应用RT-PCR法检测肝细胞癌的HCV表达

目的 研究肝细胞癌的发生与丙肝病毒感染的关系.方法 应用聚合酶链式反应对肝细胞癌(55例)和肝内胆管结石的肝组织(21例)的石蜡包埋标本中的HCV-RNA和HBV-DNA进行检测.结果 肝癌组和结石组的HCV-RNA阳性例数分别为18例(32.7%)和1例(4.8%),OR=9(P<0.05).结论 HCV感染是HCC的重要致病因素,用PCR技术检测石蜡包埋肝组织中的HCV-RNA是一种简便、特异、灵敏的方法.     

丙型肝炎患者外周血单个核细胞中HCV-RNA含量检测的临床意义

目的:了解丙型肝炎(丙肝)患者外周血单个核细胞(PBMC)中丙肝病毒核酸(HCV-RNA)的存在情况并探讨其临床意义。方法:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,对65例丙肝患者的血清和PBMC中HCV-RNA进行检测。结果:65例丙肝患者血清和PBMC中HCV-RNA阳性分别为41例(63.1%)和35例(53.8%),其中34例急性丙肝患者血清、PBMC中HCV-RNA阳性分别为21例(61.8%)、13例(38.2%),31例慢性丙肝患者血清、PBMC中HCV-RNA阳性分别为20例(64.5%)、22例(71.0%),慢性丙肝患者PBMC中HCV-RNA检出率与急性相比,差异有统计学意义(2χ=5.74,P<0.05)。3例(2例慢性、1例急性)丙肝患者PBMC中HCV-RNA阳性,但血清HCV-RNA阴性。9例(全为急性)丙肝患者PBMC中HCV-RNA阴性,但血清HCV-RNA阳性。32例(12例急性、20例慢性)丙肝患者血清和PBMC中HCV-RNA均阳性,且PBMC中HCV-RNA的含量均低于血清,两者含量呈正相关。结论:PBMC为HCV肝外贮存场所,其HCV含量依赖血清中HCV的含量;PBMC中HCV在丙肝患者的病情慢性化过程中可能起一定作用;实验室可以通过浓聚血液中PBMC的浓度来提高其HCV-RNA的检出率,故临床医生在对丙肝患者进行血清HCV-RNA定量检测的同时开展PBMC中HCV-RNA检测可以减少漏诊,可作为慢性丙肝患者的选择治疗及预后判断的重要指标。     

HCV-RNA检测在提高HCV感染患者检出率的试验研究

目的:探讨组合检测丙肝抗体和丙肝核心抗原并联合丙肝RNA在丙肝临床诊断中的意义。方法:对13 117例患者进行HCV抗体和HCV抗原组合检测,对两种方法中的阳性标本进行HCV-RNA确证检测。结果:13 117例患者中,丙肝抗体阳性188例,丙肝核心抗原阳性52例,其中丙肝抗体和核心抗原均阳性者48例,单独核心抗原阳性4例,总阳性数192例。丙肝抗体阳性188例中HCV抗体阳性标本中有121例HCV-RNA阳性,检出率为64.4%;有48例HCV-c Ag阳性,检出率为25.5%(48/188)。丙肝抗体和核心抗原均阳性者HCVRNA阳性45例,检出率为93.75%;单独核心抗原阳性4例中有3例HCV-RNA阳性,检出率75%。结论:抗-HCV和HCV-c Ag组合作为HCV感染初筛实验联合HCV-RNA确证检测,对HCV感染患者阳性检出率更高,假阳性率更低,可作为临床对HCV感染患者早期诊断和治疗的有效检验程序。     

丙肝病毒核心抗原的检测在诊断丙肝中的意义

目的：通过分别检测丙肝病毒抗体（HCV-Ab）、丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）和定量检测HCV-RNA,探究丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的意义。方法对36例丙肝抗体阳性患者和120例丙肝抗体阴性患者同时检测HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA。丙肝抗体检测采用间接ELISA法,丙肝核心抗原检测采用双抗体夹心ELISA法,丙肝HCV-RNA检测采用荧光PCR法定量检测。结果36例丙肝抗体阳性组中,HCV-cAg阳性28例,HCV-RNA阳性25例。120例丙肝抗体阴性的门诊肝炎患者中HCV-cAg阳性有2例,HCV-RNA阳性有1例。结论 HCV-cAg检测可以缩短HCV抗体检测窗口期,特异性高,操作简便,可将二者联合起来,提高丙型肝炎病毒的检出率及准确度。     

慢性丙型肝炎患者体液HCV-RNA检测结果与传播途径分析

目的了解慢性丙型肝炎(丙肝)患者体液中HCV含量及分布情况,为了解HCV的传播途径和预防丙肝以及治疗方法提供依据.方法用RT-PCR方法检测200例我院抗-HCV阳性、肝功亦有改变的慢性丙肝患者的血清,以 HCV-RNA阳性患者的唾液、尿液、部分患者精液以及部分患者阴道分泌物为标本再进行RT-PCR检测.结果200例抗-HCV阳性标本中有198例HCV-RNA阳性,唾液有143例HCV-RNA阳性,尿液有156例HCV-RNA 阳性,精液、阴道分泌物均有HCV-RNA阳性结果检出.结论慢性丙肝患者体液中均含HCV,HCV可通过这些体液传播.     

