HO-1在姜黄素拮抗乙醇所致肝细胞氧化损伤过程中的作用

目的 研究血红素氧化酶-1(HO-1)在姜黄素拮抗乙醇氧化损伤过程中所起的作用.方法 通过亚细胞分离法提取微粒体,测定姜黄素预作用大鼠原代肝细胞中HO-1的活性,确定姜黄素对HO-1的诱导情况.通过抑制剂ZnPPⅨ和诱导剂Hemin的加入,抑制和诱导HO-1的表达与活性,通过检测细胞培养上清液中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及肝细胞的氧化-抗氧化指标,确定HO-1在姜黄素拮抗乙醇所致肝细胞氧化损伤过程中的作用.结果姜黄素能够诱导HO-1的活性,在姜黄素15 μmol/L和提前1 h作用时HO-1水平达到高峰.且HO-1的活性和表达与肝细胞的抗氧化水平明显相关.结论 姜黄素对肝细胞有明显的保护作用,主要表现在提高细胞HO-1的活性及表达水平.     

miR-133a在结肠癌组织中的表达

目的探讨miR-133a在结肠癌组织和癌旁正常组织中的表达差异,为研究其在结肠癌中的作用奠定基础。方法采用miRNA芯片分析结肠癌组织和癌旁正常组织中miR-133a的表达水平,并运用实时荧光定量PCR验证其结果。结果 miRNA表达芯片发现miR-133a在结肠癌组织中较癌旁正常组织表达下调,并被实时荧光定量PCR所证实。结论 miR-133a在结肠癌组织中表达下调,提示其可能作为抑癌因子参与结肠癌的发生发展。     

miR-133a在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 观察microRNA-133a(miR-133a)在乳腺癌、乳腺良性病变及正常乳腺组织中的表达,探讨miR-133a的表达与乳腺癌临床病理特征的关系及其对乳腺癌发生发展的意义.方法 采用组织芯片平台,应用原位杂交方法检测90例乳腺癌组织、26例乳腺良性病变组织和34例癌旁正常乳腺组织miR-133a表达.结果 乳...     

miR-133在鼻咽癌细胞的迁移和侵袭过程中的作用

目的:探究miR-133对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:实验细胞分为转染miR-133模拟物(miR-133 mimics)组及其阴性对照物(miR-NC)组、转染miR-133抑制剂(miR-133 inhibitors)组及其阴性对照(Inhibitors-NC)组。qPCR检测miR-133在鼻咽癌组织和正常组织中的表达差异;划痕愈合实验检测miR-133对鼻咽癌细胞SUNE1迁移能力的影响;Transwell实验检测miR-133对鼻咽癌细胞SUNE1侵袭能力的影响;双荧光素酶实验验证miR-133和FOXC1的关系;Western Blot验证miR-133对FOXC1蛋白表达的影响。结果:miR-133在鼻咽癌组织中的表达显著低于正常组织,而且在高级别的癌组织中的表达也低于低级别者;miR-133组和miR-NC组相比,SUNE1细胞在12 h和24 h的迁移速度[(245. 8±19. 3) vs (131. 7±8. 4)μm,P<0. 05;(362. 5±23. 0) vs(189. 2±20. 6)μm,P<0. 05]显著减缓;miR-133组较miR-NC组穿过Matrigel胶的细胞数量显著减少[(198. 0±18. 6) vs (142. 6±15. 1),P<0. 05],而miR-133 inhibitor组较Inhibitor-NC组穿过Matrigel胶的细胞数量显著增多[(202. 9±25. 7) vs (367. 1±35. 2),P<0. 05];转染miR-133 mimics后可以明显抑制野生型FOXC1的荧光素酶活性,同时miR-133能使FOXC1的蛋白表达显著降低。结论:miR-133能靶向FOXC1调控鼻咽癌细胞的迁移和侵袭。     

