慢性阻塞性肺病大鼠骨骼肌蛋白降解的变化

目的探讨慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠骨骼肌蛋白降解代谢变化的规律。方法利用熏香烟法制作COPD大鼠模型(COPD组),并设置对照组,每组20只。取伸趾长肌充氧离体孵育,采用高效液相-荧光法测量骨骼肌3-甲基组氨酸(3-MH)和酪氨酸(Tyr)的含量。结果孵育后,COPD组大鼠Tyr及3-MH的降解率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论COPD大鼠不仅全身骨骼肌总蛋白降解增加,作为机体蛋白质储存库重要组成部分的骨骼肌肌蛋白消耗更为明显。     

慢性阻塞性肺病大鼠骨骼肌蛋白降解的变化

目的 探讨慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠骨骼肌蛋白降解代谢变化的规律.方法 利用熏香烟法制作COPD大鼠模型(COPD组),并设置对照组,每组20只.取伸趾长肌充氧离体孵育,采用高效液相-荧光法测量骨骼肌3-甲基组氨酸(3-MH)和酪氨酸(Tyr)的含量.结果 孵育后,COPD组大鼠Tyr及3-MH的降解率与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.001).结论 COPD大鼠不仅全身骨骼肌总蛋白降解增加,作为机体蛋白质储存库重要组成部分的骨骼肌肌蛋白消耗更为明显.     

饲料蛋白质质量对幼年大鼠骨骼肌蛋白代谢的影响

本文通过对幼年大鼠骨骼肌细胞RNA相对含量的显微分光测定和尿中3-甲基组氨酸的分析,观察了不同质量饲料蛋白质对大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响。结果显示,不同质量的蛋白质喂养动物,动物骨骼肌细胞RNA含量存在显著差异,RNA含量与饲料蛋白质的氨基酸分之间呈高度正相关(r=0.958);尿中3-甲基组氨酸排出量也随饲料蛋白质质量提高而增大。据此认为,优质蛋白质促进动物生长发育,主要是加强了机体蛋白质的合成代谢,而不是降低了分解代谢。     

严重烫伤早期外源性β—羟丁酸钠,胰岛素对大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响

本文就外源性β-羟丁酸钠(β-HOBNa)、胰岛素(Ⅰ)对37％体表严重烫伤大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响进行了研究。结果为伤后第4天血清乙酰乙酸(AcAc)无明显变化,游离脂肪酸(FFA)下降,尿3-甲基组氨酸(3-MH)和伤肢比目鱼肌蛋白质分解率明显增加。伤后连续三天注入β-HOBNa可降低尿3-MH和比目鱼肌蛋白质的分解率,但对其合成无明显影响。联合注入β-HOBNa和Ⅰ未见二者有明显的协同抗蛋白质分解的效应。     

严重烧伤脓毒症患者骨骼肌蛋白分解代谢的临床研究

目的分析严重烧伤脓毒症患者骨骼肌蛋白降解变化及其生物学机制。方法收集同期收治的20例严重烧伤脓毒症患者(烧伤脓毒症组)和12例整形患者(对照组)的血、24h尿和股四头肌标本,通过放免法测定血浆皮质醇和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,高效液相-色谱分析法检测股四头肌内3-甲基组氨酸(3-MH)含量以及尿中3-MH排出量,核糖核酸印迹法检测股四头肌内编码泛素、E2-14k和蛋白酶体C2亚基的mRNA表达变化。蛋白免疫印迹法检测股四头肌内蛋白酶体C2亚基的蛋白表达变化。结果烧伤脓毒症组血浆内皮质醇含量(478±56)μg/L和TNF-α含量(22·4±3·8)μg/L均显著高于对照组血内皮质醇含量(72±12)μg/L和TNF-α含量(0·5±0·1)μg/L(均P<0·01)。烧伤脓毒症组股四头肌内3-MH含量(4·3±0·6)μmol/g及24h尿内3-MH排出量(456±25)μmol均显著高于对照组股四头肌内3-MH含量(2·5±0·4)μmol/g和24h尿内3-MH排出量(202±29)μmol(均P<0·01)。烧伤脓毒症组股四头肌泛素mRNA2·4kb条带和1·2kb条带的表达分别较对照组增强51%和32%,差异有统计学意义(P<0·01);E2-14k mRNA1·2kb条带的表达较对照组增强75%,差异有统计学意义(P<0·01);蛋白酶体C2亚基mRNA和蛋白表达分别较对照组增强39%和130%,差异有统计学意义(P<0·01)。结论重症烧伤脓毒症时骨胳肌蛋白降解显著增强,体内糖皮质激素及TNF-α含量增加,从基因水平激活细胞内蛋白降解途径-泛素系统是重症烧伤脓毒症患者骨胳肌蛋白降解增强的原因之一。     

