定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法

通过口腔滴注表皮生长因子（EGF），观察小鼠舌上能上能下细胞生长和表皮生长因子受体（EGF-R）的表达。研究EGF影响舌苔形成的分子机制。舌组织经HE染色，EGF-R SABC免疫组化染色和图像分析数据处理系统（CMIAS-98A多功能图象分析仪）进行分析。结果表明，EGF可能通过EGF-R机制进行信号传导促进小鼠舌上皮细胞增生，舌粘膜增厚，EGF-R表达增多。     

表皮生长因子影响肿瘤患者舌苔变化分子机制探讨

目的?研究表皮生长因子(EGF)对舌鳞癌Tca8113细胞株Fas、cmyc表达的影响,探讨EGF促进肿瘤患者舌苔增厚的分子机制。方法?应用流式细胞术,检测Fas、cmyc的表达。结果?EGF能明显促进Tca8113细胞株Fas、cmyc的表达（P<0.05）。结论?EGF可能通过促进Fas、cmyc的表达影响舌苔形成。      

表皮生长因子受体在舌癌患者常见舌苔中的表达

目的：检测表皮生长因子受体（EGF—R）在舌癌患者常见舌苔中的表达水平，探讨EGF—R与舌苔形成的关系。方法：选择口腔舌鳞癌切除术患者，根据不同舌苔分为白薄苔组、白厚苔组、黄薄苔组、黄厚苔组及无苔组；并将胎儿正常白薄苔设为对照组。应用基因芯片初筛、荧光定量PCR技术定量检测舌癌患者舌黏膜EGF—RmRNA的表达水平。结幂：不同舌苔EGF—R mRNA表达水平差异明显，从高到低依次为：黄厚苔〉白薄苔〉黄薄苔〉无苔〉白厚苔，且均高于对照组。结论：不同舌苔舌上皮细胞EGF—R基因表达水平存在明显差异，EGF—R可能是影响舌苔形成的重要因素之一。     

舌苔形成与CD54和EGF-R表达关系的初步研究

目的探讨舌苔形成与CD54和EGF-R表达的关系。方法采用免疫组化S-P法检测不同舌苔黏膜组织中CD54和EGF-R表达的情况。结果CD54在薄白苔中表达最高,剥苔中表达最低;EGF-R在薄白苔中表达最高,正常对照和剥苔中无表达。结论CD54和EGF-R表达水平的变化与舌苔形成有密切的关系。     

慢乙肝患者舌苔与舌苔细胞凋亡、唾液、血清EGF含量变化及血清HBVDNA的关系

目的：研究慢性乙型肝炎患者病理舌苔与表皮生长因子（EGF）、舌苔细胞凋亡及血清HBV DNA定量的关系，探讨表皮生长因子、细胞凋亡及HBV，DNA在乙肝病理舌苔形成中的作用。方法：选取128例慢性乙型肝炎患者为研究对象，以15例其它消化系统疾病病人，15例其它系统疾病病人及15例健康人做对照组。放免法检测受试者唾液、血清EGF含量；免疫组化法检测舌苔上皮细胞表皮生长因子受体（EGFR）表达；末端标记测定法检测舌苔凋亡细胞；荧光定量PCR法检测血清HBV DNA含量。结果：与生理性薄白苔组相比，各病理舌苔组唾液、血清EGF含量及舌上皮细胞EGFR阳性细胞率均升高，以黄腻苔和白厚苔组升高最明显，与其它组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）；与生理性薄白苔组相比，除少苔或剥苔组外，各病理舌苔组凋亡细胞数目均有所增加，以黄腻苔和白厚苔组增多最明显，但黄腻苔和白厚苔组舌上皮细胞凋亡指数（AI）最低（P〈0．01），少苔或剥苔组AI最高；各病理舌苔组相比，黄腻苔和白厚苔组血清HBV DNA含量最高，薄白苔组最低，与厚苔组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；薄白苔组病毒复制以少量（〈10^5copies／mL）为主，与其它组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：慢乙肝患者病理舌苔的形成与唾液中EGF作用于舌上皮细胞引起舌苔上皮细胞不同程度的增殖、分化有关。     

