亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Eif2s3y表达的影响

[目的]观察亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Eif2s3y表达的影响。[方法]SPF级小鼠30只,按体重将小鼠随机分为对照组、低剂量染砷组(1 mg/L As2O3)、高剂量染砷组(4 mg/L As2O3)。通过自然饮用含不同浓度As2O3蒸馏水的方式使小鼠染砷,连续染毒60 d后取脑。利用基因芯片技术和RT-PCR技术检测雄性小鼠脑组织性基因Eif2s3y的mRNA表达变化。[结果]基因芯片结果显示,染砷组雄性小鼠大、小脑中Eif2s3y基因表达显著高于对照组。RT-PCR验证结果也显示,染砷组雄性小鼠大脑皮质、髓质Eif2s3y的mRNA表达量明显高于对照组,但小鼠小脑组织Eif2s3y的mRNA表达量与对照组比较,差异无显著意义。[结论]亚慢性砷暴露可诱导雄性小鼠大脑组织Eif2s3y基因表达上调。     

亚慢性染砷对小鼠脑组织性基因Jarid1d表达的影响

[目的]观察亚慢性染砷对小鼠脑组织性基因Jarid1d表达的影响.[方法]SPF级小鼠30只,按体重将小鼠随机分为1 mg/L As2O3染砷组、4 mg/Ls2O3染砷组和对照组,每组10只.自然饮用含不同浓度As2O3饮用水方式使小鼠染砷,连续染毒60 d后取脑.利用基因芯片技术检测小鼠脑组织性基因Jarid1d的...     

醋酸铅对雄性小鼠附睾Y染色体基因Ddx3y蛋白表达的影响

[目的]通过观察亚慢性铅暴露对小鼠附睾组织Y染色体基因Ddx3y表达的影响,为探讨铅的雄性生殖毒作用机制提供依据。[方法]昆明种小鼠48只,按体重将小鼠随机分为对照组、0.5 g/L、1.0 g/L和1.5 g/L醋酸铅染毒组。通过自然饮用含不同浓度醋酸铅的方式使小鼠染铅,连续染毒60 d后取附睾组织。HE染色观察组织病理学变化,Western blotting和免疫组化方法检测附睾组织Ddx3y蛋白的表达及组织分布。[结果]与对照组比较,染铅组附睾管内精子数和分泌液均减少,尤其1.5 g/L染铅组最为明显。Western blotting检测结果显示,染铅组的小鼠附睾组织中Ddx3y蛋白表达明显低于对照组,且有剂量-反应关系。免疫组化结果显示,随着染铅剂量的增加,附睾组织中抗Ddx3y蛋白免疫反应明显降低。[结论]亚慢性铅暴露显著下调小鼠附睾组织Y染色体基因Ddx3y蛋白表达。     

亚慢性砷暴露对小鼠小脑组织甲状腺激素受体表达的影响

目的：了解砷对小鼠小脑组织甲状腺激素受体（ thyroid hormone receptor ,TR）相关基因和蛋白表达影响,为阐明砷的神经毒作用机制提供靶标依据。方法昆明小鼠40只,按体重随机分为对照组、1 mg/L、2 mg/L和4 mg/L三氧化二砷（ As2 O3）染砷组,每组10只。以自由饮水方式,连续染毒60 d。行为学跳台实验测试砷暴露对小鼠学习记忆能力影响,差异表达基因谱芯片筛查砷暴露小鼠小脑组织TR相关基因的差异表达,Real-time RT-PCR和Western blot技术从基因和蛋白水平进行验证。结果跳台实验中,随砷暴露剂量增加,小鼠发生错误次数增加,从平台跳下的潜伏期缩短,呈剂量-反应关系;基因芯片筛选出砷暴露小鼠小脑组织TRβ基因表达较对照组显著下调（P＜0．05）;Real-time RT-PCR发现,砷暴露小鼠小脑组织TRβmRNA表达显著下降（P＜0．05）,且呈剂量-反应关系;Western blot发现,砷暴露小鼠小脑组织TRβ1蛋白表达下降,2 mg/L、4 mg/L剂量染砷组与对照组比较,差异显著（P＜0．05）。结论砷暴露导致小鼠学习记忆功能下降,其机制可能与抑制TR的功能性受体TRβ1表达,进而损伤长时程记忆（ LTM）有关。     

