口腔黏膜癌变过程中细胞周期素E蛋白表达及意义

目的: 了解细胞周期素E(Cyclin E)蛋白在口腔黏膜癌变过程中表达变化,探讨Cyclin E在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发生发展中的意义.方法: 正常口腔黏膜12例、不同程度上皮异常增生组织35例、不同分化口腔鳞状细胞癌69例,石蜡包埋组织.采用免疫组织化学方法检测Cyclin E蛋白表达,分析其在口腔黏膜癌变过程中的变化趋势及意义.结果: Cyclin E蛋白在正常口腔黏膜上皮无表达,但从轻度上皮异常增生组织开始出现Cyclin E蛋白阳性表达;Cyclin E在上皮异常增生组织中的阳性表达率42.86%(15/35),在OSCC的阳性表达率为65.22%(45/69),两组间差异有统计学意义(χ2=4.757,P＝0.029).Cyclin E阳性表达率及表达强度随上皮异常增生程度的增加及肿瘤分化程度的降低而增加,二者存在正相关关系(r＝0.409,P＜0.01).但Cyclin E蛋白表达与OSCC淋巴结转移、远处转移以及肿瘤临床分期无关(P＞0.05).结论: Cyclin E蛋白表达高调是口腔黏膜癌变过程中的早期事件,并可能与OSCC发生发展进程有关,但Cyclin E蛋白表达尚不能作为反映OSCC生物学特征有价值的标记物.     

Eag1在大鼠口腔舌黏膜癌变过程中的表达

目的:研究4-亚基硝氧喹啉(4NQO)诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中各阶段Eag1的蛋白表达,探讨Eag1与OSCC发生发展的关系.方法:利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,采用免疫组织化学(SP法)检测各样本Eag1蛋白的表达.结果:随着大鼠舌黏膜异常增生程度的增加,Eag1蛋白表达明显升高.Eag1在大鼠舌黏膜癌中的表达明显高于正常上皮及轻度上皮异常增生组织.结论:Eag1蛋白表达随着上皮异常增生程度的加重而表达增加,Eag1可能会成为口腔黏膜具有恶变潜能的重要指标.     

细胞周期素D1在口腔鳞癌组织中的表达及其意义

目的通过观察细胞周期素D1（Cyclin D1）在正常口腔黏膜、口腔黏膜不典型增生和口腔黏膜鳞癌的不同表达,分析它在口腔黏膜鳞癌及其癌变过程中的表达规律,探讨它的异常表达与口腔黏膜癌变、转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测Cyclin D1在17例正常口腔黏膜、6例口腔黏膜不典型增生和52例口腔黏膜鳞癌的不同表达。结果（1）Cyclin D1在正常口腔黏膜、口腔黏膜不典型增生的阳性表达率明显低于在口腔黏膜鳞癌中的阳性表达率;同时,Cyclin D1的阳性表达率随肿瘤的分化程度降低而降低;（2）Cyclin D1与肿瘤的转移密切相关。结论Cyclin D1在口腔黏膜鳞癌的分化和转移过程中起重要作用,与肿瘤的不良分化和转移密切相关,这可为口腔鳞癌患者的预后判断提供有效依据。     

细胞周期蛋白D1与口腔扁平苔藓癌变关系研究进展

口腔扁平苔藓(OLP)是最常见的口腔黏膜病之一,其癌变趋势与细胞周期蛋白D1有着极其密切的关系。本文将从细胞周期的调控,细胞周期蛋白D1的发病机制及其与口腔扁平苔藓癌变的联系简要综述。     

