脐血细胞因子水平与新生儿败血症的早期诊断

目的 :研究脐血白细胞介素 6 (IL 6 )、肿瘤坏死因子 α(TNF α)水平与新生儿宫内或产时感染所致败血症之间的关系。方法 :应用ELISA双抗夹心法检测了 72例脐血清 ,其中正常脐血清 5 2例 ,败血症 2 0例。结果 :正常脐血组IL 6 :中位数 0 .0 2 4ng/ml(范围 0 .0 2 2 1～ 0 .0 5 31ng/ml)、TNF α中位数 1.12ng/ml(范围 0 .10～ 3.85ng/ml) ;败血症组IL 6 :中位数 0 .173ng/ml(范围 0 .0 2 6 6～ 1.2 5 89ng/ml)、TNF α中位数 5 .6 1ng/ml(范围 0 .6 5～ 12 .6 0ng/ml) ;经秩和检验 ,正常脐血组IL 6、TNF α与败血症组有明显差异 (P<0 .0 1) 。结论 :脐血IL 6、TNF α可作为新生儿败血症的早期诊断指标 ,且IL 6比TNF α有更高的灵敏度和特异性。     

活血化瘀方对大鼠肝星形细胞活化的影响

活血化瘀方有较好的抗肝纤维化作用 ,为探讨活血化瘀方影响肝纤维化发生、发展的作用机制 ,我们采用MTT法检测活血化瘀方药物血清对HSC增殖的影响 ,免疫细胞化学法研究活血化瘀方药理血清对HSC表达α SMA的影响。结果表明 ,药物血清组MTT法OD值、α SMA阳性染色吸光度分别为对照组的 58 8%、51 2 % (P <0 0 1)。活血化瘀方药物血清与γ IFN有相似作用 ,能够通过抑制HSC增殖、α SMA的表达抑制体外培养的HSC的激活。     

MIP-1α联合IL-8对小鼠CD34+细胞体外增殖的影响

目的　了解巨噬细胞炎症蛋白 1α(macrophageinflammatoryprotein 1α ,MIP 1α)联合白细胞介素 8(interleukin 8IL 8)体外对小鼠CD34+ 细胞增殖的影响。方法　采用免疫磁珠吸附法分离小鼠CD34+ 细胞 ,将标本分为MIP 1α和IL 8各 1ng/ml组 ,10ng/ml组 ,5 0ng/ml组和空白组 ,建立液体培养体系及半固体培养体系 ,体系中分别加入相应浓度的MIP 1α和IL 8(空白组不加 ) ,培养一定时间后 ,观察各组的细胞生长情况 ,并作液体培养体系中细胞的周期分布检测。结果　 1ng/ml浓度的MIP 1α与相同浓度的IL 8联合使用 ,对小鼠CD34+ 细胞的体外增殖没有明显的影响 ,与空白组比较P >0 .0 5 ;10ng/ml和 5 0ng/ml浓度下 ,两者联合使用 ,则能明显抑制小鼠CD34+ 细胞的体外增殖 ,与空白组比较P <0 .0 1。但这两个浓度组相互比较却无显著差异 ,P >0 .0 5。周期分析结果表明 ,10ng/ml组和 5 0ng/ml组的G0 /G1期细胞均明显多于空白组和 1ng/ml组 ,P <0 .0 1,10ng/ml组与 5 0ng/ml组、1ng/ml组与空白组之间无显著差异 ,P >0 .0 5。结论　较低浓度下的MIP 1α联合IL 8,在体外能明显抑制小鼠CD34+ 细胞的增殖。     

肾移植受者术前TNF-α、IL-10分泌能力与急性排斥反应的关系

目的　探讨肾移植受者术前分泌TNF α、IL 10的能力 ,预测术后急性排斥反应的意义。方法　采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法 ,术前检测 35名肾移植受者体外培养的外周血及单个核细胞产生的TNF α、IL 10水平。结果　术后发生急性排斥反应的 7例 ,未发生急性排斥反应的 2 8例。发生排斥反应的受者体外TNF α分泌量为 5 4 6 .84± 12 0 .35pg ml,未发生组平均为 2 6 7.2 3± 31.5 6pg ml,两组间有显著差异 (P <0 .0 0 1)。IL 10水平在发生与未发生急性排斥反应组分别为 4 5 1.86± 16 9.93pg ml、32 0 .5 7± 4 8.78pg ml,两组间亦有统计学差异 (P <0 .0 5 )。结论　术前检测肾移植受者分泌TNF α、IL 10的能力 ,有助于预测发生急性排斥反应的危险性。     

