BET bromodomain蛋白小分子抑制剂研究进展

组蛋白赖氨酸乙酰化的识别是组蛋白乙酰化参与表观遗传调控的关键步骤,乙酰化的组蛋白赖氨酸可以被bromodomains(BRDs)结构域所特异性的识别,从而招募染色质调控因子到特定区域,协同完成基因表达调控。其中作用于bromodomain and extra-terminal(BET)蛋白家族的BRD结构域的小分子抑制剂在抗炎和抗肿瘤方面显示出巨大的潜力。本文通过对与BET bromodomain靶点相关的疾病、BET bromodomain结构、BET bromodomain小分子抑制剂的化学结构分类及其构效关系等多方面进行总结,为设计和开发高活性的BET bromodomain小分子抑制剂提供参考依据。     

BET蛋白与脑认知功能关系的研究进展

溴结构域和超末端结构域(BET)蛋白能识别乙酰化组蛋白并与之结合,同时与染色质调节因子相互作用或招募转录起始复合物,从而启动基因转录。近几年,BET蛋白抑制剂的合成推进了BET蛋白相关表观遗传学研究。本文综述BET蛋白的结构和功能、BET蛋白抑制剂、BET蛋白在学习和记忆中的作用、BET蛋白在老年痴呆症中的作用以及BET蛋白在药物成瘾中的作用。     

作用于Polo-box结构域的Polo样激酶1抑制剂的研究进展

Polo样激酶1(Plk1)的过度表达在多种肿瘤的发生及发展过程中起着关键作用,目前已有多个不同结构的作用于ATP结合口袋和底物结合位点的小分子Plk1抑制剂进入临床研究。Polo-box结构域(PBD)是Plks特有的结构域,对Plk1在细胞中的定位及其与底物的结合有重要作用,被认为是另一个靶向型Plk1抑制剂研究的潜在靶点。本文介绍了Plk1的PBD功能,从小分子化合物和含有磷酸化的丝氨酸/苏氨酸短肽及其衍生物两个方面综述了作用于PBD的Plk1抑制剂的最新研究进展,并对这类抑制剂的研究前景进行了展望。     

抗埃博拉病毒小分子抑制剂的研究进展

埃博拉病毒(EBOV)是导致人和灵长类动物发生埃博拉出血热的烈性RNA病毒,感染者死亡率极高。目前临床上对于EBOV感染以支持治疗为主,尚无经系统临床验证有效的特异性治疗手段。处于研发阶段的抗EBOV药物主要包括小分子抑制剂、蛋白和核酸等三大类,其中小分子抑制剂类药物的种类最多,作用机制最为多样。本文针对EBOV的感染复制周期中的病毒及宿主靶标,总结了临床前和处于临床试验阶段的抗EBOV小分子抑制剂的研究进展。     

PICK1在中枢神经系统疾病中的作用

PICK1(protein interacting with C kinase 1)是一种含PDZ(PSD-95/Dlg/ZO1)结构域和BAR (Bin/amphiphysin/Rvs)结构域的蛋白,它可通过PDZ结构域与多种蛋白发生相互作用,其中一些蛋白与中枢神经系统(CNS)疾病密切相关.文中综述了近年来关于PICK1在几种中枢神经系统疾病中的作用研究,以期对疾病研究和临床治疗提供参考.     

