产ESBLs菌株及其耐药性监测的临床意义

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株及其耐药性监测的临床意义.方法 选取2019年6月至2020年6月本院门诊与住院患者各种临床样本分离的大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌共150株,通过琼脂扩散法及ESBLs验证试验开展ESBLs检测.比较大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率与产ESBLs菌株对单种抗菌药与多种抗菌药的耐药性.结果 150例菌株中产ESBLs检出64株(42.67％),分别从肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌检出30、34株.肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs菌株对各种抗菌药物的耐受性除亚胺培南、氨苄西林外均高于非产ESBLs菌株(P<0.05).肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌产ESBLs对头孢菌素类、青霉素类联合酶抑制剂具有多重耐药性.结论 在肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌中产ESBLs菌株均分离率较高,且对除亚胺培南外的抗生素均具有较高耐药性及多重耐药性.     

血液中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶耐药基因型研究

目的 了解本地区血液标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分离率、耐药性和基因型.方法 收集临床血液标本分离的产ESBLs的大肠埃希菌26株,应用PCR基因扩增技术分别检测SHV、TEM、CTX-M、PER、CTX-M-2、Ampc、GES基因,DNA测序确定CTX-M、TEM基因型.结果 在26株菌株中15株为CTX-M型,占57.69%,11株为TEM型,占42.31%.结论 本地区临床血液标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型.     

临床大肠埃希氏菌耐药性检测及超广谱β-内酰胺酶流行病学调查

目的了解广州地区临床大肠埃希氏菌耐药及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况。方法对临床分离鉴定的57株大肠埃希氏菌进行5大类15种抗菌药物的耐药性检测。通过表型确认试验筛选出产ESBLs菌株,采用PCR法检测15种临床重要且常见的耐药基因。结果 57株大肠埃希氏菌对15种抗菌药物产生了不同程度的耐药性。其中有23株产ESBLs,ESBLs产生率为40.4%;24株产TEM,13株产CTX-M(其中,8株产CTX-M-55、4株产CTX-M-14、1株产CTX-M-27),2株产OXA-1。结论广州地区大肠埃希氏菌耐药情况依然严峻。同时,ESBLs流行趋势发生了变化:以前以流行CTX-M-9型为主,现在以CTX-M-1型和CTX-M-9型同时流行为主要特征。     

产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药分析

目的监测并分析我院2010年1月至2012年12月间临床分离的2341株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药变化,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法对分离的2341株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,用筛选和确证试验确认产ESBLs菌株,用WHONETS.5软件进行数据分析.结果1807株大肠埃希菌产ESBLs的有982株,占54.3%;534株肺炎克雷伯菌产ESBLs的有206株,占38.6%.产ESBLs菌株的耐药性显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05),产ESBLs菌株呈多重耐药.结论三年来产ESBLs菌的检出率与耐药率呈总体上升趋势,在抗感染治疗过程中,临床应根据药敏结果合理选择抗菌药物,特别是加强对产ESBLs菌株及其耐药性监测,以减缓细菌耐药性的产生.     

多重PCR检测临床产ESBLs大肠埃希菌的耐药基因型研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性、产ESBLs的阳性率及耐药基因之间的关系。方法采用Kirby-Bauer(K-B)琼脂扩散法检测120株临床分离的大肠埃希菌对18种抗生素的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,运用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果120株大肠埃希菌产ESBLs的有51株,阳性率为42.5%。120株大肠埃希菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的大肠埃希菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢类抗菌药物的耐药率高达100%;51株产ESBLs菌株其中46株扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,2株扩增到SHV基因,1株OXA型基因,未检出PER和VEB型。结论大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青酶烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物;产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型别为CTX-M型和TEM型。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型分型及耐药分析

