硝化花粉对哮喘小鼠气道反应及炎性细胞因子水平的影响

目的 观察硝化花粉对哮喘小鼠气道反应及炎性细胞因子水平的作用.方法按 免疫物及激发物的不同将60只小鼠分为5组,建立哮喘模型,采用体积描记法检测气道反应性、检查支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞学、CBA法测定血清和BALF中IL-17A、IL-10和TNF-α的含量.结果 用硝化花粉免疫和激发哮喘组的气道反应性、BALF中EOS及NEU的数量、血清和BALF中IL-17A、IL-10和TNF-α的含量与其他哮喘模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 硝化花粉诱发的哮喘气道高反应更显著,释放更多炎性介质,造成更加严重的气道炎症.     

林蛙油对哮喘缓解期模型小鼠气道炎症的影响

[目的]探讨林蛙油对哮喘缓解期模型小鼠气道炎症的作用及其可能机制.[方法]给予林蛙油小、大剂量组0.05,0.50g/kg林蛙油匀浆液.采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4,IL-5及γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化,观察BALF中炎性细胞和肺组织病理学改变.[结果]与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4,IL-5水平均显著增高(P<0.05),IFN-γ水平显著降低(P<0.05).与哮喘模型组比较,林蛙油小、大剂量组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4,IL-5水平均明显降低(P<0.05),IFN-γ水平显著增高(P<0.05).林蛙油小、大剂量组哮喘小鼠肺组织病理学改变明显减轻.[结论]林蛙油对哮喘模型小鼠具有保护作用,其机制可能与调节Th1/Th2平衡失调、减轻炎性细胞浸润有关.     

缺锌对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的 探讨缺锌对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法 SD大鼠32只，根据体重按随机区组设计分为4组，每组8只。A组为缺锌饲料＋卵清蛋白（OVA）激发组；B组为正常锌饲料＋OVA激发组；C组为正常锌饲料配对饲养＋OVA激发组；D组为正常锌饲料＋生理盐水激发组。建立缺锌及哮喘模型，诱喘后24h取支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞分类及右肺中叶HE染色，镜下观察支气管肺组织形态学改变并计数气道壁及BALF中嗜酸粒细胞、中性粒细胞及巨噬细胞数。结果：A、B、C组BALF及支气管管壁中嗜酸粒细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数较D组明显增加（P〈0．05）。与B组大鼠相比，A组大鼠＆地F及支气管管壁中嗜酸粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞数明显增加（P〈0．05），气道炎症反应增加。B组与C组相比，气道炎症反应无明显差异（P〉0．05）。结论 缺锌时哮喘大鼠气道炎症反应增加，这可能是饮食锌的摄入减少导致哮喘发作增加及症状加重的原因。     

小剂量5-氟尿嘧啶对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 ：观察小剂量5-氟尿嘧啶（50 mg/kg）对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 ：将15只6～8周龄的BALB/c雌性小鼠随机分成正常对照组、哮喘对照组和5-氟尿嘧啶治疗组,每组5只。哮喘对照组和5-氟尿嘧啶治疗组以卵清白蛋白（OVA）致敏和激发,正常对照组以等量PBS代替,其中5-氟尿嘧啶治疗组在第1次激发前24 h给予5-氟尿嘧啶腹腔注射,正常对照组和哮喘对照组给与等量PBS代替。采用苏木精-伊红（HE）染色和糖原（PAS）染色观察肺组织炎症和气道杯状细胞增生;瑞氏-姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数和分类计数;酶联免疫吸附试验检测血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的水平。结果：5-氟尿嘧啶治疗组哮喘小鼠肺组织炎症细胞浸润减少;气道基底膜杯状细胞数量以及BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数和巨噬细胞数均明显低于哮喘对照组（P<0.01）,但高于正常对照组（P<0.01）。5-氟尿嘧啶治疗组哮喘小鼠血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显低于哮喘对照组（P<0.01）,5-氟尿嘧...     

