白藜芦醇抑制TLR4/NF-κB通路对毛细支气管炎小鼠的保护作用

目的 研究白藜芦醇通过抑制T样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)通路对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎小鼠的保护作用。方法 选取30只小鼠随机分为对照组、RSV组、给药组,建立RSV毛细支气管炎小鼠模型,检测小鼠肺组织中TLR4、NF-κB的变化;利用肺组织HE染色、ELISA法检测白藜芦醇给药前后气道炎症病变、IL-6、TNF-α因子水平,Western Blot法及实时定量PCR法检测TLR4、 NF-κB蛋白及基因表达等相关变化。结果 与对照组相比,RSV组小鼠组肺组织中TLR4、NF-κB水平升高,肺组织切片HE染色显示气道炎症细胞浸润加剧,ELISA检测炎性因子IL-6、TNF-α升高;而给药组处理后,肺组织TLR4、NF-κB的表达下调,病理改变减轻,炎性因子IL-6、TNF-α下降。结论 白藜芦醇可通过抑制TLR4/NF-κB通路抑制炎性因子的释放,从而减轻毛细支气管炎小鼠的气道炎症反应。     

血管紧张素-(1-7)对巨噬细胞源性泡沫细胞炎症因子表达的影响

目的探讨血管紧张素(Ang)-(1-7)是否可以调节巨噬细胞源性泡沫细胞炎症因子的表达及TLR4/NF-κB通路在其中的作用。方法佛波酯(130 ng/ml)诱导人单核细胞(THP-1)分化为巨噬细胞,分别以不同浓度(0.01、0.1、1μmol/L)的Ang-(1-7)和相同浓度氧化低密度脂蛋白(ox-LDL,50 mg/L)联合刺激,并以A-779[Ang-(1-7)特异性受体阻断剂,10-7 mol/L]预处理以及用TLR4单克隆抗体(5 mg/L)阻断TLR4/NF-κB信号通路。ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量。实时PCR检测TLR4的mRNA水平,免疫印迹法检测细胞总蛋白TLR4蛋白水平、IκB蛋白的磷酸化水平以及胞浆蛋白、核蛋白NF-κB蛋白水平。结果与对照组比较,Ang-(1-7)干预下调泡沫细胞分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达,呈现剂量依赖性(P0.05),其作用可被A-779部分抑制;当TLR4/NF-κB信号通路被TLR4单克隆抗体阻断后,Ang-(1-7)作用可被部分抑制。Ang-(1-7)干预下调泡沫细胞TLR4mRNA和蛋白表达水平,下调IκB蛋白的磷酸化水平,抑制NF-kB蛋白由细胞质向细胞核内转位(P0.05),其作用可被A-779部分抑制。结论 Ang-(1-7)可以抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,该过程与TLR4/NF-κB信号转导通路抑制有关。     

健脾活血方对酒精复合内毒素脂多糖诱导的肝损伤大鼠库普弗细胞活化信号通路的干预

目的:观察健脾活血方对酒精复合内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肝损伤大鼠库普弗细胞活化信号通路的影响。方法:采用Lieber-Decarli酒精饮料饲养6周诱导的酒精性肝损伤模型,分设正常组,无酒精饮料组,酒精饮料组和酒精饮料加健脾活血方组,造模第3周起灌胃给药或蒸馏水至第6周末,各组再以LPS 10 mg/kg一次性灌胃,3.5 h后取材。检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)活性和肝组织甘油三酯(triglyceride,TG)含量;HE染色观察大鼠肝组织病理改变;CD68免疫组化观察库普弗细胞活化状态;ELISA法检测门脉血浆肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;Western-blotting方法检测肝组织TNF-α、磷酸化的IκB(phosphorylation-IκB,P-IκB)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、CD68蛋白表达。结果:经健脾活血方干预后,大鼠肝脏组织病理损伤减轻,肝组织TG含量以及血清ALT活性和门脉血浆TNF-α含量下降;同时,大鼠肝脏TNF-α、P-IκB、TLR4和CD68蛋白表达明显减轻。结论:健脾活血方对酒精复合LPS诱导的肝损伤大鼠CD68、TLR4、P-IκB和TNF-α具明显抑制作用。     