miR-133a在急性髓系细胞白血病中的表达及意义

目的:探讨miR-133a在急性髓系细胞白血病(AML)骨髓有核细胞中的表达及意义。方法:收集37例AML初诊患者及25例化疗后完全缓解患者、12例急性淋巴细胞白血病(ALL)初诊患者和22例骨髓象正常的发热患者的骨髓标本。分离有核细胞,抽提总RNA,以U6为内参,采用实时荧光定量茎环RT-PCR检测并比较AML、ALL及骨髓象正常的非白血病患者骨髓有核细胞中miR-133a的表达,同时比较miR-133a在AML常见亚型及化疗缓解前后的表达水平。结果:miR-133a在AML初诊患者骨髓中相对表达量(N=2-△Ct)明显高于ALL和非白血病患者(P<0.05);M3、M4及M5三种常见AML类型中,M5患者的骨髓标本miR-133a表达明显高于M3患者(P<0.05);AML化疗完全缓解后骨髓有核细胞中miR-133a的表达较化疗前明显下降(P<0.05)。结论:miR-133a可能参与AML的发生发展进程,其骨髓表达水平可为化疗敏感性评价提供一个新的指标。     

FoxO1和FoxO3a在内皮细胞凋亡过程中的作用

目的 探索肝细胞生长因子(HGF)在内皮细胞中是否通过磷酸化FoxO1及FoxO3a的机制发挥其抗凋亡活性.方法 分离与原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),由100 μmol H2O2诱导损伤,分空白对照组、100 μmol H2O2组和HGF预处理30 min后加100μnnol H2O2组,通过流式细胞仪判定细胞凋亡程度及Western blot检测蛋白含量变化.结果 H2O2处理对数生长期的HUVEC 24 h会导致(82.74±1.53)％的细胞凋亡,HGF预处理细胞后,细胞凋亡比例降至(25.4±3.69)％,两组相比差异有统计学意义(P＜0.05);HGF可时间依赖性地磷酸化FoxO1及FoxO3a.结论 HGF通过提高细胞内FoxO1和FoxO3a磷酸化水平,抑制H2 O2所引起的HUVEC的凋亡.     

miR-125a和miR-206在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨miR-125a和miR-206在乳腺癌中的表达及临床意义.方法:应用Real-time PCR检测35例乳腺癌组织及其癌旁乳腺组织中miR-125a和miR-206的表达,用免疫组化检查乳腺癌中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达,荧光原位杂交技术检测人类表皮生长因子受体2(HER-2)和DNA拓扑异构酶2A(TOP2A)表达;分析miR-125a和miR-206与乳腺癌患者年龄、月经、淋巴结状态、HER-2、TOP 2A、ER、PR的表达等临床病理特征的相关性.结果:miR-125a和miR-206在乳腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织,miR-125a高表达与淋巴结阴性、HER-2阴性、TOP 2A阴性具有相关性(P＜0.05),与乳腺癌患者肿瘤大小、年龄、月经状态、ER、PR无相关性.miR-206的高表达与较小的肿瘤体积、ER阴性、PR阴性、HER-2阴性具有相关性(P＜0.05),与乳腺癌患者年龄、月经、淋巴结状态及TOP 2A的表达程度无关.结论:miR-125a和miR-206在乳腺癌发生发展过程中可能发挥重要作用,对指导HER-2阳性和三阴性乳腺癌的治疗有重要临床意义.     

病毒性心肌炎患儿血清miR-133及miR-155水平的表达及临床意义

目的观察病毒性心肌炎(VMC)患儿血清微小RNA-133(miR-133)和微小RNA-155(miR-155)的表达及临床意义。方法选取2016年2月—2018年6月成都医学院第一附属医院儿科收治VMC患儿97例,根据患儿左心室射血分数(LVEF)和肌钙蛋白I(cTnI)分为轻度VMC亚组(56例)和重度VMC亚组(41例)。另选择同期于医院进行健康体检的健康儿童40例作为健康对照组。比较3组儿童血清miR-133、miR-155表达水平及心肌损伤指标[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、cTnI、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、可溶性凋亡相关因子配体(sFasL)]、炎性因子[白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)、白介素-21(IL-21)]、免疫功能指标(CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)水平,并分析VMC患儿血清miR-133和miR-155的表达与各指标间的相关性。结果与健康对照组比较,轻度VMC亚组、重度VMC亚组CD8~+及血清CK-MB、cTnI、sFasL、Caspase-3、IL-17、IL-21水平明显升高(F=1.658、2.571、1.958、2.306、1.834、1.745、1.941,P均<0.05),而CD4~+、CD4~+/CD8~+、IL-10明显降低(F=1.686、1.752、1.895,P均<0.05),与轻度VMC亚组患儿比较,重度VMC亚组患儿血清CK-MB、cTnI、sFasL水平明显升高,而CD4~+水平明显降低(P<0.05)。与健康对照组比较,轻度VMC亚组、重度VMC亚组患儿血清miR-133表达水平明显降低,miR-155表达水平明显升高(F=9.238、13.387,P<0.01),与轻度VMC亚组比较,重度VMC亚组血清miR-133表达水平明显降低,血清miR-155表达水平明显升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,VMC血清miR-133表达与CD4~+/CD8~+呈明显正相关(r=0.548,P=0.000),与CK-MB、cTnI呈明显负相关(r=-0.508、-0.496,P均=0.000),miR-155表达与CD4~+/CD8~+呈明显负相关(r=-0.567,P=0.000),与CK-MB、cTnI呈明显正相关(r=0.395、0.587,P=0.013、0.000)。结论 VMC患儿血清miR-133表达水平降低,miR-155表达水平升高,且两者表达水平与部分心肌损伤及免疫功能指标有关,可作为VMC病情判断的辅助指标。     

