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相似文献
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1.
为研究叶下珠对人肝癌细胞SMMC7721的影响,采用噻唑蓝(MTT)还原法和氚标胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法观察叶下珠提取物对人肝癌细胞SMMC7721细胞活性及DNA合成的影响。结果发现,经叶下珠提取物处理后,SMMC7721活力明显减弱,~3H-TdR掺入率明显降低,DNA合成抑制率与药物剂量呈线性关系。结论:叶下珠具有杀伤人肝癌细胞SMMC7721和抑制其增殖作用。  相似文献   

2.
华蟾毒精抗癌作用的体外研究   总被引:20,自引:0,他引:20  
赵建斌  崔勤  张雪  王文亮  蒋永培 《医学争鸣》2001,22(16):1504-1507
目的:了解中药成分华蟾毒精(cinobufagin,CBG)的体外抗癌活性及其主要作用机制。方法:采用流式细胞术检测华蟾毒精对体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721,人白血病细胞株HL-60的细胞毒作用,经透射电子显微镜观察CBG作用后培养的SMMC-7721及HL-60细胞超微结构的改变。结果:华蟾毒精有显的抗癌活性,对HL-60细胞的IC50为1.25ug.L^-1,对SMMC-7721细胞的IC50为2.72ug.L^-1,能非常显地减少HL-60,SMMC-7721细胞S期DNA含量及增值指数,诱导癌细胞凋亡,透射电镜观察显示:华蟾毒精作用后,可见成片的细胞坏死,细胞凋亡,内质网肿胀,线粒体肿大呈空泡样,溶酶体增多等细胞结构改变,结论:华蟾毒精有确切的抗癌作用,其作用产生的机制是多方面的,既能抑制癌细胞DNA的生物合成,又能诱导细胞凋亡。  相似文献   

3.
目的:研究干扰素-α对人肝癌SMMC7721细胞的增殖及迁移的抑制作用,探讨其抗肿瘤作用的机制。方法:常规培养的人肝癌SMMC7721细胞,加入干扰素-α孵育24 h后,以MTT法检测干扰素-α对肿瘤细胞增殖的影响;Boyden小室法检测肝癌细胞侵袭能力的变化,通过Annexin V-FITC检测干扰素-α诱导SMMC7721细胞组的凋亡情况。结果:干扰素-α可以明显抑制体外SMMC7721细胞的增殖,诱导细胞凋亡,导致Boyden小室穿膜的肿瘤细胞数明显下降。结论:干扰素-α可以直接抑制体外肝癌细胞SMMC7721的增殖和迁移并诱导细胞凋亡。  相似文献   

4.
目的 探讨雷氏大疣蛛Macrothele raveni毒素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及细胞周期的抑制作用,进一步探讨其作用的分子机制。方法 采用MTT法测定雷氏大疣蛛毒素对SMMC一7721细胞增殖作用的影响;采用[^3H]TdR掺入法检测雷氏大疣蛛毒素作用前后SMMC7721细胞DNA合成的变化;采用流式细胞术(FCM)探讨雷氏大疣蛛毒素对SMMC-7721细胞凋亡率和细胞周期的影响;采用Western Blot方法研究雷氏大疣蛛毒素对细胞周期相关c-myc蛋白表达的影响。结果 MTT方法表明雷氏大疣蛛毒素对SMMC-7721细胞增殖有较强的抑制作用(P〈0.05),时效和量效关系良好。雷氏大疣蛛毒素可以抑制SMMC-7721细胞DNA的合成。流式细胞仪检测结果发现雷氏大疣蛛毒素作用后SMMC-7721细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞在G2/M期。Western Blot方法进一步检测到雷氏大疣蛛毒素作用SMMC7721细胞72h后,c-myc蛋白表达减弱。结论 雷氏大疣蛛毒素可以抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和DNA的合成,其机制可能是诱导细胞凋亡,使细胞周期相关c-myc蛋白表达减弱,导致细胞周期的变化。  相似文献   