亚慢性砷暴露对小鼠海马组织细胞凋亡的影响

目的观察亚慢性砷暴露致小鼠海马组织细胞凋亡作用,为探讨砷的神经毒性作用机制提供依据。方法昆明种小鼠40只,按体重将小鼠随机分为对照组、1 ppm、2 ppm和4 ppm三氧化二砷(As2O3)染毒组。通过自然饮用含不同浓度As2O3水的方式使小鼠砷暴露,连续染毒60 d。取海马组织,通过HE染色观察海马组织形态学变化,通过TUNEL和Hoechst双染以及透射电镜观察神经细胞凋亡。结果与对照组相比,染毒组小鼠的海马神经细胞出现肿胀,细胞核仁增多,细胞分布稀疏、排列紊乱。电镜下,可观察到染毒组小鼠的海马细胞出现膜皱缩,核仁消失,染色质凝聚、移动,分布于核周,进而裂解成几个碎片等凋亡细胞形态特征。TUNEL和Hoechst双染色分析结果显示,在染毒组小鼠海马切片可见凋亡染色阳性细胞,其凋亡指数显著高于对照组(P<0.01),且随着染毒剂量的增高而增多。结论亚慢性砷暴露可导致小鼠海马组织细胞凋亡。     

氨基脲对雄性小鼠生殖功能的影响

目的:探讨氨基脲(semicarbazide,SEM)对雄性小鼠生殖功能的影响。方法:40只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)清洁级健康成年KM雄性小鼠按体重随机分成为4组,每组分为10只:溶剂对照组、低剂量SEM染毒组、中剂量SEM染毒组、高剂量SEM染毒组。溶剂对照组用去离子水灌胃;SEM染毒组按30、60、120mg/kg.bw SEM溶液灌胃染毒6周,1次/日。最后灌胃24h后,将其剖杀,取其血液和组织器官检测相关生殖指标。结果亚慢性SEM可致雄性小鼠生殖系统损伤。     

亚慢性铅暴露小鼠睾丸组织铅蓄积及对精子质量影响

目的观察亚慢性铅暴露小鼠睾丸组织铅蓄积和对小鼠精子质量影响,并探讨二者的关联性。方法昆明种小鼠60只,按体重将小鼠随机分为对照组、0.5 g/L、1.0 g/L和1.5 g/L醋酸铅染毒组。通过自然饮用含不同浓度醋酸铅水的方式使小鼠染铅,连续染毒60 d后取附睾和睾丸组织。用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测小鼠睾丸组织的铅浓度,常规方法检测附睾精子质量,并用统计学方法对二者的相关性进行分析。结果 0.5g/L、1.0 g/L和1.5 g/L染铅组小鼠精子的活动度分别为87.3%、79.2%和68.3%,显著低于对照组(94.1%)(P<0.05)。各铅暴露小鼠精子畸形率分别为15.2%、32.8%和35.5%,显著高于对照组(7.0%)(P<0.05)。各铅暴露小鼠睾丸组织铅浓度分别为72.71 ng/g,118.74 ng/g和177.14 ng/g,显著高于对照组(9.73 ng/g)(P<0.05),并随染毒剂量增加而升高。而且,铅暴露小鼠睾丸铅浓度与精子的活动率、密度和存活率之间呈显著负相关(P<0.05)。结论亚慢性铅暴露可导致小鼠睾丸组织铅蓄积,铅在睾丸组织蓄积可能是亚慢性暴露小鼠精子质量下降的重要因素。     

青蒿水提物对雄性小鼠一般生殖毒性的实验研究

目的:观察青蒿水提物对雄性小鼠生殖能力的影响.方法:采用一般生殖毒性实验,80只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水组、青蒿水提物低剂最组(20mg/kg)、中剂量(100mg/kg)和高剂量组(500mg/kg).雄鼠连续腹腔给药60d,然后按雌雄比例2:1合笼喂养交配、处死,检测青蒿水提物对各组雄鼠的交配率、睾丸、精子数量、活动精子百分率和畸形率的影响以及睾丸组织病理学变化.结果:500mg/kg青蒿水提物对前述所检测的生育指标无明显影响.结论:青蒿水提物对雄鼠的生殖功能无明显毒性作用.     

