脂质转染剂增强基因疫苗诱导的免疫应答效力

目的 研究脂质转染剂（ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ）提高丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心（Ｃ）基因疫苗的抗病毒免疫应答效力。方法 人工构建包含ＨＣＶ Ｃ基因片段的的真核表达载体ｐｃＤ－ＮＡＨＣＶ－Ｃ,在证实期可以在真核细胞中表达之后,将期用脂质转剂包裹,形成ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ－ｐｃＤＮＡＨＣＶ－Ｃ脂质混合物,将该混合物或单纯ｐｃＤＮＡＨＣＶ－Ｃ直接注射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠股四头肌,以空载体ｐｃＤＮＡ     

HCV核酸疫苗研究进展

丙型肝炎病毒是目前输血后肝炎的主要病因。并且与肝硬化和肝癌的发生和发展密切相关。由于ＨＣＶ存在不同的基因型,基因突变率高,特别是ＨＣＶ相似株的存在和免疫逃避现象,使传统疫苗的研制存在一定困难。随着基因免疫和基因治疗的兴起,ＨＣＶ核酸疫苗的研制就成为许多研...     

T细胞疫苗对HCV的清除作用

1 材料和方法 1.1 材料 雌性BALB/c小鼠(H-2d) 5～6 wk龄; P815细胞(H-2d,仅表达MHC Ⅰ类抗原,不表达MHCⅡ类抗原);SP2/0(H-2d)细胞;表达丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白的质粒载体pcDNA-C、pcDNA-CE1、pcDNA-CE1E2[1];腺病毒表达载体pAd.HCV-C、pAd.HCV-CE1、pAd.HCV-CE1E2[2];Na51CrO4;抗CD8 单克隆抗体;小鼠抗HCV C单克隆抗体;重组鼠源性IL-2;2-巯基乙醇等.     

HCV感染与细胞因子

丙型肝炎是世界范围内的疾病。目前在发达国家抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性率大约为1．9％。国内自然人群HCV的感染率在1．3％～21．7％之间。HCV感染的显著临床特点是85％～90％的急性患者将转变为慢性持续性感染。慢性持续性感染时，抗体、多种细胞因子及Th1与Th2细胞之间的比例均有所改变。本文就：HCV感染与细胞因子的关系综述如下。     

HCV核心蛋白DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫应答

目的：观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体液免疫应答的效力，为研制应用于人类的ＨＣＶ ＤＮＡ疫苗提供实验依据。方法：将全长ＨＣＶ核心蛋白基因插入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３．１，构建ＨＣＶ核心蛋白重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１ＨＣＶｃｏｒｅ，肌注ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＨＣＶ抗体。以此重组质粒转染小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以ＨＣＶ抗体阳性小鼠血清为捕获抗     

90例丙型肝炎患者HCV基因分型研究

目的 了解徐州地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型的分布情况。方法 对９０例血清ＨＣＶ ＲＮＡ阳性的丙型肝炎（ＨＣ）患者，行ＨＣＶ基因酶切分型。结果 ９０例中ＨＣＶ－Ⅱ型７１（７８．９％），ＨＣＶ－Ⅲ型１７例（１８．９％），ＨＣＶ－Ⅱ／Ⅲ混合型２例（２．２％）。结论 徐州地区ＨＣＶ流行株基因型主要为Ⅱ型，同时存在Ⅲ、Ⅱ／Ⅲ混合型。     

丙型肝炎病毒（HCV）基因分型研究中现存的问题

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因分型研究中现存的问题广西区卫生防疫站李平川综述葛宪民审校目前，在ＨＣＶ基因分型研究中所依据的基因区、分型方法、基因型的命名及数目等方面均无统一标准，各家报道很不一致，现将导致上述现象的原因综述如下。１分型所依据的基因区不同目...     