[目的]了解大连市中心医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌耐药基因型及耐药情况。[方法]收集该院2005年11月-2006年2月连续不重复产ESBLs大肠埃希菌40株,采用美国国家临床实验室标准化委员会推荐的表型确认方法进行筛选。在此基础上,分别用针对TEM、SHV、CTX-M-Ⅰ、CTX-M-Ⅱ、CTX-M-Ⅲ、CTX-M-Ⅳ型β-内酰胺酶基因的六对特异性引物对每株细菌进行聚合酶链反应（PCR）,毛细管电泳方法检测所有产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因。应用K-B纸片扩散法检测产ESBLs大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性。[结果]毛细管电泳结果显示,40株产ESBLs大肠埃希菌中,仅携带一种基因型的分别为SHV型1株（2.50%）,CTX-M-Ⅰ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅱ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅲ型2株（5.00%）,CTX-M-Ⅳ型4株（10.00%）。有18株（46.15%）同时携带两种或两种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型共同存在;药物敏感试验结果显示,产ESBLs大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素均表现出较高的耐药性,对碳青霉烯类药物（亚胺培南和美洛培南）的耐药率最低。[结论]该院产ESBLs大肠埃希菌近期流行的主要基因型别为CTX-M型,而且多基因携带情况常见;碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物。     

中山地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性调查

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是医院常见的高产ESBLs的致病菌.ESBLs是目前我国抗菌药物临床最主要的细菌耐药原因.通过调查广东省中山地区三家大型三甲医院于2006年1月-2007年12月临床分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.用美国国家临床实验室标准委员会颁布的标准(NCCLS)表型确证试验(纸片法)检测其ESBLs产生率,微量稀释法对各常用抗菌药物进行药敏试验.在符合标准的438株大肠埃希菌和292株肺炎克雷伯菌中,结果显示大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs产生率均较高.分别为46.6%和30.8%,产或不产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌株对亚胺培南均呈敏感,对酶抑制剂/β-内酰胺复合药如哌拉西林/三唑巴坦的耐药率较低,但产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌株对四代头孢如头孢吡肟、三代头孢如头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟等以及一二代头孢的耐药率均较不产ESBLs株高.     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药基因型分析

目的了解宁夏医科大学附属医院大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的分离率、耐药性和基因型。方法收集2008年1月-2008年12月住院患者分离的标本281株,采用K-B法进行药敏试验,采用PCR技术分别检测TEM、CTX-M基因。结果在281株大肠埃希菌中,有186株大肠埃希菌产超广谱ESBLs,产酶率为66.2%。在186株ESBLs菌株中有111株为TEM型,占59.7%,有66株为CTX-M型,占35.5%。结论产ESBLs株大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性较为严重,而且存在多重耐药;本地区临床标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型。     

南京地区产超广谱β-内酰胺酶菌的流行病学调查

目的:了解南京地区产ESBLs菌基因型的流行情况。方法:用TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型ESBLs的特定引物进行扩增并对扩增产物进行测序分析确定基因型。结果:30株产ESBLs大肠埃希菌和30株产ESBLs肺炎克雷伯菌未发现TEM型、SHV型、OXA型ESBLs,51株产CTX-M型ESBLs,主要为CTX-M-3、CTX-M-14。9株未扩增到ESBLs基因型。结论:南京地区产ESBLs菌基因型主要以CTX-M型为主。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药表型及基因型研究

目的研究大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酸ESBLs耐药表型及基因型特性。方法2006年1月至2006年12月我院临床分离的大肠埃希菌125株。先后用标准纸片法筛选试验和确认试验、Etest条分别检测ES-BLs。聚合酶链反应(PCR)以及基因测序分析测定ESBLs基因的类型。结果125株大肠埃希菌中检出71株产ESBLs(56.8%)菌株。PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M-14型为主;TEM基因型均为TEM-1型,SHV基因型均为SHV-1型。产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星耐药率在70%以上,对美罗培南,亚胺培南敏感性好。结论本地区大肠埃希菌ESBLs携带率较高,其基因以CTX-M-14型为主,其次CTX-M-3型ESBL,产酶株对多种抗菌药物耐药,对美罗培南、亚胺培南敏感性好。     