TNF-α对雌性大鼠生殖轴调控作用的研究

目的　通过动物实验探讨肿瘤坏死因子 (TNF α)在生殖轴调控中的作用及作用部位。方法　情前期成年雌性S D大鼠 4 4只 ,取下丘脑、腺垂体及卵巢分别进行原代细胞培养 ,贴壁后 ,于腺垂体及卵巢培养液中分别加入TNF α (10 0ng/ml) ,孵育 2 4h后 ,进行顺序灌流共 5次 ,将培养液冷冻干燥后按放免试剂盒说明测FSH、LH、E2 及P ,并收集各组培养卵巢颗粒细胞 ,用流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡率 ,观察TNF α对生殖轴调控作用及卵巢颗粒细胞增殖的作用的影响。结果　 (1)TNF α (10 0ng/ml)明显抑制原代培养的雌性动情前期大鼠卵巢组织E2 及P的分泌量。 (2 )TNF α (10 0ng/ml)明显抑制原代培养的雌性动情前期大鼠腺垂体细胞LH、FSH的分泌量。 (3)FCM检测结果 :实验组卵巢颗粒细胞凋亡率为 (37 84± 3 84 ) %与对照组 (2 6 3±0 37) %相比有显著性差异 (P <0 0 1) ,说明TNF α能够抑制颗粒细胞增殖 ,并促进其凋亡。结论　TNF α在腺垂体及卵巢水平上同时发挥作用 ,抑制FSH、LH、E2 、P的合成 ,同时抑制颗粒细胞的增殖 ,促进其凋亡。     

p38丝裂素活化蛋白激酶信号转录对IL-1β诱导肾小管细胞转分化的影响

目的　探讨 p38MAPK信号转导途径对IL 1β诱导肾小管上皮细胞转分化的影响及其导致的功能改变。方法　以培养的人近端肾小管上皮细胞 (HK 2 )为研究对象 ,给予IL 1β(10ng/ml)刺激 2 4h ,在阻断实验中加入SB2 0 35 80阻断 p38通路。采用蛋白印记杂交法检测 p38MAPK的磷酸化程度 ;细胞表型特征检测包括细胞形态变化、标志蛋白 (角蛋白、α SMA)的表达及分布、细胞增殖、黏附和移行能力。结果　 (1)IL 1β刺激 6～ 4 8h可使α SMA表达上调 ,刺激 2 4h可使角蛋白表达减弱、α SMA分布紊乱 ,但细胞形态变化不明显 ;(2 )IL 1β在 5min时可使p38激活达高峰 ,较基础水平升高 2～ 3倍 (P <0 0 5 ) ;至 12 0min时 p38则呈持续激活状态 ;(3)p38阻断剂 (SB2 0 35 80 )对HK 2细胞α SMA的基础表达有抑制作用 ,抑制率 37 13% (P <0 0 1) ;同时可明显抑制IL 1β刺激的α SMA表达 ,抑制率 4 7 0 7% (P <0 0 0 1) ;(4)IL 1β及 p38阻断剂并不影响HK 2细胞之间的黏附能力 ,但IL 1β可使细胞的移行能力增强 (P <0 0 1) ,而 p38阻断剂可明显抑制其移行能力。IL 1β并不影响HK 2细胞增殖。结论　IL 1β可以激活肾小管上皮细胞p38/MAPK ,并可使其发生表型转化 ,这一作用部分通过 p38信号通路所介导。     