蚝菇提取物对老年大鼠肝肾组织内过氧化物酶表达及蛋白质氧化的影响（英文）

目的：探讨蚝菇提取物对老年大鼠（24月龄）肝肾组织内过氧化物酶基因表达及蛋白质羰基含量的影响。方法：18只大鼠被分为3组,每组6只。组1为健康年轻大鼠（4月龄）对照组;组2为健康老年大鼠（24月龄）对照组;组3为健康老年大鼠（24月龄）蚝菇提取物干预组,干预措施为每天腹腔注射蚝菇提取物200 mg/kg体质量,连续注射30 d。第31天处死全部大鼠并取出肝肾组织。使用逆转录聚合酶链反应及分光光度测定法分别测定大鼠肝肾组织内过氧化物酶基因表达情况及蛋白质羰基的含量。结果：组3老年大鼠注射蚝菇提取物后,其肝肾组织内过氧化物酶基因表达显著高于组2老年大鼠,且组3老年大鼠肝肾组织内蛋白羰基含量显著低于组2老年大鼠。结论：蚝菇提取物能够增加老年大鼠肝肾组织内抗氧化酶基因的表达并减少自由基引起的蛋白质氧化,对于自由基引起的年龄相关性疾病可能有保护作用。     

葡萄糖转运蛋白4在宫内发育迟缓大鼠骨骼肌中的表达和转位

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠骨骼肌胰岛素刺激下葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达和转位的变化,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制。方法采用孕期全程低蛋白饮食法建立大鼠IUGR模型,检测18月龄IUGR子鼠骨骼肌胰岛素刺激下的2-D-3H葡萄糖的摄取,同时采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot方法检测胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物1(IRS-1)及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的m RNA和蛋白表达;用Western blot方法分别检测胰岛素刺激前后骨骼肌总/膜GLUT4的蛋白表达变化。结果 1与对照组相比,18月龄IUGR组大鼠骨骼肌胰岛素刺激后葡萄糖摄取率显著降低(P=0.035);2IR和IRS-1 m RNA和蛋白表达在两组大鼠骨骼肌中差异无统计学意义(P>0.05),但GLUT4 m RNA表达在IUGR组大鼠骨骼肌中显著下降(P=0.031);3基础状态时,两组大鼠骨骼肌GLUT4总蛋白表达无明显差异(P=0.967);IUGR组GLUT4膜蛋白表达略降低,但未及统计学意义(P=0.072);经胰岛素刺激后,两组大鼠骨骼肌与各自基础状态相比,GLUT4总蛋白变化不明显,GLUT4膜蛋白表达均较各自的基础状态显著增加,但IUGR大鼠骨骼肌GLUT4膜蛋白的上升程度显著低于对照组(P=0.001)。结论 IUGR老龄大鼠骨骼肌中GLUT4 m RNA表达降低以及胰岛素刺激下的GLUT4转位下降,可能降低对胰岛素的反应性,从而减少葡萄糖摄取,促进胰岛素抵抗发生。     