2 083株细菌的药敏状况及超广谱β-内酰胺酶和诱导酶的调查

目的了解本地区临床分离的细菌的药敏状况为合理使用抗生素提供依据.方法使用MICROSCAN WALKAWAY-40 对住院或门诊患者送检培养呈阳性的标本进行细菌鉴定和药敏试验.结果检出G-杆菌和G+ 球菌共2 083株包括34个菌属121个菌种.G-杆菌对第三代头孢霉素敏感率已降到3.0%～76.1%,但对亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦较敏感;在产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)G-杆菌中, 肺炎克雷伯菌高达35.0%,大肠埃希菌达23.0%.产诱导酶(IB)的G-杆菌中,铜绿假单胞菌高达60.9%,阴沟肠杆菌达24.0%.结论本地区分离的G-杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制是产生ESBLs和IB.由产此类酶的G-杆菌引起的感染首选亚胺培南单用或第三代头孢菌素复合制剂联合阿米卡星或氟喹诺酮类,万古霉素联合利福平是MRSA或MRSE引起感染的首选药物.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs酶和AmpC酶的检测结果分析

目的:了解对头孢菌素类耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs和AmpC酶的分布及其对抗生素的敏感性。方法:利用双纸片协同试验及纸片法确证试验检测ESBLs,三相试验检测AmpC酶,并用纸片扩散试验和微量稀释法测定细菌对抗生素的敏感性。结果:从头孢噻肟耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs分别为91.4%和96.7%;产AmpC酶分别为17.1%和10.0%;产SSBL分别为8.6%和6.7%。产酶菌株对三代头孢菌素高度耐药,对环丙沙星、庆大霉素及复方新诺明耐药率较高,对亚安培南敏感,产AmpC酶细菌对含酶抑制剂的复合抗生素高度耐药。结论:产生ESBLs和AmpC酶是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢菌素耐药的重要机制,实验室应对其检测和监测给予足够重视,临床医生也应了解其对抗生素的耐药规律。     

超广谱β-内酰胺酶基因型分析

目的 了解同济医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌基因型分布状况.方法 采用纸片扩散法检测产ESBLs细菌,通过基因扩增、序列分析技术研究ESBLs基因型.结果 49株产ESBLs细菌中,以CTX-M-14(n=33)亚型最常见,其它亚型包括CTX-M-3(n=3)、CTX-M-9(n=1)、CTX-M-12(n=1)、CTX-M-15(n=1)、CTX-M-24(n=1)、SHV-5a(n=1),1株细菌同时产CTX-M-3、CTX-M-14两种CTX-M型ESBLs;4株表型确证试验阳性细菌未能分型.结论 同济医院ESBLs基因型以CTX-M酶为主,CTX-M-14亚型最常见,亦存在SHV-5a,CTX-M-12、15中国少见亚型.     

产超广谱β-内酰胺酶AmpC细菌感染及耐药特性

[目的]了解医院内产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和高产AmpC细菌感染和耐药特性。[方法]三维试验检测高产AmpC细菌、双纸片协同试验检测产ESBLs菌。Kirby—Bauer法测定药物敏感试验，回顾患者临床资料及使用抗生素情况。[结果]高产AmpC细菌在阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别为12．8％（11／89）、4．1％（7／170）和2．6％（5／190）；产ESBLs菌分别为42．7％（38／89），肺炎克雷伯菌31．7％（54／170），大肠埃希菌27．3％（52／190），其中同时产两种酶为6株。高产AmpC和产ESBLs菌对三代头孢菌素，氨曲南的耐药性明显高于非产酶菌，对泰能均敏感。前者对四代头孢敏感但对酶抑制剂耐药。高产AmpC和产ESBLs菌感染与使用三代头孢有关。[结论]高产AmpC和产ESBLs是临床G^-菌耐药的重要机制，其产生与使用三代头孢有关。     

超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的选择检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和克雷伯菌的最佳方案,并分析其对相关抗生素的耐药性.方法先用纸片扩散法对临床分离的85株大肠埃希菌和30株克雷伯菌进行初筛,再用双纸片协同法、Vitek法和纸片确证法进行检测.结果3种方法检测产ESBLs细菌具有较好的一致性;产ESBLs菌对14种常用抗菌药物的耐药率明显高于非产酶株.结论双纸片协同法、纸片确证试验简单、有效,适用于广大基层实验室开展和推广,而纸片确证试验应作为临床检测产ESBLs菌的标准方法;亚胺培南对产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌的抗菌作用最强.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌流行病学研究