吸烟对雄性小鼠生殖内分泌系统的影响

目的：研究吸烟对雄性小鼠生殖内分泌系统的影响。方法：雄性小鼠50只，随机分为正常对照组、吸入香烟烟气21d组、28d组、42d组和63d组5组，每组10只，测定各组小鼠血清的睾酮（T）、促黄体生成激素（LH）、促卵泡生成激素（FSH）水平和性腺、附性腺器官的脏器系数，光镜下观察各组小鼠睾丸组织显微结构的变化。结果：与正常对照组对比，吸入42d、63d组小鼠的血清T水平显著下降（P＜0.01或P＜0.001），睾丸组织的显微结构出现不同程度的萎缩，吸入63d组小鼠血清LH、FSH水平下降有显著性（P＜0.05）。除前列腺外，吸入63d组小鼠的睾丸、附睾和精囊腺的脏器系统改变也有显著性（P＜0.05或P＜0.01）。而吸入21d、28d组小鼠的各项指标与正常对照组对比差异均无显著性（P＞0.05）。结论：长期吸烟可对雄性小鼠生殖内分泌系统造成损害。     

氧化乐果对雄性小鼠精液质量及骨髓细胞微核的影响

目的研究低剂量重复染毒有机磷农药氧化乐果对雄性小鼠精液质量和骨髓细胞微核的影响。方法将44只昆明雄性小鼠随机分成4组,即对照组和氧化乐果低、中、高剂量组,其中氧化乐果低、中、高剂量组分别以1.5、3.0、6.0 mg.kg-1体质量灌胃氧化乐果,对照组采用等容量灌胃法(20 mL.kg-1体质量)灌胃生理盐水,连续5 d。染毒结束后通过精液质量分析和骨髓嗜多染红细胞微核试验观察氧化乐果对雄性小鼠的生殖毒性和遗传毒性。结果随着氧化乐果染毒剂量的逐渐增加,小鼠肝脏质量明显降低,肝脏脏器系数明显升高,小鼠精子存活率显著下降,精子活动度明显降低,骨髓细胞微核率明显升高,与对照组比较差别均有统计学意义(P<0.05)。结论氧化乐果可引起小鼠精液质量下降和骨髓嗜多染红细胞遗传毒性。     

砷对小鼠脑单胺类神经递质浓度影响及牛磺酸、维生素C的保护作用

[目的]观察亚慢性砷暴露对小鼠脑组织单胺类神经递质浓度的影响.[方法]昆明种小鼠70只,随机分为6组,即饮用水对照组、1ppm As2O3染砷组、2 ppm As2O3染砷组、4 ppm As2O3染砷组、2个保护组(4 ppm As2O3+150 mg/kg牛磺酸和4 ppm As2O3+45 mg/kg维生素C)....     

三氧化二砷对小鼠脑神经元DNA损伤作用

[目的]为探讨砷的中枢神经系统毒性作用机制提供实验依据.[方法]昆明种小鼠40只,随机分为4组:1、2、4 ppm三氧化二砷染毒组和生理盐水组.连续染毒60d,取大脑,用免疫组化方法观察脑皮质神经细胞8-羟基-2'-脱氧鸟嘌呤核苷(8-OH-dG)的表达,并用单细胞凝胶电泳试验检测脑神经元的单链DNA断裂程度.[结果]各染砷组小鼠脑皮质神经细胞出现肿胀、胞质内有空泡变性、核固缩、碎裂等病理学变化,神经组织中8-OH-dG呈现明显的高表达,而且神经细胞可见明显的彗尾、且随砷暴露剂量增高其彗尾变长.[结论]慢性低剂量砷暴露可诱发小鼠神经元的DNA损伤,脑皮质神经元可能是砷神经毒性作用的主要靶细胞.     

