电针对MCAO模型大鼠海马CA1区P-gp表达的影响

目的:研究电针内关对局灶性脑缺血模型大鼠海马CA1区微血管内皮细胞P-gp表达的影响,探讨针刺治疗脑缺血的机制。方法:采用大脑中动脉栓塞法(MCAO)复制局灶性脑缺血模型,电针内关、地机,应用免疫组化法观察各组大鼠海马CA1区P-gp的表达。结果:MCAO模型大鼠海马CA1区微血管内皮细胞MDR1表达下降,30d时表达与15d相比明显增多,有显著性差异(P<0.05),表现为时间依赖性升高。针刺内关穴后P-gp的表达显著增多,并且针刺天数不同疗效也不同。结论:针刺对MCAO大鼠海马CA1区P-gp的表达有良性调节作用。     

侯氏黑散及其拆方对MCAO大鼠神经病理学的影响

目的:研究侯氏黑散及其拆方对大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠的保护作用,并探讨侯氏黑散组方配伍的意义。方法:线栓法阻断大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血损伤模型,以Bederson10分制评分标准对实验大鼠作行为评分,采用HE染色对脑缺血损伤部位进行整体观察,计数海马CA1区和CA3区完整的锥体细胞;尼氏体染色结合图像分析技术检测MCAO大鼠海马锥体细胞尼氏体的变化。结果:侯氏黑散全方及其拆方君加臣药、君加臣加佐药可明显改善MCAO大鼠神经功能缺损,减轻海马神经元变性程度,增加海马锥体细胞数;侯氏黑散全方组海马锥体细胞尼氏体的脱失较模型组减少,积分光密度值显著增高。结论:侯氏黑散具有明显保护海马神经细胞的作用,全方组的疗效明显优于拆方组,符合方剂学整体取性原理。     

参附注射液对大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区Caspase-3表达的影响

目的研究参附注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马CA1区半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的影响。方法成年雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、参附注射液治疗组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）再灌注模型,应用HE染色检测海马CA1区组织病理学改变,免疫组织化学法检测海马CA1区神经细胞Caspase-3的表达。结果缺血组大鼠海马CA1区神经细胞Caspase-3的表达较假手术组显著增强（P〈0.01）,给予参附注射液处理后,Caspase-3的表达较缺血组减弱（P〈0.01）,差异均有统计学意义。结论参附注射液可降低大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马CA1区Caspase-3的表达,可能与其脑保护作用有关。     

缝隙连接胞间通讯对大脑中动脉缺血后海马迟发性神经元死亡的影响

目的 观察探讨星型胶质细胞缝隙连接胞间通讯变化对大鼠大脑中动脉缺血再灌流后海马区迟发性神经元死亡(DND)的影响.方法 建立大鼠短暂性大脑中动脉缺血再灌流模型.利用尼氏染色、TUNEL方法 观察再灌流后星型胶质细胞缝隙连接蛋白抑制剂CBX对海马DND的影响.结果 大脑中动脉缺血再灌流后3 d、7 d海马神经元明显脱失,部分CA1、CA2区神经元凋亡;应用CBX后TUNEL阳性神经元数目明显减少,幸存神经元数目增加.结论 星型胶质细胞缝隙连接蛋白抑制剂CBX可有效抑制大鼠大脑中动脉缺血后海马神经元DND.     

丙泊酚预处理对脑缺血再灌注大鼠认知功能及wnt信号通路的影响

目的:研究丙泊酚预处理对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元的影响及其机制。方法:采用Longa线栓改良法制作大鼠左大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,阻断左侧大脑中动脉,2 h后拔出线栓造成再灌注损伤。将大鼠分为三组:假手术组(S组):线栓仅进入10 cm后拔出;缺血再灌注组(M组):线栓阻断大脑中动脉后,尾静脉泵注20 mL/h 0.9%氯化钠溶液;丙泊酚组(P组):线栓阻断大脑中动脉后,尾静脉泵注20 mg/(kg·h)丙泊酚。24 h后用Longa E神经症状评分法,选取1～3分大鼠,每组8只进行实验。造模后行水迷宫试验评估认知功能,HE染色观察海马区形态学改变,Western blotting检测wnt3a、wnt5a、β-catenin蛋白表达。结果:与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01);海马CA1区神经元细胞减少,变性细胞增多;脑组织中wnt3a、wnt5a、β-catenin蛋白表达上调(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,丙泊酚预处理后大鼠空间认知和学习能力改善(P<0.05);海马CA1区正常神经元细胞增多,变性、坏死细胞减少;wnt3a、wnt5a、β-catenin蛋白表达明显增强(P<0.01)。结论:丙泊酚预处理脑缺血再灌注大鼠可能通过激活经典和非经典wnt信号通路,减少海马神经元的损伤,改善大鼠空间认知和学习能力。     

