南宁年青人主动脉及冠状动脉的平滑肌细胞骨架系统免疫组化研究

用免疫组化技术染动脉壁的平滑肌细胞骨架系统,发现南宁年青人主动脉和冠脉内膜平滑肌细胞有较多结蛋白(Oesmin),然而来自动脉粥样硬化高发地区的欧美人的资料说弹力型及肌肉型动脉内膜都缺乏这种蛋白。一般认为平滑肌细胞(SMC)有结蛋白反映其分化成熟。成熟的SMC增生程度轻和分泌较多的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,可能与南宁动脉粥样硬化发病率低有关,值得注意。     

一个新的生长激素受体相关蛋白的发现及临床意义

目的鉴定实验中发现的一个新蛋白与生长激素受体（growth hormone receptor,GHR）蛋白的相关性。方法用两种不同的GHR抗体,通过蛋白质印迹法（Western blot）检测16对结直肠癌患者的肿瘤组织和癌旁组织以及8个结直肠癌细胞系中GHR的表达;在结直肠癌细胞系中过表达pcDNA3.1-HA-GHR质粒,并应用HA-tag血凝素标记（hemagglutinin-tag,HA-tag）抗体检测HA融合蛋白。结果用两种不同的GHR抗体在结直肠癌患者组织中及结直肠癌细胞系中均能检测到一大小约45kD的蛋白,抗HA-tag抗体检测外源性GHR的表达也能检测到一与HA融合的大小约45kD的蛋白。并且发现这个45kD大小的蛋白在癌组织的表达明显低于癌旁组织（P〈0.05）,在8种结直肠癌细胞系均检测到这一蛋白,其大小为45kD,并通过HA-tag抗体检测到此蛋白与GHR蛋白有关。结论此蛋白与GHR有关,并且可能参与了结直肠癌的发生与发展。     

游泳运动对大鼠血管平滑肌细胞中间纤维和超微结构的影响

目的:探讨游泳运动对大鼠血管平滑肌细胞中间纤维和超微结构的影响,为运动对血管的生理和病理变化研究提供一定的形态学依据。方法:SD大鼠进行8周不同强度的耐力游泳训练(EST),并在运动后,取胸主动脉平滑肌分别进行石蜡切片样本处理和常规透射电镜样本处理,石蜡切片分别进行结蛋白和波形蛋白的免疫组织化学染色(Envision法),观察比较各组结蛋白和波形蛋白的分布,计算其平均光密度和阳性面积的改变,电镜观察肌细胞内超微结构的改变。结果:8周耐力训练后,小强度组(LIT)的结蛋白、波形蛋白和超微结构与对照组相比,未见明显改变;中强度组(MIT)的结蛋白和波形蛋白明显增加,且超微结构也产生适应性改变;大强度组(HIT)的结蛋白和波形蛋白显著减少,同时超微结构可见损伤性改变。结论:不同强度的耐力游泳运动对大鼠平滑肌肌细胞中间纤维和超微结构产生不同的影响。     

肌源性肿瘤的结蛋白,波型蛋白及肌动蛋白表达特性

采用ＡＢＣ－ＤＡＢ免疫组织化学方法分析３５问各种类型肌源性肿瘤的结蛋白、波型蛋白及肌动蛋白表达特性．结果显示恶性肿瘤细胞表达结蛋白能力下阶，可呈结蛋白表达阴性、波型蛋白阳性，或共同表达结蛋白与波型蛋白，此与恶性肿瘤细胞低分化或未分化密切相关。血管平滑肌瘤的中间丝表达呈现３种不问类型。肌动蛋白（Ａｌｐｈａ－Ｓｒ－１）显示对胚胎型横纹肌肉瘤的良好染色反应。     