5.
目的在体外检测Nrf3基因对肝癌SMMC7721的生长影响作用。方法构建其融合蛋白真核表达载体,脂质体介导该真核表达载体转染肝癌SMMC7721细胞系,FCM观察其在体外对肝癌SMMC7721细胞系细胞周期和凋亡的影响;荧光显微镜观察候选基因亚细胞定位。结果Nrf3在肝癌SMMC7721细胞中表达,荧光显微镜下观察Nrf3定位于细胞核内。FCM分析显示Nrf3影响下肝癌SMMC7721G2/M+S期细胞所占比例较对照组明显减少,G0/G1细胞所占比例明显增加。证实Nrf3可抑制肝癌SMMC7721的DNA合成和有丝分裂,促使细胞阻滞于G0/G1期,抑制肝癌SMMC7721细胞的体外生长。FCM分析,未观察到明显的"亚G1"峰(即凋亡峰),提示Nrf3在体外对肝癌SMMC7721细胞的凋亡无影响。结论Nrf3在体外具有抑制肝癌细胞增殖的功能,对肝癌细胞的凋亡无影响,为肿瘤抑制基因。  相似文献   

6.
目的 探讨羟考酮对 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞增殖抑制的可能机制。方法 体外培养 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞,用 CCK–8 法检测不同浓度羟考酮对 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞增殖的影响 并计算药物 IC50。细胞划痕实验检测不同浓度羟考酮对 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞迁移的影响。Transwell 实验检测不同浓度羟考酮对 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞侵袭的影响。结果 CCK–8 实验提示羟考酮对 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞增殖有抑制作用,其中羟考酮抑制 HepG2 人肝癌细胞的 IC50 为 1.236mg/ml, 抑制 SMMC–7721 人肝癌细胞的 IC50 为 1.461mg/ml,对两种肝癌细胞系的增殖抑制随着剂量增大而增强。细胞 划痕实验和 Transwell 实验显示随着浓度的升高,羟考酮对 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞的迁移和侵袭有显 著抑制作用,形态观察和细胞计数显示羟考酮可减少肝癌细胞的密度和数量,显著抑制肝癌细胞的集落形成并促 进肝癌细胞凋亡。结论 羟考酮具有抑制 HepG2 和 SMMC–7721 人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。  相似文献   

7.
目的:观察人DNA MTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC-7721内源性DNA MTase基因mRNA的表达的影响。方法:将将建的包含正、反义DNA MTase基因片段的真核表达载体用脂质体法将其转染入肝癌细胞系SMMC-7721;采用RT-PCR法观察DNA MTase基因mRNA表达变化。结果:PCR法扩增外源性NeoR基因证实证用脂质体法成功将重组载体转染入细胞:RT-PCR法检测DNA MTase基因mRNA表达,显示转染反义DNA MTase基因片段的SMMC-7721细胞中DNA MTase基因mRNA表达下调。结论:人DNA MTase基因反义基因转染是一种有效,可靠的抑制肝癌细胞系SMMC-7721DNA MTase基因表达的方法。它为更多了解DNA MTase在肝癌发生的作用提供了帮助。  相似文献   

8.
目的:观察螺内酯(spironllactone)对体外培养的人毛囊生长的影响。方法:建立人毛囊体外培养模型,加入不同浓度的螺内酯,通过目镜测微尺测量毛囊的长度,利用^3H-胸腺嘧啶核苷酸(^3H-TdR)掺入法检测毛囊DNA合成率。结果:螺内酯各浓度组毛囊生长长度与空白对照组相比无明显差异(P〉0.05)。^3H-TdR掺入法检测与长度检测结果一致。结论:螺内酯对体外培养的人毛囊的生长无促进和抑制作用。  相似文献   

9.
王宏光  李开宗等 《医学争鸣》2001,22(12):1072-1072
目的:探讨人肝癌细胞株血管内皮生长因子(VEGF)及其受体的表达,进一步认识VEGF在肝癌血管形成中的作用机制。方法:以人脐静脉血管内皮细胞系ECV304和小鼠成纤维细胞系L929作为对照,采用免疫组化染色及RT-PCR,检测体外培养的人肝细胞肝癌细胞系SMMC7721、HHCC和HepG2中VEGF及其受体的表达。结果:SMMC7721、HHCC和HepG2细胞均有VEGF的表达,同时VEGF受体1(Flt-1)在SMMC7721细胞中也有表达;而HHCC和HepG2细胞则表达VEGF受体2(KDR)。  相似文献   

