一氧化氮合酶在大鼠睾丸及附睾中的表达和定位

目的：了解一氧化氮合酶（NOS）在睾丸及附睾中的分布。方法：运用免疫组织化学ABC法观察2种NOS（nNOS,iNOS,eNOS）在性成熟大鼠睾丸、附睾中的分布。结果：①nNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、睾丸间质血管壁平滑肌细胞、附睾脂肪垫细胞;②iNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、管周类肌细胞、精原细胞、精母细胞、支持细胞、输出小管上皮细胞、附睾输出小管上皮细胞、腔内精子;③eNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、附睾脂肪垫细胞。结论：NOS广泛表达于睾丸及附睾组织细胞中,推测其参与了包括精子发生和精子成熟的生殖活动多个过程。     

骨桥蛋白在雄性小鼠生殖系统中的表达及意义

目的:检测骨桥蛋白(OPN)在小鼠睾丸、附睾、精子中的表达,探讨其意义。方法:用免疫组织化学方法检测OPN在正常小鼠睾丸及附睾中的表达情况,免疫细胞荧光法检测OPN在小鼠精子中的表达情况,分析OPN与雄性小鼠生殖能力的关系。结果:OPN在小鼠睾丸、附睾组织及精子上均具有特征性表达。在睾丸中,OPN表达于Sertoli细胞、Leydig细胞以及各级生精细胞,尤其是精原细胞、精子细胞和精子的胞质中;附睾内,OPN的表达主要见于各段上皮主细胞胞质中,部分基细胞、亮细胞中也可见到免疫阳性反应。并且附睾头部的免疫阳性染色相对较弱;免疫荧光染色则将OPN定位于附睾尾精子的顶体帽区及鞭毛。结论:小鼠睾丸、附睾及精子中均存在OPN的特异性表达,OPN可能参与精子的发生及成熟过程,并与精子的活力和受精能力密切相关。     

你对精子知多少

精子是男性生殖细胞,在脑垂体前叶分泌的促性腺激素刺激下,由睾丸内的精原细胞逐渐分化成精细胞,在附睾内成熟为精子,停留于贮精囊内。这个过程大约需要64～74天,精子很小,肉眼是看不     

人睾丸中各级生精细胞的鉴定

目的:建立人睾丸生精细胞鉴定方法.方法:用机械法离散人睾丸细胞,涂片,用Diff-Quik法染色显示细胞形态.在Hoffman光学镜头下根据细胞形态进行活细胞分类,选取各类细胞分别涂片,行17号染色体着丝粒探针化学显色原位杂交和c-kit抗原表达免疫细胞化学染色.结果:在配置Hoffman镜头的倒置显微镜下人睾丸圆形细胞主要可分为4群:支持细胞(Sertoli)细胞,粗线期初级精母细胞,精原细胞,圆形精子细胞.原位杂交结果为:Sertoli细胞、粗线期初级精母细胞、精原细胞均显示2个着丝粒信号,圆形精子细胞及精子显示单个着丝粒信号.抗c-kit抗体免疫化学染色显示:粗线期初级精母细胞、精原细胞反应呈阳性,Sertoli细胞、圆形精子细胞、精子反应呈阴性.结论:人睾丸各类细胞在活体形态、染色形态、染色体倍性、抗原表达上均有各自显著的特征,其中据Hoffman成像形态区分各级生精细胞是在活体状态下一种简便有效的鉴别人生精细胞的方法.     

转化生长因子 β1 在大鼠睾丸及附睾中的表达研究

目的 通过研究转化生长因子（TGFβ1）在大鼠睾丸、附睾中的表达特征,探讨其在男性生殖系统中的作用.方法 用免疫组化SP法检测TGFβ1蛋白在青春期SD大鼠睾丸、附睾中的表达与定位.结果 TGFβ1在大鼠睾丸和附睾中都有特征性表达.TGFβ1蛋白在睾丸内表达于生精细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞胞质及顶体;附睾中表达于主细胞胞质内,附睾上皮亮细胞、晕细胞和基细胞中均为阴性.结论 大鼠睾丸、附睾中TGFβ1蛋白的特征性表达提示,它们可由不同生精上皮细胞、间质细胞和附睾主细胞产生,可能以自分泌或旁分泌的形式作用于生殖细胞或间质细胞,直接或间接地影响精子的发生、发育和成熟过程,并与精子的活动和受精能力有关.     

