糖基化低密度脂蛋白对血管内皮的损伤作用

目的探讨糖基化低密度脂蛋白对血管内皮的实验性损伤作用。方法以体外非酶糖基化低密度脂蛋白与人脐静脉内皮细胞（ＥＣ）共同培养，以低密度脂蛋白（ＬＤＬ）作对照，观察内皮细胞结构及功能的改变。结果糖化ＬＤＬ２５０μｇ／ｍｌ可引起ＥＣ超微结构改变，增殖率减低（Ｐ＜０．０５）。培养上清液中血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）活性降低（Ｐ＜０．０５），ＶｏｎＷｉｌｌｂｒａｎｄＦａｃｔｏｒ（ＶＷＦ）值升高（Ｐ＜０．００１），而糖化ＬＤＬ１２５μｇ／ｍｌ、７５μｇ／ｍｌ与ＬＤＬ对ＥＣ的作用无差异。结论在体外，糖基化ＬＤＬ２５０μｇ／ｍｌ可引起ＥＣ损伤，糖化ＬＤＬ在体外对触发动脉粥样硬化的发生、发展有重大意义。     

绞股蓝总皂甙及与化疗药合用对体外培养慢粒急性变病人癌细胞增殖的影响

目的：观察绞股蓝总皂甙（ＧＰ）及ＧＰ与化疗药合用对体外培养慢性粒细胞性白血病急性变病人癌细胞增殖的影响。方法：用ＭＴＴ比色分析法测定ＧＰ及ＧＰ与阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、高三尖杉酯碱ＨＨＲＴ分别合用对慢粒急变细胞的相对抑制率。结果：ＧＰ（１２．５～５０．０μｇ·ｍｌ－１）对体外培养慢性粒细胞性白血病急性变病人癌细胞具有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５～０．０１）。ＧＰ（３．１２５μｇ·ｍｌ－１）同Ａｒａ－Ｃ（５．０μｇ·ｍｌ－１）、ＨＨＲＴ（６．７５μｇ·ｍｌ－１）分别合用相对抑制率（７７．０％，８６％）较单用Ａｒａ－Ｃ（１５．０μｇ·ｍｌ－１）或ＨＨＲＴ（２０．０μｇ·ｍｌ－１）的相对抑制率（４７％、４１％）高（Ｐ＜０．０５）。结论：１．ＧＰ对慢性粒细胞性白血病急性变病人癌细胞生长增殖具有抑制作用，呈剂量相关性。２．ＧＰ能增强阿糖胞苷、高三尖杉酯碱抑制增殖作用。     

用MTT法测定内毒素对培养人肾小球内皮细胞的损伤作用

目的；研究内毒素对人肾小球内皮细胞（ＨＧＶＥＣ）活力的影响，探讨内毒素在烧伤早期损害中的作用。方法：分离人肾小球内皮细胞，把细胞分为正常培养组，内毒素浓度梯度组，内毒素时间梯度组，无血清内毒素作用ＨＧＶＥＣ１２ｈ组，另设烧伤血清时间梯度组为阳性，用ＭＴＴ法测定经内毒素和烧伤血清刺激后ＨＧＶＥＣ活力变化。结果：１μｇ／ｍｌ以上内毒素即可引起ＨＧＶＥＣ活力降低（Ｐ〈０．０１），１μｇ／ｍｌＬＰＳ时间梯     

钩吻碱类提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

钩吻碱类提取物在浓度大于１．２５μｇ／ｍｌ以上时对混合淋巴细胞培养反应（ＭＬＲ）均有不同程度的抑制作用，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）的最低抑制浓度为２．５μｇ／ｍｌ，抑制率为１８．３％。单独采用Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠脾细胞进行实验，促有丝分裂剂为细菌脂多糟（ＬＰＳ５μｇ／ｍｌ），在钩吻碱类提取物浓度为４０μｇ／ｍｌ才出现抑制作用（Ｐ＜０．０５），抑制率为１８％，改用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ２μｇ／ｍｌ）刺激，钩吻碱类提取物最低抑制浓度为２０μｇ／ｍｌ，抑制率为１２．４％（Ｐ＜０．０５）．脾细胞先经ＣｏｎＡ活化．后用白细胞介素２（５ｕ／ｍｌ）维持培养，此时钩吻碱类提取物的最低抑制浓度为４０μｇ／ｍｌ．抑制率为１７．１％（Ｐ＜０．０５）。     