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是由质粒介导,能水解青霉素、广谱头孢菌素及单环类抗生素并产生耐药。各地区ESBLs的检出率、基因分型各不相同,细菌质粒上可以同时携带≥2种的ESBL编码基因。产ESBLs菌感染为多种危险因素所致,临床治疗产ESBLs菌感染应首选碳青霉烯类抗生素。     

超广谱β-内酰胺酶快速检测方法研究

目的　寻找一种快速、准确、实用、价廉的ESBLs检测法。方法　增加培养基的营养 ,促进细菌繁殖 ,提高菌悬液浓度 ,利用TTC作为显色剂配制出新型的培养基 (简称TTC法 ) ,并与NCCLS推荐使用的ESBLs检测法 -标准纸片扩散确认法相比较。结果　两法符合率均达 98%以上 ,而TTC法在时间上缩短了 10h左右 ,仅需 6～ 8h。结论　本法快速、准确、实用、价廉 ,极适用于各大、小医院临床微生物实验室。     

弗劳地柠檬酸杆菌β-内酰胺酶检测

目的探讨弗劳地柠檬酸杆菌所产各种β-内酰胺酶（β-lase）的分布情况。方法以头孢硝噻吩试验检测33株弗劳地柠檬酸杆菌所产β-lase，采用多底物纸片法（协同法、拮抗法）、AmpC酶检测法、碳青霉烯酶分类检测其所产各种β-lase。结果检出33株弗劳地柠檬酸杆菌，其中各种酶全阴菌为4株，29株检出β-lase，总检出率为87．9％（29／33）；头孢硝噻吩试验27株为阳性（81．8％）；29株产酶菌株中，产青霉素酶为2株，产头孢菌素酶为3株，产广谱酶为5株，产超广谱酶为11株，产超广谱酶＋AmpC酶为6株，ESBLs总产酶率51．5％，产碳青霉烯酶为2株（均为复合产超广谱酶＋金属酶）。结论弗劳地柠檬酸杆菌产β-lase率、ESBLs总产酶率和复合产酶率很高，产六种酶，以广谱酶、ESBLs为主。     

一种细菌金属β-内酰胺酶筛查方法的建立

目的　建立一种简便、易行的实验方法 ,检测细菌产生的金属酶。方法　根据协同试验原理 ,采用亚胺培南 (IP)与巯基乙酸 (MA)协同作用的方法检测金属酶 ,并与PCR方法检测金属酶基因进行比较。结果　 4 7株嗜麦芽窄食单胞菌全部产生了金属酶 ;14株黄杆菌中有 9株产生了酶 ;2 0株铜绿假单胞菌均没有产生金属酶。该检测结果与PCR法检测金属酶基因结果一致。结论　使用伊米配能与巯基乙酸协同作用的方法可以检测金属酶 ,该方法有较好的敏感性和特异性 ,并且操作简便 ,不需要特殊的仪器设备 ,适合用于临床微生物实验室筛查产金属酶的菌株。     

铜绿假单胞菌生物被膜中AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测

目的检测铜绿假单胞菌生物被膜(Biofilm,BF)中AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)的产生率,并观察其对耐药性的影响.方法用改良平板培养法在硅胶膜上建立铜绿假单胞菌BF的体外模型.用银染法及扫描电镜对BF进行鉴定.应用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC).应用三维试验检测AmpC酶和ESBLs,等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶的等电点.结果50株铜绿假单胞菌BF中AmpC酶的产生率为82.o%(41/50),ESBL的产生率为16.0%(8/50),AmpC酶和ESBLs均阳性的占10.0%(5/50),AmpC酶和ESBL均阴性的占12.0%(6/50).浮游组中AmpC酶的产生率为60.0%(30/50),ESBLs的产生率为14.0%(7/50),AmpC酶和ESBL均阳性的占8.0%(4/50),AmpC酶和ESBLs均阴性的占34.0%(17/50).结论生物被膜铜绿假单胞菌的耐药性与其中β-内酰胺酶的产生,尤其是AmpC酶的产生有关.