草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的调控

目的：探讨草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的影响。方法：以不同浓度的草分枝杆菌制剂（商品名乌体林斯,Utilin S）体外处理人结肠癌细胞株Lovo,48h后以流式细胞仪检测细胞周期动力学指标的变化。结果：4种不同浓度的药物均能调控Lovo细胞的细胞周期,使G0－G1期细胞数率非常显著地上升（P＜0．01）,G2－M期细胞数率显著地上升（P＜0．05）,同时使S期细胞数率非常显著地下降（P＜0．01）。结论：乌体林斯能直接抑制结肠癌细胞株Lovo增殖,并可能通过G2－M期细胞阻滞而促进Lovo癌细胞凋亡的发生。     

茶多酚对人结肠癌细胞株 Caco －2细胞凋亡及细胞周期的影响

目的：探讨茶多酚对人结肠癌细胞株 Caco －2细胞凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养 Caco －2细胞,采用不同浓度（0、12．5、25、50、100μmol ／L）的茶多酚对其进行干预,MTT 法检测 Caco －2细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测 Caco －2细胞凋亡率及细胞周期的变化。结果茶多酚能抑制 Caco －2细胞增殖,且呈剂量依赖性;茶多酚能诱导 Caco －2细胞凋亡,且呈剂量依赖性;茶多酚能将 Caco －2细胞周期阻滞在 G0／G1期。结论茶多酚对体外培养的 Caco －2细胞的增殖有明显抑制作用,且能诱导细胞凋亡和影响细胞周期。     

虎杖中白藜芦醇对人结肠癌HCT-15细胞周期介导的凋亡的研究

目的 探讨虎杖中主要药用成分白藜芦醇对人结肠癌HCT-15细胞周期以及增值的影响。 方法 将25，50，100，200 μmol/L 白藜芦醇作用人结肠癌HCT-15细胞，不加药处理作为对照组，采用噻唑蓝(MTT)法检测虎杖中白藜芦醇对HCT-15细胞增殖的影响，在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，流式细胞术检测细胞周期的分布以及细胞凋亡的百分比。免疫印迹方法以及聚合酶链反应法观察主要的细胞周期蛋白以及基因的表达情况。 结果 虎杖中白藜芦醇能显著抑制 HCT-15细胞的生长， 并呈现时间-浓度依赖性。细胞形态学检测显示随着药物浓度的升高，细胞减少皱缩。流式细胞仪结果显示，白藜芦醇作用于细胞HCT-15且细胞被阻滞于S期， 呈现出剂量依赖性。不同药物浓度白藜芦醇(50，100，200 μmol/L) 作用人结肠癌HCT-15细胞48 h后， 随着药物浓度的增大，G0 /G1 期的比例逐渐减小，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。而实验组细胞S期的比例随着浓度增大而减小，分别达到(31.07±1.75) %，( 28.66±1.71) %，( 23.65±0.62) %，与对照组(34.89±0.66) % 比较，差异有统计学意义(P<0.05)。免疫印迹法检测显示，白藜芦醇以时间依赖方式下调周期蛋白cyclin D1的表达，上调 p21cip1 蛋白以及细胞凋亡相关蛋白剪切行caspase-3和PRAP的表达。 结论 虎杖中白藜芦醇能明显抑制HCT-15细胞的增殖，并诱导其细胞凋亡，可引起HCT-15细胞的 S 期阻滞。     

三羟异黄酮对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S细胞周期的影响

目的：观察三羟异黄酮(genistein，Gen)对体外培养的人乳腺癌细胞株MDA—MB—435S细胞存活率、细胞周期和凋亡的影响。方法：用噻唑蓝(MIT)法观察Gen对MDA—MB-435S细胞生长的影响；流式细胞仪观察Gen处理人乳腺癌细胞后细胞周期改变的剂量效应和时间效应关系；吖啶橙／溴乙锭染色法(acridine orange/ethidium bromide staining)在荧光显微镜下观察Gen对MDA—MB—435S细胞的凋亡作用。结果：随剂量增大和作用时间延长，Gen对MDA—MB—435S细胞增殖的抑制作用逐渐增强。同时可以阻滞细胞周期于G2—M期，而且随剂量的增大，作用时间的延长，阻滞作用也增强。吖啶橙染色法于荧光显微镜下可见，随Gen剂量增大，细胞凋亡也逐渐明显。结论：Gen可抑制人乳腺癌细胞的增殖，其作用机制可能包括诱导细胞凋亡和G2—M期阻滞。     