PDGF及白介素-10对大鼠肝星形细胞bcl-2/bax的影响

目的　探讨血小板衍生生长因子 (PDGF)及白介素 - 1 0 (IL - 1 0 )对体外培养的肝星形细胞 (HSC)表达bcl- 2 / bax的影响。　方法　原位灌流法分离 HSC,体外培养激活 ,分为对照组 (C组 )、PDGF干预组 (P组 )、IL - 1 0干预组 (I组 )及 PDGF和 IL - 1 0共同干预组 (T组 )。采用半定量 RT- PCR方法对各组细胞的 bcl- 2、bax在 RNA水平的表达进行比较分析。　结果　 P、I及 T组 bcl- 2 m RNA的表达均明显低于 C组 (P<0 .0 1 ) ,T组 bcl- 2表达量也显著低于 P组 (P<0 .0 1 ) ;但 P和 I组 ,I与 T组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。P组、I组及 T组 bax m RNA的表达均明显高于 C组 (P<0 .0 1 ) ,T组 bax表达量也显著高于 P组 (P<0 .0 1 ) ,T与 I组差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,但 P和 I组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。　结论　 PDGF的作用以促进 HSC增殖为主 ;IL - 1 0能通过调节 bcl- 2 / bax表达而促进 HSC凋亡 ,具有抑制 HSC增殖的作用     

普伐他汀对激活的VSMC增殖和细胞因子合成的干预作用

目的研究不同浓度普伐他汀对体外培养的经脂多糖 (LPS)激活的狗血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和细胞因子合成的影响。方法 10、10 0、5 0 0 μmol/L普伐他汀 ,于作用后 2 4h和 4 8h采用MTT比色法观察VSMC增殖情况 ,ELISA法观察细胞因子IL 6和TNF α的表达。结果作用 2 4h后 ,10 0、5 0 0 μmol/L的普伐他汀可抑制VSMC的增殖 ,而各浓度均可抑制IL 6的合成 (P <0 .0 5 ) ;作用 4 8h后 ,各浓度普伐他汀均可抑制VSMC增殖和IL 6合成 ,10 0、5 0 0 μmol/L组作用大于 10 μmol/L组 (P<0 .0 5 ) ;普伐他汀对TNF α合成无显著影响 (P >0 .0 5 )。结论一定浓度的普伐他汀可抑制VSMC增殖和细胞因子IL 6的合成 ,该作用可能与时间和剂量有关。     

白头翁体外对TNF、IL-1、IL-6产生的影响

目的 :观察白头翁对抑制脂多糖(LPS)刺激肝枯否氏细胞(KC)分泌肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素1(IL 1)和白细胞介素6(IL 6)的影响。方法:大鼠KC培养24h后,加入24孔板内(细胞终浓度为1×106 个/ml)静置4h。分4组:空白对照组:KC培养液 RPMI1640。LPS组:KS培养液 LPS(终浓度为20μg/ml) RPMI1640。白头翁Ⅰ组:KC培养液 LPS(终浓度为20μg/ml) 白头翁(终浓度为100μg/ml)。置37℃、5 %CO2 孵育箱中培养2、4、6、8、12、24h后取上清液,分别测定TNF、IL 1、IL 6的活性。结果:白头翁能明显抑制LPS刺激肝KC分泌TNF、IL 1和IL 6,且这种抑制作用随培养时间的延长而增强,并与药物浓度有关。结论:白头翁可能通过抑制LPS刺激肝KC分泌TNF、IL 1和IL 6而发挥抗炎作用     

巨细胞病毒肝炎患儿血清细胞因子水平测定及其临床意义

目的　研究巨细胞病毒 (CMV)肝炎患儿血清干扰素 α(IFN α)、白细胞介素 8(IL 8)和肿瘤坏死因子 α(TNF α)水平的变化及其临床意义。方法　应用ELISA法检测 35例CMV肝炎患儿血清中上述三种细胞因子的含量 ,并对其两两之间进行了相关性分析。结果　CMV肝炎组患儿IFN α、IL 8、TNF α的含量分别为 (770 .3± 2 0 5 .4 )ng/L、(41.9± 2 2 .5 )ng/L和 (10 33.2± 388.5 )ng/L ,非常显著高于正常对照组 (P <0 .0 1)。相关性研究发现IFN α与TNF α呈显著正相关 (r =0 .35 6 ,P <0 .0 5 )。结论　血清细胞因子明显增高与CMV肝炎的病理变化和病损程度有着密切的联系     

