人肺癌组织中DNA聚合酶β表达及意义

目的:通过检测DNA聚合酶β(DNApolymerasebeta,DNApolβ)基因在人肺癌,人正常肺组织中蛋 白水平的表达情况来探讨其在肺癌发生发展过程中的作用和意义。方法:应用免疫组化的方法对67例肺癌, 27例正常肺组织中DNApolβ进行定位及蛋白表达低下率的比较,建立数据库,采用SPSS10.0软件对数据进 行统计学分析,以揭示DNApolβ蛋白表达与肺癌发生的关系。结果:在肺癌组织中,有50.7%(34/67)的人 DNApolβ表达低下;正常肺组织中,有14.80%(4/27)的人表达低下,二者表达低下率存在显著差异,χ2= 10.31,P<0.05,OR=5.92,95%C.I为(2.00,17.51),提示DNApolβ表达低下是肺癌发生的一个危险因素。 且DNApolβ表达与暴露因素如:肿瘤家族史、性别、吸烟状况有关,吸烟可以抑制其表达。肺鳞癌,细胞癌的 低下率远高于其他组织类型,有依鳞癌、小细胞癌、腺癌和其他类型依次降低的趋势χ2trend=9.36,P=0.02。 DNApolβ蛋白表达与TNM分期、细胞分化程度的高低、有无淋巴结转移、3年生存率没有显著相关。结论: DNApolβ表达在肺癌的发生中起着重要的作用,该基因的表达低下可能是肺癌发生的一个分子标志。     

脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β、Fas、p53基因mRNA的表达

目的:研究脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β(polβ)、Fas、p53基因mRNA的表达。方法:采用RT-PCR扩增及半定量分析方法,对22例脑胶质瘤、7例良性脑肿瘤及其相应瘤旁正常脑组织中DNApolβ、Fas、p53基因mR-NA进行检测。结果:与相应瘤旁正常脑组织相比,脑胶质瘤及良性脑肿瘤组织中DNApolβ、Fas基因mRNA高表达,p53基因mRNA低表达(P均<0.01)。脑肿瘤组织中DNApolβ与Fas基因mRNA的表达呈正相关((r=0.611,P<0.05)),与p53基因mRNA的表达无关;p53与Fas基因mRNA的表达亦无关。结论:p53基因mRNA低表达及DNApolβ和Fas基因mRNA高表达与脑肿瘤的发生发展及恶性程度有关。     

胃癌组织中DNA聚合酶β基因突变检测

目的:了解胃癌组织中DNA聚合酶β(polβ)基因的突变情况。方法:利用RT-PCR、单链构象多态性(SSCP)和序列分析对38例胃癌组织及其相应癌旁正常组织标本polβ基因进行检测。利用DNASIS、OMIGA等软件分析测序数据,Chou&Fasman算法推测polβ氨基酸序列二级结构。结果:38例胃癌组织标本中SSCP异常9例(23.7%);而对应的癌旁正常组织均未见异常。polβ在低分化胃癌中的突变率达57.1%(8/14),而在中、高度分化胃癌中的突变率为4.2%(1/24),差异有统计学意义(P<0.05)。突变分别为196位A→G(28位Asn→Ser),268位A→G(52位Lys→Arg),790位A→T(226位Asp→Val)。其中196位A→G突变可导致polβ酶蛋白的二级结构明显改变。结果:胃癌组织中的polβ基因突变可能与胃癌的发生、发展有关。     

人食管癌组织中DNA聚合酶β与XRCCl表达的相关性

目的 :观察XRCC1及DNA聚合酶 β(POLB)在人食管癌、癌旁及相邻的正常组织内的表达。方法 :应用免疫组化方法对 17例食管癌患者的癌组织、癌旁组织及相邻的正常组织中POLB和XRCC1的免疫反应性 (IR)进行定位及表达水平的比较。结果 :POLB IR和XRCC1 IR在癌组织、癌旁组织及正常组织中依次减弱 (P <0 .0 1或P <0 .0 0 1) ,2者在上述组织中定位相似 ,且表达呈显著正相关 (P <0 .0 1)。结论 :POLB和XRCC1在癌旁组织表达的相对提高可能为癌变的早期事件 ;2者表达的定位近似 ,提示 2者在形态和功能上密切相关。     

AChR-α3亚基mRNA在人淋巴组织中的表达

①目的 探讨人淋巴组织中乙酰胆碱受体α3(AChR—α3)亚基mRNA的表达及副交感神经系统对免疫系统作用的物质基础。②方法 应用地高辛尾段标记寡核苷酸探针原位杂交技术(ISH)，对32例人淋巴组织冷冻切片中AChR—α3亚基mRNA进行定性检测。③结果 32例人淋巴组织中有19例AChR—α3亚基mRNA表达阳性，阳性率为59．38％；淋巴结和脾脏AChR-α3亚基mRNA阳性表达差异无统计学意义(P=0．268)。④结论 人的免疫细胞可自身合成并表达AChR—α3亚基；ACh通过与免疫活性细胞上的相应的AChR结合而参与免疫系统功能的调节。     