银杏叶总黄酮对缩血管物质活性的影响

目的 研究银杏叶总黄酮在体内对缩血管物质活性影响。方法 用银杏叶的乙醇（７５％）提取液（总黄酮含量０．５ｇ／ｍｌ）给大鼠腹腔注射（每日１ｍｌ／ｋｇ体重）４０ｄ,取颈静脉血,测试血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）、内皮素（ＥＴ）活性及一氧化氮（ＮＯ）含量变化。结果 银杏叶总黄酮体内实验对ＡＣＥ无抑制作用（Ｐ〉０．０５）;对ＥＴ有明显抑制作用（Ｐ〈０．０２）;ＮＯ含量明显降低。结论 银杏叶总黄酮对缩血管物质Ｅ     

大网膜脂质血管生长因子对小鼠免疫功能影响的初步研究

用提取的家兔大网膜脂质血管生长因子（Ｌｉｐｉｄａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒ，ＬＡＦ）初品，注射于昆明种小白鼠背部皮下，每天一次共五次，同时设置生理盐水对照组。最后测定其免疫功能的变化，结果显示ＬＡＦ对小鼠的血清溶菌酶的产生无明显影响：总体水平（ＣＨ５０）在ＬＡＦ中剂量２５０μｇ／ｍｌ时明显下降（Ｐ＜０．０１）；低剂量（２５μｇ／ｍｌ）和高剂量（２５００μｇ／ｍｌ）的ＬＡＦ对小鼠脾细胞产生特异性抗体能力有明显的抑制作用（Ｐ＜０．００１）。     

PAOA与四种免疫抑制剂对小鼠体外脾细胞单相和双相混合培养影响初探

本文报道了中药ＰＡＯＡ水提取物对小鼠体外脾细胞单相和双相混合培养有显著的抑制作用。其中１０００μｇ／ｍｌ浓度抑制效应最明显（Ｐ＜０．０１）。并将ＰＡＯＡ与环孢素Ａ（ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ，ＣｓＡ）、硫唑嘌呤（Ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ，Ａｚａ）、地塞米松（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ，ＤＸＭ）及环磷酰胺（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，Ｃｙ）四种临床常用的免疫抑制剂作比较，其结果显示ＰＡＯＡ（１０μｇ／ｍｌ，１００μｇ／ｍｌ，１０００μｇ／ｍｌ）的免疫抑制作用明显强于Ａｚａ、ＤＸＭ和Ｃｙ，也不亚于ＣｓＡ的抑制作用。因此，作者认为，ＰＡＯＡ作为免疫抑制剂用于临床治疗将会有广阔前景。     

K562及K562/VCR对长春新碱诱导凋亡的敏感性

研究人类白血病细胞株Ｋ５６２及耐长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异,以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中的作用。方法将Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、０．０１０μｇ／ｍｌ的长春新碱诱导２４ｈ,用流式细胞仪ＰＩ染色法、ＴＵＮＥＬ法及ＥＬＩＳＡ法分别进行细胞凋亡检测。结果经浓度为０、０．００１μｇ／ｍｌ长春新碱诱导后,Ｋ５６２细胞凋亡率分别为（４．１０±０．１７）％、（１３．３０±３．７４）％,而Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３．６１±０．６９）％、（９．０６±４．２４）％,统计学显示两者差异无显著性（ｎ＝３,Ｐ＞０．０５）。而长春新碱浓度达０．０１０μｇ／ｍｌ时,Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３６．４８±６．７０）％、（１０．４５±３．７１）％,两者差异有极显著意义（ｎ＝３,Ｐ＜０．０１）。ＴＵＮＥＬ及ＥＬＩＳＡ检测结果与此类似。结论Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导细胞凋亡的敏感性不同,耐药细胞对药物诱导细胞凋亡的抵抗性增强可能在白血病ＭＤＲ发生中有重要作用。     