BCG-DNA对哮喘小鼠气道反应性和气道炎症的影响

目的观察不同剂量卡介苗核酸(Bacille Calmette-guerin DNA,BCG-DNA)在不同干预时间对哮喘小鼠气道高反应性及气道炎症的干预作用。方法 1.将Balb/c雌鼠随机分为哮喘模型组、NS对照组、BCGDNA干预组。干预组根据干预的时间和干预制剂剂量的不同分为-7DNA1μg、-7DNA10μg、-7DNA100μg、10DNA1μg、10DNA10μg、10DNA100μg、17DNA1μg、17DNA10μg、17DNA100μg组。2.在末次激发48小时后,测定各浓度级乙酰甲胆碱激发下的增强的呼气间歇(Enhanced Pause,Penh)值,将其与小鼠激发前吸入NS后的Penh的百分比(Penh%NS),作为其气道反应性评价指标;其次对肺泡灌洗液进行细胞学分析。结果 1.气道反应性:1-7DNA1μg组从Mch为3.12~50 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);2-7DNA10μg组和-7DNA 100μg组从Mch为6.25~25 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);310DNA10μg组从Mch为12.5~25 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);4 10DNA100μg组从Mch为3.12、12.5~50 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);5 17DNA1μg组在Mch为3.12、12.5 mg/m L的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05);6 17DNA10μg组在Mch为12.5 mg/m L之间的Penh%NS显著低于哮喘组(P<0.05)2.气道炎症:10DNA1μg、-7DNA10μg、10DNA10μg和17DNA10μg组的BALF细胞分类Eos%分别为:35.34±3.81、27.30±6.91、38.20±6.56、42.17±5.17;显著低于哮喘组的Eos%(48.8±6.12)(P<0.05);10DNA1μg组的Eos%显著低于-7DNA1μg组的Eos%(P<0.05);-7DNA10μg组的Eos%显著低于10DNA10μg、17DNA10μg、-7DNA1μg和-7DNA100μg组的Eos%(P<0.05)。结论 BCG-DNA能降低哮喘小鼠的气道高反应性,减轻哮喘小鼠的气道炎症,早期(-7 d)中小剂量的干预效果较佳。     

肥胖型哮喘小鼠体内氧化应激反应变化及其与气道炎症和重构的关系

目的探讨肥胖型哮喘小鼠体内氧化应激反应变化及其与气道炎症和重构的关系。方法 60只雌性C57/6 J小鼠随机分为哮喘组、肥胖组、肥胖哮喘组和对照组。哮喘组在普通饲料基础上,采用卵白蛋白腹腔注射致敏与雾化吸入激发的方法构建哮喘模型;肥胖组采用高脂饮食诱导肥胖模型;肥胖哮喘组在高脂饲料基础上,采用卵白蛋白致敏激发构建肥胖哮喘模型;对照组以普通饲料饲养,生理盐水致敏激发。12周后收集小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞计数及分类。ELISA法测定肺组织匀浆中IL-6和8异前列腺素2α（8-iso-PGF2α）水平。肺组织切片观察小鼠病理变化,测定气管壁总面积（WAt）、气道平滑肌面积（WAm）和管腔基底膜周长（Pbm）。结果肥胖哮喘组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸粒细胞比例、肺组织IL-6水平以及气管壁总厚度（WAt/Pbm）均较肥胖组、哮喘组明显增高（P〈0.05）。肥胖哮喘组的平滑肌层厚度（WAm/Pbm）较肥胖组增高,但与哮喘组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。肺匀浆8-iso-PGF2α水平按肥胖哮喘组、哮喘组、肥胖组、对照组的顺序依次降低（P〈0.05）,且与BALF白细胞总数、WAt/Pbm及IL-6水平呈正相关（r值分别为0.828、0.863和0.891,P〈0.01）。结论氧化应激反应参与了肥胖哮喘小鼠气道炎症和重构过程。     

氧化苦参碱对豚鼠哮喘气道炎症的影响

目的 观察氧化苦参碱对豚鼠哮喘气道炎症的影响。方法 采用卵蛋白致敏后,再以卵蛋白雾化吸入诱发豚鼠哮喘发作,实验组有诱发豚鼠哮喘发作前１５ｍｉｎ,每只豚鼠腹腔内注射氧化苦参碱３０ｍｇ,两组豚鼠均每天诱发１次,共１０ｄ,然后应用生理盐水行支气管肺泡灌洗,收集灌洗液,离心后分别测定细胞总数,嗜酸性粒细胞,中性粒细胞等,同时取肺组织做病理检查。     

