缬沙坦对血紧张素Ⅱ诱导的牛主动脉血管平滑肌增殖及迁移的影响

目的：观察血紧张素Ⅱ（AngⅡ）及缬沙坦对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）增殖，迁移的作用。方法：取新生小牛胸主动脉采用贴块法培养平滑肌细胞，分成对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、缬沙坦加AngⅡ组，干预，分别测定^3H－胸腺嘧啶（^3H-TdR)掺入量和计数迁移的细胞，结果：AngⅡ（1μmol/L）作用24h能使VSMC的^3H-TdR的掺入量，细胞迁移数较对照组增多；与AngⅡ组相比，AngⅡ加用缬沙坦（100μmol/L）使^3H-TdR的掺入量与细胞迁移数明显减少；与对照组相比，单用缬沙坦使^3H-TdR的掺入量亦明显减少，结论：AngⅡ对VSMC有促增殖，迁移作用，能被缬沙坦拮抗，而且缬沙坦在没有AngⅡ作用时亦能单独发挥抗增殖作用。     

缬沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的牛主动脉血管平滑肌增殖及迁移的影响

目的 :观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及缬沙坦对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖、迁移的作用。方法 :取新生小牛胸主动脉采用贴块法培养平滑肌细胞 ,分成对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、缬沙坦加AngⅡ组 ,干预后分别测定3 H 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入量和计数迁移的细胞。结果 :AngⅡ (1μmol/L)作用 2 4h能使VSMC的3 H TdR的掺入量、细胞迁移数较对照组增多 ;与AngⅡ组相比 ,AngⅡ加用缬沙坦 (10 0 μmol/L)使3 H TdR的掺入量与细胞迁移数明显减少 ;与对照组相比 ,单用缬沙坦使3 H TdR的掺入量亦明显减少。结论 :AngⅡ对VSMC有促增殖、迁移作用 ,能被缬沙坦拮抗 ,而且缬沙坦在没有AngⅡ作用时亦能单独发挥抗增殖作用     

降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞脂质代谢及AMPK的影响

目的观察降钙素基因相关肽（CGRP）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管平滑肌细胞（VSMC）增殖过程中细胞脂代谢的影响,探索影响脂代谢的腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号蛋白在该作用中的变化。方法贴块法体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞（VSMC）,取第3-10代用于实验。分别用CGRP或／和AngⅡ处理细胞。细胞计数法观察CGRP对AngⅡ诱导大鼠VSMC增殖的影响;油红O染色检测细胞内脂质含量;Western blot检测细胞p-AMPK、p-ERK1／2的表达。结果CGRP预处理能减少AngⅡ诱导的大鼠VSMC数目（P〈0．05）和细胞内脂质聚集的作用,在此过程中伴随细胞内p-AMPK、p-ERK1／2表达下调（P〈0．05）;CGRP8—37（CGRP受体拮抗剂）能拮抗CGRP对AngⅡ促增殖和脂代谢作用（P〈0．05）;PD98059（ERK1／2抑制剂）能部分拮抗CGRP对p—AMPK的抑制作用（P〈0．05）。结论CGRP能显著降低AngⅡ诱导大鼠VSMC增殖过程中的脂质代谢,其细胞内信号通路可能涉及到p—ERK1／2和p—AMPK信号蛋白。     

冠通方及其拆方含药血清对Ang Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨冠通方及其拆方对含药血清对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响,阐析防治冠心病支架术后再狭窄的作用机理以寻找药物作用的靶点。方法：建立AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖模型;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察冠通方及其拆方对VSMC增殖的影响;并用免疫组化法观察冠通方及其拆方对大鼠VSMC表达的影响。结果：冠通方组及其拆方含药血清均可抑制大鼠VSMC的增殖（P〈0.05）;其中冠通方组作用结果最好（P〈0.01）;冠通方组、拆方3组与阴性组比较均有显著性差异（P〈0.01）;其中冠通方组的抑制VSMC的增殖最强（P〈0.01）;拆方3组其次（P〈0.05）;拆方1、2组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：冠通方能抑制血管平滑肌细胞（VSMC）的增殖,其机制可能与降低VSMC中含量表达有关。     

温脉通对血管平滑肌细胞增殖及相关因子表达的影响

目的观察温脉通对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及其对促VSMC生长因子的影响,以期探讨温脉通防治早期肢体动脉硬化性闭塞症(ASO)的作用机制.方法体外培养兔胸主动脉VSMC,以AngⅡ作为诱导因素,复制VSMC增殖模型,分别用温脉通全方及拆方药物血清进行干预.应用四唑盐(MTT)比色法测定各组VSMC增殖活性,用免疫细胞化学检测方法观察各组对血小板源性生长因子(PDGF-BB)表达的影响.结果细胞经AngⅡ作用后其增殖活性明显增加,与空白组比较有显著性差异(P＜0.01);而分别加入各组药物血清后,细胞增殖活性降低,与AngⅡ组比较有显著性差异(P＜0.01),其中以大剂量组细胞增殖活性降低最为明显.血管平滑肌细胞PDGF-BB免疫组化显色,空白组,呈弱阳性表达( /-);AngⅡ组呈强阳性表达( ),与空白组比较有显著性差异;温脉通全方组PDGF-BB表达明显减弱( ),与空白组接近;温经益气拆方组和活血通脉拆方组PDGF-BB呈中度表达( ),其阳性反应强度高于全方组,低于AngⅡ组.结论温脉通可呈剂量依赖性地抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖、抑制PDGF-BB的蛋白表达,提示温脉通防治ASO可能与抑制VSMC异常增殖及PDGF-BB的蛋白表达有关.     