螺旋藻多糖抗肿瘤作用的研究

小鼠ｐｏＰＳＰ０．６ｇ／ｋｇ和１．２ｇ／ｋｇ９ｄ对移植肉瘤Ｓ１８０,Ｈｅｐｓ实体瘤和ＥＣ实体瘤具有明显的抑制作用;小鼠ｉｐＰＳＰ０．３ｇ／ｋｇ和０．６ｇ／ｋｇ对移植肉瘤Ｓ１８０,Ｈｅｐｓ实体瘤也有明显的抑制作用。ｉｐＰＳＰ１００ｇ／ｋｇ和１５０ｍｇ／ｋｇ能促进小鼠单核Ｍψ系统的吞噬功能;促进ＳＲＢＣ致敏小鼠血清溶血素形成;并能显著促进ＣｏｎＡ诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖,最适浓度为４０μｇ／ｍｌ。结果提示ＰＳＰ对多种肿瘤有抑制作用,并对免疫功能有调节作用。     

黄色素对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究黄色素（ＳＹ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及其作用机制。方法 以培养的家兔ＶＳＭＣ为材料，采用细胞计数和＾３２Ｐ掺入法，研究了ＳＹ对ＶＳＭＣ的增殖及ＶＳＭＣ中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响。结果 ＳＹ对血清刺激的ＶＳＭＣ的增殖具有抑制作用，且呈剂量和时间依赖性。１．０ｇ／Ｌ达到最大抑制，抑制率为５４．６％，４ｄ（１．０ｇ／Ｌ ＳＹ）达到最大抑制，抑制率为５２．０％，超过４ｄ     

熊果酸对舌癌细胞Tca8113生长、迁移和凋亡的影响及机制研究*

目的 探究熊果酸对人舌癌细胞Tca8113体外生长、迁移和凋亡的影响及机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）法及克隆形成实验检测熊果酸对Tca8113细胞活性的影响;采用划痕实验检测熊果酸在0、12及24?h对Tca8113细胞迁移能力的影响;通过Heochst33342染色和流式细胞术观察熊果酸对Tca8113细胞凋亡的影响;Western blotting检测熊果酸对细胞中磷酸化局部黏着斑激酶（p-Fak）、局部黏着斑激酶（Fak）、活化冬氨酸蛋白水解酶-3（Cleaved caspase-3）、Bcl-2-Associated X的蛋白质（Bax）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白表达的影响。结果 熊果酸能抑制Tca8113细胞的活性并促进其凋亡（P?<0.05）,并呈时间、浓度依赖性。熊果酸抑制Bcl-2,并促进Bax、Cleaved caspase-3表达,促进Tca8113细胞凋亡;能降低p-Fak、Fak的表达,抑制Tca8113细胞的迁移。结论 熊果酸能抑制Tca8113细胞的生长及迁移,其机制可能与调节Bcl-2/Bax凋亡通路和抑制Fak的激活相关。     

不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞（human skin fibroblasts,HSF）增殖、迁移、凋亡的影响。方法将体外HSF
分为腐胺组和对照组,以含腐胺浓度分别为0.5、1、5、10、50、100、500、1000 μg/ml完全培养基培养细胞设为腐胺组,不添加腐胺
设为对照组。经对照组及不同浓度腐胺组处理的HSF培养24 h后,再以四唑化合物电子耦联显色法（MTS法）测定细胞增殖能
力（用吸光度值表示）,Transwell迁移实验测定细胞的迁移能力,流式细胞技术（Flow Cytometry, FCM）Annexin V/PI标记法测
定细胞凋亡率。结果（1）细胞增殖能力（MTS）测定结果显示,0.5、1、5、10 μg/ml 腐胺组HSF的吸光度值较对照组升高（P<
0.01）,并且1 μg/ml时达峰值（0.754±0.024）;500、1000 μg/ml腐胺组HSF吸光度值较对照组降低（P<0.01）;50、100 μg/ml腐胺
组HSF的吸光度值与对照组无明显差异（P>0.05）;（2）Transwell迁移实验结果显示,1 μg/ml腐胺组穿过微孔膜的细胞数目较对
照组显著增加（P<0.01）,且达到峰值309±21;50 μg/ml及以上浓度腐胺组HSF穿过微孔膜的数目较对照组减少（P<0.05）;0.5、
5、10 μg/ml腐胺组HSF穿过微孔膜的细胞数目与对照组比较无明显差异（P>0.05）;（3）流式细胞凋亡结果显示,0.5、1、5、10 μg/ml
腐胺组HSF凋亡率较对照组显著降低（P<0.05）,而且在1 μg/ml时细胞凋亡率达最低值（11.10±0.79）%;100 μg/ml及以上浓度
腐胺组细胞凋亡率较对照组显著升高（P<0.01）,而且随着浓度增加凋亡率逐渐升高;50 μg/ml腐胺组与对照组比较细胞凋亡率
无明显差异（P>0.05）。结论微量腐胺可维持细胞正常的迁移能力,显著提高HSF的细胞增殖能力,而较高浓度的腐胺能显著
抑制HSF迁移与增殖,并诱导细胞发生凋亡,提示不同浓度的腐胺会对创面愈合起到完全不同的作用。
     