西咪替丁对人结肠癌细胞株LoVo生长及凋亡的影响

目的:探讨西咪替丁对体外培养的人结肠癌细胞株LoVo的抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法:采用MTT比色法、流式细胞术、形态学观察和TUNEL法检测不同浓度的西咪替丁溶液处理LoVo细胞后的生长状况、形态学、分子生物学改变.结果:西咪替丁可抑制LoVo细胞的增殖,且有剂量依赖性的趋势:1×10-2mol/L西咪替丁处理LoVo细胞48h后,在光镜、电镜检测中,可见典型的凋亡细胞;流式细胞术检测凋亡率为32.7%,bcl-2相关蛋白表达率为36.74%;TUNEL法进一步从分子生物学角度证实凋亡的发生.结论:西咪替丁对结肠癌细胞LoVo有抑制作用,主要机制为诱导其发生凋亡,凋亡发生的原因与西咪替丁可下调bcl-2蛋白的表达有关.     

人结肠癌细胞中组蛋白乙酰化对细胞周期调节基因表达的影响

目的 研究组蛋白乙酰化对Colo-320和SW1116人结肠癌细胞系p21^WAF1和p16^INKRA基因表达的影响。方法 培养人结肠癌细胞系SW1116和Colo-320,分别以去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)和／或组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素(TSA)及丁酸钠(NaBu)干预细胞。运用流式细胞术检测细胞周期变化;以定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究控制细胞周期的基因p21^WAF1和p16^INKRA的表达;染色质免疫沉淀技术分析基因相关染色质乙酰化组蛋白的水平。结果 TSA或NaBu使人结肠癌细胞阻滞于G1期,而5-aza-dC并不能改变细胞周期。正常情况下,SW1116和Colo-320细胞中均有较弱的p16^INKRA表达;两种结肠癌细胞系p21^WAF1表达缺如。5-aza-dC干预后,p16^INKRA表达增强,相反p21^WAF1仍无明显表达。当该两个细胞系经TSA或NaBu处理后,p21^WAF1转录水平明显上调,并诱导p21^WAF1基因相关染色质乙酰化组蛋白H3和H4的积聚。结论 两种人结肠癌细胞系中,HDAC抑制剂通过选择性增加p21^WAF1基因相关染色质乙酰化水平,上调p21^WAF1基因的转录,并相应地导致结肠癌细胞生长停滞;而p16^INKRA基因表达主要受甲基化调节。     

半枝莲阻滞人结肠癌细胞周期的机制

目的研究半枝莲氯仿极性部位提取物（ECSB）阻滞人结肠癌细胞周期的机制。方法用ECSB干预结肠癌细胞株HCT-8、SW620,检测其细胞周期相关基因的表达。结果 ECSB干预SW620细胞后,其p16表达上升,PCNA表达下降;ECSB干预HCT-8细胞后,Cyclin D1、CDK2、CDK4表达下降。结论ECSB通过调控细胞周期相关基因的表达,抑制人结肠癌细胞的增殖。     

细胞周期蛋白激酶抑制剂对尤文肉瘤裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:探讨小分子细胞周期蛋白激酶抑制剂flavopiridol(FP)在裸鼠体内对尤文肉瘤细胞的抑制作用及可能机制。方法:采用人尤文肉瘤细胞株SK-N-MC建立荷瘤裸鼠模型,FP腹腔内给药,测量肿瘤体积,计算肿瘤抑制率,通过原位末端标记法(TUNEL染色)观察移植瘤内细胞凋亡诱导作用,计算凋亡指数。结果:与对照组相比,3mg/kg组肿瘤生长被明显抑制(P<0.05),TUNEL染色提示阳性率为(48.67±4.78)%(P<0.05)。结论:FP可以明显抑制荷瘤小鼠体内SK-N-MC细胞的生长,其机制主要为诱导细胞的凋亡。     

青藤碱对人结肠癌细胞株SW480增殖和细胞周期的影响

目的 研究青藤碱对人结肠癌SW480细胞增殖和细胞周期的影响.方法 用不同浓度的青藤碱处理体外培养的人结肠癌SW480细胞24、48、72h后,采用CCK法检测细胞的增殖活性,采用流式细胞术检测细胞的细胞周期分布,并用光镜和透射电镜观察SW480细胞的形态学变化.结果 青藤碱在体外可抑制SW480细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性.干预48h后,中、低浓度的青藤碱（8mmol/L、4mmol/L）可诱导SW480细胞G1期细胞比例增加,而高浓度的SIN（16mmol/L、10mmol/L）可诱导G1期、G2期细胞比例增加.光镜与电镜下均见凋亡细胞增多.结论 青藤碱在体外能抑制人结肠癌SW480细胞增殖和诱导该细胞系的凋亡,其机制可能与其阻滞细胞周期进程有关.     

