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1.
酶消化组织块法原代培养人牙周膜成纤维细胞的初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:提高人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPLF)原代培养的成功率,快速建立体外细胞研究模型.方法:采取组织块与酶消化相结合的方法处理牙周膜组织块,获取细胞;用形态学、免疫细胞化学染色等方法鉴定细胞来源,通过生长曲线的测定研究体外细胞生长特性.结果:原代培养成功率为77.8%.获得的细胞呈梭形,抗波形丝蛋白染色呈阳性,抗角蛋白染色呈阴性,  相似文献   

2.
目的 采用玻片覆盖组织块法原代培养人牙周膜成纤维细胞,以用于实验观察中药单体对培养人牙周膜成纤维细胞生物学活性的影响,进而探讨中医药治疗牙周病的有效性及其作用机制.方法 用玻片覆盖组织块方法进行人牙周膜成纤维细胞原代培养,利用形态学、免疫组化方法鉴定其来源,通过生长曲线及贴壁率的测定来研究其生物学特性.结果 原代培养成功率为85%,细胞形态呈长梭形,抗波形丝蛋白染色呈阳性,抗角蛋白染色呈阴性,细胞倍增时间为54 h,细胞12 h贴壁率为96%,符合人牙周膜成纤维细胞的形态学特征和生物学特性,生长良好.结论 采用玻片覆盖组织块法可提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成功率,且简单易行,可满足中医药治疗牙周病的有效性及其作用机制的实验研究需求.  相似文献   

3.
目的 探讨一种快速简便、原代培养成功率高、可重复性高的人牙周膜成纤维细胞培养方法。方法将处理后的牙齿整个用酶进行消化,原代培养人牙周膜成纤维细胞,对培养出的细胞进行形态学观察,免疫组化方法鉴定其来源,通过生长曲线研究其生物学特性。结果 8~14 d内可获得实验用成纤维细胞,原代培养成功率为90%,细胞形态呈长梭形。波形丝蛋白染色呈阳性,角蛋白染色呈阴性,符合人牙周膜成纤维细胞的形态学特征和生物学特性。结论采用全牙酶消化法可以快速、成功地培养出人牙周膜成纤维细胞,且简单易行,可重复性高。  相似文献   

4.
体外培养人牙周膜细胞方法的探讨   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:研究如何提高体外培养人牙周膜细胞(hPDL)的成功率,为简便、快速地获得大量成活率高的hPDL膜细胞,建立体外细胞模型提供一定的实验方法.方法:利用3种不同方法(组织块法、酶消化组织块法、全牙消化法)进行牙周膜细胞的原代培养,用形态学、免疫细胞化学染色等方法鉴定细胞来源;通过生长曲线的测定研究体外细胞生长特性.结果:3种方法获得的细胞形态和生物学行为大致相同;波丝蛋白抗体染色阳性,角蛋白抗体染色阴性.组织块法培养的细胞同源性好,但初代培养时间长;全牙消化法的原代培养成功率高于其他2种方法.结论:通过对牙周膜细胞培养方法的改良,可以显著提高hPDL原代培养的成功率.  相似文献   

5.
目的:建立人牙周膜成纤维细胞体外培养的方法。方法:采用组织块贴附法原代培养人牙周膜成纤维细胞并传代。结果:牙周膜成纤维细胞体外培养成功率为20%。5代后细胞生长旺盛。经免疫组织化学SABC法证实为来源于中胚层的成纤维细胞。结论:采用组织块贴附法培养原代人牙周膜成纤维细胞。胰酶消化传代后,生长状况良好,可作为人牙周膜成纤维细胞的实验模型。  相似文献   