Effects of Kupffer cells stimulated by triglyceride and very low-density lipoprotein on proliferation of rat hepatic stellate cells

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ,ｖｅｒｙｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＬＤＬ）,ａｎｄＫｕｐｆｅｒｃｅｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｍｅｄｉｕｍ（ＫＣＣＭ）ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｔｒｉｇｌ...     

结缔组织生长因子协同转化生长因子β1的促肾纤维化效应

目的　探讨结缔组织生长因子 (CTGF)和转化生长因子 β1(TGF β1)对肾脏成纤维细胞合成和分泌基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )和细胞表型转化的影响。方法　将大鼠肾成纤维细胞分为对照组、CTGF刺激组、TGF β1刺激组、CTGF加TGF β1联合刺激组 ,以明胶酶谱法和Western印迹方法分别检测细胞上清中MMP 2活性和蛋白的变化 ,实时定量 聚合酶链反应 (PCR)方法检测细胞中MMP 2mRNA的水平。Western印迹方法检测成肌纤维细胞标志蛋白α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达水平和细胞上清中细胞外基质成分纤黏连蛋白 (FN)的水平。结果　MMP 2的活性和蛋白水平在刺激 2 4h时 ,各组之间无明显差异 ;刺激 4 8h ,10 0ng/mlCTGF组和 5ng/mlTGF β1组明显属于对照组 (P <0 0 5 ) ;而不同浓度的CTGF加TGF β1联合刺激组分别低于CTGF刺激组、TGF β1刺激组 ,其中 10 0ng/mlCTGF加 5ng/mlTGF β1、5 0ng/mlCTGF加 5ng/mlTGF β1均分别明显低于CTGF刺激组、TGF β1刺激组 (P <0 0 5 )。上述各组细胞刺激 12h ,MMP 2mRNA水平在 10 0ng/mlCTGF组和 5ng/mlTGF β1组均明显高于对照组 (1 72 ,1 6 8vs 1 2 9,P <0 0 1) ,而 10 0ng/mlCTGF加 5ng/mlTGF β1联合组明显低于CTGF刺激组、TGF β1刺激组 (0 6 7v     

肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮样细胞增殖及syndecan-4蛋白表达的影响

目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养的人脐静脉内皮样细胞株ECV304增殖及syndecan-4蛋白表达的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮样细胞株ECV304,分别应用1、10、20、100 ng/ml的TNF-α作用24 h及36 h并设立对照组进行比较,采用MTS/PES法确定人脐静脉内皮样细胞的增殖状态.利用Western blotting蛋白免疫印迹法测定细胞syndecan-4蛋白的表达情况.结果 24 h各组细胞增殖率分别为对照组(1.956±0.214),TNF-α100 ng/ml组(2.154±0.250),TNF-α20 ng/ml组(2.26±0.151),TNF-α10 ng/ml组(2.118±0.205),TNF-α1 ng/ml组(2.106±0.136).统计分析显示低至1 ng/ml的TNF-α仍能明显刺激人脐静脉内皮样细胞的增殖(P＜0.05),其中以TNF-α 20 ng/ml组细胞增殖最显著P＜0.05).36 h各剂量组的细胞增殖率均明显低于24 h的细胞增殖率(P＜0.05).TNF-α对人脐静脉内皮样细胞的syndecan-4蛋白表达有显著的增强作用(P＜0.05).结论 TNF-α对体外培养的人脐静脉内皮样细胞的增殖及syndecan-4蛋白表达均有明显的促进作用,但随着时间的改变,这种作用有所变化.     