熊果酸诱导甲状腺乳头状癌细胞TPC-1凋亡的实验

目的 研究熊果酸 (ursolic acid UA) 在体外对人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1增殖的抑制作用.方法采用不同浓度的UA干预细胞 (对照组0μM, 实验组3μM、6μM、12μM) ;MTT法观察同一时间不同浓度的UA和不同时间同一浓度的UA对TPC-1细胞生长情况的影响;流式细胞术 (FCM) 检测应用UA后TPC-1细胞凋亡情况及细胞周期分布情况;QRT-PCR检测UA干预后TPC-1细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-9 m RNA的表达情况;Western blot检测UA干预后TPC-1细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-9蛋白的表达情况.结果 MTT实验结果显示UA对TPC-1细胞增殖的抑制呈现出浓度和时间的依赖性, 24 h、48 h、72 h的IC50分别为14.21μM、10.56μM、10.39μM;流式Annexin V-FITC/PI双染检测显示UA呈浓度依赖性诱导TPC-1细胞凋亡, 且将TPC-1细胞的生长阻滞在S期;QRT-PCR实验发现, 对照组与实验组均有Bcl-2、Bax、Caspase-9 m RNA的表达, UA呈浓度依赖性下调Bcl-2 m RNA的表达, 上调Bax和Caspase-9 m RNA的表达;Western blot结果显示, 对照组与实验组均有Bcl-2、Bax、Caspase-9蛋白的表达, UA呈浓度依赖性下调Bcl-2的表达, 上调Bax和Caspase-9的表达.结论 熊果酸可显著抑制人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖并诱导其凋亡, 为甲状腺癌治疗提供一定思路.     

熊果酸诱导前列腺癌细胞株PC-3凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人前列腺癌细胞株PC-3细胞周期、凋亡的影响及其作用机制.方法:人前列腺癌细胞株PC-3以不同浓度的UA作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(4 methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT),免疫组织化学SP法,流式细胞术(Flow cytometry,FCM),Western blot等实验方法检测PC-3细胞的增殖抑制情况,细胞周期和凋亡率的变化,以及细胞内bcl-2、bax 2个重要的细胞凋亡相关基因和细胞凋亡相关特殊蛋白cox-2、caspase 3表达的变化.结果:UA对PC-3细胞有增殖抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强.24、48 h和72 h 3个时间段UA分别作用于PC-3细胞后的IC_(50)分别为50.87、37.91 μmol/L和27.86μmol/L;熊果酸作用后PC-3细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G_1期,进入S期的细胞减少.UA能够诱导PC-3细胞凋亡,经过24、48 h和72h 3个时间段UA浓度50μmol/L作用后,细胞凋亡率为6.21%、7.81%和13.31%;细胞内bcl-2和cox-2的表达随着药物浓度增加逐渐减少;bax和caspase 3蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加.结论:UA能够抑制PC-3细胞的增殖,并使细胞大量累积于G_1期,进入s期的细胞减少.可能通过使bcl-2和cox-2的表达减少、bax和caspase 3蛋白的表达增加来诱导细胞凋亡.     