6.
人牙周膜细胞原代培养及鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 建立人牙周膜细胞原代培养方法.方法 取因正畸需要拔除的健康前磨牙根面中1/3的牙周膜组织,分别运用组织块法(n=12)、酶消化法(n=10)及组织块一酶消化联合培养技术(n=12)培养人牙周膜细胞.运用免疫组化染色法对培养细胞的生物学特征加以鉴定.绘制生长曲线,观察细胞生长并计算细胞群体倍增时间.结果 组织块法、酶消化法和织块一酶消化联合培养的细胞培养成功率分别为16.67%、20.00%和33.33%.培养细胞的抗波形蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性;碱性磷酸酶染色阳性.细胞生长曲线有明显的滞留期、指数生长期和平台期,群体倍增时间为109.79 h.结论 成功进行人牙周膜细胞的原代培养,培养细胞具有牙周膜细胞的生物学特征.组织块-酶消化联合培养可提高人牙周膜细胞原代培养的成功率.  相似文献   

7.
目的 建立人牙周膜细胞原代培养方法.方法 取因正畸需要拔除的健康前磨牙根面中1/3的牙周膜组织,分别运用组织块法(n=12)、酶消化法(n=10)及组织块一酶消化联合培养技术(n=12)培养人牙周膜细胞.运用免疫组化染色法对培养细胞的生物学特征加以鉴定.绘制生长曲线,观察细胞生长并计算细胞群体倍增时间.结果 组织块法、酶消化法和织块一酶消化联合培养的细胞培养成功率分别为16.67%、20.00%和33.33%.培养细胞的抗波形蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性;碱性磷酸酶染色阳性.细胞生长曲线有明显的滞留期、指数生长期和平台期,群体倍增时间为109.79 h.结论 成功进行人牙周膜细胞的原代培养,培养细胞具有牙周膜细胞的生物学特征.组织块-酶消化联合培养可提高人牙周膜细胞原代培养的成功率.  相似文献   

8.
酶消化组织块法原代培养兔牙周膜细胞   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的建立用酶消化组织块培养兔牙周膜细胞的方法,为下一步的研究做好基础。方法取成年新西兰大白兔牙周膜组织,通过酶消化组织块法原代培养兔牙周膜细胞。取第4代免牙周膜细胞,免疫细胞化学法鉴定细胞组织来源。结果酶消化组织块法成功培养出兔牙周膜细胞,细胞形态呈梭形。免疫细胞化学鉴定波形蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性,说明细胞为中胚层来源的牙周膜成纤维细胞。结论酶组织消化块法可以很好地进行兔牙周膜细胞体外培养,且此方法简单易行。  相似文献   

9.
目的建立用酶消化组织块培养人牙髓细胞的方法。方法用酶消化组织块进行人牙髓细胞体外培养,倒置显微镜和透射电镜分别观察牙髓细胞形态、生长情况和超微结构,取第5代牙髓细胞测定生长曲线、免疫组化法鉴定组织来源,并检测其矿化能力。结果用酶消化组织块培养的人牙髓细胞成纤维细胞样,接种4天大部分组织块能有效贴附于培养瓶壁,第7天可见组织块边缘有细胞延展生长,第14天复层生长,呈网状,可顺利传代;牙髓细胞抗波形蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性;细胞I型胶原染色阳性,连续培养的牙髓细胞可形成矿化结节,符合牙髓细胞的形态学特征和生物学特性。结论酶消化组织块培养人牙髓细胞方法简单可行,具有较高的成功率。  相似文献   

10.
目的:体外培养人肝癌组织伴生成纤维细胞,观察其生长状态,为进一步研究其功能奠定基础。方法:应用组织块培养法进行人肝癌伴生成纤维细胞的原代培养,细胞铺满培养瓶底后首次传代,通过胰酶消化法和反复贴壁法进行成纤维细胞的纯化;通过倒置显微镜观察细胞形态、免疫组织化学方法检测细胞膜波形蛋白(v im entin)、角蛋白(keratin)表达情况,对细胞进行鉴定。结果:组织块法原代培养约1周可见纤维样细胞从组织块周围游出,5周左右细胞基本长满培养瓶底。首次传代时应用胰酶消化法进行成纤维细胞的初次纯化,第2次转种时先后应用酶消化法和反复贴壁法再次进行细胞纯化,第3代以后基本可获得呈典型克隆性生长、长梭形纤维样细胞,生长周期短。免疫组化染色结果为v im entin染色阳性,keratin染色阴性。结论:在体外成功培养了人肝癌组织伴生成纤维细胞,并对其生物学性状进行了初步探讨,为进一步研究其与肝癌细胞生长、浸润及转移的关系等机制奠定了基础。  相似文献   