过表达和抑制miR-133a对JEG-3中HLA-G表达的影响

目的 研究微小miR-133a在人绒癌细胞株(JEG-3)中对人类白细胞抗原G(HLA-G)的表达调控作用.方法 用脂质体包裹化学合成的miR-133a前体分子并转染JEG-3,从而过表达及抑制miR-133a,逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测转染后miR-133a及HLA-G在mRNA水平的表达情况.Western blot法检测转染miR-133a后细胞中HLA-G蛋白水平的表达.结果 JEG-3细胞中抑制miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表达增加;在JEG-3细胞中过表达miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表达下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在JEG-3细胞中miR-133a能够负性调控HLA-G的表达,进一步验证了miR-133a与自然流产、子痫前期等疾病的相关性,并为进一步探索相关疾病机制及临床诊治提供了一定的实验基础.     

SSTF上调miR-495表达减缓高糖诱导的视网膜神经节细胞氧化损伤和凋亡

目的 探讨黄岑茎叶总黄酮(SSTF)对高糖诱导的视网膜神经节细胞(RGC-5)损伤的保护机制。方法 根据处理方法不同将RGC-5细胞分成高糖(HG)组、对照(Con)组、HG+SSTF-低剂量(L)组、HG+SSTF-中剂量(M)组、HG+SSTF-高剂量(H)组、HG+miR-NC组、HG+miR-495组、HG+SSTF+anti-miR-NC组、HG+SSTF+anti-miR-495组,每组设置9复孔。检测MDA含量以及CAT、SOD活性。流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-495表达。结果 HG组RGC-5细胞凋亡率、MDA含量高于Con组(P<0.05),CAT、SOD的活性、miR-495表达低于Con组(P<0.05)。HG+SSTF-L组、HG+SSTF-M组、HG+SSTF-H组RGC-5细胞凋亡率、MDA含量低于HG组(P<0.05),CAT和SOD的活性、miR-495表达高于HG组(P<0.05)。HG+miR-495组RGC-5细胞凋亡率[(14.96±1.26)%]、MDA含量[(4.62±0.4...     

血清miR-133a在脓毒症心肌损伤患者诊断及预后评估中的临床价值

目的探讨miR-133a在脓毒症心肌损伤患者临床诊断及预后评估中的价值。方法选取脓毒症心肌损伤患者50例作为研究对象（观察组）,根据入住ICU 28 d内是否存活,分为存活组（30例）及死亡组（20例）。另选取该院体检中心健康体检者25例作为对照组;收集其临床资料及相关观察指标,检测患者入组后第24、48、72小时患者血清心肌肌钙蛋白Ｉ（cTnI）、CK-MB,计算急性生理学与慢性健康状况评分系统 Ⅱ（APACHEⅡ评分）及序贯器官衰竭评分（SOFA评分）,运用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应技术（qRT-PCR）检测所有受试者血清miR-133a的表达水平,分析其与cTnI、APACHEⅡ评分的相关性,分析血清miR-133a在脓毒症心肌损伤患者诊断及预后评估中的价值。结果观察组与对照组在性别、年龄、体质指数方面差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,观察组心率、平均动脉压、WBC、乳酸、cTnI、CK-MB、BNP、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显升高（P<0.05）。观察组血清miR-133a表达水平与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。在入组24、48、72 h时,死亡组患者的cTnI、CK-MB浓度以及APACHEⅡ评分、SOFA评分、miR-133a表达水平均明显高于存活组,差异有统计学意义（P<0.05）,各个时间点检测的miR-133a表达水平和cTnI含量以及APACHEⅡ评分均呈显著正相关,差异有统计学意义（P<0.05）。乳酸、APACHEⅡ评分、cTnI、miR-133a表达水平等因素是脓毒症心肌损伤患者预后的影响因素（P<0.05）。结论脓毒症心肌损伤患者血清miR-133表达水平与cTnI及APACHE Ⅱ评分相关性好,可以作为诊断脓毒症心肌损伤的潜在生物学标记物,对预测疾病严重程度及预后有一定的临床价值。     