赖氨酸和锌对精子核浓集的影响

取正常及缺锌大鼠睾丸和附睾、正常人及男性不育者精子，制成苯胺蓝染色标本及电镜标本观察，并对确定为精浆低锌的男性不育者给于口服硫酸锌治疗，观察锌含量的变化。结果正常大鼠睾丸曲细精管中精原细胞及精母细胞染色深，精子细胞及精子染色渐淡，附睾头部精子较尾部精子染色深（尾部精子几乎不着色）。正常人苯胺蓝染色阳性（着色深）精子数明显少于不育者。电镜图显示睾丸精子、附睾头部及尾部精子核逐渐致密，正常人精子核致密均匀，多数不育者精子核呈粗颗粒状。结果还显示缺锌大鼠生精细胞和精子苯胺蓝染色较对照大鼠深，表明赖氨酸含量增加。精浆低锌者口服硫酸锌治疗后，精浆锌含量明显提高。因而作者认为，赖氨酸含量增加导致精子核浓集障碍，可能是男性不育的一个重要原因。而缺锌可能会导致生精细胞和精子赖氨酸含量增加，口服硫酸锌治疗精浆低锌的不育者有一定疗效     

补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠的干预作用

目的研究补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠的促生精作用.方法以腺嘌呤灌胃SD大鼠,诱发生精细胞损伤,制作肾阳虚大鼠模型,观察补肾生精丸给药前后实验动物精子活率、精子计数、精子指数,睾丸、附睾的脏器系数及睾丸组织形态学改变.结果补肾生精丸可提高生精细胞损伤大鼠精子质量;增加附睾的脏器系数;使受损的睾丸组织逐渐恢复.结论补肾生精丸对腺嘌呤诱发的大鼠生精细胞损伤具有保护作用.     

慢性铝暴露对小鼠精子质量及睾丸细胞焦亡的影响

目的 研究铝暴露对小鼠精子质量及睾丸细胞焦亡的影响。方法 将12只成熟雄性c57bl/6j小鼠分为两组：对照组(n=6)、铝模型组(n=6),对照组用蒸馏水灌胃，铝模型组采用10 mg/(kg·d) AlCl₃灌胃，8周后，获取小鼠睾丸组织、附睾组织及附睾精子。对附睾精子进行精子质量分析，对睾丸及附睾HE染色进行病理检测；运用PCR、免疫组化检测睾丸组织细胞焦亡关键基因的mRNA和蛋白表达。结果 与对照组相比，铝暴露的小鼠睾丸重量、附睾重量、精子活力、精子数量均显著下降(P<0.01),精子畸形率显著增加(P<0.01)。睾丸形态学观察结果显示，铝暴露小鼠睾丸生精小管中细胞排列紊乱，生精小管的面积和直径减小，管内精子减少。PCR及免疫组化结果显示，铝暴露小鼠睾丸组织中焦亡关键基因Nlrp3、Caspase-1、Gsdmd和IL-1b的mRNA及蛋白表达均上调(P<0.01)。结论 铝暴露可降低小鼠的精子质量，促进睾丸细胞焦亡，从而损伤雄性生殖系统。     

人工诱导大鼠精索静脉曲张对睾丸和附睾超微结构的影响

通过左侧精索静脉主干结扎和左肾静脉部分结扎诱导SD大鼠精索静脉曲张成功后,利用透射电子显微镜对其睾丸,附睾的超微结构进行了研究。结果表明:精索静脉曲张所致睾丸、附睾超微结构的改变为双侧性。最常见的病变为支持细胞滑面内质网扩张或形成空泡;还常见到精子细胞核内基质空化,核膜破裂,线粒体鞘局部缺损。附睾柱状上皮细胞静纤毛稀少、局部缺乏。证实了支持细胞异常为导致生精细胞发育终止和过早释放的重要原因;也为附睾在精索静脉曲张源性不育中的作用提供了重要的形态学基础。     

