大鼠肝纤维化模型建立及肝纤维化的检测

肝纤维化是各种慢性肝病的共同病理基础,是肝硬化的初始阶段,其本质是细胞外基质的合成与降解失衡,导致细胞外基质在肝内过量沉积,最后导致正常肝脏组织结构及功能的改变。为了研究肝纤维化的发生机制,筛选出治疗肝纤维化的药物,研究其作用及药物作用机制,建立一个理想的肝纤维化模型尤为重要。理想的肝纤维化动物模型应具备以下条件:与人类肝纤维化的基本病变特征相似;肝纤维化的形成具有一定的发生发展及明显的分期过程,病变发生发展存在一个可逆与不可逆的阶段性演变     

肝纤维化实验动物模型的建立与评价

肝纤维化是肝脏对各种病因所致的慢性损伤共有的做出应答反应的结果,其中心环节是组织损伤后进行修复反应时细胞外基质合成、降解与沉积的不平衡。肝纤维化是慢性肝病重要的病理特征,进一步发展则可引起肝小叶改建,假小叶和结节形成,进入肝硬化阶段,甚至发生恶性转变。随着研究的不断深入,人们对肝纤维化的发生机制有了更深的认识,明确提出肝纤维化甚至肝硬化有可能逆转的观点。     

肝纤维化动物模型的研究进展

肝纤维化是多种慢性肝病发展至肝硬化的共同病理学基础,虽然对肝纤维化的研究已从细胞水平进入分子水平,但肝纤维化动物模型的建立,仍是临床研究和实验研究的重点和难点.本文就数种肝纤维化模型的建立方法加以综述,并对各种模型的优、缺点和各自用途进行比较,提出了肝纤维化动物模型的研究方向.     

肝纤维化动物模型的研究概况

慢性肝病大多数都有肝纤维化 ,其中 2 5 %～ 40 %最终发展成肝硬化乃至肝癌。阻断肝纤维化成为慢性肝病治疗中一个关键问题。建立肝纤维化动物模型是肝病研究中的一项重要课题。1　四氯化碳中毒性肝纤维化动物模型①用 40 %ＣＣｌ4油溶液 ,按 2ｍｌ ｋｇ体重的剂量 ,予Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射 ,每周 2次 ,共 8周。该模型制作方法简单 ,肝纤维化病变过程可靠。②用 40 %～ 5 0 %ＣＣｌ4油溶液 ,按每百克体重 0 3ｍｌ的剂量 ,大鼠皮下注射 ,每周 2次。第 2周开始 ,隔日以 2 0 %～ 30 %乙醇 1ｍｌ灌胃。饲混有 0 5 %胆固醇低胆碱饲料 ,连续…     

中药在细胞因子水平抗肝纤维化的研究进展

肝纤维化(liver fibrosis,HF)是肝脏对各种原因所致肝损伤的代偿修复反应,又是肝损害的促进因素,这种动态演变过程是各种慢性肝病身肝硬化发展的必经阶段,是肝病慢性化的共同特征.     

大鼠酒精性肝纤维化复合模型的建立

目的:采用复合因素制备大鼠酒精性肝纤维化模型。方法:Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、酒精性肝纤维化模型组和微量CCl4处理组。酒精性肝纤维化模型组大鼠予以喂食酒精、玉米油、吡唑,结合微量CCl4腹腔注射造模。微量CCl4处理组仅予以微量CCl4腹腔注射。观察各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyltransferase,γ-GT)水平和肝组织病理学的变化。结果:造模第12周,成功建立大鼠酒精性肝纤维化模型。在造模期间,肝脏组织病理学依次表现为酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化。酒精性肝纤维化模型组大鼠肝/体比值,血清ALT、AST及γ-GT水平与正常对照组比较,差异均有统计学意义。结论:酒精灌胃结合微量CCl4腹腔注射制备酒精性肝纤维化动物模型,具有模型稳定、成功率高的特点,并可提供不同阶段酒精性肝病的实验模型。     