石蜡包埋组织中HPVB_(19)检测的PCR方法及临床应用

通过所建立的检测石蜡包埋组织中人细小病毒B_(19)的套式PCR技术,检测了经石蜡包埋的66例自然流产组织、20例同期健康妇女人工流产组织及30例死胎儿肝脏组织、20例同期因患各种疾患死亡而尸检的新生儿肝组织。结果显示:自然流产组阳性率为30.3%而对照组阳性率为5%;死胎儿肝脏标本中有8例阳性而对照组中仅有1例阳性。套式PCR检测石蜡包埋组织中HPVB_(19)技术,为回顾性诊断流行病学调查,提供了一个有效的手段。     

荧光定量PCR检测石蜡组织中结核杆菌的临床应用

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测石蜡包埋组织结核分枝杆菌DNA（TB—DNA）在结核病诊断中的应用价值。方法33例石蜡包埋组织标本采用FQ—PCR技术检测TB—DNA,同时进行组织病理学检查,分别计算FQ—PCR和病理学检查的灵敏度和准确度。结果29例临床诊断为结核病的组织标本中,FQ—PCR检测阳性26例,病理学拟诊为结核阳性20例,4例临床诊断非结核病的标本中,FQ—PCR检测和病理学检查都为阴性,两者的灵敏度和准确度分别为89．66％、90．91％和68．97％、72．73％。结论FQ—PCR技术检测石蜡包埋组织的TB—DNA用于结核病的诊断具有较高的灵敏度和准确度,与病理学检查相结合可以大大提高结核病的检出率。     

丙型肝炎患者抗-HCV和HCV-RNA的联合检测及临床意义

目的分析丙型肝炎患者抗-HCV和HCV-RNA的检测结果，探讨其联合检测的临床意义。方法用ELISA法和荧光PCR法分别检测抗-HCV和HCV-RNA。结果抗-HCV和HCV-RNA同时阳性在急性丙肝和慢性丙肝患者中分别占42．1％和86．6％，有显著性差异P〈0．01。有19例抗-HCV阴性丙肝患者检测出HCV-RNA阳性。结论抗-HCV和HCV-RNA同时阳性且HCV-RNA高含量预示着病情向慢性化发展，抗-HCV和HCV-RNA的联合检测有助于丙肝的早期明确诊断。     

丙型肝炎病毒检测的方法学评价及临床应用价值

目的:检测丙肝病毒的HCV-Ab、CAg、RNA,对检测方法进行评价,并探讨其临床应用价值。方法:123例已知HCV-RNA结果的临床标本同时检测HCV-CAg、HCV-Ab。结果:HCV-RNA阳性的93例样本中,有92例HCV-CAg阳性,1例阴性;30例HCV-RNA阴性的样本中,HCV-CAg阴性29例,1例阳性;93例HCV-RNA阳性样本中HCV-CAb阳性87例,6例阴性;30例HCV-RNA阴性的标本中,10例HCV-Ab阳性,20例阴性。结论:HCV-Cag对HCV检测的特异性高于HCV-Ab。HCV-RNA、HCV-Ab、HCV-CAg联合检测能提高HCV的阳性检出率,HCV-RNA、HCV-Ab、HCV-CAg联合检测能提高HCV的阳性检出率。     

石蜡包埋组织的p16基因甲基化特异性PCR技术

目的以石蜡包埋组织为材料进行DNA甲基化特异性PCR(MSP)检测,研究其可行性.方法40例食管组织以中性福尔马林固定、包埋、脱蜡、DNA样品制备和亚硫酸盐修饰后进行PCR测定.2例MSP阳性的冰冻甲状腺组织以70%酒精、丙酮和中性福尔马林分别固定及石蜡包埋后,非甲基化引物PCR扩增,比较不同固定剂的MSP效果.结果石蜡包埋食管组织MSP检出率与文献报道的冰冻组织MSP检出率相同,三种常用方法固定的甲状腺组织均能获得理想的MSP效果.结论MSP通过选择合适的实验条件,可应用于石蜡包埋组织.