TIMP-1对人牙周膜成纤维细胞增殖与ALP活性表达的影响

目的：探讨金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）对人牙周膜成纤维细胞的增殖与碱性磷酸酶（ALP）活性表达的影响。方法：采用MTT和ALP活性检测法,观察不同浓度的TIMP-1在第24、48和72h对体外培养的人牙周膜成纤维细胞（PDLF）的作用。结果：与对照组比较,1ng/ml的TIMP-1在24、48和72h,10ng/ml的TIMP-1在48、72h可显著促进PDLF的增殖; 1ng/ml的TIMP-1在24、48和72h,10ng/ml的TIMP-1在48h对PDLC有显著增强ALP活性作用。结论：TIMP-1可促进人PDLF生长和分化。     

TGF和bFGF对牙周膜细胞ALP活性及Fn合成的影响

目的探讨转化生长因子α,β(TGFα,β)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜(PDL)细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及纤维结合蛋白(Fn)合成的影响。方法体外培养人PDL细胞,与一定浓度的TGFα,β或bFGF作用后,用ELISA法检测Fn含量,用酶动力学方法检测ALP活性。结果TGFα使PDL细胞合成Fn的水平(0.937±0.036)比对照组(0.687±0.023)增加了136.4%(P<0.05),TGFβ使Fn的水平(2.885±0.052)明显提高(P<0.001),bFGF组(0.738±0.041)则没有明显影响(P>0.05)。与对照组(2.431±0.051)相比,TGFβ(1.748±0.042)可抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.05),bFGF(1.138±0.046)显著抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.01),TGFα(0.331±0.022)的抑制作用更强(P<0.01)。结论TGFα,β和bFGF可能通过调节PDL细胞的ALP活性和合成Fn的水平,发挥PDL细胞在牙周组织的再生中的作用。     

锌对人牙周膜细胞增殖分化的影响研究分析

锌具有广泛的生物学效应,是骨代谢的激活因子,调节成骨细胞的生长、分化、增殖。而牙周膜是牙周组织的重要组成部分,牙周膜细胞增殖、分化是牙周组织改建的前提和关键。因此,在体外探讨微量元素锌对牙周细胞生物特性的影响,有助于理解锌在正畸牙周组织重建中的作用。     

人牙周膜细胞在双氧水处理后纯钛表面的活性

目的:研究双氧水法处理纯钛表面应用于口腔临床的可行性.方法:倒置显微镜观察细胞原代及传代的生长情况,扫描电镜观察细胞在4种钛片上的附着形态,从形态学、免疫组织化学及细胞增殖、活性方面对比细胞在4种钛片上的异同.结果:人牙周膜细胞在4种钛片上都可以生长及增殖,但其在双氧水处理的钛片上的增殖高于其他3组(P<0.05).结论:4种处理钛片的方法中,双氧水法更有利于人牙周膜细胞的附着及增殖.细胞在4种钛片上都表现出了碱性磷酸酶(ALe)活性,而且处于稳定后双氧水组的ALP活性最高(P<0.05).     

PDGF和EGF对牙周膜细胞增殖、纤维结合蛋白和碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和表皮生长因子(EGF)对人牙周膜(PDL)细胞增殖、纤维结合蛋白(Fn)和碱性磷酸酶(APLase)活性的影响。方法体外培养人PDL细胞,与不同浓度的PDGF-BB、EGF或PDGF-BB+EGF作用,用噻唑盐(MTT)法观察PDL细胞增殖的情况,ELISA法检测Fn水平,用酶动力学方法检测ALPase的活性。结果PDGF-BB明显促进PDL细胞增殖,在1～50ng/ml和5d范围内,呈浓度-时间依赖关系,最佳效应时间和浓度为3d和10ng/ml,比对照组增加了256.1%(P<0.001),但对PDL细胞Fn水平无明显影响(P>0.05),却显著抑制PDL细胞的ALPase活性(P<0.01)。低浓度的EGF对PDL细胞的增殖没有影响(P>0.05),(10～50)ng/ml的EGF从第3天起,可促进PDL细胞的增殖,差异显著(P<0.05),但10ng/ml与50ng/ml之间无显著性差异(P>0.05),其最佳效应浓度为10ng/ml,最大效应在用药后4d,此时与对照组相比增加了124.1%,EGF可使PDL细胞Fn水平明显提高(P<0.01),但抑制ALPase的活性(P<0.001)。PDGF-BB和EGF二者联合应用,在促进增殖、提高Fn的水平和抑制ALPase活性方面均具有协同效应。结论PDGF-BB、EGF均可促进人PDL细胞的增殖、抑制PDL细胞的ALPase活性,但PDGF-BB对其Fn水平没有明显影响,而EGF可使其Fn水平明显提高,二者联合具有协同效应。     

