大鼠运动性动情周期抑制时卵巢结构的研究

以动情周期正常的纯系ＳＤ雌性大鼠为对象进行大负荷游泳训练。当动情周期被抑制时，取双侧卵巢，用中性福尔马林固定，石蜡切片，ＨＥ染色。研究动情周期抑制后卵巢中卵泡的生长发育、排卵及黄体形成等变化。结果：动情周期抑制组大鼠卵巢中新鲜黄体占黄体总数的百分比明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）；而囊状卵泡占全体卵泡的百分比２组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示，大负荷运动不影响卵泡的发育。但对卵泡的成熟与排卵则有较大影响。     

PTH缺乏经细胞外钙介导卵巢血管生成障碍而致生殖能力降低

目的:探讨甲状旁腺素(PTH)缺乏引起生殖功能降低的机制.方法:使用组织学,免疫组织化学和Western blot的方法比较分析了同窝4个月PTH基因敲除纯合子小鼠和野生型小鼠分别给予正常钙(1%)、低钙(0.01%)及高钙饮食(2%)后生殖能力、卵巢成熟卵泡数量、黄体形成及血管生成的差异.结果:与同窝野生型雌性小鼠(PTH+/+)相比,正常饮食PTH基因敲除纯合子小鼠(PTH-/-)生殖能力下降,成熟卵泡数量及黄体生成减少,卵巢血管发生减少;低钙饮食PTH-/-表现为完全不孕,成熟卵泡数量进一步减少和黄体缺失,卵巢血管发生减少更为明显;而高钙饮食PTH-/-生殖能力、成熟卵泡数量、黄体形成及血管发生均恢复正常.结论:PTH缺乏经细胞外钙介导卵巢血管生成障碍而致生殖能力降低.     

妇产科概论：解剖、生理和组胚学

不同促排卵方案宫颈黏液中IL-6与卵泡发育、排卵的相关性；角质细胞生长因子对无排卵型功血子宫内膜上皮细胞生长与分泌CA125的影响；多囊卵巢综合征促排卵治疗后子宫内膜HOXA10的表达。     

不同方法确定动情周期及动情期生殖器官结构

目的 为确定最佳合笼时间,对两种常见鉴定小鼠动情周期方法进行比较,并确定处于动情期的子宫内膜和输卯管的形态结构,为动物生殖发育及胚胎研究提供基础技术指导.方法 对43只昆明小鼠分别应用阴道脱落细胞检查法、宫颈黏液结晶法,确认小鼠动情周期,与子宫、输卵管和卵巢做成石蜡切片,HE染色后镜下观察的结果进行统计分析比较,同时对处于动情期的小鼠子宫内膜和输卵管进行HE染色.结果 阴道脱落细胞检查法所确定小鼠动情周期与子宫镜检所见确定的动情周期中,在动情期的判定上吻合率较高;小鼠的阴道脱落细胞在动情周期各个时期有不同的形态特点,处于动情期的小鼠的子宫内膜和输卵管的形态与处于非动情期的小鼠有明显变化.结论 阴道脱落细胞染色检查确定动情期比宫颈黏液结晶法更为可靠;小鼠激素水平的变化使阴道上皮细胞发生周期性变化,动情期小鼠输卵管和子宫内膜发生相应改变分别为受精和着床做准备.     

生精汤对雄激素致无排卵模型大鼠卵巢功能及形态学的影响

[目的]观察补肾活血方药生精汤对雄激素致无排卵模型大鼠的作用及其对作用机制进行初步探讨。[方法]幼年雌性SD大鼠注射外源雄激素制造不排卵模型,运用中医中药治疗并观察治疗前后动物动情周期、血清性激素水平以及卵巢病理形态组织学的变化。[结果]本方能恢复正常动情周期、改善血清激素水平;缩小卵巢扩张囊泡、增加黄体数量。[结论]生精汤具有改善模型大鼠多囊卵巢征象、促排卵、恢复卵巢功能的作用。     

“痰湿型”不孕症的病因病机及其生物学基础研究

目的通过对db/db小鼠生殖功能障碍的基础研究,探讨中医"痰湿型"不孕症的病因病机——"痰瘀胞宫"的现代生物学基础,证明其理论的正确性。方法①雌性B6.Cg-m+/+Leprdb小鼠和其同窝出生的雌性野生型C57BL/6J小鼠于12周龄进行卵巢交互移植,构建实验小鼠的LR基因型组合分别为A组(躯体LR+,卵巢LR-,n=10)、B组(躯体LR+,卵巢LR+,n=5)、C组(躯体LR-,卵巢LR+,n=5)、D组(躯体LR-,卵巢LR-,n=5)共4组。②术后恢复两周,进行阴道脱落细胞涂片,连续观察两个周期。③取材,检测全身糖脂代谢指标和生殖激素水平,HE染色法检测卵巢、子宫组织形态学变化。结果①C、D组与A、B组比较,其体重增加约1倍(P0.01),性腺周围脂肪垫重量增加约10倍(P0.01),血清葡萄糖、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和胰岛素水平增加2～3倍(P0.01)。②阴道细胞涂片发现,A、B组小鼠均出现正常的动情周期,而C、D组则始终处于动情间期;C、D组与A、B组比较,卵巢重量及E2、P、FSH、LH水平显著下降(P0.05)。HE染色可见A、B组小鼠的卵巢及子宫组织形态正常,而C、D组小鼠的卵巢及子宫均萎缩变小。结论 db小鼠生殖功能障碍主要是高糖脂血症累及生殖器官导致其脂质化所引起,"痰湿型"不孕症的中医病因病机为"痰瘀胞宫",其生物学基础是糖脂代谢异常。     

