Carba NP试验检测多重耐药革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶效果分析

目的评估Carba NP试验检测多重耐药革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的效果。方法收集我院2010-2013年59株多重耐药革兰阴性杆菌,采用VITEK-2全自动细菌鉴定药敏系统进行种属鉴定并检测菌株对碳青霉烯类药物的敏感性,用Carba NP试验检测菌株产碳青霉烯酶表型,用PCR法确定碳青霉烯酶基因型,并对PCR产物进行DNA测序分析。结果 59株多重耐药革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南、厄他培南耐药率分别为62.71%、61.02%和64.41%。Carba NP试验确定33株产碳青霉烯酶菌株,分别为A类酶12株、B类酶21株,PCR法检出多种碳青霉烯酶基因,包括KPC(12株)、IMP(7株)、NDM(12株)、VIM(3株)。与PCR法比较,Carba NP试验敏感性和特异性分别为97.06%、100%。结论 Carba NP试验能简单快速地检测多重耐药革兰阴性杆菌产生的碳青霉烯酶,结果与金标准的PCR法有高度一致性,值得在临床检验中推广使用。     

胶体金免疫层析法快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的对比研究

目的 评估胶体金免疫层析法快速检测血培养肠杆菌目细菌碳青霉烯酶。 方法 收集西安交通大学第二附属医院血培养79株肠杆菌目细菌,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌57株和碳青霉烯类敏感肠杆菌目细菌22株,按照NG-Test CARBA 5试剂盒说明书检测待测菌株五种主要碳青霉烯酶［klebsiella pneumoniae carbapenemase(KPC)、new delhi metallo-β-lactamase(NDM)、verona integron-encoded metallo-β-lactamase(VIM)、imipenemase metallo-β-lactamase(IMP)、oxacillinase48（OXA)-48］。碳青霉烯酶基因经PCR测序确认。 结果 57株血培养碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌,NG-Test Carba 5在15 min内检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP,其敏感度和特异度分别为100％和100％。金山川碳青霉烯酶耐药检测试剂检测到KPC、NDM、IMP、KPC+NDM和NDM+IMP的敏感度和特异度分别为94.74%和100％。 结论 NG-Test CARBA 5和金山川碳青霉烯酶耐药检测试剂作为高效和快速的诊断方法,可以简化临床检测碳青霉烯酶的复杂流程。     

mCIM、eCIM对碳青霉烯酶检测能力评估及CRE耐药特点分析

目的：评估碳青霉烯酶失活试验（modified carbapenem inactivation method,mCIM）、EDTA碳青霉烯酶失活试验（EDTA-carbapenem inactivation method,eCIM）及改良Hodge试验对肠杆菌科细菌不同基因型碳青霉烯酶的检测能力,分析碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌（carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE）对临床常用药物最低抑菌浓度（minimum inhibitory con－centration,MIC）,便于临床合理选择用药。方法：收集华北理工大学附属医院2018年6月至12月临床标本中分离的CRE菌株40株,经VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定/药敏系统进行鉴定及药敏试验,E-test法检测亚胺培南、美罗培南、替加环素、阿米卡星、左氧氟沙星、复方新诺明对CRE的MIC,微量肉汤稀释法检测多粘菌素的MIC。用mCIM、eCIM和改良Hodge试验检测CRE菌株产碳青霉烯酶的情况,用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测碳青霉烯类耐药基因（blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48）、超广谱β-内酰胺酶基因（SHV、TEM、CTX、OXA-1）、AmpC酶编码基因（FOX）及膜孔蛋白ompK35、ompK36基因。结果：40株CRE中38株确定携带碳青霉烯酶基因,其中携带blaKPC35株,包括同时携带blaNDM7株,blaKPC+blaNDM4株。改良Hodge试验和mCIM、eCIM试验对KPC型碳青霉烯酶的阳性率均为100%（38/38）;mCIM、eCIM试验对NDM型碳青霉烯酶的阳性率为100%（3/3）,改良Hodge试验对NDM型碳青霉烯酶的阳性率为0。耐药性分析：40株CRE菌株对临床常用抗菌药物如三代、四代头孢菌素,酶抑制剂复合制剂,氨曲南,亚胺培南及美罗培南的耐药率均为100%,对左氧氟沙星、阿米卡星、复方新诺明的耐药率分别为90.0%、60.0%和42.5%,尚未发现对替加环素及多黏菌素耐药的菌株。结论：mCIM、eCIM试验和改良Hodge试验对KPC型碳青霉烯酶的敏感度高,mCIM、eCIM试验对NDM型的敏感性高于改良Hodge试验;不同基因型的CRE菌株耐药情况不同,建议针对不同耐药表型的CRE感染,合理选择抗菌药物。     