DNA聚合酶β高表达与细胞癌变关系的研究进展

本综合分析了DNA聚合酶β的结构、功能以及其高表达后的分子效应,资料显示DNA聚合酶β高表达可以导致细胞自身突变率增加和遗传不稳定性,且DNA聚合酶β高表达在肿瘤的起始、演进和治疗中有重要的研究价值。     

人胃癌组织p73基因mRNA表达的研究

为了解该基因在胃癌发生发展中的作用 ,我们应用反转录多聚酶链反应技术 (ＲＴ ＰＣＲ)对胃癌及正常组织标本中ｐ73ｍＲＮＡ表达水平进行了分析。1　材料与方法1.1　研究对象　　共收集 1999年 10月至 2 0 0 0年 3月天津 2 5 4医院和西南医院手术切除标本 3 6例 ,均未经过放疗和化疗。每例包括原发癌肿和手术切缘的正常胃粘膜。经病理学检查证实肿瘤组织中癌细胞占 80 %以上 ,正常组织无癌细胞。标本放入 -80℃冰箱待检。1.2　引物　　参照文献 [1]合成 1对ｐ73基因的引物扩增其第 1～ 3外显子 ,扩增片段 166ｂｐ ,引物序列 :上游 5′ ＣＧ…     

血清DNA聚合酶活性对胃癌的诊断价值

采用改良１２５Ｉ－ＵｄＲ法检测了１３４例胃癌患者、１１３例良性胃病患者和１０５例正常对照者的血清ＤＮＡ聚合酶相对活性，结果表明：（１）胃癌患者血清ＤＮＡ聚合酶阳性率为７２．４％，该酶对良、恶性胃疾病的鉴别诊断特导性为９６．３％；（２）未分化癌患者血清ＤＮＡ聚合酶相对活性高于中、高分化胃癌患者；（３）Ⅳ期胃癌血清ＤＮＡ聚合酶相对活性及阳性率均显著低于Ⅰ－Ⅲ期患者；（４）手术后１０天内血清ＤＮＡ聚合酶阳性者绝大部分转阴。上述结果表明血清ＤＮＡ聚合酶活性测定有助于胃癌的辅助诊断和良、恶性胃疾病的鉴别诊断。     

肝素酶mRNA在胃癌组织中的表达及其与c-met表达的关系

目的　研究胃癌组织中肝素酶mRNA的表达与胃癌临床病理特征及肿瘤微血管密度之间的关系 ,并探讨胃癌组织中的肝素酶表达增高的机制。方法　采用逆转录 -聚合酶链反应(RT PCR)法检测 4 7例手术切除的胃癌组织及癌旁组织中肝素酶mRNA的表达 ,免疫组织化学法检测c met在胃癌组织中的表达 ,CD34免疫组织化学染色 ,计数肿瘤微血管密度。结果　胃癌组织中肝素酶表达阳性率明显高于相应的癌旁组织 (74 5 %vs 19 1% ,P <0 0 1)。肝素酶表达阳性组的胃癌组织 ,其微血管密度显著高于阴性组 (5 1± 15vs 31± 10 ,P <0 0 1)。肝素酶mRNA的表达与胃癌患者的肿瘤直径、淋巴结转移、浸润深度以及TNM分期有关 ,与胃癌患者的年龄、性别、分化程度及有无远处转移无关。胃癌组织中c met阳性率为 85 1% ,与肝素酶mRNA表达之间的相关系数为 0 714 (P <0 0 1)。结论　胃癌组织中肝素酶mRNA表达水平增高 ,肿瘤微血管密度增高 ,促进了胃癌的生长、浸润及转移 ,与胃癌预后不良的临床病理特征有关。c met癌基因可能参与了肝素酶的表达调控。     

胃癌组织中错配修复基因hMSH2 mRNA的表达

目的 :研究hMSH2mRNA在胃癌、癌旁及正常胃粘膜组织中的表达。方法 :应用原位杂交技术 ,检测了2 7例胃癌、10例癌旁组织和 19例正常胃粘膜组织中hMSH2mRNA的表达。计数阳性细胞数。结果 :胃癌、癌旁组织与正常胃粘膜组织hMSH2mRNA原位杂交阳性率分别为 74 1% ,6 0 0 % ,6 8 4%。胃癌杂交阳性细胞数 (42 1±2 5 9) ,较癌旁 (99 7± 16 8)与正常组织 (175 8± 2 6 4)显著减少 (P <0 0 1) ;不同临床分期胃癌组织间阳性细胞数差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :DNA错配修复基因hMSH2mRNA低表达可能导致基因组不稳定性进而诱发肿瘤     

