999感冒灵颗粒抗呼吸道合胞病毒的初步研究

目的 探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用.方法 采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒( RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增殖和阻断作用)及不同给药浓度下对 RSV的抑制作用.测定细胞的半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI).结果 细胞的TC50为25 mg/ml;直接灭活和抑制增殖均对RSV有明显作用( P ＜0.01 );采用直接灭活方式时,其 IC50为7.43 mg/ml,TI为3.36;采用抑制病毒增殖时,其IC50为4.42 mg/ml,TI为5.66. CCK-8 法结果显示,在阻断以及抑制吸附两种给药方式下,病毒抑制率与病毒对照组之间差异无统计学意义.结论 999 感冒灵颗粒在直接灭活以及抑制病毒增殖两种给药方式下对RSV有一定的抑制作用.     

大黄蒽醌类化合物体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

目的:探讨大黄蒽醌类化合物(Rhubarb Anthraquinone Analogues, RAA)在细胞培养中抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法:采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,比较观察大黄蒽醌类化合物对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用.结果:RAA半数中毒浓度(TC50)为209.7 mg/L,其抗RSV的半数有效浓度(IC50)为96.7 mg/L,治疗指数(TI)为2.3,且对RSV抑制作用存在明显的量效反应关系.结论:RAA在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用.     

热毒宁注射液对人鼻病毒(N_(36))的体外抑制作用

目的：研究中草药热毒宁注射液对人鼻病毒（HRV，N36）的抑制作用。方法：以利巴韦林为阳性对照药，采用细胞培养技术及MTT比色法，观察在热毒宁干预下，人胚胎上皮细胞的病变效应（CPE）及吸收度值（A），计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及不同给药方式下热毒宁对HRV的抑制作用效果。结果：热毒宁注射液半数中毒浓度TC50为5．873g／L。预防、直接灭活及治疗给药方式下，CPE法测定的半数有效浓度EC50分别为0．576、0.836及0．640g／L，治疗指数（TI）分别为10．20、7．03及9、18；MTT法测定的EC50分别为0．551、2.310及1．230g／L，TI分别为10．66、2．54及4．78。结论：热毒宁对HRV（N36）有直接灭活及抑制增殖作用，对其感染靶细胞有阻断作用，且呈明显量效关系。热毒宁对HRV（N36）的抑制作用，以预防给药更明显。     

荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒的作用

目的: 探讨荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用. 方法: 采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照,观察比较荔枝核黄酮类化合物对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用. 结果: 荔枝核黄酮类化合物半数中毒浓度(TC50)为152.9 mg/L,其抗RSV的半数有效浓度(IC50)为58.6 mg/L,治疗指数(TI)为2.6,体外抗RSV作用与病毒唑相当,且对RSV抑制作用存在明显的量效关系. 结论: 荔枝核黄酮类化合物在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用.     

龙胆抗病毒有效部位RG3-1体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的 探讨龙胆抗病毒有效部位(RG3-1)体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法 采用煎煮法、二氯甲烷萃取法和柱层析法分离提取RG3-1.以病毒唑为阳性对照药物,采用细胞病变抑制试验观察RG3-1对RSV的抑制作用.结果 RG3-1半数中毒浓度(TC50)为5.29mg/mL,抑制RSV的半数有效浓度EC50为262.95μg/mL,治疗指数(TI)为20.12;RG3-1对RSV的抑制存在量效关系;RG3-1具有直接灭活RSV的作用;在感染后至少10h以内给药,RG3-1能够有效的抑制RSV复制.结论 RG3-1在HeLa细胞中对RSV有明显的抑制作用.     

龙胆水提液体外抑制呼吸道合胞病毒作用研究

目的了解龙胆水提液体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法采用细胞病变抑制实验观察龙胆水提液在HeLa细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用.结果龙胆水提液的半数中毒浓度(TC50)为15.25mg/ml;抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为1.07mg/ml,治疗指数(TI)为14.25;且对RSV的抑制作用存在明显的量效反应关系(P<0.01).结论龙胆水提液在HeLa细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用.     