对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的肠杆菌科细菌产酶机制分析

目的了解临床分离肠杆菌菌种分布及对碳青霉烯类抗菌药物的耐药现状和分子机制。方法收集四川大学华西医院
2009~2010年分离到的对碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科非重复菌株共45株,测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度
（MIC）以及产酶表型和PCR检测产酶分子机制。结果对碳青霉烯类药物敏感性降低的45株肠杆菌科细菌中,17株菌对亚胺
培南中介或耐药,21株对美罗培南中介或耐药,36株对厄他培南中介或耐药,绝大多数菌株对头孢菌素类耐药。受试菌株中改
良Hodge试验阳性检出率最高（77.8%）,其次为EDTA纸片增效试验（57.8%）和PBA纸片增效试验（22.2%）。blaTEM、blaSHV
和blaCTX-M基因检出率分别为60.0%,53.3%和15.6%,同时携带2 种及以上基因的检出率为44.4%。blaIMP 基因检出率为
48.9%。4株菌（3株产酸克雷伯菌,1株阴沟肠杆菌）为blaKPC基因阳性,检出率为8.9%,且位于质粒上。结论研究发现肠杆菌
科细菌产酶是对碳青霉烯类药物敏感性下降的主要机制,产碳青霉烯酶或合并多种β-内酰胺酶可引起非敏感或耐药的出现。
本研究报道了在西南地区发现在质粒携带的KPC-2型酶,可能引起不同菌种间水平传播,需引起足够重视。
     

免疫胶体金法用于碳青霉烯耐药肠杆菌耐药分型的临床应用研究

目的评价免疫层析方法产品用于碳青霉烯耐药肠杆菌(carbapenems resistant enterobacter,CRE)的耐药基因进行快速分型的临床应用价值。方法从住院患者临床标本中分离到非重复的195株耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌,采用PCR方法和免疫层析方法分别进行检测,以PCR方法作为金标准,对检测结果采用分析软件进行分析,评价其作为碳青霉烯耐药肠杆菌耐药基因快速分型的性能。结果采用PCR方法检出携带KPC酶(质粒介导的肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)基因的菌株136株,检出携带NDM酶(产新德里金属-β-内酰胺酶)基因的菌株52株,5种耐药基因均未检出的7株。采用免疫层析法检出产KPC酶菌株136株,产NDM酶菌株52株,产IMP酶菌株1株,产VIM酶菌株2株,其中1株菌产KPC和IMP两种酶,2株菌产NDM和VIM两种酶,以上5种耐药均未检出的7株。采用免疫层析法检测KPC酶、NDM酶的灵敏度为100%,特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为100%,Youden′s指数为1。结论采用免疫层析法产品对于该碳青霉烯耐药肠杆菌是否携带有KPC和NDM酶,能够准确作出诊断,可用于碳青霉烯耐药肠杆菌的主动分型筛查。     

Triton X-100 对Hodge和Carba NP试验检测产碳青霉烯鲍曼不动杆菌复合群效能影响

目的 探索快速、准确、简单、经济的表型检测方法,为产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群流行病学调查及临床诊疗提供更好的手段和依据。方法 纳入四川大学华西医院分离的110株鲍曼不动杆菌复合群,以多重PCR扩增结果为金标准,比较Hodge试验、Carba NP试验与加入Triton X-100后改良的Triton Hodge试验及Carba NP-direct试验在检测鲍曼不动杆菌复合群是否产碳青霉烯酶中的敏感度、特异度及阳性效果。结果 Hodge试验在检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群中敏感度和特异度分别为71.1%、100%,高于Carba NP试验（35.0%、86.7%,P<0.05）。加了Triton X-100试剂后改良试验的敏感度和阳性效果明显增高,Triton Hodge试验敏感度由71.1%提高到98.8%,Carba NP-direct试验敏感度由35.0%提高到85.5%,差异有统计学意义（P<0.001）,但特异性差异无统计学意义（P>0.05）。结论 改良后的Triton Hodge试验及Carba NP-direct试验在检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群中具有更高的敏感性及阳性检测判断效果,特异度不变,因此更适用于临床常规操作。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药基因分析