卡介苗基因组DNA对哮喘小鼠模型过敏性气道炎症的影响

目的探讨腹腔注射卡介苗基因组DNA(BCGDNA)对哮喘小鼠模型的影响。方法BALB/c小鼠经鸡卵蛋白(OVA)免疫建立哮喘模型,分别于致敏前、激发时腹腔注射100μgBCGDNA,观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数(EOS),ELISA检测脾单核细胞(SMNC)培养上清和BALF中白细胞介素4(IL4)、IL5、IL12及γ干扰素(IFNγ)的含量变化,常规病理切片观察肺内炎症情况,ABPAS染色观察杯状细胞增生和黏液分泌情况。结果哮喘小鼠OVA致敏前及激发时腹腔注射BCGDNA后可明显增加BALF和脾单核细胞培养上清中IL12和IFNγ的产生,使IL4和IL5的产生减少,BALF中嗜酸性粒细胞减少,黏液过度分泌明显减轻。结论哮喘小鼠腹腔注射BCGDNA可诱导IL12和IFNγ产生,抑制Th2型细胞反应,减轻哮喘气道炎症。     

复方黄龙汤对哮喘小鼠气道炎症的影响与机制

目的建立Balb/C小鼠的急性哮喘模型,应用复方黄龙汤进行治疗,并与地塞米松治疗效果比较,探讨复方黄龙汤对小鼠哮喘气道炎症的影响及作用机制。方法选取24只6～8周龄雌性Balb/C小鼠,体重(20±2)g,应用随机数字法随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、地塞米松治疗组(C组)和复方黄龙汤治疗组(D组),每组6只。应用卵白蛋白致敏液腹腔注射联合OVA雾化吸入法建立哮喘模型,B、C、D组在第0、14天向小鼠腹腔注射OVA配置而成的致敏液0.2ml,第28、29、30天吸入1%OVA/PBS 10ml激发哮喘,造模23天后,C组每天给予地塞米松(2mg/kg),D组每天给予复方黄龙汤(2.7ml/kg);激发结束后,用无创肺功能测量仪测量小鼠气道反应性,qRT-PCR法测定小鼠肺组织中T-bet及GATA-3mRNA的含量,酶联吸附反应测定肺泡灌洗液中IL-4及IFN-γ含量,将肺泡灌洗液离心沉淀后涂片进行中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞计数,用HE染色肺组织,评价病理改变。结果无创肺功能显示雾化吸入乙酰胆碱剂量>12.5μg/ml时,C组和D组penh值明显低于B组(P<0.05),但高于A组,差异无统计学意义;肺组织中T-bet mRNA表达B组高于A组(P<0.001),D组含量高于B组,但差异无统计学意义(P>0.05)。而GATA-3mRNA表达C、D组低于B组(均P<0.01)。肺泡灌洗液中IL-4含量B组高于A、C和D组(均P<0.01),而IFN-γ含量B组远低于A组(均P<0.01),D组肺泡灌洗液中IFN-γ含量较B组升高,差异有统计学意义(P<0.05);在小鼠肺泡灌洗液中B组嗜酸粒细胞(EOS)比C、D组明显增多(P<0.01);B组气道壁和肺组织中大量炎性细胞浸润(以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞为主),支气管管壁增厚,管腔狭窄,与A组比较差异明显;C、D两组小鼠细支气管管腔呈圆形,较规整,其中C组管壁增厚较D组明显,气道壁和肺组织可见嗜酸粒细胞(EOS)及少量淋巴细胞浸润,基底膜无增厚,与B组比较明显减轻。结论复方黄龙汤可通过降低小鼠肺组织炎症反应,减轻支气管重塑,改善肺功能,其作用可能是通过上调T-bet和下调GATA-3平衡来实现的。     

苦味受体激动剂苦精对哮喘气道炎症及重塑的影响

目的 观察苦精对哮喘小鼠α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、气道上皮下胶原纤维及气道炎症的影响.方法 45只BALB/c小鼠分为3组,每组15只.A组:正常对照;B组:哮喘模型组;C组:哮喘加苦精干预1周.采用免疫组织化学方法观察小鼠肺组织α-SMA的沉积,用马松(Masson)染色方法观察小鼠气道胶原纤维的沉积,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠气道炎性程度,并对其进行计算机图像半定量分析.结果 C组小鼠肺内细支气管壁α-SMA、胶原纤维沉积、气道炎症程度较B组明显减少,图像半定量分析结果与B组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 苦精可以改善哮喘小鼠气道炎症及气道重塑.     