创伤感染时巨噬细胞表面模式识别受体表达、相互作用及其与炎症反应发生的关系

目的 从免疫细胞表面模式识别受体水平揭示创伤感染条件下炎症反应的发生机制,为探寻有效调控炎症反应的措施提供新思路.方法 选择小鼠内毒素血症、盲肠结扎穿孔、肺泡巨噬细胞免疫刺激模型,以免疫组织化学法和RT-PCR法检测主要模式识别受体的表达;利用细胞转染模型研究CD14、TLR4、MD-2相互作用及其与跨膜信号转导的关系.结果 免疫细胞清道夫受体和CD14、TLR4、MD-2,分别呈现下调和上调表达,且转染CD14、TLR4和MD-2 3种表达质粒的HEK293细胞株对FITC-LPS结合率最强(P<0.05),在内毒素刺激后NF-κB活性、TNF-α分泌最显著(P<0.05).结论 免疫细胞表面防御性受体下调和效应性受体上调参与炎症反应失控过程,调控模式识别受体表达对减轻机体炎性损伤有重要意义.     

丹皮酚对脂多糖诱导的大鼠血管内皮细胞VCAM-1、TNF-α释放及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的观察丹皮酚(Paeonol,Pae)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)释放血管内皮细胞黏附因子-1(vascular endothelial cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及Toll样受体-4(toll-like receptor,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路的影响,以阐明Pae抑制VECs黏附功能的分子机制。方法组织块预消化贴壁法分离培养VECs,采用LPS诱导VECs炎性损伤;健康大鼠灌胃给予Pae制备含药血清,反相高效液相色谱法测定血清Pae的含量;RT-PCR法检测TLR4mRNA的表达;凝胶迁移试验检测NF-κB蛋白的表达;免疫组织化学检测VCAM-1的表达;放射免疫法检测TNF-α的表达。结果 Pae含药血清(2.5,5,10μg/mL)作用于LPS诱导的VECs 24h,可抑制VECs中TLR4mRNA和NF-κB蛋白表达,以及VCAM-1和TNF-α分泌,呈现一定的剂量依赖性,其中Pae 10μg/mL的抑制作用均具有统计学意义(P<0.05)。结论 Pae降低TNF-α的释放和VCAM-1水平,可能是通过下调LPS诱导的TLR4/NF-κB信号通路的活化而实现的。     

姜黄素对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应的影响及分子机制

目的 研究姜黄素对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症因子表达的影响,初步探讨可能的分子机制.方法 使用LPS(1μg)和姜黄素(5μmol/L、15μmol/L或30μmol/L)处理HUVEC细胞24 h,收集细胞总RNA,实时定量PCR(RT-PCR)和ELISA方法检测细胞TNF-α、MCP-1水平;Western blot检测细胞TLR4、MAPKs、NF-κB p65、磷酸化-NF-κB p65及NF-κB抑制蛋白IκBα的表达情况.结果 与空白对照组比较,姜黄素能显著抑制LPS诱导HUVEC细胞TNF-α、MCP-1和TLR4的过表达(P<0.05),明显降低NF-κB p65和MAPKs的磷酸化及IκBα蛋白降解(P<0.05).结论 姜黄素可能基于抑制TLR4/NF-κB,从而影响LPS诱导HUVEC细胞炎症因子的表达.     

丹酚酸B对急性脑缺血小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨丹酚酸B对急性脑缺血小鼠的抗炎作用及Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法:建立小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。造模后阳性组(尼莫地平30μg/kg)、丹酚酸B低剂量组(丹酚酸B 11.25 mg/kg)、丹酚酸B高剂量组(丹酚酸B 22.5 mg/kg)分别尾静脉注射给药1次,模型组和假手术组给予同等体积的生理盐水。造模后6 h,分别采用酶联免疫吸附法测定脑组织中IL-1β及TNF-α的含量,采用实时定量PCR法检测缺血侧脑皮层TLR4、NF-κBp65 mRNA的表达,采用Western blot法检测缺血侧脑皮层TLR4、NF-κBp65蛋白的表达。结果:与模型组比较,丹酚酸B高、低剂量组均能显著降低小鼠脑组织中IL-1β、TNF-α含量(P0.01,P0.05);丹酚酸B高、低剂量组小鼠缺血侧脑皮层TLR4 mRNA、NF-κBp65 mRNA表达显著降低(P0.01,P0.05);丹酚酸B高剂量组小鼠缺血侧脑皮层TLR4、NF-κB蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:丹酚酸B可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低TLR4和NF-κB相关基因蛋白的表达,减少炎症因子IL-lβ和TNF-α的含量,进而发挥抗脑缺血的作用。     