舌苔脱落细胞学的几种检查方法及应用

舌苔脱落细胞学的检查为临床舌诊观察及中医辨证提供了客观依据，并对舌苔形成机制的探讨有着重要意义。但是，舌苔脱落细胞学检查要进行组化染色及细胞形态学分析，目前除巴氏染色多见报道外，其他组织染色因实验方法及技术要求较高，有关报道不多。本文根据我们20多年来这方面研究积累的资料，介绍几种舌苔脱落细胞学检查方法及在舌诊辨证中的意义。     

含转表皮细胞生长因子基因人表皮细胞复合皮的构建与移植

目的探讨转染表皮细胞生长因子(EGF)基因的人表皮细胞移植后EGF的表达及对细胞增殖的影响。方法将Balb/c小鼠的表皮细胞和转染EGF基因的人表皮细胞按1∶1、1∶3、1∶5的比例混合,种植于脱细胞真皮替代物表面,于体外培养后形成复合皮,将复合皮移植于Balb/c小鼠全层皮肤缺损创面,抗EGF抗体免疫组织化学染色观察移植后EGF的表达,抗增殖性细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色观察表皮细胞的增殖情况。结果小鼠表皮细胞与转EGF基因的人表皮细胞按1∶5混合构建的复合皮移植后1～2周,抗EGF染色阳性,1周时,新生表皮基底层中PCNA阳性细胞比含单纯小鼠表皮细胞的复合皮移植后显著增多(P<0.01)。结论转染EGF基因的人表皮细胞在移植后早期可表达外源基因产物,并促进表皮细胞增殖。     

消化系统肿瘤患者舌苔脱落细胞EGFR表达及唾液EGF含量研究

目的　通过观察消化系统肿瘤患者舌苔脱落细胞EGFR表达及其唾液中EGF含量 ,研究EGF与消化系肿瘤患者舌苔变化之间的关系。方法　用EGFRSABC免疫组化染色观察舌苔脱落细胞EGFR表达 ,用放射免疫测定 (RIA)法检测唾液中EGF的浓度。结果　在各舌苔组中 ,EGFR表达情况和EGF含量以呈厚苔组明显高于其他各组 ,各组之间进行比较呈 :黄厚苔组 >白厚苔组 >薄黄苔组 >薄白苔组 >无苔组趋势。结论　消化系统肿瘤患者唾液EGF含量及其舌苔脱落细胞EGFR表达情况与舌苔改变有明显的相关性     

EGF对小鼠角质形成细胞中组织型纤溶酶原激活剂表达的调节

目的 探讨小鼠表皮角质形成细胞（KC）中,EGF对组织型纤溶酶原激活剂（tPA)表达的影响。方法 应用免疫组化及原位杂交技术, 结合图像分析,定性及定量检测在EGF作用下的小鼠表皮角质形成细胞中,tPA mRNA/蛋白质的表达。结果 小鼠表皮KC经EGF处理12、24、48、72h后,tPAmRNA/蛋白质的量均增加（P＜0．01）,tPAmRNA的表达的 高峰出现于EGF作用24h时,tPA蛋白质表达的高峰则出现于EGF作用48h时。EGF联合0．5、1．0、1．5mmol/L Ca^2 作用小鼠表皮KC48h,与EGF单独作用小鼠表皮KC48h时,tPAmRNAA／蛋白质的表达,均显著降低（P＜0．001）。结论 小鼠表皮KC中,EGF可以时间依赖方式促进 tPAmRNA／蛋白质的表达,但受Ca^2 浓度的影响。     

胎儿骨髓间充质干细胞EGF受体或IGF受体的表达与其向上皮细胞分化的关系

目的：观察骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）表达表皮生长因子受体（Epidermal growth factor-receptors,EGF-R）和胰岛素样生长因子1 受体（Insulin-like growth factor-1-receptors,IGF-1-R）与其向上皮细胞分化分化的关系。方法：取第3代（P3）-BMSCs分别用或不用含EGF、IGF-1的介质诱导培养;另取P5-BMSCs用EGF-R抗体或IGF-1-R抗体孵育4 h后,加入含或不含EGF、IGF-1的培养基培养。免疫组织化学SP法检测各组细胞表达EGF-R、IGF-1-R和细胞角蛋白（Cytokeratin,CK）的时间。结果：P3-BMSCs分别于无诱导培养的8 ～11 d、10～14 d和16～18 d首次表达EGF-R,IGF-1-R和CK;经EGF或IGF-1诱导后,EGF-R、IGF-1-R的表达较无诱导组提前2～4 d。P5-BMSCs经抗EGF-R或IGF-1-R抗体阻滞后,细胞表达CK的时间较对照晚2 d。结论：EGF-R和IGF-1-R的表达与培养的BMSCs向上皮细胞分化密切相关;体外培养的P4-BMSCs～P5-BMSCs为加入外源性EGF、IGF-1诱导其向上皮细胞分化的最佳时间点。     