10.
目的探讨大豆黄酮对肝癌SMMC7721细胞糖代谢和癌干细胞CD133基因表达的影响。方法培养人肝癌SMMC7721细胞并用大豆黄酮处理。MTT法测定细胞的成活率,用试剂盒法测定人肝癌SMMC7721细胞中的己糖激酶活性,并用WesternBlot方法测定癌干细胞CD133蛋白的水平。结果大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖具有抑制作用,同时,可降低人肝癌SMMC7721细胞中己糖激酶活性和癌干细胞CD133蛋白的水平。结论大豆黄酮能抑制人肝癌SMMC7721细胞的增殖,降低人肝癌SMMC7721细胞中己糖激酶活性和癌干细胞CD133蛋白的水平。  相似文献   

11.
目的探讨盐酸氮芥抑制人肝癌HepG2细胞生长的可能机制。方法以盐酸氮芥处理人肝癌HepG2细胞,运用DNA片断化分析、流式细胞术检测肝癌HepG2细胞的凋亡和细胞周期的改变。结果DNA片断化分析显示没有出现典型“梯形”条带,流式细胞术显示各浓度组细胞凋亡率之间差异无显著性(P〉0.05),但有明显的细胞周期阻滞(S期和G2期)。结论盐酸氮芥对人肝癌HepG2细胞的生长抑制主要通过细胞周期的阻滞发挥作用。  相似文献   

12.
目的研究肝癌癌周组织淋巴细胞和肝癌TIL的分布及抗瘤活性。方法用冷胶原酶消化分离法来分离肝癌癌周组织淋巴细胞及肝癌实质部和中心部TIL并测定它们的获得率。用  相似文献   

13.
目的:研究肝癌癌周组织淋巴细胞和肝癌TIL的分布及抗瘤活性,方法:用冷胶原酶消化分离法来分离肝癌癌周组织淋巴细胞及肝癌实质部和中心部TIL并测定它们的获得率,用^3T-TdR释放法测定它们对自体肝癌细胞的杀伤活性。结果:肝癌实质部TIL获得率最高,肝癌癌周组织淋巴细胞获得率次之,肝癌中心部TIL获得率最低,它们对自体肝癌细胞的杀伤活性从高到低则分别为肝癌实质部TIL,肝癌中心部TIL和肝癌癌周组织淋巴细胞,结论:肝癌癌周组织和肝癌组织不同部位的淋巴细胞分布有所不同,它们的抗瘤活性也各不相同,为了获得数量多和抗瘤活性高的淋巴细胞,应尽量从肝癌实质部来分离获取。  相似文献   

14.
目的 :研究叶绿素衍生物 (CPD4 )光动力学疗法 (PDT)对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞的体外杀伤效应。方法 :应用MTT比色分析法研究PDT CPD4对人卵巢癌细胞 (3AO)、肝癌细胞 (HCC)、胆囊癌细胞 (GBC SD)的光动力杀伤效应。结果 :PDT对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞杀伤效应明显 ,CPD4的光动力学杀伤效应与药物浓度呈正相关 ,并与激光能量有关。结论 :光动力学疗法对人卵巢癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞有明显杀伤效应 ,且与激光能量、药物浓度有关  相似文献   

15.
Objective To explore the apoptosis inducing effects of arsenic trioxide (As2O3) on human bladder cancer cells and elucidate possible mechanisms. Methods After treatment with As2O3, the growth inhibition rates of human bladder cancer cell line BIU-87 were studied by MTT and cell counts methods. DNA synthesis rates were detected by 3 H-TdR assay. The morphological changes of cancer cells were observed by light and electronic microscopy and cell apoptosis rates were detected by TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL). bcl-2 gene expression of BIU-87 cells was observed by strept avidin-biotin complex (SABC) immunohistochemical method. Results As2O3 could effectively inhibit the growth of BIU-87 (P<0.05), which were time and concentration dependent. The inhibition rate of 4.0?μmol/L As2O3 for DNA synthesis of cancer cells was 55.64% (P<0.01). Partial cancer cells presented the characteristic morphological changes of apoptosis which depended on the time of exposure to drug (P<0.05). bcl-2 expression of BIU-87 cells was decreased significantly (P<0.05). Conclusion As2O3 can significantly induce apoptosis in bladder cancer cells by down-regulating the expression of the bcl-2 gene and inhibiting DNA synthesis. This provides a potentially effective method for prevention and cure of human bladder cancer.  相似文献   