改良组织块法培养SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞

目的应用改良植块法体外培养大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞。方法15只SD雄性大鼠,随机分成3组,每组5只,分别采用组织块法、酶消化法及改良组织块法分离大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,在含双抗及20%胎牛血清DMEM,37℃、5%CO2、95%空气的细胞培养箱静置中培养,相差显微镜观察细胞形态及扩增情况,用α-平滑肌肌动蛋白(a-SM-Actin)及结蛋白(desmin)免疫组织化学染色,鉴定细胞类型。结果α-平滑肌肌动蛋白在阴茎海绵体平滑肌细胞阳性率为96.3%,在成纤维细胞中阳性率为23.8%,结蛋白在阴茎海绵体平滑肌细胞阳性率为74.4%,在成纤维细胞中呈阴性。三组间结蛋白阳性细胞率具有显著差异,改良组织块法组结蛋白阳性细胞率高于组织块法和酶消化法组。结论结蛋白是鉴定海绵体平滑肌细胞的特异性指标,改良组织块法可获纯度更高、结构和功能良好的阴茎海绵体平滑肌细胞。     

长链非编码RNA GATA2-AS1在结直肠癌细胞中的表达及功能研究

目的 探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)GATA结合蛋白2-AS1(lncRNA GATA2-AS1)在结直肠癌细胞系中的表达以及对结直肠癌细胞生物学功能的意义。方法 通过基因表达谱交互分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis, GEPIA)数据库比较lncRNA GATA2-AS1在各种肿瘤中尤其是结直肠癌中的表达差异。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real time- quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法检测结直肠癌细胞和人正常肠黏膜上皮细胞中lncRNA GATA2-AS1的表达情况。应用小干扰RNA(siRNA)沉默HCT116细胞中lncRNA GATA2-AS1的表达,通过CCK-8法、EdU增殖实验、划痕实验、Transwell侵袭实验检测lncRNA GATA2-AS1对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。采用Western blot法检测上皮间充质转化相关蛋白表达情况。结果 结直肠癌细胞的lncRNA GATA2-AS1表达水平与正常肠黏膜上皮细胞比较均显著升高(P<0.05)。干扰lncRNA GATA2-AS1的表达抑制了结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。干扰lncRNA GATA2-AS1后,E-cadherin蛋白上调,N-cadherin蛋白明显下调。结论 lncRNA GATA2-AS1在结直肠癌中表达显著增加,且与结直肠癌的增殖、迁移、侵袭及上皮间充质转化相关。     

大肠癌组织中小窝蛋白1的表达及意义

目的探讨小窝蛋白1(Caveolin-1)在正常结直肠粘膜、结直肠癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化S-P法,检测82例结直肠癌组织、40例正常结直肠粘膜组织中Caveolin-1的表达水平。结果在结直肠正常粘膜和癌组织中Caveolin-1的表达存在显著差异(P=0.001),癌组织中Caveolin-1表达阳性率(42.68%)明显低于正常粘膜组织(75.00%)。在结直肠癌组织中,Caveolin-1蛋白表达阳性率与结直肠癌的浸润深度呈负相关(P=0.028),且伴发淋巴结转移的结直肠癌组织比未发生转移的结直肠癌组织Caveolin-1表达阳性率明显减弱(31.11%vs.56.76%),差异有统计学意义(P=0.019)。结论Caveolin-1的低表达与结直肠癌的发生、浸润和转移密切相关。     