推拿对骨骼肌减少症患者伸膝速度和肌电的干预作用

目的探讨推拿疗法对骨骼肌减少症患者伸膝速度和肌电信号的干预作用。方法对骨骼肌减少症患者进行为期8周的推拿功法训练结合推拿手法治疗，实验前后分别检测伸膝速度及肌电图。结果经过8周的推拿治疗，骨骼肌减少症患者单位时间伸膝次数明显增高，马步状态下肌电信号时程、上升时间明显降低。结论推拿干预可以提高骨骼肌减少症患者伸膝速度，促进骨骼肌同步化收缩程度。     

推拿治疗老年骨胳肌减少症的临床观察

目的 探讨推拿疗法对老年骨胳肌减少症的临床疗效.方法 收集门诊就诊的69例老年骨胳肌减少症患者一般资料,分成治疗组及对照组,采用推拿及运动训练的方法进行临床观察研究.观察治疗后所有老年骨胳肌减少症患者的伸膝速度,骨骼肌同步化收缩程度、肌力协调性和平衡功能等.结果 推拿治疗3个月患者的伸膝速度,骨骼肌同步化收缩程度、站立位的平衡功能较治疗前有所改善,与对照组相比有统计学意义(P＜0.05).结论 推拿疗法治疗老年骨胳肌减少症有效,且能改善患者的肢体功能.     

推拿疗法对骨骼肌纤维化大鼠MMP-1和TIMP-1表达的影响

[目的]观察推拿疗法对大鼠急性腓肠肌钝挫伤后纤维修复的影响,探讨其可能的作用机制。[方法]将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、推拿治疗组(n=10),运用自制砸伤装置复制经典骨骼肌钝挫伤模型。治疗组进行推拿治疗,每次干预10 min,每日1次,连续实施25 d。通过苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠腓肠肌纤维化程度;qPCR和蛋白印迹检测大鼠腓肠肌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)蛋白的表达情况。[结果]HE染色镜下发现对照组大鼠骨骼肌纤维排列整齐,形态结构完整;模型组大鼠骨骼肌纤维排列紊乱,甚至断裂,肌成纤维细胞增多,细胞外基质ECM)增多且胶原纤维明显沉积;治疗组大鼠骨骼肌纤维排列较整齐、间距小,且大小均一,胶原纤维生成减少,仅有少量ECM生成,损伤基本恢复。qPCR和蛋白印迹结果显示模型组大鼠损伤腓肠肌MMP-1的mRNA和蛋白表达量及MMP-1/TIMP-1比值明显降低(P<0.01),而TIMP-1的mRNA和蛋白表达水平明显升高;给予推拿治疗后可明显提高损伤大鼠腓肠肌MMP-1的mRNA和蛋白水平及MMP-1/TIMP-1的比值(P<0.01,P<0.05),且降低TIMP-1的转录水平(P<0.01,P<0.05)。[结论]推拿治疗可有效减轻骨骼肌钝挫伤后纤维化程度,其作用可能与上调MMP-1/TIMP-1比值有关。     

肾小管基底侧钠/二羧基转运蛋白随增龄的表达变化

目的：观察大鼠及人类肾小管基底侧钠/二羧基转运蛋白（NaCD3）随增龄的表达变化规律,并探讨其在肾脏衰老变化中的意义。方法：采用Northern杂交、Western印迹免疫组化染色方法,从基因及蛋白质水平观察大鼠出生后1d、7d、1个月、3、12、24个月及少年、中青年、老年正常人肾组织NaDC3表达变化趋势,并利用生化方法测定大鼠血、尿枸椽酸。结果：（1）大鼠血及尿枸椽酸浓度随鼠龄增长呈现逐渐下降的趋势。（2）大鼠肾组织Northern杂交及Western印迹结果显示随鼠龄增长NaDC3mRNA及蛋白表达逐渐增强的趋势。（3）免疫组化结果显示NaDC3表达于大鼠及人肾脏近端小管基底侧,从大鼠出生后7d开始表达,后随鼠龄增长表达逐渐增强;在人类随年龄增长也呈现表达逐渐增强的趋势。结论：NaDC3可能通过枸椽酸等物质的能量代谢机制参与了机体的衰老过程。     