BET家族及其抑制剂在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌是女性最常见的癌症之一,也是全球女性癌症相关死亡的主要原因之一.全世界每年有超过130万的乳腺癌病例,约45万人死于乳腺癌.据统计,2018年中国乳腺癌病例数为 367900 ,占所有癌症的8 .6％,其中死亡病例数为 97972 ,占所有癌症死亡病例的9 .1％[1].乳腺癌分为五种分子亚型,包括Luminal A型、Luminal B 型、人表皮生长因子受体 2 (human epidermal growth factor receptor2 ,Her-2)阳性(HR阳性)、Her-2阳性(HR阴性)、三阴型.其中三阴型乳腺癌占18％ ～25％,三阴型表现为雌激素受体(estrogen receptor ,ER)阴性、孕激素受体(progesterone receptor , PR)阴性、Her-2阴性,除了手术和化疗之外,缺乏有效的治疗手段.因此研究新的分子靶向方法治疗乳腺癌,尤其是三阴型乳腺癌(triple negative breast cancer ,T N-BC)具有重要意义.溴结构域和超末端结构域(bromo-domain and extra terminal domain ,BET )蛋白家族是乙酰化组蛋白的表观遗传阅读器,在细胞周期调控、细胞增殖及细胞凋亡的基因转录中发挥重要作用,多个研究已经证实BET抑制剂在急性髓系白血病、前列腺癌、结肠癌、骨肉瘤及乳腺癌中显示出显著的抗肿瘤效果.因此,BET家族抑制剂有望成为乳腺癌患者治疗的新药,为乳腺癌患者,尤其是缺乏有效治疗的 T NBC或乳腺癌一线治疗耐药患者带来福音.     

流行性感冒防治药物研究进展

目前药物防治仍是控制流感的主要措施之一.现有的流感防治药物主要包括M2离子通道阻滞剂和神经氨酸酶抑制剂,临床上虽有一定治疗作用,但其耐药性也日益突显.近年来,随着晶体学、病毒学及其他相关学科在制药领域的深入应用,不少新药已进入临床(前)试验,并取得了良好的抗病毒效果.其中最具代表性的包括广谱抗流感病毒血凝素抗体和病毒RNA聚合酶复合物小分子抑制剂.本文以流感病毒被用于靶标进行药物设计的几种重要蛋白为主线,分别介绍了近年来出现的一些具有较好应用前景的流感防治药物,以期为流感疫情防控提供参考.     

融合蛋白TAT-HIF-1α-PAS-B原核表达载体的构建、表达及纯化

目的 构建蛋白转导结构域TAT和人缺氧诱导因子1α PAS-B结构域融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化.方法 分别构建原核表达质粒pTAT-PAS-B、pET-PAS-B和pTAT-EGFP;在大肠杆菌BL21(DE3)pLyss内,以IPTG诱导融合蛋白的表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析鉴定,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(NiNTA-His)亲和层析法对重组蛋白进行纯化.结果 成功构建了PAS-B结构域的原核表达载体,经过优化表达和纯化条件,融合蛋白在IPTG诱导下获得特异性表达,纯化得到了高纯度的目的蛋白.结论 含人缺氧诱导因子1αPAS-B和TAT结构域融合蛋白的成功表达及纯化,为应用该融合蛋白调控体内HIF-1α的活性奠定了基础.     

抗糖尿病小分子ABHD6抑制剂的研究进展

2型糖尿病表现为糖脂代谢紊乱并伴随多脏器慢性损害,已成为威胁人类健康的巨大隐患。α/β水解酶结构域-6(α/β hydrolase domain-6,ABHD6)通过水解单酰甘油,负调控胰岛素的释放。小分子ABHD6抑制剂因其在增强胰岛素敏感性、改善脂肪功能等方面的重要作用而有望成为新一代治疗2型糖尿病的药物。本文介绍了ABHD6的作用机制,根据其结构特点对此类抑制剂的最新研究进展进行综述,并对其构效关系进行分析。     