细胞因子基因转染的肿瘤疫苗研究进展

近年来，随着分子免疫学、肿瘤分子生物学和生物工程技术的发展，肿瘤的免疫基因疗法成为肿瘤治疗的一个新的研究热点。经细胞因子基因转染的肿瘤疫苗的研究就是其中的一个方面。其基本机制就是将细胞因子基因携至肿瘤局部使之在肿瘤微环境中表达和产生细胞因子并诱导全身抗肿瘤的特异和(或）非特异免疫反应及免疫记忆，抑制或消灭体内肿瘤生长，从而达到治疗肿瘤的目的。     

HCV NS—5区分型引物法检测新疆两城市HCV基因型

了解新疆两城市丙型肝炎病毒感染者中存在哪些基因型，以便为今后防治ＨＣＶ感染提供依据。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ技术，选择ＨＣＶ ＮＳ－５区设计的分型引物进行基因分型。结果；我们检测了１２８例已证实为丙型肝炎病毒感染者的血清，其中基因分型检测出的９８例中可分为１ａ型１４例，１ｂ型５８例，２ａ型１１，２ｂ型１０例，混合感染５例。     

Humoral immune response to HCV core DNA vaccine in mice

DNAvaccine,alsocallednucleicacidvaccine,isarecombinanteukatyoticexpressionplasmidencodingcertainantigenofpathogen.DNAvaccinecanexpressantigenandinducecellularandhumoralimmuneresponsesaftervaccinationbyintramuscularinjectionorplasmid--coatedmicroparticlebombardment.Itshightemperaturestability,lowexpenseofmassproductionandtheabilitytoinducestrongimmuneresponsesevenfortheuseintherapyhavemadeDNAvaccineanexcitingwayfornewvaccinedevelopment['J.InordertofurnishevidenceforHCVDNAvaccinesuitablefo…     

HIV-1 DNA vaccine with adjuvant cytokines induces specific immune responses against HIV-1 infection in mice

There is mounting evidence that the induction ofstrong mucosal and cell-mediated immuneresponses is key element to consider in constructing efficacious HIV-1 vaccine. Therapeutic vaccines that induce high levels of CTL specific to HIV are currently being developed worldwide. To induce strong and stable cell-mediated immune responses against HIV infection, immunoregulatory molecules including cytokines and chemokines have been used in the immunization protocols, and some of them were found …     

重组蛋白CTB表位对HCV多表位DNA疫苗的小鼠中免疫应答的影响

将一12aa的CTB表位连接于丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus,HCV)复合多表位抗原基因PCX的5'端,再克隆于真核表达载体pcDNA3中,获得重组质粒pcDNA3/CTB-PCX,利用表达IL-12的pWRG/mIL-12作为佐剂,肌注免疫小鼠后6W,用重组蛋白GZ-PCX加强免疫1次,第6W时可检测到较高水平的抗GZ-PCXIgG,最高滴度达1：10^3,与对照pcDNA3/PCX相比无显升高,提示CTB表位并无明显的增强PCX基因特异性体液免疫应答的作用。重组蛋白GZ-PCX可有效提高抗体水平,促进CD^8 T细胞增殖。免疫小鼠可诱发针对GZ-PCX融合蛋白的迟发性超敏反应（DTH）,免疫后小鼠体重正常,肝脾未见明显肿大。具有良好安全性。     

轮状病毒DNA疫苗经不同途径接种诱导体内免疫应答研究

目的:通过研究不同途径接种轮状病毒DNA疫苗所诱导的体内免疫应答,寻找其适合的免疫途径.方法:轮状病毒基因疫苗pcDNA1/VP7经肌肉注射及鼻粘膜两种途径免疫BALB/c小鼠,利用ELISA方法对其诱导产生的体液免疫应答进行测定.结果:经肌肉注射及鼻粘膜两种途径接种轮状病毒DNA疫苗后,均在BALB/c小鼠体内诱导产生了病毒特异性IgG增高(P＜0.05),而病毒特异性IgA与对照组相比无显著性差异.结论:肌肉注射及鼻粘膜两种途径均能作为轮状病毒DNA疫苗的候选接种途径.     