风心病瓣膜置换术患者体外循环围术期细胞因子的释放

To examine cytokines release related to cardiopulmonary bypass(CPB), the anthers investigated the possible differences in cytokines responses between patients undergoing prosthetic valve replacement (study group, n = 10) and those receiving closure of patent ductus arteriosus or pericardiectomy(control group, n = 9). Venous levels of interleukin-2 (IL-2), soluble interleukin-2 receptor (sIL-2R), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and interleukin-10 (IL-10) were measured at multiple time points before, during and after operation. As compared with pre-operative values, IL-2 levels in both groups decreased significantly (P < 0.05), and the levels of sIL-2R, IL-6, TNF-alpha, and IL-10 in both groups increased significantly at multiple time points post-operative (P < 0.01). All the values of cytokines returned to pre-operative levels at 7th post-operative day. Although there were no pre-operative differences in these cytokines between the two groups (P > 0.05), the post-operative changes of cytokines in study group was more obvious than that in control group (P < 0.01). In study group IL-10 rose to a peak value of around 620 pg/ml at the end of CPB while IL-6 and TNF-alpha levels reached their peak values of around 88 pg/ml and 52 pg/ml respectively at 1st post-operative day. IL-10 has been reported as an antiinflammatory cytokine. The preceding IL-10 peak value, as compared with the peak values of IL-6 and TNF-alpha, could be associated with the interplay and regulation of cytokine network. On the other hand, in control group the levels of IL-6, TNF-alpha, and IL-10 reached their peak values at 1st post-operative day simultaneously. The values were 34 pg/ml, 36 pg/ml, and 162 pg/ml respectively. This result suggests that besides surgical stress mediated cytokines production or suppression, CPB itself also results in obvious changes of cytokine metabolism. However further studies are needed to elucidate the underlying mechanisms and clinical value of post-operative cytokines production or suppression related to CPB in patients with prosthetic valve replacement.     

小鼠骨髓源半成熟树突状细胞的培养与初步鉴定

目的探索培养与鉴定小鼠骨髓来源半成熟树突状细胞(smDC)的可行方法。方法分离、纯化6周龄C57BL/6小鼠骨髓单核细胞,以含10%胎牛血清、2 ng/ml重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和20ng/ml重组小鼠白细胞介素(IL)-4的RPMI-1640培养基培养9 d;再以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(40 ng/ml)刺激24 h获得smDC,同时以脂多糖(1μg/ml)刺激和不加刺激培养24 h获得成熟DC(mDC)和未成熟DC(iDC)。扫描电子显微镜、流式细胞术、ELISA检测iDC、smDC和mDC的形态、细胞表面标志及细胞因子的表达。建立体外淋巴细胞反应模型,采用细胞计数试剂盒检测smDC对异基因淋巴细胞的活化作用。结果smDC的体积介于iDC和mDC之间、多呈类圆形或圆形,胞体直径约为15μm,树突长度多在5~10μm。smDC、iDC与mDC均高表达CD11c,smDC表达CD40、CD80、CD86及MHC-Ⅱ介于iDC和mDC之间。smDC分泌IL-1β、IL-6和IL-12显著低于mDC(P<0.01)、分泌IL-12显著低于iDC(P<0.05),分泌IL-1β、IL-6与iDC比较差异无显著性(P>0.05);smDC、iDC与mDC分泌IL-10差异无显著性(P>0.05)。smDC对异基因淋巴细胞激活作用显著低于mDC和阳性对照(P<0.01),而与阴性对照和iDC差异无显著性(P>0.05)。结论smDC可能是一个功能和形态上相对独立的DC亚群,体外利用GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导骨髓单核细胞是获得smDC的有效方法。     