As2O3诱导人膀胱癌BIU-87细胞株凋亡及其对细胞周期的影响

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人膀胱癌BIU-87细胞株生长抑制作用,并探讨对细胞周期及凋亡的影响.方法:CellTiter 96 Aqueous One 试剂检测BIU-87细胞株增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及凋亡.结果:As2O3与BIU-87细胞株生长抑制率之间有明显的浓度依赖关系 (P<0.01),IC50为28.92 μmol/L;荧光显微镜下观察到经As2O3作用的BIU-87细胞核膜消失,核染色质呈大小不等的小圆形碎片;流式细胞术结果表明30 μmol/L的As2O3处理BIU-87细胞株48 h后,G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例增加,凋亡率为47.37%.结论:As2O3能显著抑制BIU-87细胞株增殖;使细胞阻滞在S期,并进一步诱导细胞凋亡.     

槲寄生对人大肠癌HCT116细胞细胞周期作用的研究

目的探讨槲寄生对人大肠癌HCT116细胞细胞周期的影响。方法采用MTT法测定槲寄生对HCT116增殖的影响,瑞特-姬姆萨染色和吖啶橙荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪进行细胞周期分析。结果槲寄生对HCT116细胞的生长有明显抑制作用,显微镜下肿瘤细胞体积缩小,核染色质固缩,部分发生核偏位,并使人大肠癌HCT116细胞周期阻止在G2/M期。结论槲寄生对HCT116细胞有明显的生长抑制和细胞周期阻滞作用。     

Staurosporine对甲状腺癌SW579细胞的促凋亡作用

【目的】研究星形孢菌素促进人甲状腺癌细胞SW579凋亡的作用,从而为肿瘤治疗寻找新的方向。【方法】MTT法检测ST对SW579细胞增殖的抑制作用。流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡情况。用Hochest33258及MDC染色方法分别检测细胞的凋亡及自噬发生情况。Western blotting用于检测相关蛋白的表达情况。【结果】通过MTT检测发现staurosporine对SW579增殖的抑制呈浓度和时间依赖性。流式细胞术检测发现staurosporine对SW579细胞具有G0~G1期阻滞。【结论】Staurosporine能够诱导对SW579细胞凋亡从而抑制肿瘤细胞的增殖。     

吲哚美辛对结肠癌细胞HCT116中细胞周期蛋白的影响

目的揭示吲哚美辛抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡的分子机理，探讨其抗结肠肿瘤的作用机制。方法不同浓度的吲哚美辛作用于结肠癌细胞株HCT116细胞24h，采用Western蛋白印迹技术检测CDK2、CDK4、Bcl-2、Bax及p21^WAE1/CIP1蛋白表达。结果吲哚美辛能降低CDK2、CDK4及Bcl-2的表达，同时上调p21WAE1／CIP1蛋白的表达且呈剂量依赖方式，而对促凋亡蛋白bax的表达无影响。结论吲哚美辛可通过降低CDK2、CDK4、Bcl-2蛋白，上调p21^WAF1/CIP1蛋白的表达来抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡，从而实现其抗肿瘤作用。     

稀释碘伏对人结肠癌细胞增殖的影响

目的:探讨不同稀释碘伏浓度对人结肠癌细胞SW480增殖的影响。方法:用不同浓度的稀释碘伏(0.05%、0.025%、0.01%)作用于人结肠癌细胞株SW480,用MTT检测碘伏对结肠癌细胞增殖的影响,碘化丙啶(PI)染色观察稀释碘伏对肿瘤细胞形态学的改变。结果:不同浓度的稀释碘伏都抑制结肠癌细胞的增殖,抑制率可达到84.5%,浓度和时间依赖关系不明显。碘化丙啶染色后观察到细胞膜皱缩、胞核固缩、裂解等形态学改变。结论:稀释碘伏抑制体外培养结肠癌细胞的增殖,为稀释碘伏预防肿瘤在腹腔的种植转移提供理论基础。     