miR-21和miR-146 a在癫痫患者中的表达及临床意义

目的 分析微小RNA-21(miR-21)和miR-146a在癫痫患者血清中的表达及临床意义.方法 选择2017年4月—2019年5月成都中医药大学附属第五人民医院/成都市第五人民医院神经内科诊治的癫痫患者99例作为癫痫组,选择同期在医院进行体检的健康者99例作为健康对照组.比较2组血清miR-21和miR-146a表...     

血清miR-1和miR-133表达水平与2型糖尿病患者冠心病风险的相关性研究

目的 探究血清miR-1和miR-133表达水平与2型糖尿病患者冠心病发病风险的相关性.方法 选择2015年4月-2018年11月广元市第四人民医院收治的41例60岁以上的2型糖尿病合并冠心病患者作为研究对象(研究组),根据研究组患者年龄以及性别匹配41例单纯2型糖尿病患者作为对照组.比较两组患者血清中miR-1和mi...     

急性冠状动脉综合征患者血浆miR-133a、miR-208b表达水平及其与心肌损伤和冠状动脉病变程度的相关性

目的 分析急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆微小RNA(miR)-133a、miR-208b表达水平及其与心肌损伤指标和冠状动脉病变程度的相关性.方法 选取2018年5月—2019年5月云南省第三人民医院心内科收治的ACS患者106例作为研究对象,其中不稳定型心绞痛(UAP)51例(UAP组),急性心肌梗死(AMI)...     

miR-208a在大鼠心肌缺血再灌注损伤及缺血后处理中的表达及其作用

目的:探讨mi R-208a及α-肌球蛋白重链(α-myosin heavy chain,a-MHC)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)在大鼠心肌缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IR)及缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)中的表达变化及其作用。方法:取SD大鼠,使用改良垫扎球囊法建立IR模型,随机分为3组(每组6只),Sham组、IR组、IPO组。检测各组血流动力学指标;real-time PCR检测mi R-208a、α-MHC、β-MHC基因表达;Western blot检测α-MHC、β-MHC蛋白含量。结果:与IR组相比,IPO能明显降低左室舒张末期容积(left ventricular end diastolic volume,LVEDV)和左室收缩末期容积(left ventricular end systolic volume,LVESV),增加左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和左室短轴缩短率(left ventricular fraction shorting,LVFS),改善心功能。mi R-208a表达水平在IR组明显增加,IPO组明显降低。β-MHC表达在IR组明显上调,IPO组明显下调,且基因和蛋白表达水平一致。α-MHC基因和蛋白表达水平在3组无明显差异。结论:mi R-208a和β-MHC在缺血再灌注组明显增加,缺血后处理能使mi R-208a和β-MHC表达下降,并在一定程度上改善心功能。     

顺铂诱导SPC-A1人肺腺癌细胞凋亡过程中miR-27a的表达及意义

目的:检测miR-27a在顺铂(DDP)体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡过程中的表达变化,探讨其与细胞凋亡之间的相关性及其检测的临床意义?方法:体外培养SPC-A1细胞,实验组加入终浓度为2.5 μg/ml DDP,同时设置不加DDP的对照组?观察12?24?48和72 h后显微镜下细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,real-time PCR检测培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a的表达变化?结果:DDP(2.5 μg/ml)组SPC-A1细胞形态呈凋亡改变,在48和72 h凋亡率分别为(59.3 ± 2.5)%和(76.4 ± 3.1)%,均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a含量在24?48和72 h均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中miR-27a含量在12?24?48和72 h逐渐升高,两两比较差异均有统计学意义(P < 0.05)?结论:miR-27a在DDP诱导的SPC-A1细胞凋亡中表达升高,提示其可能参与细胞凋亡调控;对miR-27a进行定量检测有望用于对肺腺癌化疗疗效的评估?     