目的了解铜陵市人民医院分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药基因型。方法收集2011年5月至2016年8月铜陵市人民医院临床标本中分离的CRKP,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因(bla_(KPC)、bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(NDM)和bla_(OXA-48)),并对各碳青霉烯酶基因阳性扩增产物进行基因测序。结果共收集CRKP 90株,其中改良Hodge试验阳性84株(93. 3%),51株(56. 7%)携带blaKPC-2基因,2株(2. 2%)携带bla_(IMP-4)基因,1株(1. 1%)携带bla_(VIM-1)基因。结论该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的主要耐药机制是产KPC-2型碳青霉烯酶。     

1株阴沟肠杆菌临床分离株对亚胺培南耐药机制的研究

目的：探讨阴沟肠杆菌临床分离株对亚胺培南的耐药机制。方法采用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度（M IC ）值,用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR扩增检测碳青霉烯酶（blaKPC、blaIMP‐1、blaIMP‐2、blaVIM‐1、blaVIM‐2）编码基因和广谱及超广谱β‐内酰胺酶（blaTEM、blaSHV、blaCTX‐M‐1、blaCTX‐M‐2、blaCTX‐M‐9）编码基因;耐药基因水平传播采用质粒结合试验。结果阴沟肠杆菌临床分离株除对阿米卡星、环丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星敏感及妥布霉素中介外,对所有β‐内酰胺类抗菌药物、庆大霉素、四环素、甲氧苄啶／磺胺甲恶唑等抗菌药物均耐药。改良 Hodge试验为阳性。PCR扩增5种碳青霉烯酶基因和5种广谱及超广谱β‐内酰胺酶基因,显示blaT EM基因扩增阳性,其余基因扩增阴性。质粒接合试验成功传递了对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性,接合子菌株相较于阴沟肠杆菌临床株,呈现出低水平耐药。结论此分离株产碳青霉稀酶,携带T EM基因,并可以经质粒转导播散。     

一株耐碳青霉烯阴沟肠杆菌金属β-内酰胺酶的检测

目的初步探究一株耐碳青霉烯阴沟肠杆菌的耐药机制。方法采用K-B法检测该菌株对碳青霉烯类及其他常用抗菌药物的耐药性,采用改良Hodge实验和EDTA双纸片协同试验对碳青霉烯酶进行初筛,并用4对金属酶基因引物进行PCR扩增,同时进行AmpC酶的检测。结果药敏试验显示,该菌株对碳青霉烯和三代头孢耐药,并不被传统β-内酰胺酶抑制剂所抑制(对阿莫西林-克拉维酸和头孢哌酮-舒巴坦耐药),但对单环类的氨曲南敏感。改良Hodge试验和组合纸片法金属酶的初筛试验均为阳性,PCR检测结果显示该菌株携带Vim-2及Vim-5型金属酶基因。AmpC酶检测结果表明受试菌产诱导型AmpC酶。结论产Vim-2和Vim-5型金属酶是此株阴沟肠杆菌对碳青霉烯类耐药的重要原因,产诱导型AmpC酶可能参与其多重耐药机制,同时提示碳青霉烯类耐药性有向肠杆菌科扩散的趋势。     

耐碳青霉烯大肠埃希菌分子特征和同源性分析

目的 研究耐碳青霉烯大肠埃希菌(CREC)的耐药特点、碳青霉烯酶基因型,并分析CREC的同源性。方法 收集安徽医科大学第一附属医院临床标本分离的6 092株大肠埃希菌,筛选出71株CREC,采用Vitek-2 Compact进行鉴定和药敏试验,改良Hodge试验(MHT)、改良碳青霉烯类灭活法(mCIM)和Carba NP试验进行碳青霉烯酶的表型确证。聚合酶链反应(PCR)检测bla_KPC、bla_NDM、bla_VIM、bla_IMP等碳青霉烯酶基因,将阳性菌株扩增产物进行测序,测序结果在Blast程序中进行比对。用肠杆菌科基因间重复一致序列PCR (ERIC-PCR)指纹图谱确定CREC不同菌株之间的克隆关系。结果 CREC主要分布在重症监护室(ICU)和烧伤科,标本来源以尿液为主。药敏结果显示CREC对环丙沙星、左氧氟沙星和复方新诺明的耐药率都在70%以上,仅对阿米卡星和妥布霉素的耐药率低于50%。71株CREC中MHT、mCIM和Carba NP实验阳性的菌株数分别为45株、67株和69株,阳性率...     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点，诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据，做出准确诊断，给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂，腹腔内疾病占64．63％，共17种病因；腹腔外疾病占35．37％，共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查，在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。