基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制因子-1在老年肌少症大 鼠中的表达及意义

目的 观察肌少症大鼠骨骼肌质量、力量的变化以及基质金属蛋白酶（MMP-1）、金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP-1）及Ⅰ型胶原的表达。方法 11 只5 月龄SD大鼠作为成年对照组(YC组）;18只24月龄SD大鼠根据双能X线吸光测定得到的相对瘦质量（瘦质量%）分为两组,其中9只大鼠为老年对照组（OC组）,9只大鼠为老年肌少症组（OS组）,分组标准为YC组相对瘦质量较OS组高2SD;大鼠喂养4周后处死;电子抓力仪测量大鼠前肢抓力;HE染色和天狼星红染色观察大鼠腓肠肌细胞外基质变化;Western blot检测MMP-1、TIMP-1及Ⅰ型胶原的蛋白表达量。结果 老年对照组相对抓力低于成年对照组（P<0.01）,瘦质量%与成年对照组无统计学差异（P>0.05）,HE染色和天狼星红染色示细胞外基质较成年对照组增多,Ⅰ型胶原、TIMP-1的表达高于成年对照组（P<0.05）,MMP-1的表达与成年对照组无统计学差异（P>0.05）;与老年对照组相比,老年肌少症组相对抓 力未见显著性差异（P>0.05）,瘦质量%显著下降（P<0.01）,HE染色及天狼星红染色示细胞外基质增多,Ⅰ型胶原、TIMP-1的表达增多（P<0.05）,MMP-1的表达降低（P<0.05）。结论 增龄过程中骨骼肌MMP-1/TIMP-1失衡,影响细胞外基质代谢,导致细胞外胶原纤维增多,进而影响骨骼肌质量和功能,可能是肌少症发病的重要原因之一。     

Rosiglitazone reduces fatty acid translocase and increases AMPK in skeletal muscle in aged rats: a possible mechanism to prevent high-fat-induced insulin resistance

Background As an agonist of peroxisome proliferator-activated receptor-gamma （PPARy）, rosiglitazone can prevent acute fatty acid-induced insulin resistance in rats, however, the precise mechanisms by which rosiglitazone alleviates insulin resistance induced by high-fat diet need to be further investigated.Methods Wistar rats aged 23-24 weeks were divided into three groups： （1） aged control group （OC）, （2） high-fat diet （HF） group and （3） high-fat diet plus rosiglitazone maleate tablets （HF＋Rosi） treatment group （n=20 in each group）. Insulin sensitivity was evaluated by conscious hyperinsulinemic-euglycemic clamp technique. mRNA levels of fatty acid translocase （FAT/CD36）, AMP-activated protein kinase α1 （AMPKα1）, AMPKα2 and acetyl CoA carboxylase （ACC） of rat skeletal muscle were determined using real-time PCR, while muscle camitine palmitoyltransferase-1 （CPT-1β） was determined using semi-quantitative PCR. Protein expression levels of FAT/CD36, AMPK phosphorylation （reflecting AMPK activity）, P-ACC （inversely related with ACC activity） and muscle CPT-1M in rat skeletal muscles were measured using Western blotting.Results Aged rats fed by diet rich in fat for more than 8 weeks led to significant increases of plasma lipids, skeletal muscle intramuscular triglyceride and long-chain fatty acyl-CoA （LCACoA） compared to aged rats fed by normal chow diet （OC） （P 〈0.05）, which might correlate with the lower （reduced by 42.4%） whole body insulin sensitivity in HF rats. FAT/CD36 protein concentrations and mRNA levels increased in untreated HF aged rats （P 〈0.01） and high-fat diet induced a significant decrease in P-AMPK, P-ACC, CPT-1M protein concentrations and AMPKα2 and CPT-1β mRNA levels in rat skeletal muscles （P 〈0.05）. No change in AMPKα1 mRNA levels was observed in the HF group.Conclusion High-fat diet in aged rats results in a lipid accumulation and subsequent insulin resistance, while rosiglitazone can alleviate the insulin resistance by reducing fatty acid uptake as well as enhancing lipometabolism.     

