proliferation of human carcinoma of larynx Hep-2 in vitro

Summary The inhibitory effects of two kinds of selective cyclooxygenase-2 inhibitors on the proliferation of human carcinoma of larynx Hep-2in vitro and their corresponding mechanisms were investigated. Hep-2 cells were cultured with two kinds of selective cyclooxygenase-2 inhibitors (Sc-58125 and Celecoxib) at various concentration for 24 h. Morphological changes were observed under the phase microscopy and the growth suppression was detected by using MTT colorimetric assay. Apoptotic DNA fragments were observed by agarose gel electrophoresis and the cell cycle and apoptotic rate were detected by flow cytometry (FCM) respectively. Hep-2 cells became rounded and detached from the culture dish after being treated with Celecoxib for 24 h, however, they remained morphologically unchanged with Sc-58125. Sc-58125 could increase G₂ phase cells, whereas, Clecoxib rose G₁ phase cells. Both of the two effects were dose-dependent. Moreover, the Hep-2 cells cultured with 50μmol/L and 100μmol/L Celecoxib showed obvious apoptosis, with the nuclear DNA of cells exhibiting characteristic DNA ladder. So Sc-58125 could inhibit the proliferation of Hep-2 cells by altering the G₂ phase cells. However, Celecoxib had the same effect by changing the G₁ phase cells and inducing apoptosis at higher concentration. DING Juan, female, born in 1977, M. D., Ph. D. This project was supported by the Teaching and Research Award Program for Outstanding Young Teachers in Higher Education Institutions of MOE of China     

Study on Taxol in Inhibiting Human Leukemia Cell Proliferation andInducing Apoptosis

Objective: To explore the effects of Taxol in inhibiting human leukemia k562 cell proliferation and inducing apoptosis in vitro. Methods: Human leukemia K562 cells were treated with Taxol of different concentrations for 12-72 hrs. Cell proliferation was evaluated by MTT assay and morphological changes of apoptosis were examined by microscopy. Cell apoptosis was determined by flow cytometry (FCM) and DNA gel electrophoresis. Results: Growth of K562 cells was inhibited by Taxol with an IC50 value of 0. 84μg/ml. Typical nuclear condensation and apoptosis bodies were observed as early as 24 hrs after a 0.5μg/ml Taxol treatment; Apoptotic rate of the Taxol-treated K562 cells increased from 3.7% to 24.0% in 24 hrs. No DNA ladder was observed by DNA gel electrophoresis. Conclusion: Taxol could inhibit K562 cell growth and induce apoptosis in vitro.     

肿瘤抑素诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的实验研究

目的探讨肿瘤抑素对体外培养的人喉癌Hep-2细胞系凋亡的影响。方法用MTT法和台盼蓝染色法观察肿瘤抑素对喉癌Hep-2细胞生长的抑制作用。实验分为对照组和治疗组．光镜、电镜观察细胞形态及超微结构变化，采用DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的梯形条带，TUNEL标记法检测细胞凋亡情况。结果随着肿瘤抑素浓度的增加喉癌Hep-2细胞的存活率下降。在相同浓度下。随着时间延长存活细胞逐渐减少。电镜观察治疗组细胞出现明显凋亡，琼脂糖电泳结果可见治疗组产生了特征性的DNA梯形条带，TUNEL标记法也证实治疗组可见明显的棕黄色凋亡细胞。结论肿瘤抑素通过诱导凋亡对体外培养的人喉癌Hep-2细胞系产生杀伤作用。     

雷公藤内脂醇联合热疗对Hep-2细胞的增殖抑制作用

目的：探讨雷公藤内脂醇(TL)联合热疗对导人喉癌细胞株（Hep-2）的增殖抑制率、细胞凋亡率、及细胞周期增殖各时相的影响,旨在为人喉癌治疗提供理论依据。方法：对数生长期Hep-2细胞随机分为对照组、单纯热疗组、单纯TL组及TL联合热疗组,应用MTT（噻唑蓝）摄入法检测Hep-2细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期各时相细胞百分率变化及细胞凋亡率,电子显微镜观察亚细胞结构改变。结果：单纯热疗组、单纯TL组和TL联合热疗组Hep-2细胞增殖抑制率分别为21.2%、28.5%和54.5%,TL联合热疗组细胞增殖抑制率高于单纯热疗组和单纯TL组（P<0.01）。与对照组比较,单纯热疗组、单纯TL组和TL联合热疗组细胞周期进程发生明显改变,G1期细胞增多（P<0.01）,S期细胞减少（P<0.01）,而G2/M期细胞相对增多（P<0.01）,细胞凋亡率升高（P<0.01）;与单纯热疗组、单纯TL组比较,TL联合热疗组上述各项指标变化差异均具有显著性（P<0.01）。电子显微镜观察,单纯热疗组、单纯TL组和TL联合热疗组Hep-2细胞核染色质趋边凝集,线粒体肿胀,可见凋亡小体改变;上述变化TL联合加热疗组轻于单纯热疗组、单纯TL组;对照组未见上述改变。结论：TL联合热疗可提高Hep-2细胞的增殖抑制率、抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡。     