Toll样受体在新生儿呼吸窘迫综合征中作用的研究

目的 探讨Toll样受体在新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)中的作用.方法 选取酉阳县人民医院2014年10月至2015年10月的42例NRDS患儿作为病例组,选取同期的42例非NRDS患儿作为对照组,对两组研究对象的TLR2、TLR3和TLR4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、JNK和核因子-κB(NF-κB)血清学水平进行检查,TLRs/JNK/NF-κB/TNF-α信号通路进行表达,分析TLR2、TLR3和TLR4血清学水平与NRDS发病的相关性,以及TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB与NRDS发病的相关性.结果 两组患者的治疗后3d和7d的TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB血清学水平与治疗前存在明显差异,而且病例组的TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB血清学水平与对照组差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后3d和治疗后7d的TLR2、TLR3和TLR4明显低于治疗前,而且病例组治疗后3d和治疗后7d的TLR2、TLR3和TLR4明显低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB血清学水平与NRDS发病具有良好的相关性,TLR2、TLR3和TLR4与NRDS发病具有良好相关性.结论 对NRDS的Toll样受体分析可以更好的发现TLRs/JNK/ NF-κB/TNF-α信号通路与新生儿呼吸窘迫综合征的相关性.     

连翘酯苷A通过TLR4/NF-κB抑制PC12细胞低氧/再复氧诱导的炎症反应

目的 研究连翘酯苷A(FA)对缺血再灌注诱导的PC12细胞炎症反应的抑制作用.方法 建立PC12细胞氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)模型,给予不同浓度的FA(1.25、2.5和5μmol/L)处理,测定炎症因子:白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6的水平,Western blot测定TLR4/NF-κB通路相关蛋白的表达情况,并采用慢病毒激活颗粒进行机制验证.结果 FA可显著抑制炎症因子释放水平,抑制TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平,同时可抑制细胞核内NF-κB p65表达.分别采用Toll样受体4(TLR4)和核转录因子kappa B(NF-kB)慢病毒激活颗粒验证发现FA通过TLR4调控NF-κB p65核转移,从而抑制炎症因子释放,减轻炎症反应.结论 FA可通过调控TLR4抑制NF-κB p65核转移抑制炎症因子表达,从而减轻缺血再灌注诱导的炎症反应,发挥脑保护作用.     

TLR4 mAb对人正常肝内胆管上皮细胞LPS-TLR4-NF-κB通路的影响

目的对脂多糖( LPS)及Toll样受体4单克隆抗体( TLR4 mAb)作用于体外培养的人肝内胆管细胞( HiBEC)后其TLR4 mRNA和核转录因子-κB( NF-κB) mRNA的表达情况进行了研究。方法体外培养HiBEC,采用 RT-PCR 法检测经LPS和不同浓度的TLR4 mAb作用后,HiBEC细胞株中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达情况。结果 LPS可以上调HiBEC中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达( P<0．05);而 LPS 作用于 TLR4 mAb 处理后的 HiBEC 中其TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达下调;高质量浓度TLR4 mAb使NF-κB mRNA的表达下调更明显( P<0．05)。结论LPS 能上调HiBEC中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达;而 TLR4 mAb 则能拮抗 LPS 对 HiBEC 的刺激作用,下调TLR4 mRNA和NF-κB mRNA 的表达。     