肝纤维化实验动物模型造模方法及应用研究进展

肝纤维化是肝脏对持续损伤作出的以细胞外基质过度累积为主要特点的一种常见的免疫应答。目前尚无理想的治疗药物或方法,因此研究肝纤维化的发生机制对寻找有效的治疗药物及其方法有重要意义,理想的动物实验模型是上述研究的关键所在。尽管目前有四氯化碳造模法、乙醇造模法及免疫造模法等肝硬化动物模型制备方法,但各法均有其利弊,而理想的、重复性好且适合广泛推广应用的标准模型仍需继续探索。本文对肝纤维化动物模型的研究和应用进展作一综述。     

肝纤维化的治疗研究进展

肝纤维化是各种病因所致的慢性肝病的共同病理过程 ,也是向肝硬化发展的主要中间环了 ,其主要发病机制是肝脏细胞外基质的过度增多和异常沉积 ,因此阻断肝纤维化的发生和发展具有重要意义。因此抗纤维化成为治疗的主要手段。1　肝纤维化形成的几个重要方面目前认为 ,在各种损伤性因素的始动作用下 ,肝脏星状细胞 (ＨＳＣ)的激活是肝纤维化发生发展的中心环节。肝脏星状细胞的激活包括启动和持久化两个阶段[1 ] 。启动是指ＨＳＣ某些早期结构基因的表达 ,转录的激活及信号分子的产生 ,从而导致ＨＳＣ形态改变 ,对致纤维化、细胞增殖、收缩的…     

肝纤维化动物模型研究进展

肝纤维化动物模型的建立对全面研究肝纤维化的病因机制及临床肝纤维化的早期诊断、治疗及预防手段发展有重大意义。但是由于人和动物种属差异及肝纤维化的病因多样性,肝纤维化动物模型的建立还处于不断研究和探索中。本文就近期研究领域中较成熟的肝纤维化模型进行了简要综述,以供基础及临床研究参考。     

寄生虫感染所致肝纤维化的疾病负担及病理特征

血吸虫、肝吸虫、包虫等寄生虫以肝脏为主要寄生或致病脏器，肝纤维化是这些寄生虫感染后宿主的主要病理特征以及宿主致病致死的主要原因。寄生虫感染所致肝纤维化在全球仍有较重的疾病负担，并由于其独特的疾病特征使得寄生虫感染所致肝纤维化动物模型在肝纤维化研究中具有独特地位。寄生虫感染所致肝纤维化区别于其他类型肝纤维化的最本质特征就是寄生虫分泌的各类虫源分子是肝纤维化的始动因素，虫源致病分子包括蛋白、核酸、脂质、代谢小分子等类型。虫源致病分子在宿主肝脏内诱导形成2型免疫或炎症微环境，虽然对寄生虫感染后肝脏内2型免疫的启动、维持及消退过程进行了深入研究，但诸多核心机制仍不明确。慢性炎症最终激活星状细胞等类型细胞转分化为肌成纤维细胞（myofibroblast, MF）并促使肝纤维化的形成；清除寄生虫后MF可能发生逆分化、凋亡、衰老等转归过程，肝纤维有可能发生逆转。深入研究MF的激活及转归过程是有效预防和治疗肝纤维化的基础。本文综述了寄生虫感染所致宿主肝纤维化的疾病负担及病理特征。     

肝纤维化诊断中肝穿病理分期及非创伤性指标相关性研究

目的评价肝纤维化非创伤性指标对诊断肝纤维化的应用价值。方法测定122例慢性肝炎病人的血清肝纤维化指标．肝脏B超检查,并对肝活检组织学检查进行比较,以建立非创伤性指标对肝纤维化的诊断优势。结果超声检查对门脉高压性肝硬化的诊断价值已肯定,但对轻、中度肝纤维化患者超声检查的指标的变化还不很显著,随着肝纤维化分期的上升,透明质酸（HA）、Ⅲ型胶原（PCIU）、Ⅳ型胶原（cIV）、层黏连蛋白（LN）的水平也随之增高,其水平与肝纤维化分期呈正相关。结论血清肝纤维化相关标志结合B超检查门静脉主干内径、脾长径及脾静脉内径对肝纤维化有良好的诊断价值,联合检测结果与肝纤维化病理分级有一定的相关性。     