As2O3对小鼠结肠癌CT26细胞生长的抑制作用

目的 在体外观察三氧化二砷（As2O3）对小鼠结肠癌CT26细胞的抑制作用并探讨其作用机制,为其能否作为结肠癌的化疗药物提供理论基础.方法 将不同浓度As2O3作用于CT26细胞不同时间后,用MTT法检测各组细胞的生长抑制率;光镜下观察细胞形态学和结构的变化;采用免疫组织化学方法观察凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3在各药物组中的表达;应用Western blot测定各药物组中Bax和Caspase-3表达的变化.结果 ①MTT法检测发现不同浓度的As2O3作用CT26细胞后,细胞增殖受到不同程度的抑制,且随着浓度的升高和作用时间的延长作用越来越明显;②形态学观察可见随着As2O3浓度增加,各组中贴壁细胞数量逐渐减少,细胞间隙变大、细胞变圆、胞膜皱缩、胞体回缩,可见大小不等的凋亡小体;③免疫组织化学和Western blot检测显示,随着As2O3浓度的增加,各药物组细胞中Bax和Caspase-3蛋白表达也逐渐增加,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 As2O3具有明显的抑制结肠癌CT26细胞生长的作用,其作用可能与促进细胞凋亡相关.     

As2O3与阿司匹林联合应用增强对人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用

目的:探讨As2O3与阿司匹林联合应用对人胃癌SGC-7901细胞生长的影响。方法:采用MTT法检测As2O3和阿司匹林对SGC-7901细胞株增殖的影响,采用流式细胞术检测两者对SGC-7901细胞凋亡和细胞周期分布的影响。结果:①药物作用后72h,4μmol/L和2mmol/LAs2O3组生长抑制率分别为31.04%及16.11%,与阴性对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);2μmol/LAs2O3 1mmol/L阿司匹林联合用药组的生长抑制率为24.19%,与阴性对照组、2μmol/LAs2O3(5.96%)及1mmol/L阿司匹林(4.86%)相比,差异均有统计学意义(P<0.05);②2μmol/LAs2O3与1mmol/L阿司匹林联合组细胞的凋亡率是19.01%,与阴性对照组(1.55%)、2μmol/LAs2O3组(1.81%)及1mmol/L阿司匹林组(1.64%)相比,差异均有统计学意义(P<0.05);③As2O3使细胞G0/G1期比例下降,G2/M期比例增加。阿司匹林使细胞G0/G1期比例增加,S和G2/M期比例下降。2μmol/LAs2O3与1mmol/L阿司匹林联合应用后72h,G0/G1期和G2/M期比例增加,S期比例下降。结论:As2O3、阿司匹林可以抑制SGC-7901细胞增殖、诱导其凋亡,阻滞细胞周期,两者联合应用具有协同作用,可以同时降低两药的用量。     

As2O3对乳腺癌细胞的生长及端粒酶活性的影响

目的：探讨不同浓度As2O3对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231端粒酶及其亚单位hTERT-mRNA活性表达的影响,为临床治疗乳腺癌提供理论和实验依据。方法：将不同浓度的As2O3与MDA-MB-231细胞共培养不同时间后,MTT比色法检测As2O3对MDA-MB-231细胞的生长抑制作用;TRAP-PAGE-银染法检测As2O3作用后细胞端粒酶活性的改变;RT-PCR法测定MDA-MB-231细胞hTERT-mRNA的表达。结果：As2O3可显著抑制MDA-MB-231细胞生长,且存在浓度、时间效应关系,其24 h IC50为24.73μmol/L,48 h IC50为6.99μmol/L;用终浓度分别为10、20、40μmol/L的As2O3与MDA-MB-231细胞作用24h、48 h,银染条带显示出端粒酶活性显著下降;RT-PCR产物电泳条带显示出hTERT-mRNA的表达明显下降。结论：As2O3在体外可显著抑制MDA-MB-231细胞的生长,具有较明显的细胞毒作用;As2O3能显著抑制MDA-MB-231细胞端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶的活性,且抑制作用具有明显的时间和浓度依赖关系。     

三氧化二砷诱导表达带3蛋白膜段结构域K562细胞凋亡作用的研究

目的 探讨三氧化二砷诱导表达带3蛋白膜段结构域K562细胞凋亡的作用。方法 将纯化的表达载体pYDl—mdb3转染K562细胞，Western Blot检定有带3蛋白膜段结构域的表达；通过光学显微镜、DNA电泳和线粒体膜电位的测定，观察三氧化二砷对表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞凋亡的影响。结果 表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞的上述凋亡特征均比未表达带3蛋白的K562细胞明显。结论 表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞对三氧化二砷更敏感。