c-jun在金黄地鼠颊囊黏膜癌前病变和鳞癌组织中的表达

目的：研究 c-jun在地鼠颊囊黏膜癌前病变和鳞癌中的表达。方法：采用60只金黄地鼠DMBA诱导颊囊黏膜癌前病变、鳞癌动物模型,取材,HE染色,选择正常组23例,上皮单纯增生组22例,上皮异常增生组22例,鳞癌组29例,经免疫组化SABC法检测各组c-jun的表达。结果：c-jun蛋白阳性表达主要在细胞核。在正常黏膜、上皮单纯增生及上皮异常增生中阳性表达以基底细胞及棘细胞为主,阳性表达位于细胞核。在口腔鳞癌中c-jun阳性表达多数位于癌巢中各层细胞,少数仅位于癌巢中的棘细胞,阳性表达多数定位于细胞核和细胞浆,呈弥漫性分布,细胞膜也可见阳性表达。c-jun免疫组织化学各组染色等级分布差异具有显著性（Z=16.84,P<0.01）。各组阳性表达率比较差异具有显著性（χ²=13.71,P<0.01）,上皮异常增生组（77.27%）、鳞癌组阳性表达率（55.17%）高于正常组（26.09%）（P<0.05）,上皮单纯增生组(36.36%)与正常组比较差异无显著性（P>0.05）,上皮异常增生组高于上皮单纯增生组（P<0.05）。染色程度变化趋势：上皮异常增生组最强,鳞癌组次之,正常组最弱。结论：c-jun参与了金黄地鼠颊囊癌前病变和鳞癌的发生与发展。     

喉鳞癌组织中细胞周期素D1的表达

目的:检测喉鳞癌组织中细胞周期素D1(cyclinD1)的表达.方法:应用免疫组织化学SP法检测31例喉鳞癌组织(TNM分期:Ⅰ期2例,Ⅱ期10例,Ⅲ期15例,Ⅳ期4例.伴颈淋巴结转移13例,无转移18例.高分化16例,中分化7例,低分化8例)、17例癌旁正常黏膜组织中cyclinD1的表达.结果:喉鳞癌组织中cyclinD1蛋白阳性表达率为54.8%(17/31),高于正常喉黏膜组织(5.9%(1/17))(P＜0.05).喉鳞癌组织中cyclinD1蛋白阳性表达与淋巴结转移和临床病理分期有关(P均＜0.05),与患者年龄、性别及分化程度无关(P均＞0.05).结论:cyclinD1的异常表达与喉鳞癌的发生、发展密切相关,可能是影响喉鳞癌预后的重要分子学指标.     

口腔粘膜癌变过程中CCND1扩增的检测

目的研究CCND1基因在口腔黏膜癌前损害及癌变中的变化规律,以期明确该基因在口腔癌发生发展中的作用。方法选取正常口腔粘膜,上皮单纯增生,轻、中、重度上皮异常增生和口腔粘膜鳞状细胞癌及其相应转移淋巴结石蜡组织标本共55例,提取DNA,采用差示PCR技术检测CCND1基因的扩增,并通过直接序列分析验证差示PCR产物的确切性。结果差示PCR扩增显示,上皮单纯增生组无CCND1基因扩增倍率,与正常粘膜基本一致,差异无统计学意义(P=5.645)。上皮异常增生组19例中7例出现CCND1基因的扩增,平均扩增倍率为正常粘膜组的4.2倍,与上皮单纯增生组差异有统计学意义(P<0.01);在上皮异常增生各组中,以重度异常增生最高,但组间差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤组16例中9例出现CCND1扩增,平均扩增倍率为6.2倍,与上皮单纯增生组和异常增生组的差异均有统计学意义(P<0.01);转移癌和非转移癌的扩增率和平均扩增倍数的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CCND1基因的扩增与口腔粘膜癌前损害的发生发展相关。     

MMP1 mRNA在口腔鳞癌与正常黏膜中的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶1(MMP1)mRNA在口腔鳞状细胞癌(OSCC)及配对正常口腔黏膜组织中的表达及临床意义.方法 用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常口腔粘膜中MMP1 mRNA的表达;所得数据采用t-test检验方法进行统计学处理.结果 RT-PCR检测结果表明,MMP1 mRNA在OSCC和配对正常粘膜的表达水平分别为4.06±0.52和1.24±0.17,上调3.26倍(P＜0.0001).在30例OSCC标本中,MMP1 mRNA表达在病理Ⅱ/Ⅲ级OSCC中的表达(4.31±0.68)高于Ⅰ级OSCC的表达(3.87±0.57)(P＞0.05);在临床Ⅲ/Ⅳ期OSCC患者标本中的表达水平(4.18_ 0.67)高于Ⅰ/Ⅱ期OSCC的表达水平(3.65±0.53)(P＞0.05);在颈淋巴结阳性OSCC患者的表达水平(4.32±0.71)高于颈淋巴结阴性OSCC患者的表达水平(3.91±0.51)(P＞0.05).结论 MMP1可能在OSCC的侵袭过程中起重要作用,可能是OSCC诊断、治疗及预后判断的一个基因靶标;MMP1在OSCC分类诊断中有应用价值.     

EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7在中国地鼠口腔颊囊黏膜癌变过程中的表达研究

目的探讨EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7在口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用ELISA对中国地鼠口腔黏膜癌变过程中血清EGFR,PDCD4水平进行检测;采用免疫组织化学法检测正常口腔黏膜上皮,单纯增生上皮、异常增生上皮和鳞癌组织中TGF-β1,Smad3,Smad7的表达。结果在口腔黏膜癌变过程中血清EGFR蛋白呈升高趋势,血清PDCD4的表达呈降低趋势,呈负相关。鳞癌组织中TGF-β1、Smad7表达明显高于口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生(P0.05),而Smad3作用减弱。相关性分析显示,口腔异常增生上皮、口腔鳞癌组织中TGF-β1表达与Smad7呈正相关(P0.05)。结论 EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7表达与口腔鳞癌的生物学行为关系密切,本实验为研究口腔鳞癌机理研究提供了理论依据,对口腔鳞癌的发展与预后有重要意义。     

Cyclin D1、P53在口腔鳞癌中的表达及意义

目的：研究ＣｙｃｌｉｎＤ１、Ｐ５３蛋白在口腔鳞癌中的表达及与口腔鳞癌发生、发展间的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法,检测了４０例口腔鳞癌中ＣｙｃｌｉｎＤ１、Ｐ５３蛋白的表达情况。结果：５７．５％（２３／４０）的口腔鳞癌ＣｙｃｌｉｎＤ１过表达。正常口腔粘膜Ｐ５３蛋白均为阴性;５２．５％（２１／４０）的口腔鳞癌Ｐ５３蛋白阳性,两组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。其中高分化鳞癌阳性率为３６．８％（７／１９）;中分化鳞癌阳性率为６６．７％（１４／２１）,差异具有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：ＣｙｃｌｉｎＤ１过表达及Ｐ５３蛋白异常协同作用引起口腔鳞癌细胞的失控性生长,在口腔鳞癌的发生、发展中发挥着重要的作用。     

信号传导与转录激活因子3及细胞周期蛋白D1在口腔鳞癌中的表达及意义

目的探讨信号传导与转录激活因子3（stat3）及细胞周期蛋白D1（cyclinDl）在口腔鳞癌组织中的表达及其与临床预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）对35例口腔鳞癌患者的癌组织、相应正常组织中stat3、cyclinDl基因mRNA的表达进行检测。并结合临床资料进行分析。结果鳞癌组织中stat3及cyclinDlmRNA的表达水平均明显高于相应正常组织的表达,差异有统计学意义（P〈0．05或0．01】。鳞癌组织中stat3mRNA的表达与cyclinDlmRNA的表达无明显相关（P〉0.05）。stat3、cyclinDlmRNA的表达与肿瘤临床分期、淋巴结转移明显相关（P〈0．05）,而与性别、年龄、发生部位、肿瘤大小和病理分级之间无明显相关（均P〉0．05）。结论检测stat3、cyclinDlmRNA的表达可能有助干口腔鳞癌淋巴结转移和肿瘤临床分期的预测;口腔鳞癌发生、发展中stat3基因在mRNA水平上对cyclinDl的调控作用不明显。     

