日本血吸虫31/32kDa抗体的检测及其在诊断中的作用

目的：探讨纯化日本血吸虫３１／３２３ｋＤａ抗原（Ｓｊ３１／３２）诊断的特异性、敏感性及疗效考核价值。方法：利用纯化Ｓｊ３１／３２与可深性虫卵抗原（ＳＥＡ）ＥＬＩＳＡ方法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清。结果：急、慢性血吸虫病患者血清抗Ｓｊ３１／３２抗体检出率为１００％和９５％，与正常人、肝吸虫和肺吸虫病患者血清未出现交叉反应；抗ＳＥＡ抗体检出率为９７．４％和９０％，与正常人和肠道吸虫病患者有不同程     

抗重组Sj26（rSj26）GST多抗金免疫测定法检测日本血吸 …

为探讨ｆＳｊ２６ＧＳＴ抗原诊断日本血吸虫病的应用价值，本研究以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体为捕获抗体和金标记抗体，建立了夹心斑点金免疫测定法（Ｓ－ＤＩＧＦＡ０检测日本血吸虫循环抗原的简易免疫学方法。同时以ＳＥＡ－ＤＩＧＦＡ和ＳＥＡ－ＥＬＩＳＡ检测抗体作对照。结果三种方法检测慢性血吸虫病人的敏感性分别为７６．７％〉９８．９％和９６．５％；特异性分别为９７．５％，９６．３％和９１．２％。初步试验结果表     

日本血吸虫重组32kD抗原的纯化和诊断应用

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结合电渗洗脱的方法分离、纯化日本血吸虫重组３２ｋＤ抗原（ｒＳｊ３２）；用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析纯化抗原的免疫活性。用纯化抗原、日本血吸虫成虫抗原（ＡＷＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）分别检测慢性血吸虫病人、肺吸虫病人、肝吸虫病人、钩虫病人和健康人血清抗体。结果表明：纯化的ｒＳｊ３２分子量为３７ｋＤ，有较好的免疫活性；用其检测日本血吸虫病的敏感性和特异性与虫源性抗原（ＡＷＡ和ＳＥＡ）无显著性差异。提示ｒＳｊ３２可代替ＡＷＡ和ＳＥＡ用于日本血吸虫病诊断     

单克隆抗体双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原对抗血吸虫药疗效考核的价值

应用日本血吸虫抗３１／３２ｋＤ（１Ｄ＝０．９９２１ｕ）单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验（双夹心ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫循环抗原，用于城市急性血吸虫病经吡喹酮治疗５年后无再次感染患者的疗效考核，阳性率为１２．２０％。与快速法ＥＬＩＳＡ检测循环抗原的符合率为９６．３４％。与常用检测抗体的ＩＨＡ、ＥＬＩＳＡ法平行对照，阳性率基本一致。与改进的粪便孵化法比较，两法的符合率为８５．３６％。无疫水接触史健康人未见阳性反应。对肝病患者无交叉反应。结果显示双夹心ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原敏感性高，特异性强，具有良好的抗血吸虫药物疗效考核价值。     

日本血吸虫不同发育阶段抗原检测IgG及IgG4的疗效考核价值

目的：建立具有疗效考核价值的抗原－－抗体检测系统。方法：用日本血吸早不同发育阶段抗原（ＡＷＡ、ＡＭＡ、ＡＥＳＡ、ＳＥＡ、ＳＩＥＡ）检测治疗前及治疗后不同时间慢性血吸虫病人血清中特异性ＩｇＧ及ＩｇＧ４并测定肺吸虫病人、肝吸虫病人和健康人血清的交叉反应性。结果：不同发育阶段抗原－ＩｇＧ检测系统间对慢性血吸虫师人、肺吸虫病人、肝吸虫病人和健康人血清测试的阳性率无显著性差异（Ｐ〉０．０５），慢性血吸虫病人     

夹心法ELISA检测血吸虫循环抗原的研究

用抗血吸虫成虫抗原的多克隆抗体为捕捉抗体，抗虫卵抗原的单克隆抗体ＭＧ２为标记抗体的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原。对慢性血吸虫病的阳性率为９５．４％；检测正常人血清２２２份，１１例假阳性，对１７例肺吸虫病人和４０例其他寄生虫病人的交叉反应率分别为１１．７％和２．５％；检测血吸虫病中度流行区人群６２２名和低感染区人群１０９９名，阳性率分别为２２．５％和４．６％。对血吸虫病疗效考核的结果表明     