肝脏剪切波速与肝纤维化分期及血清肝纤维化指标之间的相关性

目的:探讨慢性乙型肝炎患者肝脏剪切波速与肝纤维化分期及血清肝纤维化指标之间的相关性。方法:使用ACUSON S2000彩色多谱勒超声诊断仪,测量96例慢性乙型肝炎患者的肝脏剪切波速,分析肝脏剪切波速与肝纤维化分期及血清肝纤维化指标之间的相关性。结果:肝脏剪切波速与肝纤维化分期有显著相关性,相关系数为0.684;肝脏剪切波速与Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏蛋白、透明质酸均有显著相关性,相关系数分别为0.398、0.392、0.426和0.376。结论:肝脏剪切波速与肝纤维化分期及血清肝纤维化指标有较好的相关性,可以利用肝脏剪切波速来评估肝纤维化程度。     

对抗大鼠肝纤维化模型自发逆转的实验研究

目的探讨一种可行的方法对抗CCL4腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型的自然恢复趋势,以确保药物或细胞移植等方法对肝纤维化治疗效果的可靠性。方法50%CCL4腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,然后随机分4组改皮下注射不同剂量CCL4（0.02-0.08ml/100g）,通过纤维化程度分期、纤维化半定量统计分析、肝功能和血清肝纤维化指标测定来评估肝纤维化。结果CCL4腹腔注射6周,肝组织汇管区和血管周围出现较粗大的纤维间隔。在抗逆转实验的第2周和第4周,皮下注射0.06ml/100g体重CCL4组的纤维化水平与造模成功时的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论对大鼠肝纤维化模型使用皮下注射50%CCL4,0.06ml/100g体重,1次/周,能够将造模时的纤维化水平维持4周。     

Fuzheng Huayu Capsule (扶正化瘀胶囊) in the treatment of liver fibrosis: Clinical evidence and mechanism of action

Liver fibrosis represents the wound healing response to liver injury from a wide variety of etiologies.Remarkable progresses have been shown in the field of liver fibrosis in a range of areas in the past years.In particular,the reversibility of liver fibrosis has been well documented in both patients and animal models.Great progresses have been made in the treatment of liver fibrosis with Chinese medicine.This review summarizes the effects of Fuzheng Huayu Capsule(扶正化瘀胶囊,FZHYC) in treating liver fibrosis and inflammation induced by chronic hepatitis B in clinical trials and the mechanism of action of FZHYC in reversing liver fibrosis in vivo and in vitro experiments.     

瞬时弹性记录仪诊断病毒性肝炎肝纤维化的临床应用

目的探讨瞬时弹性记录仪(FS)测定肝脏硬度值对肝纤维化诊断价值。方法对112例入院诊断为慢性乙型肝炎(CHB)的患者行肝穿刺,诊断肝脏纤维化;放射免疫法检测血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC的水平;用FS诊断仪探测CHB患者肝脏硬度值(LSM),并与肝脏的组织学纤维化分期(S)进行比较和相关性分析。结果 112例CHB患者LSM均值为(14.23±8.11)kPa,肝纤维化S3期的LSM值(13.41±5.94)kPa,肝纤维化S4期的LSM值(16.25±8.09)kPa,且LSM值随纤维化分期从S0~S4期逐步升高,LSM及HA与肝脏纤维化分期呈显著正相关(r=0.896,P<0.01;r=0.724,P<0.01);患者血清C-Ⅳ、LN、PⅢNP 3项与肝脏纤维化分期也呈正相关,但差异无统计学意义。结论 FS检测慢性肝病患者肝纤维化程度稳定性良好,是一种无创、无痛、快速、客观定量检测肝纤维化的有效方法,LSM值可以作为判断肝纤维化的程度及抗纤维化疗效的参考指标。     

维生素D受体基因多态性与肝纤维化关系初步研究

目的 探讨维生素受体（VDR）基因多态性与中国汉人肝纤维化的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性长度多态性（PCR-RFLP）方法测定122例乙型肝炎肝纤维化，87例慢性乙型肝炎非肝纤维化患者和61例健康对照者VDR基因多态性，观察其与肝纤维化关系，分析血清肝纤维化标志物、生物化学指标与比较VDR基因型的关系。结果 肝纤维化组aa基因型频率和a等位基因频率均高于非肝纤维化组和健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．01），健康对照组与非肝纤维化组VDRaa基因型频率比较无统计学意义（P〉0.05）。未发现VDR基因多态性与肝纤维化标志物、肝功能有关。多因素logistic回归分析显示a等位基因是肝纤维化独立的危险因素。结论 VDR基冈多态性与中国人肝纤维化发病存在基因连锁，a等位基因可能是慢性乙型肝炎进展为肝纤维化的危险因素．     