不同分化程度胃癌组织中hMSH2 mRNA的表达

目的 :研究正常胃粘膜和不同分化程度胃癌胃粘膜组织中hMSH2mRNA的表达。方法 :应用原位杂交技术 ,对 2 7例胃癌 (高、中、低分化分别为 5例 ,9例与 13例 )和 19例正常胃粘膜组织中hMSH2mRNA表达进行检测。结果 :癌组织中杂交信号阳性细胞数与正常组织相比显著减少 (P <0 0 5 )。低分化胃癌 (2 1.8± 10 .6 )与中分化胃癌 (5 0 .9± 19.3)及高分化胃癌 (72 .5± 2 3.3)相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :hMSH2mRNA表达与胃癌分化程度有关 ,胃癌细胞的分化程度愈低 ,其hMSH2mRNA表达愈低。hMSH2可能对胃癌细胞存在分化诱导或转录水平调控     

胃癌组织中DNA聚合酶β基因突变特点分析

目的:探讨人胃癌DNA聚合酶β(polβ)基因突变的特点. 方法:对32例人胃癌组织及32例正常对照组织中提取总RNA,进行RT-PCR,SSCP,对PCR产物克隆后以Sanger's法测序,并采用Omiga及Dansis软件分析结果. 结果:人胃癌标本的polβ基因突变率21.9%. 测序分析了7例SSCP异常中的3例,其突变分别为196位A→G,268位A→G,790位A→T;经OMIGA软件分析,这3个polβ的点突变均导致了氨基酸的改变,具体形式为:核酸196位A→G导致氨基酸28位Asn→Ser;核酸268位A→G导致氨基酸52位Lys→Arg;核酸790位A→T导致氨基酸226位Asp→Val. DNASIS软件Chou-fasman算法推测,polβ的196位A→G突变可以导致polβ酶蛋白的二级结构图明显改变. 结论:人胃癌组织polβ基因突变率达21.9%;这3个polβ的点突变都导致了氨基酸的改变,196位A→G突变可以导致polβ酶蛋白的二级结构明显改变.     

RNA斑点印迹法检测人食管癌DNA聚合酶β的基因表达

目的 :探讨人食管癌组织DNA聚合酶 β(polβ)RNA水平的表达。 方法 :提取 5 1例食管癌患者的手术标本组织 ,包括 :17例癌灶组织 ,17例癌旁组织 ,17例“正常”组织细胞总RNA ,以生物素标记的polβcDNA探针进行RNA斑点印迹。结果 :DNApolβRNA水平的表达癌组织高于癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ,癌旁组织高于“正常”组织 (P <0 .0 5 ) ,癌组织高于“正常”组织 (P <0 .0 1)。结论 :人食管癌组织及癌旁组织的DNApolβ基因RNA水平表达显著高于“正常”组织 ,提示DNApolβ的过表达可能在食管癌的发生、发展中起 作用。     

肺癌组织中WISP-1 mRNA和蛋白的表达

目的:探讨人肺癌组织中WNT诱导的分泌型蛋白-1(WISP-1)基因的表达与临床病理因素的关系.方法:采用real-time PCR和免疫组化法检测原发性肺癌患者的癌组织和癌旁正常肺组织中 WISP-1 mRNA和蛋白的表达.结果:肺癌组织和正常肺组织中WISP-1 mRNA的相对表达量分别为(-3.09±3.53)μg/L和(-5.82±3.67)μg/L,WISP-1蛋白阳性率分别为63.3%和39.2%,肺癌组织中WISP-1 mRNA的相对表达量和蛋白阳性率均高于正常肺组织(P均＜0.05).肺癌组织中WISP-1 mRNA的表达与病理学类型、年龄有关(P＜0.05).多元线性回归分析显示:病理类型、年龄、家族史、转移、性别等对WISP-1 mRNA的表达有影响.结论:WISP-1基因可能是原发性肺癌发生发展过程中的重要生物学标志物,WISP-1基因表达的蛋白产物可作为临床干预治疗的重要靶蛋白.     