穿心莲提取物体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

目的：了解穿心莲提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抑制作用。方法：通过光镜观察不同药物浓度下：RSV对Hep-2的致病作用(CPE)，四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测穿心莲提取物对RSV的抑制和对：RSV感染HeF2细胞的保护作用。结果：穿心莲提取物对RSV无直接灭活作用，亦不能阻止RSV的吸附，各药物浓度均出现典型的CPE；穿心莲提取物有抑制RSV生物合成的作用，其半数抑制浓度(IC50)是1．52μg，／ml，治疗指数为36，且随着药物浓度的增加，CPE特征明显逐渐减弱，病毒滴度逐渐降低，而病毒抑制率则明显增高。结论：穿心莲提取物在体外可能是通过抑制生物合成来发挥抗RSV作用。     

清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒抑制作用的实验研究

目的 研究清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染细胞的抑制作用.方法 用不同剂量的清肺口服液制成含药血清处理呼吸道合胞病毒感染后的Hep-2细胞,用组织细胞培养法,采用细胞病变(CPE)观察和四氮唑盐还原法(MTT法)检测清肺口服液含药血清对RSV感染细胞的增殖抑制作用.结果 在Hep-2细胞上,清肺口服液的最大无毒浓度为1:9.100TCID50 RSV攻击后Hep-2细胞的OD值明显降低,加入中高剂量含药血清后OD值升高.结论 清肺口服液含药血清对RSV有抑制作用.     

空心莲子草微乳体外抗RSV作用的实验研究

目的 用空心莲子草微乳进行细胞内抗呼吸道合胞病毒(RSV)的研究,以扩大该药新的抗病毒谱.方法 采用细胞病变效应法(CPE)、逆转录-PCR,观察检测空心莲子草微乳对Hep-2细胞的细胞毒性作用和抗RSV作用.结果 除320mg/ml组外,各药物浓度组处理的细胞均未见细胞的毒性反应.药物对RSV增殖的抑制作用随着药物浓度升高,细胞病变数减少,其半数有效浓度(IC50)为160 ug/ml.虽然各药物浓度组中均可检出RSV-RNA,但在药物对RSV抑制作用组,病毒滴度则随着药物浓度的增加而减少.结论 空心莲子草微乳对细胞的毒性作用低.该药虽不能直接杀灭RSV使细胞免受病毒的攻击,但对进入细胞内的病毒有抑制作用.     

银黄清肺胶囊含药血清体外抗呼吸道合胞病毒实验研究

目的 研究银黄清肺胶囊含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法 采用观察CPE及MTT法,观察在银黄清肺胶囊含药血清干预下,感染RSV Hep-2细胞的CPE及光密度值,从而比较不同给药方式(预防给药、治疗给药、直接杀灭)及不同药物剂量下银黄清肺胶囊对RSV的抑制作用. 结果 在三种给药方式中,与相应浓度空白血清比较,各浓度银黄清肺胶囊与利巴韦林片含药血清OD值均明显增高(P<0.05);其中稀释度为3.13%的利巴韦林片含药血清和稀释度为6.25%的银黄清肺胶囊含药血清相比本组其他浓度含药血清OD值均明显增高(P<0.05).结论 银黄清肺胶囊含药血清对RSV有直接灭活作用,对RSV侵入Hep-2细胞有阻断作用,对RSV在Hep-2细胞内增殖有抑制作用. 其中稀释度为3.13%的利巴韦林含药血清和稀释度为6.25%的银黄清肺胶囊含药血清相比本组其他浓度含药血清体外抗RSV活性强.     

连翘抑制呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的 探讨连翘在细胞培养中抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法 采用细胞培养技术，以病毒唑为阳性对照药，比较观察连翘水提液对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用。结果 连翘半数中毒浓度(TC50)为7．25mg/ml，其抗RSV的半数有效浓度(EC50)为0．15mg/ml，治疗指数(T1)为48．33，且对RSV抑制作用存在明显的量效反应关系；于感染RSV后0、2、4、6、8^加入连翘水提液均有抑制RSV活性作用。结论 连翘在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用。     

盐酸阿比朵尔抗呼吸道合胞病毒机制初探

目的:明确盐酸阿比朵尔抗吸道合胞病毒(RSV)Long株的活性并探讨其抗病毒机制。方法:通过细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察盐酸阿比朵尔抗RSV的作用。结果:盐酸阿比朵尔的半数毒性浓度(TD50)为85.39 mg/L,当该药浓度为25 mg/L时,药物抗病毒生物合成组、药物直接作用组、药物抗吸附4 h组、药物抗病毒吸附8 h组的病毒抑制率分别能达到81.61%,79.57%,40.39%和78.60%。4组相应的药物半数有效浓度(ED50)为11.52,8.74,25.36和10.40 mg/L。结论:盐酸阿比朵尔在体外能明显抑制RSV引起的CPE效应,病毒抑制率随药物浓度的增加而增高,盐酸阿比朵尔能通过多种途径发挥抗RSV的作用。     