胃癌组织中miR-181a和miR-27a高表达及意义

目的：分析miR-181a与miR-27a两种miRNAs在胃癌中的表达及其与胃癌l临床病理特征的关系。方法：选取广州市第一人民医院胃癌外科手术切除的胃癌标本50例和对应的距离胃癌病灶5cm以上的癌旁组织,以及25例慢性浅表性胃炎黏膜为对照,采用实时荧光定量-PCR（qRT—PCR）对miR一181a和miR一27a作定量分析。结果：相对于自身癌旁组织和他人的慢性浅表性胃炎组织,miR-181a和miR＋27a在胃癌组织中表达上调,差异有统计学意义（P〈0．05）。胃癌者的性别、年龄、病例分型和淋巴结转移与miR-181a和miR-27a表达无显著相关性。结论：miR-181a和miR-27a在胃癌组织中显著表达,可能参与胃癌的发生过程。     

miR-449a、miR-26a和CXCL5在溃疡性结肠炎中的表达水平及其预后研究

目的探讨miR-449a、miR-26a、CXC趋化因子配体5(CXCL5)在溃疡性结肠炎组织中的表达水平及其预后研究。方法选取2017年5月至2018年4月本院进行治疗的94例溃疡性结肠炎患者,以及同期行单发息肉切除的72例肠粘膜组织正常者进行研究,所有受试者均行结肠镜检查采集结肠粘膜组织,实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测组织中miR-449a、miR-26a表达水平,免疫组化法检测组织中CXCL5阳性表达情况,分析miR-449a、miR-26a和CXCL5与溃疡性结肠炎患者病理参数的关系;采用COX回归分析、KM曲线分析miR-449a、miR-26a和CXCL5与溃疡性结肠炎患者预后的关系。结果与正常组比较,溃疡性结肠炎组中miR-449a、miR-26a表达水平下降,CXCL5阳性表达率升高,差异有统计学意义(P0.05)。miR-449a、miR-26a和CXCL5表达与患者疾病活动程度、内镜分级、组织学分级相关,差异有统计学意义(P0.05)。COX单因素分析显示,疾病活动程度、内镜分级、组织学分级、miR-449a、miR-26a、CXCL-5与患者预后有关,差异有统计学意义(P0.05);多因素显示,疾病活动程度、内镜分级、miR-449a、miR-26a和CXCL5为影响患者预后的独立危险因素,差异有统计学意义(P0.05)。miR-449a、miR-26a低表达组和CXCL5高表达组黏膜愈合良好率分别为49.09%、49.06%和48.28%,均低于miR-449a、miR-26a高表达组与CXCL5低表达组的71.79%、76.73%和75.00%,差异有统计学意义(P0.05)。结论miR-449a、miR-26a在溃疡性结肠炎患者中低表达,CXCL5呈高表达,三者与患者黏膜组织预后情况有关,且为黏膜愈合不良的独立危险因素。     

miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮患者中的表达

目的通过检测miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)和血浆中的表达,探讨miR-155和miR-146a的表达在SLE发病中的作用。方法 SLE患者20例,健康对照组15例。取外周血分离PBMC和血浆,提取和纯化miRNA,实时定量PCR检测miR-155和miR-146a的表达,以小分子RNAU6作为内对照,计算标准化后的2-△Ct值表示miRNA的相对表达含量。结果 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a的表达水平是健康对照组的3.07倍(P<0.01)和1.91倍(P=0.056);SLE患者血浆中miR-155和miR-146a的表达水平比对照组低,但差异无统计学意义;同时SLE患者中蛋白尿阳性组血浆中两种miRNAs表达水平有降低的趋势,活动组患者血浆中两种miRNAs表达水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义。结论 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a异常高表达,但血浆miR-155和miR-146a的表达水平有下降的趋势。