隐丹参酮对哮喘模型小鼠呼吸道炎症的作用

[目的]观察隐丹参酮对哮喘模型小鼠呼吸道炎症的作用.[方法]取雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、隐丹参酮低、高剂量(15,30 mg/kg)组,给予相应处理.采用鸡卵白蛋白致敏和激发的方法制作哮喘小鼠模型,末次激发24 h后处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液,测定总炎性细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数量及IL-4,IL-5,IL-13水平.[结果]与正常组比较,哮喘组小鼠支气管肺泡灌洗液中总炎性细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数量及IL-4,IL-5,IL-13水平均显著升高(P<0.05);与哮喘组比较,隐丹参酮低、高剂量组上述各项指标均明显降低(P<0.05).[结论]隐丹参酮具有抗哮喘作用,其机制可能与下调Th2细胞因子、减少炎性细胞浸润有关系.     

虎杖苷对实验性哮喘小鼠气道炎症的影响及其机制

探讨虎杖苷（PD）对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠气道炎症的影响,阐明其可能作用机制。     

NGF参与支气管哮喘大鼠气道炎症的发生及作用机制

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor, NGF)对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响及作用机制.方法 24只雄性SD大鼠分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)和抗NGF组(C组),每组8只.测定各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总细胞及细胞分类计数;HE染色观察气道病理改变;RT-PCR和ELISA法检测各组大鼠白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、NGF mRNA和蛋白表达水平.结果 B组与A组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数增多(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达增加(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达减少(P＜0.01).C组与B组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数减少(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达减弱(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达水平无显著差异.B组BALF中NGF含量与细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞呈正相关(r=0.833、0.944、0.949,P＜0.05);与IL-4含量呈正相关(r=0.944,P＜0.01),与IFN-γ含量不相关(r=0.122,P＞0.05);与肺组织中IL-4 mRNA表达水平呈正相关(r=0.848,P＜0.05),与IFN-γ mRNA表达不相关(r=0.611,P＞0.05).结论 NGF与哮喘大鼠气道炎症密切相关,它可以通过使Th2型细胞因子分泌亢进参与哮喘的发生.     

白藜芦醇对哮喘小鼠磷脂酶A2活性和气道炎症的影响

目的 探讨白藜芦醇对哮喘小鼠磷脂酶A2活性和气道炎症的影响.方法 采用卵清蛋白(OVA)刺激,建立小鼠哮喘模型,测定哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)计数;紫外分光光度法测定肺组织中前列腺素E2(PGE2)的含量;盐酸滴定法测定肺组织和血清中磷脂酶A2活性.结果 白藜芦醇能显著减少哮喘模型小鼠BALF中白细胞总数及EOS计数,减少肺组织中PGE2含量,降低磷脂酶A2活性.结论 白藜芦醇对哮喘小鼠有保护作用,可能与其降低磷脂酶A2活性、减轻炎性细胞浸润、减少炎症介质PGE2的产生有关.     

CpG寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN）能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组（慢性哮喘组）、B组（CpG-ODN干预组）和C组（GpC-ODN对照组）分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组（生理盐水对照组）用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时（d1, d14）和激发阶段（每2周1次）分别给予60μg／mLCpG-ODN腹腔注射,共6次。C组将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC）作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液（bronehoalveolar lavage fluid,BALF）作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 （interleukin-4,IL-4）、白介素-13（interleukin-13,IL-13）和γ-干扰素的mRNA（interferon-γ,IFN-γ）表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[（89±10）×10^4／mL]、血清IgE值[（279±53）ng／mL）、IgG1（A值2．151±0．628）、IgG2α（A值0．772±0．245）、BALF中EPS（6．3±1．3）]×10^5／mL）及百分比[（18．1±3．0）％]较D组明显增高（P〈0．01）;且肺组织中IL-4、IL-13和IFN-γ等细胞因子mRNA表达量[（分别为（5．72±3．89）×10^-2、（9．45±5．91）×10^-2和（3．23±1．69）×10^-2）]也明显高于D组（P〈0．05）。用CpG-ODN干预后（B组）,除IgG2α（A值1．186±0．414）和IFNγmRNA表达量[（18．91±9．85）×10^-2]增高外（P〈0．05）,其余指标均低于A组（P〈0．05）。C组的上述各指标与A组相比差异均无显著性（P〉0．05）。结论CpG- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。     