清肝活血方及其拆方对酒精性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物途径的影响

目的：通过观察清肝活血方及其拆方对酒精性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plas-minogen activator,uPA）和纤溶酶原激活物抑制物1（plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1）途经的调控作用,探讨清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝纤维化的作用机制。方法：雄性SD大鼠随机分为空白组、四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）组和造模组。造模组采用56度二锅头酒、玉米油、吡唑混合物灌胃联合腹腔注射CCl4橄榄油溶液（CCl4∶橄榄油=1∶3）的方法造模。8周后造模组再随机分为模型组、清肝活血方组、清肝方组及活血方组。各治疗组分别加用相应药物（4.75、1.5、3.25g/kg）灌胃,其他各组灌胃等体积生理盐水。12周末处死大鼠,观察大鼠肝功能变化和肝组织病理学改变;采用蛋白印迹法、实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫荧光法检测uPA、PAI-1蛋白和mRNA表达。结果：与空白组比较,CCl4组肝纤维化程度未见明显加重;模型组肝纤维化程度则明显加重（P〈0.01）,血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和门冬氨基氨转移酶（aspartate aminotransferase,AST）活性明显升高,肝组织uPA和PAI-1表达明显升高,并且PAI-1升高幅度高于uPA。与模型组比较,清肝活血方及其拆方均能不同程度地减轻酒精性肝纤维化大鼠肝纤维化程度（P〈0.01）,降低血清ALT和AST活性,显著降低PAI-1表达,提高uPA表达。全方对上述环节的调控优于拆方。结论：清肝活血方及其拆方均能改善酒精性肝纤维化大鼠肝功能,减轻纤维化程度,且全方作用优于拆方,其机制可能与调控uPA/PAI-1纤溶途径有关。     

清肝活血方治疗酒精性肝病的临床研究

目的研究清肝活血方治疗酒精性肝病的临床疗效。方法以小柴胡冲剂和一般治疗为对照，观察清肝活血方对酒精性肝病患者症状、体征、肝功能、血脂、肝纤维化标志物、细胞因子、脂质过氧化和B超等的改善作用。结果清肝活血方对食欲减退、恶心、呕吐、黄疸的改善作用优于对照组，对ALT、AST、TG的作用优于各对照组，对GGT、VLDL的作用优于一般治疗组，并可降低肝纤维化标志物、细胞因子水平，抗肝脏脂质过氧化损伤，较明显改善脂肪肝程度，总体疗效优于一般治疗组和小柴胡冲剂组。结论清肝活血方对酒精性肝病有明显治疗作用，而抗脂质过氧化，稳定肝细胞膜，纠正肝内脂质代谢紊乱，调节免疫功能，抗肝纤维化，促进酒精的肝内代谢作用可能是其作用机制。     

Triggering of toll-like receptors 2 and 4 by Aspergillus fumigatus conidia in immortalized human corneal epithelial cells to induce inflammatory cytokines

Background Cornea epithelial cells play eady and crucial roles in the initiation of ocular surface responses to pathogens. Participation of toll-like receptor （TLR） 2 and TLR4, which are major forms of fungi receptors, may be involved in Aspergillus fumigatus induced immune responses. The objective of the present study was to examine whether inactive Aspergillus fumigatus conidia induce NF-KB activation and production of proinflammaory cytokines, and whether the expression of TLR2 and TLR4 were amplified by conidia in cultured immortalized human corneal epithelial cells （THCEs）. This may contribute to our knowledge of the mechanism by which the host cornea can successfully defend against invasive fungi. Methods Aspergillus fumigatus conidia were used to challenge THCE cells. THCE cells were harvested after 0.5, 1, 2 or 4 hours incubation. Real-time quantitative PCR was performed to determine the expression of TLR2, TLR4, TNF-a and IL-8. Western blotting was performed to determine the expression of NF-KB. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was performed to determine the expression of TNF-a and IL-8. And the release of TNF-a and IL-8 in the cell supematant were also assessed by ELISA with or without pretreatment with TLR2 and TLR4 neutralizing antibodies. Results Aspergillus fumigatus conidia elicited the expression of TLR2, TLR4, TNF-a and IL-8 mRNA in THCEs. Exposure of THCE cells to Aspergillus fumigatus conidia resulted in NF-KB activation, which increased at 30 minutes （increased from 11.35±2.74 in the controls to 19.12±3.48, p〈0.05） and thereafter increased steadily up to 4 hours after challenge （P 〈0.01）. Concomitant with NF-KB activation, secretion of TNF-α and IL-8 in conidia-challenged cells was increased in a time-dependent manner. Incubation of THCE cells with TLR2 antibody or TLR4 antibody before conidia challenge resulted in inhibition of conidia-induced TNF-α and IL-8 secretion （P 〈0.05）, TLR2 antibody and TLR4 antibody together significantly increased inhibit     