金标抗rsjc26GST多然隆抗体斑点免疫金渗滤法检测血吸虫？…

目的;探索一种简捷的检测吸血虫循环抗原的方法,方法：应用抗日本血吸虫重组谷胱甘肽－Ｓ－转移酶的多克隆抗体标记胶体金,建立检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的双抗体夹心斑点免疫金渗滤法（Ｓ－ＤＩＧＦＡ）并以Ｓ－ＥＬＩＳＡ作对比。结果：用Ｓ－ＤＩＧＦＡ和Ｓ－ＥＬＩＳＡ平行检测９５例慢性血吸虫病患者,阳性检出率分别为８１．０５％和８２．１１％,正常人血清１８０份,两者的假阳性率分别为６．６７％和７．７８％     

日本血吸虫大陆株26KDa基因重组蛋白保护性免疫力的研究

本文报道了ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ分别抗原可诱导宿主产生抗日本血吸虫感染的保护性免疫力，获得免疫的小鼠虫贡荷与肝、脾组织中虫卵负荷均下降，减虫率与肝、脾减卵分别为３０与５７．１１％、７９．９７％。ＥＬＩＳＡ测免疫鼠血清特异性抗体水平明显升高。提示ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ作为日本血吸虫病候选疫苗矍有广泛应用前景。     

眼肌结合抗体的检测及应用

自猪和牛眼肌提取眼肌抗原，建立了检测人血清中循环眼肌结合抗体（ＥＭＢ－ａｂ）的ＥＬＩＳＡ法。此法简便，重复性好，特异性强，敏感性较用一种抗原（猪或牛）要高。检测４０例甲亢患者阳性率为３０．０％，２３例ＳＬＥ患者阳性率为２６．９％，与正常对照组比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。     

固相生物素－亲和素ELISA检测HIV抗体方法的建立与应用

采用生物素化ＨＩＶ合成肽抗原与预吸附在ＥＩＡ反应板上的亲和素结合，建立检测ＨＩＶ抗体的固相生物素－亲和素ＥＬＩＳＡ方法。经ＨＩＶ（１＋２）抗体参考血清Ｐａｎｅｌ检定，其灵敏度（１３／１３）１００％，特异性（２８／２８）１００％，批内变异系数＜７％，批间变异系数＜１０％。１０５６８例确认血清标本验证，阳性检出率１００％，阴性总符合率９９．８％，假阳性率０．２％。与常规间接ＥＬＩＳＡ法比较，本法操作简便，试验所需时间短，灵敏度、特异性和稳定性提高明显     

采用间接免疫荧光法监测流行性出血热疫苗接种3年后的人群抗体水平

目的：研究接种疫苗３年后人群抗体水平及间接免疫荧光抗体检测方法在流行性出血热免疫抗体检测中的应用。方法：采用间接免疫荧光法测定特异性ＩｇＧ抗体,并对２６６例血清样本进行分析。结果：全程接种与未加得抗体阳性率分别为７０．６３％,５９．７９％,并拍摄到抗原抗体免疫荧光结合物。结论：全程接种疫苗３年后人群抗体保持较高水平,加强接种后免疫效果更佳。     

间接血凝法检测抗Sm抗体和抗RNP抗体

应用间接血凝法测定抗Ｓｍ抗体和抗ＲＮＰ抗体。对不同疾病的检测结果表明，建立的该种方法与免疫电泳法结果无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。对ＳＬＥ病４５例检测抗Ｓｍ抗体阳性率为１００％，抗ＲＮＰ抗体阳性率为９１％，抗Ｓｍ抗体可作为ＳＬＥ的特异性标志抗体，抗ＲＮＰ抗体在ＲＡ、ＰＳＳ、ＤＭ、ＭＣＴＤ病人中检出，其中ＭＣＴＤ病２３例，抗ＲＮＰ抗体阳性率高达９６％。且凝集效价高，可作为此病诊断的重要依据。间接血凝法具有操作简便、快速、敏感、特异性高、便于推广等特点，可代替免疫电泳法。     

血清抗髓过氧化物酶抗体、抗蛋白酶3抗体和抗肾小球基底膜抗体联合检测在自身免疫性血管炎中的诊断价值

目的探讨采用血清抗髓过氧化物酶抗体(MPO)、抗蛋白酶3抗体(PR3)和抗肾小球基底膜抗体(GBM)联合检测对于自身免疫性血管炎(AAV)中的诊断价值。方法将平煤神马医疗集团总医院2015年3月—2018年3月收治的自身免疫性血管炎(AAV)患者作为对象开展研究,患者数量为60例,均接受临床基础检查、影像学、体液检查、病理活检等手段进行病情诊断,且被确诊为AAV,其中包含MPA、GPA、EGPA各20例,根据疾病分型分别归为MPA组、GPA组、EGPA组,另选同期前来我院接受体检的健康体检者20例为对照组,受检者均行MPO、PR3、GBM抗体检查,并统计检查结果。结果各组MPO抗体检查结果均高于对照组;在PR3抗体检查中,MPA组、GPA组结果较对照组更高;在GBM抗体检查中,MPA组、EGPA组最终结果较对照组更高,MPA组各项抗体阳性率均较对照组更高;在GPA组中,MPO、PR3两项抗体阳性率较对照组更高,而EGPA组抗体阳性率高于对照组项目为MPO、GBM抗体,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论采用MPO、PR3、GBM抗体联合检查能够对于AAV诊断产生良好的诊断效果,且其对于AAV分型具备一定借鉴价值。     