游泳运动对衰老大鼠学习记忆、前额叶皮质氨基酸水平及nNOS表达的影响

摘 要］ 目的：观察游泳运动对衰老大鼠学习记忆能力及前额叶皮质(PF)氨基酸含量和神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达的影响,探讨游泳运动提高衰老大鼠学习记忆能力的可能机制。方法：选择20只24月龄SD衰老大鼠,随机分为衰老对照组及游泳运动组,10只5月龄大鼠作为成年对照组。成年和衰老对照组大鼠在笼内正常生活,不运动。游泳运动组大鼠采用递增负荷游泳运动,连续8周。8周后利用八臂迷宫实验测试大鼠空间学习记忆能力,检测大鼠PF中谷氨酸（Glu）及γ-氨基丁酸（GABA）水平,采用免疫组织化学结合图像半定量方法测量和分析PF中nNOS神经元的数量、面积及灰度。结果：与衰老对照组比较,游泳运动组大鼠Glu水平显著增加（P<0.05）,GABA水平增加,但差异无统计学意义（P>0.05）,Glu/GABA比值显著升高（P<0.05）。与衰老对照组比较,游泳运动组大鼠完成八臂迷宫时间显著缩短（P<0.05）,参考记忆及总记忆错误次数均显著减少（P<0.05,P<0.01）,工作记忆错误次数减少,但差异无统计学意义（P>0.05）。与衰老对照组比较,游泳运动组大鼠PF中nNOS免疫阳性细胞数量和面积均显著增加（P<0.05）,灰度值显著增强（P<0.05）。结论：长期游泳运动可提高衰老大鼠的学习记忆能力,其机制可能与游泳运动增加中枢兴奋性神经递质Glu合成,有效调整Glu/GABA比值及增强大脑PF内nNOS 的表达有关。     

有氧运动与六味地黄丸对实验性糖尿病大鼠骨骼肌GLUT-4基因表达的影响*

[目的]研究有氧运动与六味地黄丸对糖尿病大鼠血糖、胰岛素、葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)基因表达的影响.[方法]40只雄性Wistar大鼠尾静脉注射四氧嘧啶复制糖尿病动物模型.将成模的糖尿病大鼠按血糖和体质量随机分为糖尿病组、运动组、六味地黄丸组、运动+六味地黄丸组,同时设立正常对照组,6周后测定空腹血糖、血清胰岛素水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量测定骨骼肌GLUT-4 mRNA表达.[结果]糖尿病组大鼠血糖显著升高,GLUT-4mRNA含量显著降低;补充六味地黄丸和有氧运动干预后血糖显著下降,GLuT-4 mRNA含量显著增加.[结论]有氧运动和六味地黄丸能改善糖尿病大鼠糖代谢,降糖机制可能与增加骨骼肌GLUT-4 mRNA的表达有关.     

推拿按法对慢性激痛点模型大鼠骨骼肌超微结构的影响

目的观察推拿按法对慢性激痛点模型大鼠骨骼肌超微结构的影响,探讨推拿按法对慢性激痛点的治疗作用。方法将健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、按法组、利多卡因组,每组6只。采用钝性打击结合离心运动方式建立慢性激痛点大鼠模型。按法组大鼠予按法刺激局部激痛点,隔天治疗1次,每次7.5 min,共治疗7次;利多卡因组大鼠予0.5 mL的1%利多卡因注射液治疗,6 d 1次,共治疗3次。2周干预结束后,采用HE染色观察各组大鼠骨骼肌显微结构变化;采用透射电镜观察各组大鼠骨骼肌组织超微结构变化。结果(1)光镜下,模型组可见异常梭形形态肌纤维,表现为中间膨大,两端变窄,伴大量炎症细胞浸润和核内移现象;与模型组比较,按法组和利多卡因组均可见肌纤维粗细均匀、排列较整齐,炎症细胞减少。(2)电镜下,模型组肌原纤维排列紊乱,大量肌纤维断裂、破损,线粒体数量减少,结构异常,出现肿胀变圆、嵴结构减少或呈空泡状;按法组和利多卡因组表现接近,与模型组比较,肌原纤维排列趋于整齐,线粒体数量增多,结构恢复正常,呈细长杆状和卵圆形,或出现融合形态。各组肌节长度测量结果显示,模型组与空白组比较,肌节长度明显缩短,差异有显著统计学意义(P<0.01);模型组与按法组、利多卡因组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性激痛点病理特征为骨骼肌肌节挛缩、线粒体结构和数量受损。按法治疗能够舒张挛缩的肌节、促进线粒体的损伤修复,起到对慢性激痛点的去活化作用。     