乳宁方药物血清对人乳腺癌细胞基因表达的影响

目的:探讨乳宁方体外抗乳腺癌复发转移的作用机制。方法:SD雌性大鼠,分为乳宁方治疗组、乳宁方拆方温肾方治疗组、乳宁方拆方疏肝活血方治疗组、三苯氧胺(tamoxifen,TAM)治疗组、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)治疗组、空白对照组,每组10只,制备含药血清。MDA-MB-435细胞传代培养,分别加入药物血清常规培养,采用体外matrigel细胞侵袭能力实验检测细胞的侵袭能力、实时逆转录聚合酶链反应法检测细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、金属蛋白酶组织抑制物-1(tissueinhibitorofmetalloproteinase-1,TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)基因表达。结果:CTX治疗组、TAM治疗组、疏肝活血方治疗组血清均可下调MDA-MB-435细胞VEGF基因表达;CTX治疗组、乳宁方治疗组、温肾方治疗组血清可上调MDA-MB-435细胞TIMP-1基因表达,并能下调MMP-9基因表达。结论:乳宁方抑制MDA-MB-435侵袭的作用可能与影响MMP-9/TIMP-1的平衡性,以抑制肿瘤细胞的侵袭和转移有关。     

CD14与TLR4相互作用的实验研究

目的探讨CD14与TLR4(toll-like receptor 4, TLR4)在介导LPS膜信号转导中的相互作用.方法通过PCR分别克隆CD14 cDNA和TLR4胞外区cDNA,构建其酵母表达载体,将载体共转化酵母细胞行酵母双杂交实验.同时,应用Pull-down和免疫共沉淀实验在体外及体内进一步鉴定CD14与TLR4的相互作用.结果 PCR扩增获得了CD14 cDNA和TLR4胞外区cDNA,并成功地构建了pGADT7 AD-CD14和pGBKT7 BD-TLR4酵母双杂交质粒.酵母双杂交系统检测显示pGADT7 AD-CD14和pGBKT7 BD-TLR4质粒均无自主激活报告基因LacZ表达的能力,在酵母细胞中CD14和TLR4之间存在相互作用.Pull-down结果也显示,在体外反应体系中,CD14和TLR4间存在相互作用.免疫共沉淀实验结果表明,在哺乳动物细胞(HEK 293)这一体内反应体系中,CD14与TLR4间也存在交互作用.结论在酵母细胞、体外反应体系和哺乳动物细胞(HEK 293)中,CD14与TLR4之间存在物理上的相互作用.     

乌司他丁对重症急性胰腺炎患者早期外周血单核细胞Toll样受体4表达的影响

目的:研究乌司他丁对重症急性胰腺炎患者早期外周血单核细胞Toll-样受体4(TLR4)表达的影响.方法:将58例重症急性胰腺炎患者随机分为乌司他丁组(29例,予以常规治疗+乌司他丁)和常规组(29例,予以常规治疗),同时选择20例健康志愿者作为对照组.入院后第1、3、5、7、14天采集静脉血,对照组仅采血1次.用流式细胞仪检测外周血单核细胞TLR4、CD14的表达,用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α、IL-6的浓度,并分析与TLR4表达的相关性.结果:与对照组比较,在入院第1天常规组和乌司他丁组患者外周血单核细胞TLR4表达明显增高(P＜0.01),两组在入院后第3、5天TLR4表达逐渐降低,但仍高于对照组(P＜0.05).乌司他丁组与常规组相比,入院第1天治疗前,外周血单核细胞TLR4表达差异无统计学意义(P＞0.05),而在入院后第3、5、7天乌司他丁组外周血单核细胞TLR4的表达均明显低于常规组(P＜0.05).血浆TNF-a、IL-6浓度的变化与TLR4变化一致.结论:重症急性胰腺炎患者早期外周血单核细胞表面TLR4的表达明显增高,乌司他丁对重症急性胰腺炎引起的全身炎症反应的拮抗和抑制作用与其抑制单核细胞表面Toll样受体4的表达从而抑制炎症反应有关.     