丙型肝炎病毒DNA疫苗的研究进展

目前,对慢性丙型肝炎尚无有效的治疗方法.DNA疫苗可诱导机体产生特异性体液和细胞免疫应答,丙型肝炎病毒（HCV）的DNA疫苗不仅可用于预防,而且有望成为治疗HCV持续感染的有效工具.作者就HCV DNA疫苗研究中抗原基因的选择、疫苗佐剂、疫苗导入体内的方法和存在的问题,以及应用前景等方面作一综述,并介绍一种评价HCV DNA疫苗效果的新代用模型.     

乙肝病毒表面抗原基因疫苗诱导小鼠细胞及体液免疫应答的研究

为观察乙肝病毒 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 基因疫苗免疫小鼠后的细胞及体液免疫应答,将该疫苗定向克隆于质粒ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 巨细胞病毒启动子下游,构建能在真核细胞内表达的重组基因疫苗ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ Ｈ Ｂｓ Ａｇ 。将此疫苗通过多点肌肉注射免疫 Ｂａｌｂ／ Ｃ 小鼠后第六周,实验组小鼠均出现抗－ Ｈ Ｂｓ Ｉｇ Ｇ 阳性,其抗体水平明显高于对照组,同时 Ｔｈ１ 免疫应答相关的细胞因子 Ｉ Ｌ２ 及γ干扰素水平也明显高于对照组,表明本文构建的基因疫苗ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ Ｈ Ｂｓ Ａｇ 能诱导 Ｂａｌｂ／ Ｃ 小鼠产生良好的细胞及体液免疫应答。     

HBV S基因与IL-12基因联合免疫小鼠的免疫应答

目的 观察小鼠对IL-12基因表达质粒与HBVS基因疫苗联合免疫的免疫应答。方法 用已构建的HBVS基因疫苗（pCR3.1-S)和表达IL-12p35和p40蛋白的真核表达载体pWRG3169分别给BALB/c小鼠多点肌肉注射,2wk后追加免疫1次,用ELISA法及MTT法检测小鼠血清抗-HBs及脾细胞对HBsAg的特异性增殖反应。结果 免疫接种2wk后小鼠血甭抗-HBs滴度及脾细胞对HBsAg的刺激指数均明显高于对照组,pWRG3169 pCR3.1-S组明显高于单纯pCR3.1-S注射组。结论 IL-12表达质粒可以增强pCR3.1-S基因疫苗诱导的体液和细胞免疫应答强度,尤以细胞免疫增高明显。     

白藜芦醇对小鼠氧惊厥的保护作用及其可能机制

目的:以真核质粒pcDN3.1( )为载体携带丙肝病毒高变区1(HVR1)相关模拟表位DNA序列对小鼠进行基因免疫,观察其诱导细胞免疫反应的效果.方法:根据HCV HVR1模拟表位多肽序列,合成DNA序列,并将其连接到pcDN3.1( )上,构建为pcDN3.1-SP.免疫中分别采用2种剂量pcDN3.1-SP(10μg和100 μg),以及10μg质粒中混合了非甲基化CpG基序(-CpG),以其作为佐剂增强免疫原性,并比较其与100μg剂量的免疫效果.杀鼠、收集血清、分离脾细胞;ELISA法检测小鼠体液中的抗体;脾细胞经混合肽刺激后,用流式细胞仪检测CD8 IFN-γ 细胞;用非放射性MTS法检测细胞增殖反应;以非放射性LDH法检测CTL反应.结果:混合肽体外刺激100μg和10μg-CpG基因免疫小鼠脾淋巴细胞后,T细胞增殖反应明显;脾淋巴细胞中CD8 IFN-γ 细胞增多;并能检测到明显的CTL反应,同时伴有较弱体液免疫反应.结论:合成的模拟表位中可能含有T细胞和B细胞表位;非甲基化CpG基序增强了DNA免疫效果.