促排卵治疗对多囊卵巢综合征患者子宫内膜整合素α_vβ_3表达的影响

据《中华妇产科杂志》2000年3月35卷第3 期报道 为了解促排卵药物对多囊卵巢综合征(PCOS)患者黄体中期子宫内膜整合素α_vβ_3表达的影响,北京医科大学第三临床医学院妇产科王颖等应用单克隆抗体,采用免疫组织化学技术对22例正常妇女、40例无排卵PCOS患者促排卵治疗后黄体中期的子宫内膜整合素α_vβ_3进行了测定。     

卵巢胰岛素抵抗对卵巢糖代谢及功能影响的实验研究

目的 探讨卵巢内胰岛素信号分子缺失对卵巢自身功能影响,为阐明卵巢局部胰岛素抵抗对生殖功能作用提供理论支撑.方法 (1)分别选择蛋白激酶B2(AKT2)基因缺失的(AKT2-)和其同窝出生的有完整AKT2基因(AKT2+)的雌性小鼠评估卵巢糖摄取情况,并进行卵巢交互移植,构建AKT2基因型组合个体分别为A组(躯体+,卵巢+)12只,B组(躯体+,卵巢-)15只,C组(躯体-,卵巢+)8只.(2)监测动情周期,随机分组,对刺激组小鼠采用卵泡刺激素(0.75 IU/g)进行干预后取材.评估各组小鼠卵巢组织形态与生殖激素指标,并且采用RT-PCR检测卵巢内ERK-1胰岛素信号分子和甾体激素合成酶的表达.结果 (1)AKT2-卵巢的葡萄糖摄取能力显著下降.(2)B组动情周期显著延长,卵巢内黄体数量明显减少,而卵泡的数量明显增多,同时17-OH和T的水平显著升高.(3)基础状态下,B组卵巢内ERK-1和CYP17的表达明显增强.刺激状态下,B组卵巢内ERK-1、CYP17、CYP19和GSK3β均显著升高.结论 (1)AKT2-小鼠卵巢存在胰岛素抵抗,出现动情周期延长,卵巢多囊性改变和雄激素及其合成酶水平增高,类似PCOS表现.(2)卵巢局部胰岛素抵抗使卵巢自身糖代谢异常,细胞分裂增殖功能亢进,卵巢对促性腺激素反应性增高,卵巢功能放大,可能是PCOS发病的关键因素.     

DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析*

目的 应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2（DDR2）在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i?EC（DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2）,并分析其在肝脏中的表型。方法 复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞（ES细胞）打靶,通过聚合酶链反应（PCR）+脱氧核糖核酸（DNA）印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0代杂合小鼠自交筛选获得F1代DDR2flox/flox小鼠,该小鼠与Cdh5-Cre/ERT2小鼠杂交,通过子代自交获得DDR2在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除（DDR2flox/flox, Cdh5-Cre/ERT2）小鼠。他莫昔芬诱导血管内皮细胞上DDR2基因敲除,对小鼠进行表型分析。结果 获得DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠DDR2i?EC（DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2）,DDR2i?EC小鼠出生时符合孟德尔遗传定律,发育良好,他莫昔芬诱导敲除小鼠血管内皮细胞DDR2基因表达后,小鼠出现自发性肝纤维化及黄体血管新生障碍等表型。结论 成功复制DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型。血管内皮细胞DDR2缺失能导致自发性肝纤维化。     

不同促排卵方案宫颈黏液中IL-6与卵泡发育、排卵的相关性

目的:探讨不同促排卵方案患者宫颈黏液(CM)中IL-6水平与卵泡发育及排卵的相关性.方法:选择36例不孕妇女为研究对象,15例正常月经周期妇女为对照组.实验组分三组,分别采用克罗米酚(CC)、尿促性素(HMG)及超促排卵(COH).于月经早卵泡期、围排卵期及黄体高峰期收集CM及血清,采用双抗RIA测定IL-6水平及FSH, LH, E2, P水平,同时行阴道B型超声监测卵泡发育、子宫内膜厚度及排卵情况.结果:① CM中IL-6在正常月经周期及促排卵周期中存在周期性变化,卵泡期开始上升,围排卵期达高峰,黄体期下降,三期中围排卵期CM IL-6水平最高,差异有统计学意义(P＜0.05).② CM中IL-6与卵泡大小呈正相关(r=0.792, P＜0.05),与子宫内膜厚度、宫颈黏液评分无相关.③排卵组与未排卵组CM中IL-6比较,排卵组IL-6水平明显高于未排卵组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:① CM中IL-6在正常月经周期及促排卵周期中存在周期性变化,排卵期达高峰,有望作为预测排卵的新指标.② HMG促排卵组和IVF-ET COH组CM中IL-6水平高于对照组,可能与促性腺激素对IL-6的上调作用及激活生殖道局部细胞免疫有关.③ IL-6在卵泡发育及排卵过程中起重要作用.