补肾活血方对动脉粥样硬化斑块稳定性相关机理研究

目的：通过单纯高脂血症喂养法诱导建立新西兰兔的动脉粥样硬化模型（AS模型）,观察补肾活血方对动脉粥样硬化斑块（AS斑块）中炎症因子MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-8、MMP-9、MMP-12、CD40蛋白表达的变化以及对NF-κB活化的影响,探讨补肾活血方对高脂血症所致AS的防治作用及对AS斑块稳定性影响。方法：实验动物新西兰兔分别以特制的高脂喂养造模,诱发造模动物动脉粥样硬化（AS）病变,利用免疫组织化学染色方法观察家兔主动脉AS斑块中炎症因子MMPs、CD40蛋白表达水平,NF-κB活化情况并探索其相互关系。结果：（1）AS动物模型建立,实验动物兔均成功复制了AS模型。两种模型动物中均可见明显的AS斑块,呈点状或片状的乳白色隆起,多位于主动脉窦至主动脉弓段,AS兔模型中胸、腹主动脉病变也较明显。对照组未见AS病变,内膜光滑且管壁弹性好。（2）补肾活血方对兔模型AS斑块中MMPs、CD40、NF-κB蛋白表达的影响：补肾活血方可抑制或下调斑块MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-12的表达,其中对MMP-2、MMP-3作用最明显（P〈0.05）;补肾活血方可明显抑制CD40表达（P〈0.01）;补肾活血方也可抑制NF-κB表达,但因组内差异大而无统计学意义。（3）MMPs、CD40、NF-κB蛋白表达相关性的比较：模型组中,MMP-1与MMP-2,MMP-8与MMP-9、MMP-12,MMP-2与CD40,NF-κB与CD40的相关系数分别为0.935、0.809、0.942、0.833、0.886,均呈正相关且达到显著相关水平（P〈0.05）。另外,MMP-1与CD40,MMP-3与MMP-8、MMP-9、MMP-12的相关系数分别为0.675、0.737、0.628、0.731,呈现出弱相关,但无显著性差异。结论：（1）补肾活血方对MMPs蛋白表达均有抑制或下调作用,对MMP-2、MMP-3蛋白作用最强。（2）补肾活血方可降低炎症因子CD40、NF-κB的表达,具有一定的抗炎作用。（3）MMPs、CD40、NF-κB间存在一定的相关性,推断补肾活血方抗AS、稳定?     

肺虚痰阻大鼠肺组织核因子-κB和环氧合酶-2mRNA的表达

目的:探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)和环氧合酶-2(cycloxygenase-2, COX-2)在肺虚痰阻大鼠发病中的意义和化痰1号作用的机制.方法:采用二氧化硫烟薰和寒冷刺激建立SD大鼠肺虚痰阻模型,应用免疫组化法检测正常组、肺虚痰阻模型组及化痰1号治疗组大鼠支气管上皮细胞NF-κB的表达及RT-PCR检测肺组织COX-2 mRNA的表达.结果:模型组NF-κB和COX-2 mRNA的表达高于正常组(P<0.01),中药治疗后,NF-κB和COX-2 mRNA的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.01).结论:NF-κB和COX-2 mRNA的表达升高在痰邪致病中起着重要作用,化痰1号可能通过调节NF-κB和COX-2 mRNA的表达而起到化痰作用.     

三色和双色荧光标记流式细胞术对肾移植免疫反应新指标TLR4的监测

目的 比较三色和双色荧光标记流式细胞术（FCM）在肾移植术后免疫指标TLR4监测中的优缺点。方法 选取10例肾移植术后病例，分别采用三色和双色FCM检测外周血单核细胞中CD14、TLR4和CD80表达情况，计算CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80的表达百分率并进行统计比较。结果 两种方法检测CDl4阳性单核细胞中TLR4和CD80阳性表达百分率均无显著性差异（P=0．198，P=0．872），两种方法对相同血标本的检测结果均呈正相关关系（积矩相关系数r=l，P=0．000；积矩相关系数r=0．999，P=0．0001。另外，应用三色FCM还可同时获得单核细胞中TLR4和CD80双阳性的表达情况。结论 三色和双色FCM检测TLR4的结果无显著性差异，但三色FCM可同时显示TLR4与其下游分子CD80双阳性表达情况，对揭示TLR4参与移植免疫反应机制具有重要价值，而且血标本用量少。节约单克隆抗体。