熊果酸对人舌鳞癌细胞株TSCCa的抑制作用及其机制探讨

目的 :研究女贞叶有效成分熊果酸对TSCCa细胞增殖的影响 ,探讨其中可能的机制。方法 :用MTT法研究熊果酸对TSCCa增殖的影响 ;用原位杂交的方法检测熊果酸对TSCCa细胞浆中核转录因子mRNA原位表达的影响。结果 :熊果酸抑制TSCCa细胞增殖 ,对TSCCa细胞的半数生长的抑制剂量约为 1 2 .5 μmol·L-1 ,在 2 4h内表现为一定的量效关系 ;原位杂交显示熊果酸对TSCCa细胞的抑制作用与抑制核转录因子的原位表达有关。结论 :熊果酸可能通过抑制TSCCa细胞的增殖来发挥抗肿瘤作用 ,其作用机制可能与抑制细胞浆中核转录因子mRNA的表达有关。     

核因子-κB抑制剂熊果酸延长小鼠心脏移植物存活时间

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用.方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸.24 h后检测P65核转位程度;48 h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况.体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维索钠混悬.行BALB/c到B6的小鼠心脏移植.实验组使用10m...     

熊果酸对膀胱癌5637细胞的作用研究

目的观察熊果酸对高危浅表性膀胱癌5637细胞株的体外作用,为熊果酸用于膀胱癌治疗提供依据。方法体外常规培养5637细胞,取对数生长期细胞随机分为两组。实验组加入质量浓度为10、50、100、200 ug/mL的熊果酸分别处理24h、48h;对照组不加熊果酸。采用MTT法检测各组细胞生长抑制率;流式细胞仪检测凋亡率;western-bolt法检测survivin因子蛋白表达。结果熊果酸对5637细胞有明显的抑制增殖的作用,并对其有诱导凋亡的作用。结论 10～200 ug/mL熊果酸可有效抑制5637细胞增殖（P〈0.05）,抑制作用呈时间-剂量依赖性。作用48h时200 ug/mL的抑制率为47.38±4.69%,凋亡率为45.20±1.32%,与对照组比较,P均〈0.01;survivin因子蛋白表达随药物浓度增高而下降。     

黄蜀葵花总黄酮对人脐静脉血管内皮细胞形成新生血管的影响

目的观察黄蜀葵花总黄酮（TFA）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）形成新生血管的影响。方法以体外培养HUVEC为模型,MTT法检测不同浓度TFA对细胞增殖的影响;Transwell小室细胞进行迁移实验检测药物对细胞迁移能力的影响;管形形成实验观察药物对细胞分化的影响。结果5.0~20.0 mg/L TFA作用72 h,不仅对HUVEC增殖有明显促进作用;而且能促进HUVEC迁移;10.0~20.0 mg/L TFA能够促进HUVEC管样结构形成。结论一定浓度的TFA具有明显促进HUVEC形成新生血管的作用。     

黄蜀葵花总黄酮对人脐静脉血管内皮细胞形成新生血管的影响

目的观察黄蜀葵花总黄酮（TFA）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）形成新生血管的影响。方法以体外培养HUVEC为模型,MTT法检测不同浓度TFA对细胞增殖的影响;Transwell小室细胞进行迁移实验检测药物对细胞迁移能力的影响;管形形成实验观察药物对细胞分化的影响。结果5.0~20.0 mg/L TFA作用72 h,不仅对HUVEC增殖有明显促进作用;而且能促进HUVEC迁移;10.0~20.0 mg/L TFA能够促进HUVEC管样结构形成。结论一定浓度的TFA具有明显促进HUVEC形成新生血管的作用。     

熊果酸对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响

目的 研究熊果酸对金黄色葡萄球菌(S.aureus)生物膜形成的影响.方法 二倍稀释法测定熊果酸与左氧氟沙星对S.aureus的最低抑菌浓度(MIC),采用紫外法测定金黄色葡萄球菌的生长曲线,结晶紫染色法测定生物膜生成量,倒置显微镜下观察生物膜结构.结果 熊果酸对S.aureus的MIC为0.27 mmol/L,左氧氟沙星的为0.000 6 mmol/L,不同浓度熊果酸不仅对S.aureus浮游菌的生长有抑制作用,且能显著抑制其生物膜的形成,并呈浓度依赖性;与左氧氟沙星和熊果酸单独应用相比,熊果酸和左氧氟沙星联合用药更能显著抑制S.aureus生物膜形成,且差异具有统计学意义(P<0.01).结论 熊果酸与左氧氟沙星联用对抑制S.aureus生物膜形成有增效作用.