缺血(氧)鼠心肌肌质网和线粒体内钙离子变化的研究

用液体闪烁计数法测定离体再灌注鼠心肌肌质网(SR)和线粒体(Mit)内~(45)Ca~(2+)放射性强度(cpm),比较能量制剂ATP-氯化镁,活性氧自由基清除剂SOD和钙阻滞剂Verapamil对离体缺血(氧)再灌注鼠心肌细胞SR和Mit钙离子浓度的影响。结果表明,ATP-氯化镁,SOD和Verapamil组SR内~(45)Ca~(2+)的cpm均高于对照组cpm(P<0.01或P<0.05),而Mit内均低于对照组cpm(P<0.01)。此3种药物均能增高离体大鼠心肌细胞内SR~(45)Ca~(2+)和降低Mit~(45)Ca~(2+)积聚,从而保护心肌细胞缺血再灌注损伤。     

三磷酸腺苷-氯化镁对缺血缺氧-再灌注心肌线粒体内氧自由基的影响

应用电子自旋共振波谱仪(ESR)测定了缺血缺氧离体兔心用自体动脉血再灌注后心肌线粒体的氧自由基。结果表明,ATP-MgCl_2和人参皂甙均对心肌线粒体内氧自由基有清除作用,其效果与超氧化歧化酶(SOD)相近,作用基点主要是心肌细胞线粒体。     

ATP-MgCl2和异搏定对离体兔肺缺血再灌注保护及其机制的实验研究

目的探讨三磷酸腺苷-氯化镁(ATP-MgCL2)和异搏定对肺缺血再灌注损伤的保护作用和可能机制.方法建立离体兔缺血再灌注模型,利用细胞器分离技术及原子吸收光谱仪并结合光镜、电镜,定量测定肺缺血及再灌注后线粒体内Ca2+浓度,同时观察肺缺血再灌注后超微结构的变化.结果肺缺血再灌注组线粒体内Ca2+浓度显著低于缺血再灌注组(P＜0.01),两组肺湿干重比值显著低于缺血再灌注组(P＜0.01),两组保持的形态学结构较缺血再灌注组完整.结论Ca2+在肺缺血再灌注损伤过程中起重要作用,ATP-MgCl2和异搏定对肺缺血再灌注损伤有保护作用,它是通过提供高能磷酸化合物和降低线粒体内骤增的Ca2+2种途径实现的.     

缺血及缺血/再灌心律失常大鼠心肌~(45)Ca~(2+)内流变化

本实验采用麻醉大鼠缺血、及缺血再灌心律失常法以及同位素示踪法,对大鼠心肌缺血40mm和缺血10mm再灌30mm心律失常发生与心肌损伤致~(45)Ca~(2+)内流的变化进行了观察。结果表明,心肌缺血40mm心律失常发生较轻VF(53％),~(45)Ca~(2+)内流不明显(与正常心肌组比P>0.05)。缺血10mm再灌30mm心律失常发生严重(91％),室颤发生率较高(80％),~(45)Ca~(2+)内流量明显增加(与正常,缺血心肌组比P<0.01)。证实缺血性心律失常与心肌损伤引起Ca~(2+)内流关系不明显,而再灌心律失常的发生则与心肌损伤引起Ca~(2+)内流增加有关。     

ATP-Mg~(2+)对缺血缺氧心肌保护作用的实验研究

用离体大鼠心脏灌流方法观察了ATP-Mg~(2+)等对缺血缺氧心脏再灌注后心功能的影响及超微结构变化。结果表明,ATP-Mg~(2+)对缺血缺氧心肌具有明显的保护效果,其作用与ATP-MgCl_2几乎相同;两者均优于单纯性ATP(ATP-2Na)。作者认为,ATP-Mg~(2+)是ATP-MgCl_2,心肌保护的有效成分。     