16.
以原代培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞等为靶细胞,研究了不同纯化阶段的新生牛肝细胞生长因子(cHGF)对靶细胞DNA合成活性的影响。结果表明,cHGF对体外培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞的DNA合成有明显的促进作用,对大鼠肾细胞、人肝癌细胞株SMMC-7721的DNA合成亦有一定的促进作用,对S_(180)小鼠腹水癌细胞的DNA合成无促进作用。纯品cHGF对人胎肝细胞的最小作用剂量为5ng/ml。提示HGF是一种较强的肝细胞有丝分裂原。  相似文献   

17.
粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖与凋亡的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的:通过观察粉防己碱(Tetrandrine)对人肝癌7402细胞株增殖与凋亡的影响,初步探讨粉防己碱对肝癌的体外抗肿瘤效应。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、集落形成实验观察粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖的抑制效应,利用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳、细胞凋亡荧光染色法及流式细胞术检测粉防己碱诱导肿瘤细胞凋亡的作用,以免疫细胞化学法检测粉防己碱对Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响。结果:MTT比色法、集落形成实验显示,粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖有抑制作用,其抑制效应具有剂量依赖的特点,细胞凋亡荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术表明,粉防己碱可诱导7402细胞凋亡,免疫细胞化学法显示,粉防己碱上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。结论:粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖的抑制效应具有剂量依赖性,并可诱导细胞凋亡,其抗肿瘤效应可能与凋亡相关基因表达的调控有关。  相似文献   

18.
Objective To explore the growth inhibiting effects on human bladder cancer by antisense RNA targeting the proliferating cell nuclear antigen (PCNA) gene. Methods The eukaryotic expression vector for antisense PCNA cDNA was constructed and transferred into a bladder cancer EJ cell line. The PCNA expression in the cancer cells was detected by RT-PCR and Western blotting assays. The in vitro proliferation activities of the transferred cells were observed by growth curve, tetrazolium bromide (MTT) colorimetry, tritiated thymidine (3H-TdR)incorporation, flow cytometry and clone formation testing, while its in vivo anti-tumor effects were detected on nude mice allograft models.Results After the antisense vector, pLAPSN, was transferred, cellular PCNA expression was inhibited at both protein and mRNA levels. The growth rates of EJ cells were reduced from 27.91% to 62.07% (P<0.01), with an inhibition of DNA synthesis rate by 52.31% (P<0.01). Transferred cells were blocked at G0/G1 phases in cell-cycle assay, with the clone formation ability decreased by 50.81% (P<0.01). The in vivo carcinogenic abilities of the transferred cancer cells were decreased by 54.23% (P<0.05). Conclusions Antisense PCNA gene transfer could inhibit the growth of bladder cancer cells in vitro and in vivo, which provided an ideal strategy for gene therapy of human cancers.  相似文献   

19.
复方莪术对MGC80—3胃癌细胞的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用MTT比色分析,~3H—TdR掺入及电镜观察复方莪术对MGC80—3胃癌细胞的影响。结果发现复方莪术能明显杀伤人低分化胃腺癌MGC80—3细胞,较低浓度即呈现明显细胞毒效应,IC_(50)为1∶150稀释度。~3H—TdR掺入试验表明:复方莪术能明显抑制MGC80—3胃癌细胞DNA的合成,掺入抑制率为78.5%。透射电镜下发现实验组细胞膜破裂,胞浆消失,呈裸核。  相似文献   

20.
目的 :研究表皮生长因子 (EGF)对大鼠成骨肉瘤细胞钾离子通道活动的影响 ,探讨这种钾通道活动与细胞增殖的关系。方法 :采用膜片钳技术 ,在细胞贴附方式下用内面向外的方法记录。在含有EGF(10ng/ml)的无血清培养液中培养 2 4h后记录钾通道 ,同时用3 H -TdR掺入法及流式细胞仪测定DNA合成的变化并进行细胞周期分析。结果 :含有EGF的培养液培养细胞的钾通道电流较对照实验有明显增加 ,通道开放概率也增加。同时 ,EGF加入使细胞的3 H -TdR掺入率增加 6 4 91% ;进入S期细胞增加 35 %。在EGF作用的不同时期加入钾通道阻断剂 ,可以不同程度的抑制DNA合成 ,并且阻断剂加入时间越早 ,对DNA合成的抑制越强。结论 :钾通道在细胞进入S期或在S期的活动中起重要作用。阻断钾通道可以较明显地抑制DNA合成 ,揭示出钾通道的活动与DNA合成和细胞增殖有密切关系。  相似文献   

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