bFGF对人牙周膜细胞增殖的影响

目的 检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养人牙周膜细胞的增殖效应,探讨bFGF参与正畸牙移动的作用机制。方法 体外培养人牙周膜细胞,将第5代细胞按细胞数约为4×10<'3>/孔接种在96孔培养板的50孔中,每5孔为一组,共分为10组。根据每组bFGF浓度不同,分为无bFGF组、0.5 ng/mL bFGF组、1.0 ng/mL bFGF组、2.0 ng/mL bFGF组、4.0 ng/mL bFGF组、8.0 ng/mL bFGF组、16.0 ng/mL bFGF组、32.0 ng/mL bFGF组、64.0 ng/mL bFGF组及128.0 ng/mL bFGF组。显微镜下观察各组细胞均进入对数生长期时,用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法染色,在酶联免疫检测仪上测出各孔吸光度(opficM density,OD)值,并计算各组OD均值。结果 与对照组OD均值比较：实验组OD值随bFGF浓度(0.5～16.0 ng/mL)的增加先逐渐增加(P<0.05,0.01),达到峰值(16.0 ng/mL)后,又随bFGF浓度(32.0～128.0 ng/mL)的增加而逐渐减少(P<0.05,0.01)。结论 bFGF可能参与了正畸牙移动中牙周组织的改建,bFGF较低浓度时有促进人牙周膜细胞增殖的作用,而较高浓度时有抑制人牙周膜细胞增殖的作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞的影响

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是近年来研究较为热门的生物因子,为具有多种功能的多肽生长因子,能广泛促进来源于中胚层及神经外胚层细胞的增殖,是体内重要的创伤愈合因子之一。bFGF有主动诱导分化和加速生长作用,可以促进牙周膜成纤维细胞的分化和增殖,促进牙周组织的修复和再生。     

神经生长因子和碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖的影响

目的 探讨神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)分别及联合作用对体外培养的人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖的影响.方法 体外培养人牙周膜细胞,与不同浓度的NGF、bFGF或NGF+bFGF作用,用噻唑盐(MTT)法观察PDLC增殖的情况.结果 不同浓度的NGF、bFGF都可促进人PDLC的增殖,这种促进作用呈一定的浓度依赖性.NGF与bFGF联合应用对人PDLC的增殖有协同作用,且与单独应用相比具有统计学差异.结论 NGF、bFGF都可促进人PDLC的增殖,且二者联合具有协同作用.     

银杏叶提取物对人牙周膜细胞增殖影响的研究

目的研究银杏叶提取物（GBE）对人牙周膜细胞（PDLCs）增殖的影响。方法采用改良组织块培养法培养人PDLCs,取第4代人PDLCs随机分为5组;①空白对照组（无GBE）;②含1mg/mlGBE;③含0.1mg/mlGBE;④含0.01mg/mlGBE;⑤含0.01mg/mlGBE。以MTT法测定GBE对PDLCs增殖的影响。结果与对照组比较1mg/mlGBE组抑制细胞增殖,0.1mg/mlGBE组在12、24、48h时均能促进细胞增殖,0.01mg/mlGBE组在48、72h时能促进细胞增殖,差异具有统计学意义（〈0.05）,0.001mg/mlGBE组与对照组比较差异无统计学意义（〉0.05）。结论不同浓度GBE对人PDLCs增殖影响不同。     