PTEN在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的　观察肿瘤抑制基因 PTEN蛋白在结直肠良、恶性组织中的表达水平 ,探讨 PTEN表达与结直肠癌发生、增殖、分化、转移等的相关性及其在结直肠癌诊断、治疗和判断预后的应用价值。　方法　采用免疫组织化学 SP法定性、半定量检测 /分析 110例结直肠癌组织、13例癌旁粘膜组织、17例结肠腺瘤组织、8例正常结肠粘膜组织的 PTEN的表达情况。　结果　 (1)结直肠癌、癌旁粘膜、结肠腺瘤、正常结肠粘膜 PTEN蛋白阳性表达率分别为 5 9.1% ,76 .9% ,76 .4 % ,10 0 %。结肠癌阳性表达率明显低于非癌组 ,P<0 .0 1。良性结肠粘膜组织 PTEN蛋白表达水平高于恶性结肠粘膜组织 (rs= - 0 .2 39,P<0 .0 5 )。 (2 )结直肠癌组中 PTEN蛋白的阳性检出率与患者性别、年龄、癌肿部位无关 (P>0 .0 5 )。 (3)PTEN表达水平与癌组织浸润深度呈负相关 (rs=- 0 .2 82 ,P<0 .0 5 )。 PTEN表达水平随淋巴结转移、癌远处转移呈逐渐下降趋势 (P<0 .0 5 )。 (4 ) PTEN表达水平与结直肠癌TNM分期 (rs=- 0 .4 70 ,P <0 .0 5 )、 Dukes'分期 (rs=- 0 .5 0 0 ,P<0 .0 5 )呈负相关 ,与病理组织分化呈正相关 (rs=- 0 .4 12 ,P相似文献   

Metrnl表达降低促进结直肠癌发生和发展

目的 探讨Metrnl与结直肠癌的关系及其在结直肠癌发生发展中的作用。方法 利用人体组织芯片分析结直肠癌和癌旁组织中Metrnl的表达与分布(n=30)。收集临床结直肠癌组织样本15例,利用实时定量多聚酶链式反应(real time PCR)检测Metrnl在结直肠癌组织及正常结肠组织中的转录水平。在细胞实验中,通过慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)干扰技术敲减人结肠癌上皮细胞系Caco-2细胞中Metrnl表达,通过CCK8(Cell Counting Kit-8)细胞活力检测试剂盒、凋亡执行蛋白Caspase-3活力检测试剂盒、流式细胞检测Annexin V外翻等探究细胞在5-氟尿嘧啶(5-FU)作用下的存活和凋亡情况。结果 免疫组化检测显示Metrnl蛋白在人结直肠癌组织中增多,但real time PCR结果显示Metrnl mRNA水平降低(P<0.05)。敲减 Metrnl可抑制5-氟尿嘧啶诱导的细胞活力降低和细胞凋亡(P<0.05)。结论 由于肿瘤组织异构,分泌蛋白Metrnl在结直肠癌组织中蓄积,但Metrnl转录在结直肠癌中降低,Metrnl转录降低可能促进了结直肠癌的发生发展,提示该基因有望成为结直肠癌诊断和治疗的新靶点。     

结蛋白沉积性肌病并呼吸衰竭1例

结蛋白沉积性肌病为一种罕见的肌病,1980年Edstrom首先报道,病因未明,发病年龄2～48岁不等,男女均可患病;家族性病例多见,亦可见散发性疾病,多呈常染色体显性遗传;骨骼肌、心肌常受累,罕见平滑肌受累[1].2008年5月我科收治1例结蛋白沉积性肌病并发呼吸衰竭患者,经积极抢救和治疗,患者病情好转,现报告如下.     

唾腺腺泡细胞癌24例光镜、电镜和免疫组织化学研究

本文对24例唾腺腺泡细胞癌进行光镜、电镜和免疫组织化学观察.光镜下肿瘤由腺泡细胞、透明细胞、空泡细胞、闰管细胞和非特殊性腺细胞组成.电镜观察部份瘤细胞胞浆有酶原颗粒或张力微丝等.免疫组织化学检测,24例角蛋白均为阳性,14例波形蛋白部份瘤细胞阳性.结果表明腺泡细胞癌瘤细胞成份有异质性,支持起源于多潜能导管上皮细胞的观点     

胆囊切除后胆总管有无代偿性扩张

对43例病人胆囊切除术前后胆总管径的改变进行对照观察与测量。43例中,23例于手术前后分别行静脉胆道造影,20例于术中行胆道造影、术后行静脉胆道造影。结果,术后胆总管较术前扩张者13例(其中5例造影阳性),无变化者27例(其中2例造影阳性),缩小者3例。造影阴性者36例,其手术前后胆总管管径的变化差异无显著性(P>>0.05)。说明作为生理现象,胆囊切除术后胆总管的代偿性扩张在大多数胆道造影阴性病人是不存在的。提示将术后胆总管管径与其术前标准对照观察,对判断其病变更有价值。     