COX-2在口腔白斑、口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌中的表达

目的通过观察COX-2在口腔黏膜白斑(OLK)、口腔扁平苔藓(OLP)及口腔鳞状细胞癌(SCC)中的表达情况,探讨其在口腔癌发生过程中的意义。方法用免疫组化方法检测COX-2在51例口腔黏膜白斑(单纯增生15例,伴异常增生36例)、34例口腔扁平苔藓(单纯扁平苔藓19例,伴异常增生15例)、52例口腔鳞状细胞癌、10例正常口腔黏膜中的表达情况。采用图像分析系统计数阳性细胞率。应用统计学方法分析COX-2在不同病变中的表达。结果COX-2在白斑单纯增生组6.7%(1/15)为强阳性表达,白斑异常增生组强阳性的表达率为50%(18/36);在单纯扁平苔藓组15.8%(3/19)为强阳性表达;扁平苔藓异常增生组强阳性的表达率为33.3%(5/15);鳞状细胞癌有7.7%(4/52)呈强阳性表达。COX-2在白斑异常增生组强阳性的表达率显著高于单纯白斑和鳞状细胞癌组(P<0.01),在扁平苔藓异常增生组明显高于单纯扁平苔藓和鳞状细胞癌组(P<0.05)。单纯白斑、扁平苔藓组与鳞癌组相比较,COX-2的表达无明显差异(P>0.05)。结论COX-2在口腔癌变过程中是一个早期事件,可能成为化学预防作用的重要靶点。     

Stat3?Bcl-2及cyclinD1在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性研究

目的:研究口腔黏膜癌前病变癌变过程中Stat3?Bcl-2及cyclinD1的表达及其相关性?方法:采用免疫组化的方法分别检测正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中Stat3?Bcl-2及cyclinD1的表达?结果:正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜和OSCC中Stat3和Bcl-2?cyclinD1的积分光密度值(intergrated optical density,IOD)均逐步升高;Stat3?Bcl-2?cyclinD1三者的IOD值除单纯性增生黏膜与口腔正常黏膜无统计学意义外,其余各组间均有统计学意义?Stat3与Bcl-2 IOD值呈线形正相关;Stat3与cyclinD1 IOD值呈线形正相关;Bcl-2与cyclinD1 IOD值无相关性?结论:Stat3?Bcl-2及cyclinD1在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性提示,口腔黏膜癌前病变癌变是由多种基因共同参与的过程?     

细胞角蛋白19在4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中的表达

目的:观察CK19在口腔黏膜癌变各个阶段的表达,探寻其与口腔黏膜癌变之间的关系及意义。方法:4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,运用免疫组织化学的方法检测CK19在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化,分析CK19与口腔黏膜癌变的关系。结果:在大鼠正常舌黏膜组织中,CK19阳性染色的细胞散在分布于黏膜基底层,基底上层不表达;随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,CK19表达于黏膜基底上层;随着病变程度加重,CK19表达强度增强,阳性率增加,差异具有统计学意义。结论:4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中,CK19蛋白表达水平随病变程度加重显著升高,提示CK19与口腔上皮细胞的癌变有关;CK19的异常表达可作为早期诊断口腔鳞状细胞癌的辅助指标之一。     

口腔黏膜异常增生不同阶段上皮细胞E-cadherin、Twist1启动子甲基化研究

目的:研究口腔黏膜异常增生不同阶段上皮细胞E-cadherin及Twist1启动子甲基化,探讨其意义。方法:使用量子点免疫荧光技术检测口腔黏膜异常增生中Twist1的表达。随机选取口腔黏膜上皮异常增生组织,使用甲基化特异性PCR检测其甲基化状态,分别以口腔黏膜单纯过度角化,口腔鳞癌细胞系及口腔鳞癌组织作为阴性或阳性对照。结果:Twist1在口腔黏膜单纯过度角化中几乎不表达,在口腔异常增生黏膜中随上皮异常增生程度加重而升高(P<0.05)。在轻、中、重度的口腔黏膜异常增生的样本中,Twist1甲基化率随上皮异常增生程度加重而升高,分别为15.8%,29.4%,50%,差异有显著性(P<0.05)。口腔癌组织Twist1甲基化率为62.5%,口腔癌细胞系为60%,而单纯过度角化中Twist1未出现甲基化;与异常增生相比具有统计学意义(P<0.05)。在不同程度的异常增生上皮中,E-cadherin甲基化率分别为33.3%,50%,62.5%,未显示统计学差异。Twist1和Ecadherin的甲基化率无明显相关性(P>0.05)。结论:Twist1启动子甲基化可能发生在黏膜异常增生早期阶段,且与口腔黏膜上皮癌变过程关系密切。     