雄性裸鼹鼠可育个体与不可育个体生殖系统结构与功能差异初探

目的 观察和分析雄性裸鼹鼠中可育个体和不可育个体生殖系统结构和功能的差异,初步探索雄性不可育个体不能繁育后代的原因。方法 健康雄性裸鼹鼠可育个体和不可育个体各5只,先采集一侧睾丸和附睾组织,称重后换算脏器系数;再采集另一侧睾丸组织,用中性福尔马林溶液进行固定后制备组织切片;取另一侧附睾用作精子计数、精子活动度的测定;采集血清测定血清中黄体生成素（LH）和睾酮（T）浓度。结果 与可育个体组相比较,不可育个体组的睾丸重量下降（P＜0.05）,附睾重量显著下降（P＜0.01）,且睾丸系数和附睾系数均显著下降（P＜0.01）;精子数量显著减少（P＜0.01）,精子活动度也显著减弱（P＜0.01）;血清黄体生成素和睾酮水平均显著降低（P＜0.01）;睾丸组织切片观察显示,不可育个体各级生精细胞严重脱落,排列混乱无序,支持细胞和间质细胞均有减少。 结论 雄性裸鼹鼠不可育个体生殖系统存在睾丸和附睾萎缩、生精功能下降和性激素分泌减少等现象。     

表皮生长因子受体在小鼠睾丸内免疫组织化学定位

采用生物素—抗生物素蛋白DCS体系(biotin-avidin DCS system)间接免疫荧光新技术,以176小鼠抗人A431细胞的表皮生长因子受体McAb进行表皮生长因子受体在小鼠睾丸内免疫组织化学定位的研究。在体实验结果显示,小鼠睾丸曲细精管的精原细胞和支持细胞内可见斑点状荧光,其它各级生精细胞均未见荧光。离体实验结果显示,体外培养的小鼠支持细胞内有相当强的荧光。证明精原细胞和支持细胞是表皮生长因子的靶细胞。     

低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响

目的：研究低剂量X射线对小鼠睾丸生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响。方法：采用免疫组织化学方法（SABC法）观察不同低剂量X射线照射后各类生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的剂量及时程效应关系。 结果：低剂量照射后各类生精细胞不同程度表达P53和Bcl-2。P53蛋白表达主要见于精原细胞和精母细胞,前者阳性率高于后者,并且随照射剂量增加而逐渐升高,而精子细胞和精子阳性率较低;Bcl-2蛋白主要表达于精子细胞和精子,并且随照射剂量增加而逐渐降低,而精原细胞和精母细胞Bcl-2蛋白表达阳性率较低。 结论：低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸各类生精细胞p53和Bcl-2蛋白表达具有一定规律性,两者在生精细胞表达的结果相反。     

棉酚对睾丸生精上皮及附睾上皮的影响

棉酚之作为男性抗生育剂,国内已集算了大量科研资料。本文试图用不同方法,做睾丸及附睾上皮超微结构的进一步观察。用成年雄性大白鼠随机分三组:正常对照、服用棉酚每日30mg/kg30天,同量服用50天。断头杀死取睾丸及附睾头,分别按超薄切片、扫描及冷冻复型常规制样,透射及扫描电镜观察。结果发现: (一)睾丸——曲细精管的改变与一般报导相似,但值得注意的是:①精子细胞可直接与精原细胞相毗邻;②精子形成过程中,精子细     

乙胺嘧啶对雄性大鼠抗生育作用的实验研究

目的 :研究乙胺嘧啶的抗生育作用及其可逆性。方法 :通过给SD雄性大鼠灌服不同剂量乙胺嘧啶 5 0d后 ,观察其睾丸和附睾质量及组织学形态、附睾尾部精子活率和畸形率、血清睾酮含量、雄鼠的致孕率变化。结果 :15 0mg·(kg·d) - 1 组变化最明显 ,睾丸质量和脏器系数下降 ,睾丸曲细精管生精细胞排列疏松和结构紊乱 ,附睾上皮细胞肿胀和纤毛脱落 ,致孕率显著下降 ,实验各组附睾尾部精子存活率和畸形率均有下降 ,但血清睾酮含量没有显著变化。结论 :乙胺嘧啶对睾丸生精过程和附睾上皮功能有影响 ,但不影响血清睾酮的分泌     

