丹参酮ⅡA对人膀胱癌J82细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响

目的探讨丹参酮ⅡA在体外对人膀胱癌J82细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法以不同浓度的丹参酮ⅡA处理J82细胞,分别采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（AnnexinV-FITC）/碘化丙锭（PI）双标记流式检测法、Transwell侵袭实验及划痕实验检测J82细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移情况。结果丹参酮ⅡA可抑制J82细胞增殖,且呈浓度与时间依赖性（均P＜0.05）。1、3、5滋mol/L丹参酮ⅡA处理组总凋亡率分别为12.23%、14.74%、18.40%,均高于对照组的3.36%（P＜0.05）,且呈浓度依赖性（P＜0.05）。对照组、1滋mol/L组、3滋mol/L组、5滋mol/L组细胞侵袭数比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,且呈浓度与时间依赖性（均P＜0.05）。对照组、1滋mol/L组、3滋mol/L组、5滋mol/L组划痕后12、24、36h划痕愈合率比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,呈浓度依赖性（P＜0.05）。结论丹参酮ⅡA在体外可抑制膀胱癌J82细胞增殖,促进其凋亡,降低其侵袭和迁移能力。     

大鼠骨髓内皮祖细胞SPIO标记及检测

目的：研究大鼠骨髓内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCS）的分离、培养、SPIO标记,SPIO对EPCS的标记效果及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响,为进一步的实验研究奠定基础。方法：SD大鼠体重120～150 g,采用梯度密度离心法和贴壁法获取大鼠EPCS,采用25μg/ml SPIO对其标记,比较标记和未标记的EPCS。普鲁士蓝染色观察铁标记率,台盼蓝检测细胞活力,MTT法检测细胞增殖力,Calcein-AM/PI染色检测细胞活性及细胞膜完整性,AO/PI染色检测细胞凋亡率。结果：分离培养EPCS 7～10 d,细胞集落相互连接,呈典型的铺路石样外观。普鲁士兰染色显示SPIO（25μg/ml,24 h）对细胞的标记率接近94%;比较SPIO标记及未标记的EPCS,细胞活力分别为（94.34±0.25）%和（95.33±0.31）%;MTT法检测两组间相比差异无统计意学义（P〉0.05）;Calcein-AM/PI染色检测细胞的活性和膜完整性,存活率分别为96%和97%;AO/PI染色两组细胞的凋亡率均为5%。结论：采用梯度离心法从骨髓中分离单个核细胞,经诱导培养可实现内皮祖细胞的分离培养。25μg/ml浓度的SPIO细胞标记率高,对细胞毒性小,且不影响EPCS的活力、增殖及凋亡。     

褪黑素联合顺铂对人食管癌Eca109细胞株的增殖抑制作用研究

目的：观察褪黑素（Mel）联合顺铂（DDP）对人食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响.方法：以DDP 2.5 mg/L、不同浓度Mel及两药联合作用于食管癌Eca109细胞.通过MTT实验检测用药后对食管癌Eca109细胞增殖的影响,并计算抑制率;通过集落克隆形成实验观察用药后对细胞集落克隆形成的影响;通过流式细胞仪检测用药后细胞凋亡率的变化.结果：DDP 2.5 mg/L与不同浓度Mel联合用药组对食管癌Eca109细胞生长抑制率均明显高于单独使用DDP或Mel组（P＜0.01）;10-5 mol/L Mel诱导人食管癌Eca109细胞的24 h凋亡率为7.8%,10-5 mol/L Mel与2.5 mg/L DDP联合刺激人食管癌Eca109细胞的24 h凋亡率为32.0%,高于DDP本身诱导的24 h凋亡率9.7%（P＜0.01）.结论：Mel可增强DDP对人食管癌Eca109细胞增殖的抑制作用,并增强其诱导凋亡作用,为临床食管癌的治疗提供了一定的实验研究基础.     

2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的：探讨2-甲氧雌二醇（2-ME）对HL60白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法：用MTT法和流式细胞术检测2-ME对HL60的增殖抑制及促凋亡作用,用流式细胞技术检测Bcl-2蛋白的表达。结果：随着2-ME浓度升高及作用时间延长,HL60细胞增殖明显受抑制（P〈0.05）,细胞凋亡率明显增加（P〈0.05）,当2-ME浓度为50μmol/L时,细胞凋亡率达65.8%;2-ME（30μmol/L）作用72h后,Bcl-2的表达较对照组显著减少（P〈0.05）。结论：2-ME对HL60细胞增殖有抑制及促凋亡作用,Bcl-2表达下调在此过程中可能发挥重要作用。     

环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨环巴胺（Cyclopamine）对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响.方法 不同浓度环巴胺（1、5、10、15μmol·L^-1）干预LNCaP细胞,分别在不同作用时间（24、48、72h）用MTT法检测环巴胺对LNCaP细胞增殖的抑制,Hoechst染色观察细胞凋亡形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化.结果 环巴胺5、10、15μmol·L^-1浓度组对LNCaP细胞增殖有显著抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.随着浓度的增大对细胞增殖的抑制作用显著增强.10μmol·L^-1组于48 h达到半数抑制量（IC50）.环巴胺10μmol·L^-1组24、48、72h凋亡率分别为37.21％、57.38％、57.98％,15μmol·L^-1组凋亡率分别为21.16％、71.31％、72.90％,与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）.随着浓度的增大细胞凋亡率逐渐增大.细胞凋亡形态的改变随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长而增强.结论 环巴胺能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡.     