miR-20b抑制哮喘小鼠的气道炎症

目的探讨miR-20b对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、哮喘+miR-20b模拟
物处理组、哮喘+miR-20b模拟物对照处理组。卵清白蛋白（OVA）致敏和激发构建哮喘模型小鼠,miR-20b模拟物及其对照采用
鼻滴的方式给药干预。实验流程的第49天检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数和分类计数,肺组织进行HE染色观察
病理学变化,ELISA检测BALF中血管内皮生长因子（VEGF）的浓度。结果哮喘小鼠经miR-20b模拟物处理后,BALF中细胞
总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的分类计数明显降低（P<0.01）,并且气道黏膜增厚减轻,气道腔内粘液分泌及支气管周围
炎性细胞的浸润减少。与哮喘组BALF中VEGF的含量28.55±3.42 pg/mL相比,哮喘+miR-20b 模拟物处理组的含量18.19±
3.67 pg/mL明显降低（P<0.01）。结论miR-20b对哮喘小鼠气道炎症产生抑制作用,这一效应可能是通过降低VEGF的表达来
介导。
     

桦褐孔菌多糖对哮喘小鼠气道炎症的影响

[目的]观察桦褐孔菌多糖(PIO)对哮喘小鼠气道炎症的影响.[方法]取雄性BALB/c小鼠40只,随机分为正常组、模型组、PIO低剂量组(100mg/kg)和PIO高剂量组(200mg/kg).体外卵清蛋白诱导建立哮喘小鼠模型,给支气管灌洗液(BALF)内细胞行Diff-quik染色后观察细胞总数和各分类细胞数.肺组织石蜡切片行HE染色后观察炎症情况.利用ELISA方法检测哮喘小鼠BALF中白细胞介素(IL)-4,IL-5及IL-13的表达水平.[结果]与正常组比较,模型组炎性细胞数、IL-4,IL-5及IL-13水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,PIO低、高剂量组炎性细胞数、IL-4,IL-5和IL-13水平均明显降低(P<0.05).[结论]PIO可减轻哮喘小鼠肺部炎症.     

过氧化物酶增殖物激活受体γ在哮喘气道重构中的作用

目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)在哮喘小鼠气道重构中的作用。方法40只小鼠随机分为对照组、哮喘组、PPARγ激动剂组和PPARγ拮抗剂组。后三组以卵蛋白致敏激发建立慢性哮喘模型并按组别分别给予不同药物。以免疫组织化学、RT-PCR和Western blot技术检测PPARγ的定位及其表达水平,比较各组小鼠的气道炎症和重构的程度及其与PPARγ含量的关系。结果哮喘组支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞计数和白细胞介素-4(IL-4)水平、肺组织中炎症细胞评分、杯状细胞百分数、气道平滑肌厚度和胶原纤维面积均较对照组明显提高。PPARγ激动剂能明显降低上述指标,而PPARγ拮抗剂则加重气道炎症反应,但对结构改变不明显。组织学发现实验组肺组织内有明显的PPARγ表达,主要分布于气道上皮细胞和炎症细胞。实验组PPARγ的转录水平较对照组明显增高(P<0.01);但各实验组间差异无统计学意义(F=0.609,P=0.551)。PPARγ激动剂能明显提高核内PPARγ的表达水平,而PPARγ拮抗剂则不影响其核内表达水平。在实验组内,核内PPARγ的表达水平与气道炎症评分、气道平滑肌厚度和胶原纤维面积呈负相关(r分别为-0.690、-0.726和-0.851,P均<0.01)。结论PPARγ激动剂能够抑制哮喘的气道炎症和气道重构。