金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育模型大鼠精子质量与性激素含量的影响

目的:观察金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育大鼠精子质量及性激素含量的影响。方法:30只SD大鼠随机分为空白对照组、腺嘌呤组、金匮肾气丸组。应用自动精子质量分析仪检测实验大鼠的精子质量(精子密度、活率及活动度);同时应用放射免疫法测定血清睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量;透射电镜观察实验大鼠睾丸组织精子鞭毛密度,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞等结构。结果:与腺嘌呤组比较,金匮肾气丸组大鼠肾阳虚症状显著改善,精子密度、活率及活动度明显提高(P<0.05);金匮肾气丸组大鼠血清T含量明显提高(P<0.05),LH、FSH含量降低(P<0.05);电镜下金匮肾气丸组大鼠精子数量明显增多,大鼠睾丸组织受损的支持细胞明显改善。结论:金匮肾气丸可提高腺嘌呤致不育模型大鼠的精子质量,其机制之一可能是通过提高血清中T的含量及保护受损的支持细胞这一间接作用实现的。     

经输精管向附睾内注射甲酸棉酚的抗生育研究

对72只Wistar大鼠经输精管向附睾内注射甲酸棉酚,观察附睾中精子数量、形态、移动距离和附睾、睾丸的组织学改变。结果:注射12h后精子移动距离缩短,24h后精子计数下降,组织学观察见附睾管呈无精状态,睾丸曲细精管各级生精细胞出现变性等损伤性改变,精母细胞脱落入曲细精管管腔,注射甲酸棉酚后2～40d内交配的雌鼠全部不孕。     

睾丸或附睾精子ICSI治疗无精子症

目的 比较睾丸和附睾精子ICSI治疗无精子症的临床效果.方法 分别用睾丸或附睾来源的精子进行ICSI,对其受精率、优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率等指标进行评价.结果 睾丸精子的受精率明显低于附睾精子的受精率(P ＜0.001),两者的优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率差异无显著性(P＞0.05).结论 附睾精子较睾丸精子有更强的受精能力,但不影响治疗结局.     

附睾及睾丸精子结合ICSI治疗无精子症的研究

目的回顾性分析比较附睾精子和睾丸精子结合卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection,IC-SI）治疗无精子症的助孕结局。方法 167例无精子症患者经皮附睾精子抽吸术（PESA）取得附睾精子,69例无精子症患者经皮睾丸精子抽吸术（TESA）获得睾丸精子。女方进行常规超排卵。采用卵胞浆内单精子注射技术获得妊娠,比较两者的受精率、种植率和临床妊娠率。结果全部患者共41个治疗周期,附睾精子组和睾丸精子组的受精率分别为75.5%和73.9%,两组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。两组的种植率为40.7%、24.6%,临床妊娠率为53.9%、39.1%,两组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 PESA和TESA结合ICSI是男性无精子症患者的有效治疗方法 ,附睾是精子获能、成熟的重要部位,附睾精子优于睾丸精子,应首先选取附睾精子。     

经皮附睾和睾丸精子获取术的方法改进及在无精子症诊断和治疗的应用

目的:研究附睾精子抽吸术和睾丸精子获取术的方法改进及对无精子症患者的诊断和治疗价值.方法:应用改进的经皮附睾精子抽吸术(Pereutaneous epididymal sperm aspiration,PESA)和睾丸精子获取术(Testieular sperm extraction,TESE)对218例无精子症患者进行穿刺检查.结果:其中94例附睾抽吸液中存在精子(43.12%);28例患者睾丸中存在精子(12.84%);对其中16例附睾或睾丸中发现精子的患者采取PESA或TESE取精后行卵细胞胞质内单精子注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗.胚胎移植后妊娠率为37.50%.结论:PESA和TESE的改进方法为部分无精子症患者提供了更为安全的获精方式,是针对无精子症有效的治疗手段.     

计划生育

基　础　理　论 050001　乙胺嘧啶对雄性大鼠抗生育作用的实验研 究/胡向农…∥东南大学学报(医学版).—2004,23 (4).—211～214 目的:研究乙胺嘧啶的抗生育作用及其可逆性。 方法:通过给SD雄性大鼠灌服不同剂量乙胺嘧啶 50d后,观察其睾丸和附睾质量及组织学形态、附睾 尾部精子活率和畸形率、血清睾酮含量、雄鼠的致孕 率变化。结果:150mg·(kg·d)-1组变化最明显, 睾丸质量和脏器系数下降,睾丸曲细精管生精细胞 排列疏松和结构紊乱,附睾上皮细胞肿胀和纤毛脱 落,致孕率显著下降,实验各组附睾尾部精子存活率 和畸形率均有下降,但血清睾…