喷他脒对人宫颈癌细胞株 Hela 细胞增殖和诱导凋亡的作用

目的:研究抗肺孢子虫类药物喷他脒对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用,探讨其抗癌机制。方法:应用MTT法检测不同浓度喷他脒对Hela细胞的生长抑制作用,光镜观察其形态学变化,流式细胞仪及流式细胞仪间接免疫荧光技术检测其细胞周期、细胞凋亡率及细胞内bcl-2蛋白的表达。结果:Hela细胞经不同浓度(分别为0.10μmol/L、1.00μmol/L、10.00μmol/L、100.00μmol/L)的喷他脒处理后,细胞生长明显受到抑制,且这种抑制作用呈时间及浓度依赖性,10.00μmol/L、100.00μmol/L喷他脒作用72 h后抑制率分别达到89.32%和97.26%。倒置显微镜和光学显微镜可观察到细胞增殖情况的形态学改变。流式细胞仪分析,实验组G0/G1期上升,S期下降,凋亡率上升,细胞内bcl-2蛋白表达率明显降低,并呈剂量依赖性。结论:喷他脒对Hela细胞生长的抑制作用呈明显的时间及浓度依赖性,并诱导其凋亡,同时可使抗凋亡基因bcl-2蛋白的表达下降。     

那可丁联合奥沙利铂对人舌鳞状细胞癌 Tca8113 细胞增殖及凋亡的影响

目的 探究那可丁联合奥沙利铂对人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞增殖及凋亡的影响。方法 将 体外培养的人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞随机分为空白对照组、奥沙利铂组、那可丁组和联合用药组。 CCK-8 法检测各组药物对Tca8113 细胞的存活率;Hoechst33342 染色荧光显微镜下观察凋亡形态变化;流 式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting 法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、PARP、Cleaved Caspase-9 及 Cleaved Caspase-3 蛋白的表达水平。结果 奥沙利铂组、那可丁组和联合用药组Tca8113 细胞存活率较空白 对照组低（P <0.05）,联合用药组较奥沙利铂组、那可丁组低（P <0.05）。Hoechst33342 染色法结果显示：奥 沙利铂组、那可丁组和联合用药组处理后均使人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞发生凋亡特征性改变。奥沙利铂组、 那可丁组和联合用药组Tca8113 细胞凋亡率较空白对照组高（P <0.05）,联合用药组较奥沙利铂组、那可丁 组高（P <0.05）。奥沙利铂组、那可丁组和联合用药组Bax、PARP、Cleaved Caspase-9 及Cleaved Caspase-3 的蛋白表达较空白对照组高（P <0.05）,而Bcl-2 的蛋白表达较空白对照组低（P <0.05）,联合用药组Bax、 PARP、Cleaved Caspase-9 及Cleaved Caspase-3 的蛋白表达较奥沙利铂组、那可丁组高（P <0.05）,Bcl-2 的 蛋白表达较奥沙利铂组、那可丁组低（P <0.05）。结论 那可丁联合奥沙利铂对人舌鳞状细胞癌Tca8113 细 胞的生长具有协同抑制作用,并促其凋亡,其作用机制可能与调节细胞凋亡相关蛋白表达有关。     

氯丙嗪协同紫杉醇对Hep-2细胞的增殖抑制作用

目的：观察盐酸氯丙嗪与紫杉醇联合应用对人喉癌细胞株（Hep-2细胞）的增殖抑制作用及其对细胞周期各时相的影响。方法：对数生长期Hep-2细胞分为单纯紫杉醇组（3.0、6.0和12.0 mg•L^-1）、氯丙嗪4.0 mg•L^-1）加紫杉醇（12.0 mg•L^-1）联合组和空白对照组（100 mL培养液）,应用MTT比色法和流式细胞术检测各组Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析单独及联合用药后Hep-2细胞的周期进程及凋亡率。结果：3.0、6.0和12.0 mg•L^-1单纯紫杉醇组Hep-2细胞增殖抑制率分别为14.0%、23.9%和36.7%,随紫杉醇浓度增加细胞增殖抑制率升高,三组间及组间两两比较差异均具有显著性（P<0.05）;联合组Hep-2细胞增殖抑制率为46.3%,明显高于相同剂量单纯紫杉醇组（P<0.05）;单纯紫杉醇组随其用药浓度的增加G₁期细胞减少,S期和G₂期细胞增多,与空白对照组比较凋亡率升高（P<0.05）。结论：在一定浓度下,盐酸氯丙嗪能够增强紫杉醇诱导Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期进程各时相变化和凋亡率,氯丙嗪与紫杉醇联合应用具有明显的协同效应。