视黄酸对肿瘤坏死因子α诱导肺泡上皮细胞损伤的保护作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549增殖凋亡的影响与视黄酸(RA)对其调控作用。方法用不同浓度的TNF-α、1μmol/LRA和10μg/LTNF-α+1μmol/LRA处理肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞24h和48h后MTT法测定细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡。用10μg/LTNF-α处理24h或48h后继续培养,用台盼蓝染色计算24、48和72h活细胞数。结果分别用0、0.1、1、5、10μg/L浓度的TNF-α培养A549细胞24h和48h测定细胞增殖数(%):24h分别为95.0%、90.0%、79.6%、72.4%和59.6%,方差分析结果F值为18.04,P<0.01;48h分别为93.2%、82.7%、61.5%、50.3%和44.7%,F值为40.61,P<0.01。用10μg/LTNF-α处理A549细胞24h,其对细胞的增殖抑制作用可逆转,但处理48h后的A549细胞增殖抑制作用不能逆转。用TNF-α和视黄酸培养A549细胞12、24与48h后,凋亡的细胞数(%)TNF-α组分别为14.3%±3.2%、18.6%±2.9%和43.4%±3.5%,与对照组(6.3%±1.2%,8.2%±1.3%和26.1%±2.5%)比较差异有统计学意义;视黄酸加TNF-α组为4.8%±1.1%,5.2%±1.3%和16.4%±2.3%,明显少于TNF-α组。结论视黄酸通过抑制TNF-α对肺泡Ⅱ型上皮细胞的破坏,可以达到减轻肺泡上皮细胞损伤,保护肺表面活性物质的作用。     

神经生长因子在肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡中的作用

目的探讨神经生长因子(NGF)在肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡中的作用。方法HSC株分别在实验组(分别以NGF 50、100和150ng／ml干预HSC)和对照组(单纯HSC培养)中体外培养24、48和72 h。应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖率;原位杂交凋亡检测(TUNEL)法观察HSC凋亡状况;流式细胞术检测细胞凋亡率;显微镜观察细胞形态学变化。结果①MTT法显示,不同浓度的NGF作用HSC 24 h,实验组HSC增殖率均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0．05)。NGF浓度为100 ng／ml时,HSC增殖率低于对照组最显著(0．63±0．02 vs 0．77±0．03,P<0．05);②最适浓度的NGF(100 ng／ml)作用HSC 24、48和72 h,第72小时的HSC增殖率低于对照组最显著(0．48±0．03 vs 0．89±0．01,P<0．05),增殖率的降低呈时间依赖性;③最适浓度的NGF(100 ng／ml)作用HSC 24 h,TUNEL法显示HSC凋亡率显著高于对照组(10．2％±1．2％vs 1．6％±0．1％,P<0．05);同时,流式细胞术显示HSC凋亡率为6．2％±0．2％,而对照组无凋亡;④NGF对HSC形态没有明显影响。结论NGF可诱导体外活化的HSC凋亡。     

Changes in intestinal microflora in patients with chronic severe hepatitis

Objective To investigate changes in intestinal microflora in patients with chronic severe hepatitis (CSH), and their role in this life-threatening disease.Methods We classified nineteen patients with chronic severe hepatitis as the CSH group, thirty patients with chronic hepatitis (CH) as the CH group and thirty-one heal thy volunteer as the control group. Fecal flora from all subjects were analyzed . Concentrations of plasma endotoxin, serum cytokines tumor necrosis factor alp ha (TNF-α) and interleukin-1 beta (IL-1β) and liver function were assessed .Results The number of fecal bifidobacterium (P&lt;0.001, P&lt;0.05 respectively), as well as bacteroidaceae (P&lt;0.001, P&lt;0.01 respectively) were significan tly deceased in patients with chronic severe hepatitis compared with the CH and control groups, while the number of enterobacteriaceae (P&lt;0.001, P&lt; 0.05 respectively) and yeasts (P&lt;0.01, P&lt;0.05 respectively) were sign ificantly increased. Levels of plasma endotoxin, serum TNF-α, IL-1β and tot al bilirubin (TBiL) were significantly increased in the CSH group. The concentr ation of endotoxin positively correlated with levels of both TNF-α, IL-1β an d TBiL (P&lt;0.001, respectively). Levels of plasma endotoxin were positivel y correlated with the number of fecal enterobacteriaceae and negatively correlat ed with bifidobacterium (P&lt;0.05, P&lt;0.001, respectively).Conclusion Intestinal flora in patients with chronic severe hepatitis were severely disturb ed and gut mircobiological colonization resistance was impaired. Changes in int estinal flora may have a pivotal role in both the elevation of plasma endotoxin and further hepatic lesions resulting in liver failure.