肝硬化大鼠心脏诱导型iNOS的表达与定位研究

为探讨肝硬化心肌病的发生机制 ,应用免疫组织化学法对胆管结扎诱导的胆汁性肝硬化大鼠和假手术大鼠心脏诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)的表达与定位进行比较性研究。结果显示肝硬化大鼠心肌细胞、心肌血管内皮细胞和心内膜细胞 i NOS均呈强阳性表达 ,假手术大鼠则为阴性。提示肝硬化大鼠心肌细胞、心肌血管内皮细胞和心内膜细胞i NOS表达显著增高 ,并由此推断 NO途径可能在肝硬化心肌病发生机制中起重要作用     

P53和PCNA在辐射诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡中的表达及意义

目的探讨在辐射诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡中,P53和PCNA的表达及意义。方法12只犬随机分两组,每组6只犬,在犬胆管内分别植入103pd(103钯)放射性支架和普通胆管支架,术后30d取出胆管标本采用ABC法进行PCNA免疫组化染色,核出现棕色反应为阳性细胞;原位杂交进行P53细胞染色,细胞浆出现棕褐色反应为阳性细胞;又行平滑肌细胞凋亡染色,阳性细胞为细胞核有棕黄色颗粒即为凋亡细胞。结果103Pd支架组PCNA蛋白阳性表达率明显低于普通支架组,两组之间比较差异有非常显著性(P<0.01),103Pd支架组P53蛋白阳性表达率明显高于普通支架组,两组之间比较差异有非常显著性(P<0.01)。103Pd支架组平滑肌细胞凋亡数较普通支架组明显增多,两者有显著差异(P<0.05),103pd放射性支架组犬胆管腔无明显狭窄,而普通支架组犬胆管腔有明显狭窄。结论以上结果证实103Pd支架组犬胆管平滑肌组织PCNA表达较弱,而普通支架组犬胆管平滑肌组织PCNA表达却增高,说明辐射可以抑制平滑肌细胞增殖,辐射可激活P53基因而诱导犬胆管平滑肌细胞凋亡,同时抑制犬胆管损伤后胆管狭窄。     

血清甘胆酸放免测定在胆道疾病中的应用

用放免法测定了胆道疾病患者空腹血清甘胆酸（CG）值。结果：各胆道疾病组CG值与对照组有显著差异（P＜0．01），CG检出率高达90．4％，优于ALP（50．4％），GGT（65．9％）。确诊率高。故CG值对胆道疾病的诊断有一定意义。     

家兔Oddi括约肌NOS阳性神经元的分布及其对该括约肌肌电的影响

目的研究家兔Oddi括约肌 (sphincterofOddi,SO)中一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)阳性神经元的分布及其对SO肌电的影响。方法应用黄递酶组织化学法 ,观察家兔SO中NOS阳性神经元和其纤维的分布 ;应用电生理学方法 ,观察NOS抑制剂NG 硝基 L 精氨酸 (NG nitro L arginine ,L NNA)及一氧化氮前体L 精氨酸对SO肌电活动的影响。结果在SO的近胆总管侧 ,阳性神经元和神经纤维均明显多于SO的近十二指肠乳头端。根据细胞大小、形态不同 ,NOS阳性神经细胞可分为两种 :一种神经元胞体较大、突起较多、染色较深 ,主要分布于SO的环肌和纵肌之间 ,并且可见由众多NOS阳性神经元所组成的神经节 ;另一种为胞体较小、着色较浅、只有 1～ 2个突起的神经元 ,仅偶见于粘膜下层。NOS阳性神经纤维位于SO各层 ,其中环肌层最丰富。局部灌注L NNA 2 0 0 μg/(kg·min) ,SO肌电活动的振幅明显增大 (P <0 .0 1) ,肌电的频率无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;这种作用可被L 精氨酸反转。表明抑制NO合成 ,可引起SO时相性收缩活动增强。结论大量NOS阳性神经元分布于肌间神经丛 ,少量偶见于粘膜下神经丛 ,NO是家兔SO的一种重要抑制性神经递质。     