抗病毒中药1号在MDCK细胞中对流感病毒B的抑制作用

目的　为了解抗病毒 1号单味中草药对流感病毒B的抑制作用。方法　本研究采用细胞培养技术 ,以病毒唑为阳性对照药 ,观察抗病毒 1号对流感病毒的抑制作用。结果　抗病毒 1号半数中毒浓度(TC50 )为 60 53mg/ml ;治疗和预防给药方式均有抗流感病毒作用 ,其抗流感病毒B的半数有效浓度 (EC50 )分别为 8 88mg/ml和 9 2 1mg/ml ;治疗指数 (TI)分别为 6 81和 6 57。结论　抗病毒 1号对流感病毒B的抑制作用存在着明显的量效关系。     

甘草水提液、甘草酸体外抗呼吸道合胞病毒作用的比较

目的 比较甘草水提液、甘草酸体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法 以病毒唑为阳性对照药物,用细胞病变抑制(CPEI)实验比较甘草水提液与甘草酸对RSV的体外抑制作用.结果 甘草水提液半数中毒浓度(TC50)为5.1mg/ml,抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为0.215mg/ml,治疗指数(TI)为23.72;甘草酸的TC50为0.47mg/ml,没有明显抑制RSV的作用.结论 本研究发现甘草水提液在Hela细胞培养中对RSV有明显的抑制作用,而甘草酸则未见明显抑制作用,因此,甘草中可能存在其它抑制RSV的活性成分.     

甘草醇沉淀物有效部位对RSV作用的体外实验研究

目的 比较甘草的醇沉淀物乙醇提取部位体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)作用.方法 采用薄层色谱法、Molish反应定性鉴定甘草乙醇提取部位;以利巴韦林为阳性对照药,采用细胞培养技术及四氮唑蓝(MTT)比色法,观察这些提取部位对Hela细胞的药物毒性作用及抑制RSV作用.结果 HPD 722-乙醇部位、HPD 750-乙醇部位、D 101-乙醇部位均不含甘草酸、黄酮类物质、甘草多糖;对RSV感染的治疗指数(TI=TC50/EC50)依次为123.93、3.13、5.35.结论 甘草醇沉淀物中HPD 722-乙醇部位在体外具有显著抑制RSV作用,可能是新的抗RSV有效部位.     

己酮可可碱对呼吸道合胞病毒所致的TNF-α基因表达水平的影响

观察己酮可可碱(PTX)对呼吸道合胞病毒(RSV)所诱导的巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)含量及TNFαmRNA表达水平的影响。收集Balb／c小鼠腹腔巨噬细胞,随机分成三组①对照组(NOR组);②感染组(RSV组)培养基中含有106pfu的RSV;③已酮可可碱组(PTX组)用RSV(106pfu)感染后,培养基中加入PTX(1mg／ml);每组于RSV感染巨噬细胞20h后,用ELISA法测定培养细胞上清中TNF-α含量的变化,同时用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组巨噬细胞TNF-αmRNA表达水平。结果表明感染组中TNF-αmRNA表达水平与对照组相比明显增多。PTX组TNF-αmRNA的表达和感染组相比明显降低。TNF-α的含量也有相应的变化与对照组比较,感染组明显升高(P<0．01);而PTX组与感染组比较明显下降(P<0．01)。认为PTX能抑制RSV所诱导的巨噬细胞TNF-α的基因表达,并减少TNF-α的产生。     

呼吸道合胞病毒抑制JAK/STAT信号通路减少干扰素-β的表达

目的:探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染上皮细胞早期对酪氨酸蛋白激酶/信号传导与转录活化因子(JAK/STAT)信号通路和β干扰素(IFN-β)表达的影响。方法:RSV体外感染人喉癌上皮细胞(Hep2)0,1,2,4,8,12,24 h后分别应用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测感染后各个时间段IFN-β的浓度以及STAT1、STAT2 mRNA的表达水平。结果:RSV感染Hep2细胞后,IFN-β浓度于第2小时后略有上升,但与未感染细胞基础水平无差异性变化(P>0.05)。STAT1、STAT2 mRNA表达第1小时即上升,第2小时达峰值,随后逐渐下降,在第24小时达最低值(P<0.05)。结论:RSV感染Hep2细胞早期上调STAT1、STAT2 mR-NA,继而抑制其转录,对上皮细胞IFN-β的分泌无明显影响。     

锌盐对体外呼吸道合胞病毒的作用研究

目的研究锌盐抗呼吸道合胞病毒的作用。方法采用细胞病变抑制实验,观察锌盐在HEP-2细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用,以抑制指数为评价指标。结果硫酸锌和醋酸锌在10～100μm/mL时,对细胞无毒性作用。先病毒后锌盐试验50μm/mL浓度的硫酸锌和醋酸锌,抑制指数为2。先锌盐后病毒试验结果显示：25μm/mL浓度的硫酸锌和醋酸锌,抑制指数为4。结论锌对呼吸道合胞病毒（RSV）有直接杀伤作用,规律补锌可以预防呼吸道合胞病毒感染。