FABD结构域缺失削弱293T细胞BCR/ABL癌蛋白抗凋亡能力

目的 通过转染野生型pAd-Bcr/Abl及缺失突变型pAd-BCR/ABL-AFABD于293T细胞中,探讨FABD结构域对Bcr/Abl癌蛋白抗凋亡能力的影响及相关机制.方法 293T细胞分别转染野生型pAd-Bcr/Abl及缺失突变型pAd-Bcr/Abl-AFABD质粒,并设置Blank组和Adtrack组作为对照,分别培养24、48、72 h后,采用流式细胞术(FCM)检测转染荧光强度并筛选最佳转染条件,Western blot验证蛋白表达.采用WST-1(水溶性四唑盐)实验及FCM检测FABD结构域对BCR/ABL癌蛋白促增殖抗凋亡能力的影响;DAPI染色观察细胞核形态变化;Western blot分别检测p-bcr/abl、p-AKT、p-ERK表达及凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP蛋白活化情况.结果 FCM检测结果显示质粒转染效率呈时间依赖性增加,并选择48 h为最佳转染时间.Western blot结果证实已经成功构建野生型pAd-Bcr/Abl及缺失突变型pAd-Ber/Abl-AFABD质粒.WST-1实验及FCM检测结果显示,FABD结构域缺失可显著抑制细胞增殖并促进凋亡,在处理48 h后细胞凋亡数达到29.0％ (P ＜0.05);在FABD结构域缺失后,p-AKT、p-ERK表达显著下调;凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP均在48 h明显活化.结论 FABD结构域缺失可显著削弱BCR/ABL癌蛋白促增殖抗凋亡能力,其可能与下调AKT、ERK信号通路并激活线粒体凋亡途径有关.     

血管内皮生长因子受体及其小分子抑制剂的研究进展

目前抗血管生成治疗是抗肿瘤研究的热点。血管内皮生长因子（VEGF）是刺激血管生成的重要因子之一,血管内皮生长因子受体（VEGFR）在肿瘤新生血管中高表达,因此成为肿瘤靶向治疗的理想靶点。以VEGF、VEGFR为靶点的抗肿瘤药物除了常见的单克隆抗体药物阿伐斯汀外,小分子抑制剂舒尼替尼、索拉非尼等也已经广泛使用;另外,一些具有上市潜力的药物,如范得他尼、西地尼布、瓦他拉尼、阿西替尼等也值得关注。已上市和正在进行临床研究的VEGFR小分子抑制剂按结构大致分为6类：喹啉及喹唑啉类、哒嗪类、吲唑类、咪唑和吡咯嘧啶类、吲哚类和其他结构等。对VEGF、VEGFR的生物学功能,其代表性的小分子抑制剂研究进行综述。     

溴结构域蛋白4的抑制策略及其在肿瘤治疗中的研究进展

溴结构域蛋白4（bromodomain-containing protein 4，BRD4）是溴结构域和超末端结构域家族中最重要的蛋白，其过度表达与多种肿瘤的发生发展密切相关，成为肿瘤治疗的新靶点。BRD4的抑制策略主要包括BRD4抑制剂和BRD4降解剂，其单独用药或与化学治疗、光热治疗、免疫治疗等治疗手段联合使用均显示出良好的抗肿瘤效果，为肿瘤治疗开辟了新的方向。本文介绍了BRD4的结构及其在肿瘤发生发展中的作用，综述了BRD4的抑制策略、在肿瘤联合治疗中应用以及耐药性的研究进展，为以BRD4为靶点的肿瘤治疗提供理论参考。     

后曲妥珠单抗时代的乳腺癌靶向治疗

摘要：乳腺癌靶向治疗进展迅速。Trastuzumab (曲妥珠单抗) 给乳腺癌治疗及转归带来了革命性的改变,显著降低了Her-2阳性乳腺癌亚组的复发风险并增加了生存。其它获FDA批准用于治疗乳腺癌的靶向药物有靶向VEGF的抗血管生成单克隆抗体Bevacizumab(贝伐单抗)、双靶点表皮生长因子受体HER-1和HER-2的酪氨酸激酶抑制剂Lapatinib（拉帕替尼）。获准用于乳腺癌治疗临床试验的靶向药物有小分子酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib（吉非替尼,）、Erlotinib（厄洛替尼）、Sorafenib（索拉非尼)、Sunitinib（索尼替尼）;单克隆抗体有Cetuximab（西妥昔单抗）、Panitumumab及靶向哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的小分子丝氨酸/酪氨酸激酶抑制剂Temsirolimus（CCI 779, Torisel）及Everolimus（依维莫司）。本文将综述近几年正式发表或口头报告的靶向治疗复发或转移性乳腺癌的研究结果来解释贝伐单抗及拉帕替尼在晚期乳腺癌治疗中的作用并简单介绍其它已用于临床试验的靶向药物的研究结果,以解答乳腺癌靶向治疗临床研究设计及处方这些药物时的两难境地。     