三七总皂苷对脑缺血再灌注后海马CA1区损伤的影响

目的 探讨大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经元损伤的病理改变及三七总皂苷(PNS)对其的影响。方法 采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断(MCAO)局灶性脑缺血模型，缺血2h，再灌注46h。大鼠随机分为假手术组、缺血再灌模型组、PNSI组和PNSⅡ组。以神经症状缺损记分、海马CA1区组织学分级、海马CA1区神经元密度等作为评价指标。结果 三七总皂苷组神经症状明显减轻或接近正常，其行为评分得分明显低；三七总皂苷组海马CA1区组织学分级降低、神经元密度增加，与模型组问有显著性差异。结论 三七总皂苷能减轻脑缺血再灌注引起的损伤性神经症状及海马CA1区神经元损伤的程度。     

大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3的表达及纳洛酮的影响

目的:探讨Caspase-3在缺血再灌注大鼠海马神经元中的表达及纳洛酮的影响。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,左侧MCAO1h,再灌注23h后处死,对照组给予生理盐水,纳洛酮组给予纳洛酮,海马区Caspase-3的表达通过免疫组化来测定;缺血侧海马区凋亡细胞数采用TUNEL法测定。结果:对照组、纳洛酮组、假手术组缺血侧海马区平均密度值分别为0.130±0.012、0.062±0.004、0.053±0.006。对照组大鼠缺血侧海马区Caspase-3的表达较假手术组显著增强(P<0.01),给予纳洛酮处理后,Caspase-3的表达减弱(P<0.01)。对照组缺血侧海马区许多神经元有凋亡现象,纳洛酮组凋亡神经元减少,假手术组偶见凋亡神经元。结论:短暂的脑缺血可导致海马区Caspase-3的表达增加,凋亡神经元增多。海马区Caspase-3的激活与神经元的凋亡相关,纳洛酮可抑制海马区Caspase-3的表达,减少神经元的凋亡。     

猕猴大脑中动脉缺血后海马CA1区结构改变及胰岛素样生长因子-1的表达

目的:探讨猕猴大脑中动脉阻塞/再灌(MCAO)后海马CA1区胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达。方法:采用猕猴MCAO模型,缺血2h,再灌24h,用免疫组化方法检测脑缺血后IGF-1蛋白的表达。结果:MCAO后缺血侧海马CA1区形态结构改变,神经元密度降低,IGF-1蛋白阳性细胞数与假手术组比较明显减少(P<0.05)。结论:MCAO缺血侧海马CA1区结构改变,IGF-1蛋白表达减少,提示海马内IGF-1在脑缺血损伤中可能具有一定的作用。     

复方当归注射液对脑缺血神经保护作用的实验研究

目的:研究复方当归注射液对其对脑缺血的保护作用.方法:建立阻断大鼠大脑中动脉所致局灶性脑缺血、结扎大鼠双侧颈总动脉和花生四烯酸诱发的急性血栓性脑缺血模型的动物模型,测定复方当归注射液的神经保护作用.结果:复方当归注射液可以增加脑缺血大鼠脑海马CA1区神经细胞数量.结论:复方当归注射液可促进脑缺血及脑缺血后遗症神经功能恢复,减轻后遗症的神经功能障碍,对脑缺血具有保护作用.     

细胞外信号调节激酶在局灶性脑缺血中的表达

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)在局灶性脑缺血再灌注海马神经元中的表达.方法:线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分成假手术组(sham组)、脑缺血再灌注组(I/R组),每组根据再灌注时间不同再分为3,6,24,48和72 h亚组,每亚组各6只鼠.在预定时间点进行HE染色观察组织学变化;TUNEL法检测CA1区细胞凋亡的动态变化规律;免疫组织化学方法研究ERK的表达特征.结果:MCAO后海马神经元存活数量较假手术组明显减少;凋亡细胞大量出现,以48 h为高峰;MCAO后3 h,磷酸化ERK在局灶性脑缺血大鼠脑组织中显著升高,6 h达到最高峰,72 h恢复到正常水平.结论:脑缺血再灌注损伤可能导致ERK活性上调,参与缺血后神经细胞凋亡过程.