MDM2和p53在口腔黏膜鳞状细胞癌和口腔白斑中的表达

目的：探讨分析鼠双微染色体2（murine double minute 2,MDM2）和p53在正常人口腔黏膜（NOM）、口腔白斑（OLK）及口腔黏膜鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其在OLK及OSCC发生发展中的作用和临床诊断意义。方法：选取2010年1月至2013年1月我院收治的口腔黏膜鳞状细胞癌患者56例和口腔白斑患者44例,随机选取50例健康人员为对照组,采用免疫组织化学SP方法对50例NOM、56例OSCC以及44例OLK患者的组织中MDM2蛋白和p53蛋白进行检测。结果：MDM2和p53阳性表达率在NOM、OLK及OSCC组织中呈明显的逐渐升高趋势,对照组正常黏膜中MDM2和p53阳性表达为0,口腔白斑组MDM2和p53阳性表达为56.8%和38.6%;口腔鳞癌组MDM2和p53阳性率分别为76.8%和69.6%,与对照组相比均差异显著（P〈0.05）;口腔白斑组和口腔鳞癌组在MDM2阳性率无显著性差异（P〉0.05）,而p53阳性率差异显著（P〈0.05）。MDM2和p53蛋白在口腔白斑组（r=0.628）及口腔鳞癌组（r=0.829）均呈现正相关。结论：MDM2和p53蛋白功能异常是口腔黏膜上皮发生癌变的重要因素之一。MDM2和p53表达水平与OLK和0SCC发展进程密切相关,在口腔鳞癌的形成过程中起协同作用。     

HBD-1和HBD-2在口腔鳞癌患者肿瘤组织中的表达和意义

目的研究HBD-1和HBD-2在口腔鳞状细胞癌、人口腔鳞状细胞癌细胞系中的表达及临床意义。方法采用RT-PCR和免疫组化方法检测HBD-1和HBD-2在正常口腔组织和口腔鳞状细胞癌中的转录及表达情况。结果HBD-1在正常组织与口腔鳞状细胞癌中mRNA表达水平无明显差异,HBD-2在口腔鳞状细胞癌中较正常口腔粘膜组织在mRNA转录水平明显增加;HBD-1和HBD-2在人口腔鳞状细胞癌细胞系中有稳定表达。结论HBD-1主要参与机体多种防御机制及构建机体防御体系。HBD-2在口腔鳞状细胞癌的发生、发展及淋巴结转移中起重要的作用。     

人口腔黏膜白斑和鳞状细胞癌组织中Caspase-3的表达

目的:探讨口腔黏膜白斑和鳞状细胞癌组织中Caspase-3的表达及其与口腔鳞状细胞癌发生发展的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测口腔正常黏膜(n=10)、口腔黏膜白斑(n=48)(单纯增生性白斑14例,轻度异常增生性白斑12例,中度异常增生性白斑12例,重度异常增生性白斑10例)和鳞状细胞癌(n=41)组织中Caspase-3的表达.结果:正常黏膜、单纯增生性白斑、异常增生性白斑和鳞状细胞癌组织中均有Caspase-3的表达,且阳性表达率差异有统计学意义(x2=9.691,P＜0.05).轻、中、重度异常增生白斑组织中,Caspase-3阳性表达率分别为50.00%、83.33%、90.00%,呈逐渐升高趋势(P＜0.05).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级鳞状细胞癌组织中,Caspase-3阳性表达率分别为81.25%、50.00%、36.66%,呈降低趋势(P＜0.05).结论:Caspase-3表达水平增高是口腔黏膜白斑恶变发生发展中的早期事件,可将其作为预测口腔黏膜白斑恶变潜能的重要标志物.