从噬菌体抗体库中筛选D二聚体特异的Fab抗体

目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选抗人D二聚体单克隆抗体并进行可溶性表达。方法:以人D二聚体标准品为抗原对所构建的噬菌体抗体库进行两轮“吸附-洗脱-扩增”筛选,从中筛选出抗人D二聚体的噬菌体Fab抗体,并在大肠杆菌细胞中进行可溶性表达。结果:经4次电转化构建了库容为2. 8×108cfu的抗体库,滴度为4. 1×1014PFU/mL,Fab基因重组率为46%。经过淘筛后携带抗人D二聚体抗体的特异性噬菌体得到了明显的富集。用试剂盒以ELISA法检测对人D二聚体的结合活性,得到抗人D二聚体单克隆抗体。筛选出的阳性克隆成功在大肠杆菌细胞中可溶性表达筛选出的阳性克隆在大肠杆菌细胞中可溶性表达。结论:人D二聚体标准品对抗体库的淘筛,富集了表面呈现抗人D二聚体的单克隆抗体的噬菌体,成功构建了人源性抗D二聚体噬菌体抗体,并成功在大肠杆菌细胞中可溶性表达。     

抗Sa和抗CCP抗体对类风湿关节炎诊断意义的比较

目的：探讨抗Sa和CCP抗体对类风湿关节炎诊断意义的比较及其联合检测的意义。方法：采用ELISA法检测抗Sa抗体和抗CCP抗体。结果：抗Sa抗体和抗CCP抗体对RA特异性和敏感性分别为97．26％和60．67％、98．63％和92．13％,抗CCP抗体较抗Sa抗体敏感性高（P〈0．05）,两种抗体联合检测对RA诊断的特异性高达100％,敏感性为60．67％。抗Sa抗体阳性组中疼痛肿胀关节数大于阴性组（P〈0．05）,抗CCP阳性组中疼痛肿胀关节数及ANA阳性率大于阴性组（P〈0．05）。结论抗CCP抗体敏感性高于抗Sa抗体,二者联合检测可以进一步提高RA诊断特异性。     

抗子宫内膜抗体和子宫内膜异位症的关系

介绍一种改良的子宫内膜抗原提取方法，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析证实，产物中存在多条蛋白区带，分子量分别为１８，４２，５４，７１，８２及９１ＫＤ，另有三条大于９４ＫＤ，其中４２，８２，９１ＫＤ及３条大于９４ＫＤ的区带可和抗子宫内膜抗体发生特异反应。并在此基础上建立了抗子宫内膜抗体的ＥＬＩＳＡ测定方法，可用于人体液抗子宫内膜抗体的检测。该法灵敏度高，特异性好，方法稳定，操作简便。     

特异性单克隆抗体测定脑囊虫病人血清中循环抗原的临床研究

对１３０例临床初诊脑囊虫病人血清中循环抗原及抗体进行了测定。结果发现，６７例抗体阳性患者中有３４例抗原阳性，阳性率为５０．７％；３４例抗原阳性患者中有２０例头颅ＣＴ证实为活动性病变；３３例抗体阳性而抗原阴性患者中有２６例头颅ＣＴ证实为１～２个或多个钙化灶，这表明脑囊虫患者特异性抗原检测可以比较客观地反映脑囊虫病变的不同程度与ＣＴ检查之间的关系，而且可以作为疗效观察的指标。     

硒对桥本甲状腺炎患者TPOAb及TGAb水平的影响

目的:观察硒对桥本甲状腺炎(HT)患者甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)的影响.方法:选取TPOAb在100~600 IU/ml之间,TGAb在200 IU/ml到2000 IU/ml之间的HT患者66例,随机分为硒治疗组与对照组,硒治疗组(n=46)服硒酵母片(100μg,2次/d)和左甲状腺素钠片(维持TSH至0.27~4.2μIU/ml)治疗;对照组(n=20)服左甲状腺素钠片(维持TSH至0.27~4.2μIU/ml)治疗,比较两组治疗3个月后TPOAb及TGAb水平的变化.结果:治疗3个月后两组TGAb水平与治疗前相比,差异无统计学意义(P>0.05).治疗3个月后,两组TPOAb水平明显降低,但降低值差异无统计学意义(P<0.05).结论:硒对桥本甲状腺炎患者轻度增高的TPOAb及TGAb水平无明显影响.