B-Raf激酶抑制剂的研究进展

原癌基因B-Raf存在于多种肿瘤细胞中,尤其在黑色素瘤和甲状腺癌中。选择性B-Raf激酶抑制剂vemurafenib的上市引起了人们对此类抑制剂的广泛关注。通过分析vemurafenib与B-Raf激酶的结合模式,人们对B-Raf激酶抑制剂提出了新的分类。依据此分类,本文对蛋白质晶体数据库(PDB)出现的B-Raf激酶抑制剂进行了分析,比较每种类型抑制剂的作用模式,分析其构效关系,并对Raf激酶抑制剂的未来进行了展望。     

核素标记受体酪氨酸激酶靶向药物显像研究进展

跨膜受体酪氨酸激酶信号在肿瘤细胞增殖、抑制凋亡和促进新生血管形成中具有重要作用,多种恶性肿瘤过度表达该受体。随着对受体酪氨酸激酶通路的认知,已设计出众多靶向该靶点的抗肿瘤药物,如单克隆抗体、小分子酪氨酸激酶抑制剂等,临床应用证明这些药物能显著提高抗肿瘤效果,提高患者生存率。但靶向药物靶点专一、价格昂贵,早期监测靶向药物的疗效,对提供临床诊疗决策、减少药物不良反应及节约患者开支具有重要意义。核素标记受体酪氨酸激酶靶向药物显像已用于临床监测靶向药物的疗效,该文就此方面的研究进展进行综述。     

以gp120、CD4和CXCR4为靶点的HIV小分子进入抑制剂研究进展

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的一种烈性传染病,危害极大.病毒的包膜蛋白gp120及其受体CD4、辅助受体CXCR4在病毒感染中起着重要的作用.其中,gp120的Phe43口袋结构和Arg59是其与CD4分子相互作用的重要部位.HIV小分子进入抑制剂因能在HIV感染细胞前即发挥抑制病毒的作用,成为近年来抗HIV药物研究的热点.Phe43口袋结构是小分子进入抑制剂的重要靶点,目前研究热点化合物主要有BMS-378806、BMS-488043及其类似物、NBD-556及其类似物.靶向CXCR4也是研究HIV小分子进入抑制剂的一个重要方向.     

抗肿瘤新靶点CDK9及其抑制剂的研究进展

细胞周期蛋白依赖性激酶9(CDK9)是细胞周期蛋白依赖性激酶家族中的一员。与其他CDKs不同,CDK9主要在转录延伸的调控中发挥作用,而不影响细胞周期过程。目前已有多种CDK9抑制剂进入了临床研究。本文介绍了CDK9的结构特征和作用机制,比较了CDK9与其他CDKs的蛋白结构差异,综述了CDK9非选择性抑制剂和选择性抑制剂的构效关系及研究进展。     

泛素蛋白酶体抑制剂在急性髓系白血病中的研究进展

泛素蛋白酶体系统 (UPS)在真核生物蛋白质循环中具有重要生物学作用,出现异常可导致肿瘤的发生。目前包括白血病在内的多种肿瘤患者体内均检测到高水平的泛素蛋白酶体活性。泛素蛋白酶体抑制剂通过影响泛素蛋白酶体系统的E3连接酶、去泛素化酶以及蛋白质降解活性位点能够有效地杀伤肿瘤细胞。临床上已经将相关泛素蛋白酶体抑制剂用于治疗血液系统肿瘤,但在急性髓系白血病中的应用相对较少。本文对影响蛋白质泛素化降解不同阶段的抑制剂在急性髓系白血病中的研究进展进行相关总结,为研发急性髓系白血病有效疗法提供新思路。