胃癌组织中基质金属蛋白酶-2和E-钙黏附素检测

目的:探讨胃癌组织中基质金属蛋白酶 -2(MMP- 2)和E 钙黏附素 (E- CD)的表达。方法:采用原位杂交法,检测 72例胃癌(其中复发 39例)组织中MMP- 2mRNA和E- CDmRNA的表达,并观察 2者与浸润深度和淋巴结转移之间的关系。结果:胃癌组织中MMP -2mRNA和E CDmRNA的阳性表达与浸润深度和淋巴结转移有关。复发患者的 2种胃癌组织 (复发前手术切除标本;本次胃镜活检标本)与非复发胃癌组织标本的MMP 2mRNA和E- CDmRNA的阳性表达率差异有统计学意义(MMP 2:P<0. 01;E CD:P<0. 05)。MMP- 2mRNA阳性表达的胃癌组织中E CDmRNA的阳性表达率低于MMP 2mRNA阴性表达的胃癌组织, 2者呈负相关 (r=-0. 273,P<0. 05)。结论:MMP- 2mRNA和E- CDmRNA的表达与胃癌的浸润、转移及复发有关。检测MMP- 2mRNA和E- CDmRNA在胃癌患者胃镜活检组织中的表达可能有助于判断预后及胃癌转移复发潜能。     

胃癌组织中多巴胺受体亚型D4和c-fos mRNA的表达

目的:检测胃癌组织中多巴胺受体亚型D4和癌基因c-fos mRNA的表达,探讨2者在胃癌发生、发展中的作用.方法:应用原位杂交技术检测42例胃癌和35例正常胃黏膜组织中的D4和c-fos mRNA的表达,并分析2者与临床病理指标的关系及2者的相关性.结果:与正常胃黏膜比较,胃癌组织中D4阳性率明显降低(P＜0.01),c-fos阳性率明显升高(P＜0.01).D4在肿瘤直径≥5 cm组中的阳性率明显低于＜5 cm组(P＜0.05),但与肿瘤分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移无关(P＞0.05);c-fos在高中分化及肿瘤直径≥5 cm胃癌组中的阳性率分别高于低分化组(P＜0.01)和＜5 cm组(P＜0.05),而与肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移无关(P＞0.05);胃癌组织中D4和c-fos的表达呈负相关(P＜0.05),D4表达阳性的胃癌组织中c-fos阳性率明显低于D4阴性组.结论:D4和c-fos在胃癌发生及癌细胞增殖中起重要作用,且c-fos与胃癌分化密切相关.胃癌组织中D4低表达与c-fos高表达可能协同参与了胃癌的发生发展.     

EXPRESSION OF SOM mRNA IN CHRONIC AT-ROPHIC GASTRITIS DETECTED WITH IN SITU HYBRIDIZATION

应用原位杂交和免疫组织化学技术，对癌前疾病慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）组织中生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＯＭ）ｍＲＮＡ和ＳＯＭ免疫反应性（ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ，ＩＲ）进行了研究。结果显示：ＣＡＧ组织中，ＳＯＭｍＲＮＡ杂交阳性率为５３．８％，杂交阳性信号细胞明显高于正常组织（Ｐ＜０．００１）。ＳＯＭＩＲ高于ＳＯＭｍＲＮＡ原位杂交阳性信号细胞。结果提示：ＳＯＭｍＲＮＡ的表达增高参与ＣＡＧ细胞分裂、分化的内分泌调节。     

Vcp mRNA在胃癌中表达的研究

目的：研究Vcp mRNA表达与胃癌及淋巴结转移的关系,寻找术前预测淋巴结转移危险度及预后的标志基因。方法：采用RT-PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳EB染色法,检测42例胃原发癌、正常黏膜、淋巴结转移癌中Vcp mRNA的表达。结果：Vcp mRNA在上述组织细胞中均有表达,胃原发癌和淋巴结转移癌明显高于正常黏膜（P〈0.01）,且胃原发癌VcpmRNA表达与转移淋巴结数量具有相关性。结论：胃原发癌Vcp mRNA过度表达的患者淋巴结转移范围及程度相对较重,癌细胞侵袭力较强,宜行扩大根治术;术前RT-PCR检测胃原发癌Vcp mRNA表达有助于确定治疗方案及判断预后。     

Polι在膀胱尿路上皮癌细胞株及肿瘤组织中mRNA的表达

目的 检测DNA聚合酶ι(Polymerase iota,Polι) 在尿路上皮癌细胞株及肿瘤组织的表达,探讨Polι在尿路上皮癌组织表达的意义.方法 培养尿路上皮癌细胞株BIU87、T24,反转录聚合酶链式反应(Reverse transciptase-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测Polι在尿路上皮癌细胞株的表达;收集人膀胱黏膜正常组织及临床膀胱尿路上皮癌、肾盂尿路上皮癌组织标本,检测组织标本中Polι的表达.结果 Polι在尿路上皮癌细胞株有丰富表达,显著高于膀胱正常黏膜组织;Polι在膀胱尿路上皮癌及肾盂癌组织的表达显著高于膀胱正常黏膜组织的表达(P<0.01),并与尿路上皮癌的分级有关.结论 Polι在尿路上皮癌组织的高表达可能与尿路上皮癌的发生、发展有关.