一氧化氮、内皮素和血管紧张素对VSMC中Cdk2基因表达的调控

目的：研究细胞周期依赖性激酶2（Cdk2）在NO、内皮素1（ET-1）及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）促血管平滑肌细胞（VSMC）增殖中的作用。方法：应用半定量RT－PCR法测定样品Cdk2水平；3H-TdR参入方法测定细胞DNA合成水平。结果：自发性高血压大鼠（SHR）VSMC中Cdk2的表达明显高于WistarKyotO大鼠（WKY），细胞增殖较快；硝普钠抑制SHRVSMC增殖，CdkZ表达下降；而左旋硝基精氨酸（L－NNA）和ET-1、AugⅡ能够促进WKYVSMCCdk2mRNA的表达和细胞增殖。结论：NO及ET－1、AngⅡ在对VSMC增殖的调节中，Cdk2可能起着重要的作用。     

卡托普利和氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞Bcl2和Fas基因表达的抑制作用

目的研究卡托普利（CP）和氯沙坦（LT）及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对Wistar大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡相关基因表达的影响。方法采用流式细胞技术检测CP、LT及CP与LT联合应用对在AngⅡ不同浓度、不同作用时间下体外培养的大鼠主动脉VSMC凋亡相关基因Bcl 2及Fas的表达量。结果随着AngⅡ作用浓度的增加和作用时间的延长, Bcl 2基因表达量增加且呈浓度和作用时间依赖(P<0.01);AngⅡ可使Fas 的表达量增加(P<0.05),但无明显时间和浓度依赖性;一定浓度的CP（5×10-6mol/L）和LT（5×10-6mol/L）可抑制AngⅡ对2个基因表达的影响。(P均<0.05或P均<0.01)。 结论CP和LT可以通过拮抗VSMC凋亡基因Bcl 2和Fas的表达促进异常增殖的VSMC凋亡,且这一作用与作用浓度和作用时间相关。     

通脉宁对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响

目的观察通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响.方法组织贴块法进行血管平滑肌细胞(VSMC)培养,应用血清药理学研究的方法,AngⅡ 10-6mol/L、LPC 10-8mol/L作为刺激因子,制备通脉宁全方、益气拆方、活血拆方药物血清.采用Fluo-3染色荧光探针标记测定钙离子荧光强度.结果通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的VSMC内钙超载具有明显的干预作用,且通脉宁全方组的干预作用明显优于益气拆方组及活血拆方组.结论通脉宁药物血清抑制AngⅡ及LPC诱导的VSMC增殖与部分阻断AngⅡ及LPC细胞内的信号转导途径有关,这可能是通脉宁抑制VSMC增殖的作用途径之一.     

血管紧张素Ⅱ促进血管平滑肌细胞胶原合成以及其AT2受体在其中的作用

目的利用血管紧张素（AT）Ⅱ（AngⅡ）受体阻滞剂研究血管紧张素Ⅱ的1型和2型受体在血管平滑肌细胞（VSMC）胶原合成中的作用。方法实验采用自发性高血压大鼠（SHR）以及SD大鼠血管平滑肌细胞，分别分为空白对照组，血管紧张素Ⅱ作用组，血管紧张素Ⅱ＋AT1受体阻滞剂组，血管紧张素Ⅱ＋AT2受体阻滞剂组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测量上清中细胞分泌Ⅰ型胶原的含量，细胞ELISA法测量细胞中贮存的Ⅰ型胶原的含量，逆转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）法测量Ⅰ型胶原mRNA水平的变化。结果阻断AT1受体后，两种大鼠VSMC分泌以及胞内胶原量较AngⅡ照组明显下降（P〈0．01）；阻断AT2受体后，SHR大鼠VSMC分泌以及胞内胶原量均较Angli对照组下降（P〈0．01，后者P〈0．05），而在SD大鼠中，则无明显下降。结论在胶原合成方面，源自SHR的VSMC对于AngⅡ反应性高于源自SD大鼠的VSMC。AT1受体参与AngⅡ诱导血管平滑肌细胞胶原合成的过程；AT2受体参与AngⅡ诱导SHR的血管平滑肌细胞胶原合成的过程，但是在SD大鼠的VSMC巾没有作用。     

大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究大豆异黄酮对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响并探讨其作用机制?方法:分离大鼠胸主动脉,组织贴块法培养VSMC,以AngⅡ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖模型?应用MTT法,CellTiter-Glo■ Assay法检测细胞增殖,观察不同浓度的大豆异黄酮及亚硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对AngⅡ诱导的VSMC增殖的影响?硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)含量;化学比色法测定一氧化氮合酶(NOS),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平;半定量RT-PCR检测VSMC iNOS mRNA的表达?结果:大豆异黄酮能剂量依赖性的抑制VSMC增殖,该作用可被L-NAME部分抵消;大豆异黄酮能升高NOS?iNOS和NO水平,增加iNOS mRNA的表达?结论:大豆异黄酮可呈剂量依赖性的抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,该作用可能通过上调iNOS基因表达?升高NO水平实现的?