BMSCs作用于肝纤维化的分子机制研究

随着礼会的发展,肝硬化病例在我同的发病率呈逐年增加的趋势。肝硬化的主要原因是各种慢性损伤,主要的病理学特点是肝脏的纤维化进程。目前,肝移植是用来解决肝纤维化有效的手段,但是,在世界范围来看,肝源的缺乏,使肝移植的成活率和可行性不高。随着医学对于肝纤维化的研究,发现这个过程是一个可逆的过程,并且发现了一种能够发挥很好作用的细胞移植方法——骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs）移植。这种方法有望成为肝纤维化的有效治疗方法。本文结合国内外研究,就BMSCs治疗肝纤维化的研究现状作一综述,旨在为研究BMSCs逆转肝纤维化的研究提供参考。     

3.0 T MRI表观扩散系数诊断中度肝纤维化价值的实验研究

目的探讨3.0 T MRI表观扩散系数（ADC）诊断中度肝纤维化的价值。方法采用猪血清腹腔注射复制肝纤维化大鼠模型。采用3.0 T MRI 行DWI检查,计算b值=800 s/mm2时ADC 值。DWI 检查后快速处死大鼠,行病理检查,对照组（12 只）、轻度肝纤维化组（S1期18 只）和中度肝纤维化组（S2、S3期共22 只）比较采用单因素方差分析及SNK 法多重比较。采用ROC 曲线分析ADC 值区分中度和轻度肝纤维化的效能。结果中度肝纤维化组大鼠肝脏ADC 值为（1.47±0.39）×10-3 mm2/s,轻度肝纤维化组大鼠肝脏ADC 值为（1.78±0.67）×10-3 mm2/s,两组比较,差异有统计学意义,对照组与轻度肝纤维化组大鼠肝脏ADC 值比较差异无统计学意义（p >0.05）,与中度组比较差异有统计学意义（p <0.05）。ADC 值区分中度肝纤维化和轻度肝纤维化的ROC曲线下面积（AUC）为0.79,以ADC 值=1.68×10-3 mm2/s为界值时,诊断的敏感性和特异性分别为61%和100%。结论3.0 T MRI 功能弥散加权成像能反映早期肝纤维化微观改变,肝脏ADC值有助于中度肝纤维化的诊断。     

从痰毒瘀损肝体探讨肝炎后肝纤维化发病机制渊薮

系统阐述中医关于痰毒瘀损肝体理论的基本内涵,探讨了痰毒瘀损肝体与肝纤维化的密切关系,提出痰毒瘀损肝体是肝纤维化发生发展的重要病理因素。并解决了肝纤维化的中医病名、病因病机、病位等诸多难题,从而使肝纤维化的中医论治有了自身系统的中医基础理论的支持和准确的切入点,并有望取得突破。     

联合检测细胞外基质因子对肝纤维化定量诊断方法的研究

目的通过对血清中常见的多种细胞外基质因子的检测,创建一种无创、简便易行的定量诊断肝纤维化的方法。方法以肝活检为肝纤维化诊断的金标准,同时检测肝纤维化和正常对照者血清中的透明质酸、层黏连蛋白、纤黏连蛋白、血清Ⅳ型胶原、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽和血清脯氨酸肽酶,将两种方法检测的结果进行拟合优度检验,建立起用多种细胞外基质因子预测肝纤维化的多元Logistic回归方程。结果肝硬化组和慢性乙型肝炎(重度)以上各指标均无显著差别,慢性乙型肝炎(重度)>慢性乙型肝炎(中度、轻度)>正常对照。透明质酸、层黏连蛋白、血清Ⅳ型胶原、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽和血清脯氨酸肽酶各因素均进入回归方程。以回归方程预测的肝纤维化T值大于0.95者做判断肝纤维化的标准,结果该法诊断的灵敏度和特异度分别为86.7%和80.0%,符合率为85%。结论肝细胞基质透明质酸、层黏连蛋白、纤黏连蛋白、血清Ⅳ型胶原、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽和血清脯氨酸肽酶是诊断肝纤维化的敏感指标,联合检测可以对肝纤维化进行定量预测诊断。