PDGF—BB和bFGF对牙周膜细胞增殖的影响

目的：探讨血小板衍生生长因子-BB（PDGF—BB）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人牙周膜（PDL）细胞增殖的影响。方法：体外培养人PDL细胞与不同浓度的PDGF—BB，bFGF或PDGF—BB＋bFGF作用。用四唑盐（MTT）法观察PDL细胞增殖的情况。结果：PDGF—BB明显促进PDL细胞增殖，第3天最大显效浓度为10ng／ml，比对照组增加34％（P〈0．001），最小显效浓度为1ng／ml，比对照组增加25％（P〈0．001）。PDGF—BB在1d～9d，0．1ng／ml～10ng／ml范围内呈浓度时间依赖关系，峰值位于第9天，10ng／ml处，比对照组增加20％（P〈0．001）。bFGF也能明显促进PDL细胞增殖，第3天最大显效浓度为50ng／ml，比对照组增加71％（P〈0．001），最小显效浓度为1ng／ml，比对照组增加23％（P〈0．001）。bFGF在1d～6d，1ng／ml～50ng／ml范围内呈浓度时间依赖关系，峰值位于第6天，50ng／ml处，比对照组增加79％（P〈0．001）。PDGF—BB与bFGF最大与最小显效浓度联合作用均在1d～9d内呈浓度时间依赖关系，峰值位于第9天，最大显效浓度联合作用比对照组增加46％（P〈0．001），最小显效浓度联合作用比对照组增加17％（P〈0．001）。结论：PDGF-BB和bFGF均可促进人PDL细胞增殖，在一定范围内呈浓度时间依赖关系，二者联合对PDL细胞增殖具有协同效应。     

氧化苦参碱对牙龈卟啉菌内毒素作用下人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的 研究氧化苦参碱对牙龈卟啉菌内毒素(Pg-LPS)作用下人牙周膜细胞(PDLC)碱性磷酸酶(ALP)的活性及其表达的影响. 方法 采用细胞培养技术分离PDLC,对照组为仅含1％胎牛血清的细胞培养液,实验组分别加入不同浓度的氧化苦参碱溶液和Pg-LPS.采用细胞培养技术和酶联免疫、实时荧光定量RT-PCR技术,观察Pg-LPS对PDLC的ALP活性及其表达的影响. 结果 在25 μg/mL的Pg-LPS作用下,PDLC的ALP活性及其表达明显减低,加入一定浓度的氧化苦参碱溶液后,PDLC的ALP活性及其表达有一定程度恢复. 结论 氧化苦参碱可以减轻Pg-LPS对PDLC的破坏,对Pg-LPS抑制PDLC的ALP活性及其表达的现象具有拮抗作用.     

丁酸对人牙周膜细胞增殖的影响

目的探讨丁酸对牙周膜细胞增殖的影响.方法用含不同浓度丁酸(0、2、4、8 mmol/L)的培养液培养人牙周膜细胞,通过MTT法测定其生长与增殖.结果人牙周膜细胞进入指数生长期后,丁酸以剂量依赖的方式抑制人牙周膜细胞的增殖.结论龈下厌氧菌代谢生成的丁酸可能通过抑制人牙周膜细胞的增殖,进而影响牙周膜的改建和更新,促进牙周袋形成和牙周组织破坏.     

NGF基因转染对牙周膜细胞成骨性的影响

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)基因转染对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLC)成骨性的影响.方法 运用基因转染技术将NGF基因通过质粒pcDNA3.1-NGF转入PDLC中,利用免疫组化及免疫印记法鉴定转染细胞的表达并观察对其成骨性的影响.结果 免疫细胞化学证实,牙周膜细胞有NGF蛋白表达.转染NGF后的PDLC的OC含量较未转染NGF组明显增高(P＜0.01).结论 转染NGF后的牙周膜成纤维细胞成骨性明显增强,为使牙周膜细胞成为牙周组织再生的种子细胞奠定基础.     