表皮生长因子受体（EGF—R）放射受体分析方法（RRA）的建立

目的：建立表皮生长因子受体（EGF－R）放射受体分析方法（RRA）,用于研究舌苔,EGF－R与肿瘤的关系,方法：放射配基结合法,^125I标记EGF与肿瘤细胞膜EGF－R结合,结果：从饱和曲线和Scatchard作图得知150fmol浓度的^125IEGF可使受体基本达到饱和,最大结合位点Bmax为5.89fmol,KD为106.38fmol,结论：建立的EGF－R RRA方法符合实验要求,适用于舌苔研究。     

71例胃癌患者舌苔与EGF的相关性研究

目的?研究胃癌患者舌苔特点及与表皮生长因子（EGF）之间的关系。方法?以71例胃癌患者为研究对象,并以40例正常人作为对照,酶联免疫分析（ELISA）法检测血清中EGF水平,观察记录舌象,将舌苔分为薄白、薄黄等6种舌苔类型进行分析。结果?胃癌患者舌苔以腻苔为多,其次是剥苔;胃癌组血清EGF水平明显高于正常组（P<0.01）,不同类型舌苔的血清EGF含量均高于正常组,包括正常组舌苔在内的7组舌苔之间经统计分析有明显的差异（P<0.01）。结论?胃癌患者舌苔变化明显,且血清EGF与舌苔变化有一定的关系。      

Epidermal growth factor and its receptor in the renal tissue of patients with acute renal failure and normal persons]

Epidermal growth factor (EGF) and its receptor (EGF-R) were identified by immunohistochemical method (4 layer PAP) in the renal tissue specimens obtained from 11 normal kidneys and 17 cases of acute renal failure (ARF). The quantitative EGF and EGF-R in the tissue were expressed as positive tubules per mm2. The amount of EGF and EGF-R in renal tissue was markedly increased in cases of ARF than in normal persons. Positive EGF staining was present only in distal tubules, but absent from glomeruli in normal persons. In ARF patients EGF was identified in both distal and proximal tubules. It was also seen in the glomerular mesangial area in 2 cases complicated by mesangial proliferative GN. However, no obvious difference was noted in the distribution of EGF-R between normal and ARF specimens. The amount of EGF in the renal tissue varied with the morphological changes in tubules and the time when the renal biopsy was being taken. The amount of EGF was large in those with a Scr value less than 2.5mg/dl There was a more profound expression of EGF during the recovery from ARF.     

表皮生长因子促进舌苔增厚机理初探

目的 探讨表皮生长因子促进舌苔增厚的机理。方法 采用荧光标记单克隆抗体流式细胞仪测定。结果 表皮生长因子促进细胞角蛋白表达。结论 表皮生长因子促进舌苔增厚的可能机理之一是促进了上皮细胞的角化。     

应用iTRAQ技术筛选乳腺癌白苔和黄苔患者血清差异表达蛋白

目的应用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术筛选乳腺癌白苔和黄苔患者与正常组之间的血清差异表达蛋白,以寻找乳腺癌早期诊断的生物标记物和探索中医舌苔形成的机制和原理。方法临床收集乳腺癌患者中具有典型的白厚苔和黄厚苔者各10例,并以正常薄白苔者10例作为对照,采血取血清提取蛋白,然后进行蛋白变性、还原及酶解,最后进行iTRAQ标记和ESI-QTOF-QⅡ质谱仪鉴定,得到峰图用DATA ANALYSIS、MASCOTT 2.2搜库和Scaffold软件分析,得到表达量差异结果。结果共鉴定出335个蛋白,其中达到严格定量标准的蛋白数59个,与正常组比较,乳腺癌白苔组和黄苔组共筛选出11个血清差异表达蛋白,乳腺癌白苔组和黄苔组之间筛选出6个差异蛋白。结论 iTRAQ结合LC-MS/MS技术能够快速、有效地进行差异蛋白质组学研究,同时发现一些蛋白与乳腺癌的发生以及中医舌苔形成机制密切相关。