低剂量丙泊酚对肝缺血再灌注模型大鼠心肌能量代谢的影响

目的:探讨低剂量丙泊酚对肝缺血再灌注模型大鼠心肌能量代谢的影响。方法:选取健康雄性SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、高剂量组、低剂量组,每组10只。空白组股静脉注射生理盐水3 ml/(kg·h),高和低剂量组于造模前30 min股静脉分别注射丙泊酚30 mg/(kg·h)和10 mg/(kg·h),依据文献复制肝缺血再灌注模型大鼠(参照王宏等实验研究)。分别检测各组心肌组织ATP、ADP、EC、AMP的含量和Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性,超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醇(MDA)的蛋白含量,并进行比较。结果:低剂量组和高剂量组ATP、ADP、EC、AMP含量明显高于模型组,且低剂量组ATP、ADP、EC含量明显高于高剂量组(P<0.05);模型组Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶、Na~+-K~+-ATP酶明显低于其它三组,低剂量组Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶、Na~+-K~+-ATP酶明显高于高剂量组(P<0.05);模型组SOD明显低于其它三组,模型组MDA明显高于其它三组(P<0.05);低剂量组SOD明显高于高剂量组,低剂量组MDA明显低于高剂量组(P<0.05)。结论:低剂量丙泊酚对肝缺血再灌注模型大鼠心肌能量代谢具有保护作用。     

SEA0400对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨SEA0400对离体大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法:利用酶解法分离成年Wistar大鼠心脏获得心肌细胞悬液,随机分成3组进行研究:(1)对照组:心肌细胞用再灌注液培养60min,未经历缺血再灌注过程;(2)缺血再灌注损伤组:心肌细胞缺血30min,再灌注30min,经历缺血再灌注损伤过程;(3)SEA0400干预组:在心肌细胞缺血再灌注过程中,予以终浓度1 μmol/L的SEA0400进行干预.实验结束后测定以上各组心肌细胞内Ca~(2+)浓度和心肌细胞活力.结果:缺血再灌注可导致心肌细胞活力降低和细胞内Ca~(2+)荧光强度显著升高(P<0.01);SEA0400能够明显增加心肌细胞活力和减轻细胞内Ca~(2+)荧光强度升高(P<0.01).结论:SEA0400可明显减轻缺血再灌注所致心肌细胞内钙超载,维持心肌细胞活力,从而达到心肌保护的作用.     

褪黑素对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

为探讨褪黑素增补于停搏液中对缺血再灌注离体鼠心的影响,将24只Wistar大鼠随机分为褪黑素组和对照组.离体鼠心在改良的Langendorff-Neely灌注模型上30 min预灌注,120 min停搏、30 min再灌注.缺血前及再灌注期间测定血流动力学指标、心肌酶(CPK,LDH),再灌注30 min测心肌超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)含量.电镜观察心肌超微结构.再灌注后发现,褪黑素组心功能、心肌超微结构的改善明显优于对照组;心肌酶(CPK,LDH)和LPO含量显著低于对照组(P＜0.01);SOD含量显著高于对照组(P＜0.01).结果表明褪黑素增补于停搏液中可显著减轻心肌缺血再灌注损伤,具有良好的心肌保护作用.     

ω-3脂肪酸后处理对大鼠缺血再灌注心肌抗氧化作用的影响

目的探讨ω-3脂肪酸后处理对离体大鼠缺血再灌注心肌抗氧化作用的影响。方法将60只SD大鼠随机分为4组:持续灌注组(A组)、缺血再灌注组(B组)、缺血后处理组(C组)以及ω-3脂肪酸后处理组(D组)。建立Langendorff离体大鼠心脏缺血再灌注模型,A组持续灌注150min,其余各组均平衡灌注30min,全心缺血30min,再灌注90min,C组在再灌注开始前进行4个循环的复灌20s/缺血20s,D组在再灌注开始前用ω-3脂肪酸灌注15min。灌流结束后取左心室心肌测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;透射电镜下观察心肌线粒体形态结构的改变,TTC染色计算心肌梗死面积。结果与B组相比,C、D组LDH、MDA水平显著降低(P<0.05),D组SOD水平显著升高(P<0.05);C、D组的大鼠心肌线粒体损伤程度明显减轻,心肌梗死面积明显缩小(P<0.01)。结论ω-3脂肪酸后处理可提高离体大鼠心脏缺血再灌注后心肌组织SOD的水平,改善心肌抗氧化能力,减轻心肌细胞线粒体损伤。     

热休克蛋白70对兔未成熟心肌和心肌间质的影响

目的: 探讨热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌和心肌间质的影响. 方法:健康新生长耳大白兔12只随机分为2组. 对照组(C组):ip生理盐水0.4 mL,24 h后取离体心脏,常规建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注15 min转为工作心15 min后停灌45 min,恢复灌注15 min改为工作心30 min;实验组(E组):ip去甲肾上腺素, 24 h后取离体心脏,方法同对照组. 测定心肌细胞中HSP70含量、血流动力学指标、心肌含水量(MWC)、心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET) 含量、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性及其Ca2 含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m,心肌超微结构. 结果:E组HSP70含量明显高于C组(P<0.01);MWC低于C组(P<0.05);ATP含量、SOD活性、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、[ATP]m, HP含量优于C组(P<0.01),MDA含量、CK, LDH漏出率、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量、ET含量低于C组(P<0.01),心肌超微结构损伤较C组明显减轻. 结论:HSP70对缺血再灌注未成熟心肌和心肌间质具有明显的保护作用.     