血小板衍生生长因子-BB对人牙周膜细胞在牙根面上附着和生长的影响

目的:探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)对人牙周膜(PDL)细胞在离体牙根面上附着、增殖的影响.方法:应用细胞计数法和扫描电镜观察法,观察在细胞因子作用下,离体正常和牙周病患牙根面上PDL细胞附着和增殖的情况.结果:无论是否加入PDGF-BB,PDL细胞在正常牙根面(N组)上的附着数量均明显多于病变(P组)根面(P＜0.01);与对照(C组)相比,PDGF-BB(S组)既能促进PDL细胞在正常根面的附着(P＜0.01),也能促进PDL细胞在牙周病变根面上的附着(P＜0.05).不加PDGF-BB时,PDL细胞在NC上的增殖率为80.0%,PC只有50%;加入PDGF-BB后,NS增殖率为249.4%,PS的增殖率为213.09%,与对照(C)组相比,PDGF-BB既能明显促进PDL细胞在正常根面的增殖(P＜0.01),又能显著提高PDL细胞在病变牙根面上的增殖(P＜0.01);扫描电镜下病变牙根面上生长的PDL细胞数量较少,形态细长,细胞的突起伸展不够充分,边缘皱缩,与根面附着较松散,经PDGF-BB作用后,细胞与根面的附着状态有所改善,较为紧密,数量有所增加.结论:PDGF-BB是一种有效的促PDL细胞生长的因子,可促进PDL细胞在牙根面的附着和增殖.     

表皮生长因子及其受体在胃癌中的表达

目的：观察表皮生长因子（ＥＧＦ）及其受体（ＥＧＦＲ）在胃癌中的表达，加深对胃癌发生分子基础的了解。方法：采用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法），分析探讨两者在５２例原发性胃癌组织中的变化。结果：ＥＧＦ、ＥＧＦＲ在胃癌中的阳性表达率分别为４０４％（２１／５２）和４８１％（２５／５２），两者同时阳性表达率为３６５％（１９／５２）；ＥＧＦ在中、晚期胃癌，淋巴结转移胃癌，低分化胃癌中的免疫阳性反应率为４７６％（２０／４２）；５３１％（１７／３２）；５２３％（１８／３４），分别高于其在早期（１０％，１／１０）、淋巴结阴性（２０％，４／２０）、高分化胃癌（１６７％，３／８）中的表达，Ｐ＜００５；ＥＧＦＲ表达与临床进展无明显相关性，Ｐ＞００５，但其在淋巴结转移（５９４％，１９／３２）、低分化胃癌（６１８％，２１／３４）中的表达率分别高于其在淋巴结阴性（３０％，６／２０）、高分化胃癌（２２２％，３／１８）中的表达，Ｐ＜００５。结论：ＥＧＦ、ＥＧＦＲ在胃癌转移过程中起一定作用，并可能是胃癌恶性程度的影响因素。     

不同浓度雌激素对人源性牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的：对比研究不同浓度的雌激素对人源性牙周膜干细胞成骨分化的影响。方法：采用DMEM完全培养基将人牙周膜干细胞制成单细胞悬液,分别加入浓度为0、10×10^-10、10×10^-9、10×10^-8、10×10^-7、10×10^-6、10×10^-5mol/L的雌激素,以未加入雌激素的成骨诱导液组（普通DMEM培养基中加入10mMβ-甘油磷酸钠、50μM维生素C及10nM地塞米松）作为阴性对照。培养后实时定量PCR方法分别检测成骨早中晚期关键指标Runx2、ALP和OCN mRNA表达。结果：浓度为10×10^-10、10×10^-9、10×10^-8、10×10^-7、10×10^-6、10×10^-5mol/L的雌激素对人源性的牙周膜干细胞培养均无毒性;不同浓度组间差异无统计学意义（P＞0.05）;在成骨诱导7、14、21天时,Runx2、ALP及OCN mRNA表达在10×10^-7组最高（P＜0.05~0.01）。在不同浓度雌激素组中成骨相关基因的表达均高于阴性对照组（P＜0.05）。结论：当雌激素浓度＜10×10^-7mol/L时,雌激素能够以剂量依赖的方式促进人牙周膜干细胞成骨分化过程中成骨相关基因的表达。当雌激素浓度＞10×10^-7mol/L时,雌激素浓度的增加并未促进成骨相关基因的表达。