人结肠癌细胞株CW-2干细胞富集方法的比较

目的比较3种细胞分选方法对人结肠癌细胞株CW-2干细胞的富集效率,探讨获得肿瘤干细胞的有效方法。方法采用单纯无血清悬浮培养、无血清悬浮培养+奥沙利铂、无血清悬浮培养+奥沙利铂+流式细胞术(多重联合)分别富集人结肠癌细胞株CW-2干细胞;应用流式细胞术、NOD-SCID小鼠致瘤实验和Transwell侵袭实验比较3种方法的富集效率;分别测量不同时间点(4、7、9、14、21、28d)各组小鼠成瘤情况;免疫组化检测移植瘤中CD44和EPCAM的表达情况。结果无血清悬浮培养细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞和多重联合分选细胞中具有结肠癌干细胞特性的CD44+EPCAM+细胞,细胞比例分别为57.39%、73.85%、89.57%;多重联合分选细胞接种NOD-SCID小鼠后成瘤时间早、瘤体增长速度快,各时间点体积分别为(209.25±31.54)、(500.00±72.90)、(852.75±157.51)、(2280.00±440.91)、(4897.00±1154.15)、(11070.00±3559.86)mm3,与无血清悬浮培养细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞的成瘤能力比较差异有统计学意义(P0.05);单纯无血清悬浮培养细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞和多重联合分选后细胞接种72h后穿过人工基底膜的细胞数分别为(98±7)/视野、(135±7)/视野、(188±6)/视野,3组之间差异有统计学意义(P0.05);各组移植瘤中均表达CD44和EPCAM。3种分选方法所获得细胞中干细胞含量由高到低为:多重联合分选后细胞、无血清悬浮培养+奥沙利铂处理细胞、单纯无血清悬浮培养细胞。结论多重联合法富集肿瘤干细胞的效果明显强于单纯无血清悬浮培养和无血清悬浮培养+化疗药物法,是获得肿瘤干细胞较好的方法。     

DC-CIK细胞对人肝癌HEPG2细胞周期、凋亡的影响

目的 探讨细胞因子从肝癌患者外周血贴壁单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)诱导的树突状细胞( dendritic cells,DCs)与杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对人肝癌HEPG2细胞系周期、凋亡的影响.方法 用肝癌患者肝...     

Effect of c-Met inhibitor SU11274 on human colon cancer cell growth

Background Colon cancer is one of the major malignancies worldwide and it still remains resistant to much of the currently available chemotherapy. Downregulation of HGF/c-Met signaling pathway is an emerging therapy for cancer treatment.

Methods In this study, the inhibitory effects of c-Met phosphorylation were observed with SU11274 on different colon cancer cell lines in vitro.

Results The results revealed the significant inhibitory effects of SU11274 on cell proliferation and cell survival, in a time and dose-dependent manner. Furthermore, the inhibitory effects of SU11274 on different subgroups of colon cancer cells via the HGF/c-Met signaling pathway were implicated in this study.

Conclusion The results suggested the possible selective therapeutic effects of c-Met inhibitor on colon cancer.

     

Effect of c-Met inhibitor SU11274 on human colon cancer cell growth

Background Colon cancer is one of the major malignancies worldwide and it still remains resistant to much of the currently available chemotherapy.Downregulation of HGF/c-Met signaling pathway is an eme...     

抑制JNK通路对Genistein诱导结肠癌SW620细胞周期阻滞的作用

目的 探讨染料木黄酮（Genistein,Gen）阻滞结肠癌细胞S 期向G2/M 期转换与JNK 通路的关系。方法 以人结肠癌SW620 细胞为研究对象,实验分三个系列组,第一系列组为对照组和SP600125 组（10 μmol/L、20 μmol/L、30 μmol/L、40 μmol/L）,第二系列为对照组、Gen 组（20 μmol/L、40 μmol/L、80 μmol/L）和联用组（Gen 40 μmol/L 和SP600125 40 μmol/L）,第三系列为对照组、Gen 组（40 μmol/L）、SP600125 组（40 μmol/L）和联用组。蛋白质印迹法筛选SP600125 的最适工作浓度及Cyclin B1、P-Cdc2 和Cdc2 蛋白的表达。MTS 法检测细胞增殖。结果 SP600125 的最适工作浓度为40 μmol/L。药物组的Cyclin B1（除Gen 20 μmol/L 组）、P-Cdc2 和Cdc2 蛋白表达均显著下调（P＜0.01）,Cyclin B1 蛋白表达随Gen 剂量的增加而降低（P＜0.01）,联用组Cyclin B1 明显低于Gen 40 μmol/L组（P＜0.01）,联用组P-Cdc2 和Cdc2 蛋白与Gen 40 μmol/L 组的比较虽有降低的趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）。抑制JNK 通路可增强Gen 抗SW620 细胞增殖的作用。结论 抑制JNK 通路可通过减少结肠癌SW620 细胞Cyclin B1-Cdc2 的活化,阻滞细胞由S 期进入G2/M 期。