11.
Chen JX  Lu YC  Ying K  Ding XH  Hu GH  Luo C  Lou MQ  Li Y  Tang R  Xie Y 《中华医学杂志》2004,84(8):622-627
目的 探讨人脑胶质瘤发生发展中相关基因的表达及功能,初步建立基于基因表达谱的胶质瘤分子病理学分类方法。方法 用含13939种人类基因的BioStarH140S型表达谱芯片,以正常脑组织及胶质瘤组织总RNA制备的探针杂交芯片;ScanArray 4000扫描芯片,提取正常脑组织及胶质瘤组织差异基因并行生物信息分析,对部分新基因行Northern杂交、原位杂交等功能研究;Hierarchical聚类对差异基因进行特征提取,进行初步胶质瘤分子病理分类。结果 在正常脑组织与18例不同级别胶质瘤组织中筛选出1200条(8.61%)差异基因,其中395条(2.83%)基因尚未登录GeneBank,胶质组织瘤中348条基因表达上调,852条下调,信息分析与细胞信号传导等多类基因密切相关;Northern、原位杂交显示新基因与胶质瘤密切相关;聚类发现微管相关蛋白、黏附素超家族蛋白、细胞外基质相关基因等与分子分型相关,基于基因表达谱的分子病理分类与依据细胞形态的病理学分类基本一致,且更能反映胶质瘤发生发展的内在本质。结论 胶质瘤发生发展存在多类基因表达改变,表达谱芯片对胶质瘤分类具有特异性高、重复性好、样本量少的特点,基因表达谱及相关新基因的发现和分子病理学分类有助于阐明胶质瘤分子病理学机制。  相似文献   

12.
Fang Q  An N  Wu XY  Liu QL  Feng SH 《中华医学杂志》2004,84(8):667-670
目的 产前诊断多胎妊娠的合子性质并检测染色体21三体、18三体、13三体和性染色体三体异常。方法 选择因各种指征产前诊断或拟行选择性减胎的多胎妊娠17例38个胎儿,抽取羊水或脐血及其父母外周血,采用短串联重复序列聚合酶链反应(short tandem repeat and polymerase chain reaction,STR-PCR)技术检查胎儿的合子性质,同时检查有无上述染色体异常;选择18个单胎妊娠产前诊断胎儿及其父母的样本,作为染色体三体检测的对照组。结果 7例体外受精胚胎移植的多胎妊娠均为多合子;7例伴有1胎畸形的多胎妊娠,仅1例为双合子双胎。本组多胎妊娠胎儿未发现有上述染色体三体异常。对4例多合子多胎于妊娠中期行减胎术,预后良好。结论 STR-PCR技术可快速、准确鉴定多胎合子性质,同时诊断胎儿染色体三体,有助于多胎妊娠的产前监测;当出现1胎畸形和拟行减胎术时,有助于选择处理方式。  相似文献   