运动对2型糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号通路PI3K/PKB磷酸化与表达的影响

目的 探讨运动对2型糖尿病大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)与蛋白激酶B(PKB)磷酸化和蛋白表达及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和mRNA表达的影响.方法 30只SD雄性大鼠随机分为对照组、糖尿病组与糖尿病运动组.糖尿病组与糖尿病运动组大鼠经高脂饲料喂养8周后,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg),注射后3周确认2型糖尿病建模成功,糖尿病运动组大鼠进行4周游泳训练.糖尿病组与糖尿病运动组大鼠建模过程始终喂养高脂饲料;对照组大鼠喂养普通饲料.糖尿病运动组大鼠4周游泳训练结束,于最后一次运动后恢复48 h,取材各组大鼠腓肠肌.采用Western blot法分析PI3K与PKB的磷酸化水平和蛋白表达,检测GLUT4蛋白表达:RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达.结果 与糖尿病组比较,运动改善2型糖尿病大鼠腓肠肌PKB磷酸化水平与蛋白表达(P<0.05);增加了糖尿病大鼠腓肠肌GLUT4蛋白与mRNA表达(P<0.01,P<0.05).结论 运动可能通过改善2型糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素信号通路蛋白激酶磷酸化和蛋白表达,增加对葡萄糖的吸收与利用.     

健康大鼠单侧肾切除后肾脏的代偿功能观察

目的观察正常大鼠摘肾后生理变化和代偿侧肾脏的病理变化，为肾移植的进一步推进与发展提供理论依据。方法采用尿肌酐检测试剂盒检测尿肌酐；考马斯亮蓝法检测尿蛋白；自动生化仪检测肾功能；PAS特殊染色方法观察肾脏病理变化。结果2～3月龄、7～9月龄和10～12月龄的肾切组大鼠的尿蛋白，肌酐比值于术后1个月显著升高（P〈0．001），其中2～3月龄和7-9月龄雄性肾切组的术后2个月降至正常，雌性肾切组的术后3个月降至正常，而10～12月龄的均在术后3个月降至正常；4～6月龄肾切组的与正常组的比较无明显差异（P〉0．05）。结论单侧肾切除术后1～2个月为关键期，直接关系到大鼠术后的近期和远期的安全性；年龄幼小或老年者单侧肾切除后肾脏损伤的风险大：雄性大鼠代偿功能较好。     

不同康复方法对青少年颈椎病的影响

目的观察中医推拿手法和牵引法联合佩戴颈围、功能锻炼对青少年颈椎病的康复影响。方法将60例青少年颈椎病患者分为两组,治疗组采用推拿手法联合颈围佩戴和功能锻炼进行康复,每次手法治疗后持续佩戴颈围,期间进行适当的颈部抗阻运动;对照组采用颈椎牵引联合颈围佩戴和功能锻炼进行康复,每次牵引后持续佩戴颈围,期间适当颈部的颈部抗阻运动。4周后统计临床疗效。结果经统计学分析显示,治疗组疗效优于对照组(P0.05)。结论推拿手法联合佩戴颈围和功能锻炼,明显优于颈椎牵引联合佩戴颈围和功能锻炼。