三磷酸腺苷-氯化镁对兔肺再灌注损伤的保护作用

目的利用家兔左肺灌注模型，探讨三磷酸腺苷一氯化镁ATP-MgCl2）对缺氧再灌注肺线粒体内钙离子浓度和肺组织水分的影响。方法观察ATP-MgCl2对再灌注肺组织线粒体内钙离子浓度和肺组织水分的影响。结果（1）家兔左肺灌注模型均获成功。（2）缺氧再灌注组线粒体内钙离子浓度显著高于正常对照和缺氧组（P〈0．01）；ATP-MgCl2加用再灌注组线粒体内钙离子浓度显著低于缺氧再灌注组（P〈0．01）。（3）缺氧再灌注组肺组织湿干重比值（LW／DR）显著高于正常对照和缺氧组（P〈0．01）；ATP-MgCl2加用再灌注组LW／DR显著低于缺氧再灌注组（P〈0．01）。结论本模型具有操作简便、成功率高的优点，是可行的肺离体研究模型；ATP-MgCl2明显抑制家兔缺氧再灌注肺线粒体内钙沉积和肺组织水肿，提示ATP-MgCl2对肺缺血再灌注损伤具有保护作用。     

丹参和异搏定对高能冲击波致兔肾损伤的保护作用

目的: 探讨丹参对高能冲击波致家兔肾损伤的保护作用及机制. 方法: 将家兔45只随机分为3组,丹参组、异搏定组和生理盐水对照组各15只,ESWL前3 d分别iv丹参注射液、异搏定和生理盐水,测定体外冲击波碎石术(ESWL)前后不同时间血浆中内皮素(ET-1)和超氧化物歧化酶(SOD)及血清中丙二醛(MDA)变化. 结果: 对照组ESWL后血浆中ET-1和血清中MDA值较ESWL前显著升高(PET-1=0.015, PMDA =0.01), 而血浆中SOD活性显著性降低(P=0.003). 丹参组和异搏定组ESWL后血浆中ET-1和血清MDA较ESWL前无显著性变化,且高峰值均显著低于对照组;而血浆SOD活性虽较ESWL前降低,但却显著高于对照组(丹参: P=0.001; 异搏定: P=0.022). 丹参组和异搏定组两组间3个指标均无显著性差异. 结论: 丹参与异搏定一样对高能冲击波致家兔肾损伤具有保护作用.     

ATP—MgCl2对缺血缺氧鼠心线粒体内离子变化的影响

用原子吸收分光光度仪测定将ATP-MgCl_2溶灌注到缺血缺氧心脏前后心肌线粒体内钾、钠、钙、镁离子的浓度。结果表明,对照组内各时间组之间有显著差异(P<0.01或P<0.05),而给药组内各时间组之间无显著差异(P>0.05),这说明在单纯缺血缺氧状态下,心肌细胞受到损伤,控制离子转运能力随之下降;当给予ATP-MgCl_2时,由于提高了线粒体内ATP水平,控制离子转运能力得以提高。所以认为,ATP-MgCl_2具有心肌保护作用,其作用基点在线粒体上。     

缺血预处理对大鼠心肌离子泵、离子及氧自由墓的影响

目的：探讨心肌缺血预处理（Ischemicpreconditioning，IPC）的心肌保护作用机制。方法：通过大鼠在体心肌缺血预处理模型，观察预处理（PC）对缺血再灌注心肌钠泵（Na+-K+-ATP酶）、钙泵（Ca(2+)-ATP酶）活性、Na+、Ca(2+)浓度及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的影响。结果：与单纯缺血再灌注组相比，PC组缺血再灌注心肌钠泵、钙泵的活性降低幅度小（P＜0．01），心肌钠钙离子浓度降幅较大（P＜0．01），且SOD活性升高，MDA含量下降。结论：心肌缺血预处理通过提高缺血再灌注区心肌钠泵、钙泵的活性，减少心肌钠钙超载及氧自由基的产生而达到保护心肌的作用。