13.
易瑞莎对H22肝癌小鼠的抑癌作用   总被引:12,自引:1,他引:11  
Zhu BD  Yuan SJ  Xu JM  Zhao QC  Li X  Li Y  Hao LH 《中华医学杂志》2004,84(8):684-686
目的 探讨易瑞莎 (IRESSA)对小鼠H2 2肝癌移植瘤生长的抑制作用。方法 H2 2肝癌移植瘤小鼠随机分为口服对照组、生理盐水对照组、顺铂d1 5组、顺铂d6 10组、易瑞莎组、易瑞莎 顺铂先合用组、易瑞莎 顺铂后合用组。易瑞莎用量为 10 0mg/kg体重 ,每日灌胃 1次 ,共 10d(d1 10 )。顺铂用量为 1 2mg/kg体重 ,每日腹腔内注射 1次 ,共 5d(d1 5或d6 10 )。检测肿瘤生长抑制率 (抑瘤率 ,IR)、小鼠体重变化、脾脏指数 (SI)、血白细胞数和血红蛋白值。结果 易瑞莎组抑瘤率与顺铂d1 5组、顺铂d6 10组、易瑞莎 顺铂先合用组抑瘤率相近 (P >0 0 5 ) ,分别为 4 1%、5 4 %、4 6 %和 5 6 %。易瑞莎 顺铂后合用组的抑瘤率 (2 6 % )明显低于易瑞莎 顺铂先合用组 (P <0 0 1)和顺铂d6 10组 (P <0 0 5 )。与口服对照或生理盐水对照组比较 ,易瑞莎组脾脏指数和净体重差异无显著意义 (P >0 0 5 )。易瑞莎 顺铂先或后合用两组的脾脏指数和净体重 ,与易瑞莎组比较明显下降 (P <0 0 1)。结论 易瑞莎对小鼠H2 2肝癌移植瘤生长具有显著抑制作用。  相似文献   

14.
Yan PX  Wang ZC  Yu CJ  Guan SS 《中华医学杂志》2004,84(8):628-631
目的 探讨第四脑室巨大室管膜瘤的影像学特征、手术切除情况及预后。方法 回顾性分析了22例疝入颈椎管的巨大四脑室室管膜瘤病人的临床资料。所有病人术前均进行了磁共振成像(MRI)检查,16例还进行了CT检查,所有肿瘤除占据四脑室外,还经四脑室正中孔疝入颈椎管,深达C2或C3平面。结果 所有病人接受枕下和C13后正中入路肿瘤切除术,全切除20例,近全切除2例,术后6例病人接受放疗。平均随访5.5年,1例复发又行手术切除,其他病人无复发,5年存活率100%,所有病人均恢复正常工作和生活。结论 颅脊管型四脑室巨大室管膜瘤是一种预后较好的肿瘤,手术全切除率高,复发率低,术后结合放疗可以获得理想的预后。  相似文献   

15.
腹腔镜脾切除治疗特发性血小板减少性紫癜的疗效观察   总被引:5,自引:2,他引:3  
Wang XF  Cai XJ  Li W  Yu H  Liang X  Cai XY 《中华医学杂志》2004,84(8):653-655
目的 探讨腹腔镜脾切除术治疗特发性血小板减少性紫癜(ITP)的手术安全性及临床疗效。方法 对21例ITP患者行腹腔镜切脾的临床资料进行回顾性分析。结果 21例ITP术后1周内血小板很快上升,术中失血少,全组均于术后24h内恢复胃肠蠕动,术后6h下床活动,平均住院时间4d。发生并发症4例,1例中转开腹,1例因术中渗血行腹腔镜下再次止血,1例膈下感染,1例皮下气肿。其中16例得到随访,2例复发。结论 腹腔镜脾切除术治疗ITP是安全可行的,且临床疗效显著。  相似文献   

16.
原位心脏移植43例   总被引:15,自引:2,他引:13  
Chen LW 《中华医学杂志》2004,84(8):646-648
目的 探讨43例同种异体原位心脏移植的初步经验和体会。方法 自1995年8月至2003年5月福建医科大学附属协和医院心外科共为43例终末期心脏病患者实施了原位心脏移植。对这些患者的手术效果及其影响因素进行回顾性总结。结果 术后早期死亡7例,分别死于急性右心功能衰竭(5例)、感染(1例)和急性肾功能衰竭(1例),死亡率为16.3%;晚期死亡5例,分别死于急性排斥反应(2例)、感染(2例)和心律失常(1例)。长期生存的患者生活质量良好。结论 心脏移植是治疗终末期心脏病的有效方法。低肺血管阻力受体的选择和合理的免疫抑制治疗方案的府用是心脏移植成功的关键。  相似文献   

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