涎腺肿瘤免疫组化研究

应用6种抗体(CEA、MAK-6、EMA、S-100、GFAP、HHF-35)对55例涎腺肿瘤和9例肿瘤旁涎腺组织进行免疫组化研究,结果表明:肿瘤旁涎腺组织的免疫光谱,以腺管上皮细胞为一端,肌上皮细胞为另一端,润管细胞和腺泡细胞位于光谱中间段,多形性腺瘤起源于同一类细胞,而不是混合性起源。简略介绍HHF-35的性质和应用价值,在识别肌上皮细胞方面,HHF-35比GFAP更为敏感。     

复发性肝未分化肉瘤临床病理变化及分析

目的分析原发及其复发的肝未分化肉瘤的临床和病理变化，明确其组织学特点及复发后的病理改变。方法结合文献，对1例罕见的肝未分化肉瘤的原发及其3次复发病例进行临床及病理形态分析，用S-P法进行免疫组化研究。结果肝未分化肉瘤无特殊的临床表现；影像学改变多为囊性或囊实混合性；组织学图象是由梭形和上皮样的原始间叶细胞、多核巨细胞、PAS阳性的嗜酸小体组成，免疫组化显示Vimentin（＋），AACT（＋），Desmin（＋），Actin（＋）。在原发性肿瘤中出现了腺体结构，而在其3次复发的病例中，未见到腺体。结论警惕肝囊性或囊实混合性病变；肝未分化肉瘤内的腺体成分可能是肝胆管的残留和反应性增生；肿瘤可向平滑肌、横纹肌及纤维组织细胞分化。     

103pd放射性支架诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡及对抑癌基因影响和意义

目的探讨辐射对抑癌基因(p53基因)在辐射诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡中的影响和意义.方法12只犬随机分两组,每组6只,在犬胆管内分别植入103pd(103钯)放射性支架和普通胆管支架,术后30d取出胆管标本进行HE染色和p53基因原位杂交,DAB染色,p53基因表达阳性者为细胞浆呈棕黄色,和平滑肌细胞凋亡染色,阳性凋亡细胞为细胞核有棕黄色颗粒.结果103pd放射性支架组犬胆管平滑肌细胞p53基因阳性表达率为83.33%,而普通支架为16.66%,两组之间比较差异有非常显著性(P＜0.01);同时,103pd放射性支架组犬胆管增殖平滑肌凋亡细胞数明显大于普通支架组犬凋亡细胞数,两组之间比较差异有显著性(P＜0.05),而且103pd放射性支架组犬胆管腔无明显狭窄,普通支架组犬胆管腔有明显狭窄.结论以上结果证实辐射可以激活p53基因,使其功能提高,诱导犬胆管平滑肌细胞凋亡,抑制犬胆管再狭窄.     

狗肝外胆道的肌肉分布和粘膜上皮细胞及腺体对爱先兰PAS染色反应的观察

我们观察了六支成年狗肝外胆道,平滑肌的分布和其粘膜上皮细胞及腺体粘多糖的分布情况。肝外胆道的平滑肌自肝管开始即有少量出现,多数不形成肌层,至胆总管下端时,肌纤维逐渐增多,形成平滑肌层。十二指肠壁内的胆总管有两层肌肉围绕。环肌形成的隔向下延伸较远,几乎达到近胆总管开口处。肝管、胆总管、胆囊管等管壁外的外膜中神经纤维非常丰富,神经节较多。肝外胆道粘膜上皮及腺体细胞。Ab—PAS染色反应有一定规律,阳性物质位于核上区的胞质中。文中对上皮细胞分泌物性质作了讨论。