灰树花多糖治疗卵巢癌体外实验观察

目的体外实验探讨灰树花多糖治疗卵巢癌的作用。方法以不同浓度灰树花多糖(终浓度为100、250和500μg/ml)处理人SKOV3细胞,台盼蓝染色和MTT检测对细胞增殖的抑制作用,Annexin V/PI双标记流式细胞术检测与荧光显微镜观察检测细胞凋亡。另设阴性对照组,仅用培养液;10μg/ml顺铂(DDP)作为阳性对照。结果台盼蓝排染和MTT检测证实,灰树花多糖明显抑制SKOV3细胞增殖;Annexin V/PI双染流式细胞术检测显示,灰树花多糖100、250、500μg/ml作用细胞24、48、72 h均能诱导细胞凋亡,凋亡率与时间、剂量存在依赖关系;Annexin V/PI双染荧光显微镜观察检查细胞凋亡率显示了与流式细胞术检测类似结果。结论灰树花多糖显著抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

La（C7H5O3）2·（C9H6NO）抑制Hela细胞生长作用机制研究

目的：观察La（C7H5O3）2·（C9H6NO）对体外培养的Hela细胞的生长抑制作用,并进一步探讨其作用机制。方法：应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,Annexin V—FITC染色法检测细胞凋亡率。结果：不同浓度的La（C7H5O3）2·（C9H6NO）处理Hela细胞24～96h后,细胞增殖受到显著抑制,并呈浓度及时间依赖性;0．5、1．0、5．0、10．0μmol／L La（C7H5O3）2·（C9H6NO）处理72h后,Hela细胞G0/G1期细胞数量显著增加,S期细胞数量显著减少（P〈0．01）;各浓度组细胞凋亡率均显著增加（P〈0．01）。结论：La（C7H5O3）2·（C9H6NO）对Hela细胞具有生长抑制作用,其机制与阻滞细胞周期及诱导凋亡有关。     

银杏叶提取物对叔丁基过氧化氢损伤人脐带间充质干细胞的干预作用

【目的】观察银杏叶提取物EGb761对叔丁基过氧化氢（t-BHP）诱导人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）损伤的干预作用。【方法】取原代培养的hUC-MSCs,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖,确定建立氧化应激损伤细胞模型所需的t-BHP浓度以及EGb761的最适作用浓度;采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（FITC/PI）双染流式细胞术测定100 mg/L EGb761对100μmol/L t-BHP所致hUC-MSCs凋亡的影响,同时检测脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化,并采用实时荧光定量PCR观察p53和p21Cip1/Waf1表达水平的改变。【结果】用10～200 mg/L的EGb761预处理3 h可降低hUC-MSCs对100μmol/L t-BHP所致细胞增殖抑制的敏感性,浓度超过100 mg/L后EGb761对hUC-MSCs的保护效果无明显提高;100 mg/L EGb761可显著抑制100μmol/L t-BHP作用6 h后对hUC-MSCs凋亡及其胞内MDA的诱导作用,保持hUC-MSCs内的SOD活性,并显著降低t-BHP损伤的hUC-MSCs内p53和p21Cip1/Waf1的表达。【结论】 EGb761具有保护被氧化应激损伤的hUC-MSCs的作用,其机制可能与p53/p21信号通路的下调有关。     

没药挥发油对大鼠神经胶质瘤细胞体外增殖的抑制作用

目的 探讨没药挥发油 (没药油) 对大鼠神经胶质瘤细胞 C6增殖抑制作用。方法 应用 MTT 法检测不同质量浓度没药油对 C6 细胞活性的作用;BrdU 掺入试验检测细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 没药油对 C6 细胞活性有明显的抑制作用,其抑制率与质量浓度有关;没药油作用 24 h 后,C6 细胞 BrdU 标记指数明显降低;而不同质量浓度没药油作用24 h 后,C6 细胞凋亡率与对照组相比无显著改变。结论 没药油对大鼠神经胶质瘤细胞株 C6 的增殖具有明显的抑制作用,但诱导细胞凋亡的作用不明显。     

左旋肉碱对高糖条件下人腹膜间皮细胞增殖、凋亡及纤维连接蛋白分泌的影响

目的：探讨左旋肉碱对高糖条件下体外培养人腹膜间皮细胞增殖、凋亡及纤维连接蛋白（FN）分泌的影响。方法：以不同浓度左旋肉碱作用体外培养人腹膜间皮细胞，MTT法测定细胞增殖，Annexin V-FITC／PI双标记法检测细胞凋亡，ELISA法检测培养液中FN浓度。结果：不同浓度左旋肉碱作用24h后，0．1％左旋肉碱组细胞增殖活性显著升高（P〈0．05），作用72h后0．5％及1．0％左旋肉碱组细胞增殖活性明显降低（P〈0．05）。作用48及72h后0．05％及0．1％左旋肉碱组细胞凋亡率降低。作用24h后0．05％左旋肉碱组培养液中FN浓度升高（P〈0．05），作用72h后左旋肉碱组培养液中FN浓度均下降（P〈0．01）。结论：高糖条件下一定浓度的左旋肉碱可以促进人腹膜间皮细胞增殖、减少其凋亡。