芍药苷对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及其产生细胞因子的影响

目的研究芍药苷(PF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)吞噬功能及其产生细胞因子的影响。方法采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导AA大鼠模型,无菌取PMΦ,吞噬功能采用中性红法测定,PMΦ培养上清液中IL-1活性的测定采用小鼠胸腺细胞增殖法,TNF-α和PGE2含量的测定采用放射免疫测定法。结果PF能抑制关节肿胀,降低AA大鼠PMΦ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平。结论PF对AA大鼠的抗炎和免疫抑制作用与其降低AA大鼠PMΦ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平有关。     

原花青素对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞iNOS表达的影响

目的:研究原花青素对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)基因表达的影响。方法:建立大鼠佐剂性关节炎(AA)模型。硝酸还原酶法测大鼠关节液中NO的含量;RT-PCR和Western blot分别检测大鼠腹腔巨噬细胞内iNOS mRNA和蛋白的表达;同时ELISA检测大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-α的含量。结果:原花青素显著减低AA大鼠足跖炎症组织中NO的含量以及血清中IL-1β、TNF-α的水平,同时下调AA大鼠腹腔巨噬细胞iNOS mRNA和蛋白的表达。结论:原花青素对大鼠佐剂性关节炎的抗炎作用可能与其降低TNF-α和IL-1β的水平,抑制iNOS的mRNA和蛋白表达从而减少NO的释放有关。     

三氯化钐,三氯化镨对小鼠腹腔巨噬细胞的影响

目的：探讨小剂量三氯化钐（ＳｍＣｌ３）三氯化镨（ＰｒＣｌ３）对小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭ）形态结构及功能的影响,方法：选用雄性昆明小鼠,分别腹腔注射给予０．０５ｍｇ·ｋｇ６－１,０．５ｍｇ·ｋｇ＾－１ＳｍＣｌ３和ＰｒＣｌ３连续７ｄ采用定量酶细胞凝集素亲合细胞化学,透射电镜,扫描电镜及吞噬实验现察ＰＭ的结构和功能变化。结果：两种剂量ＳｍＣｌ３,ＰｒＣｌ３均使ＰＭ的酸性磷酸酶（ＡＣＰ）,α－醋酸萘酚酯酶（     

A771726体外给药对LPS刺激的胶原性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的 研究来氟米特活性代谢产物A771726对LPS刺激的胶原性关节炎(CIA)大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)免疫功能的影响及其可能的机制.方法 应用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)建立大鼠CIA模型,无菌制备CIA大鼠PMΦ悬液,A771726(0.1、1、10 μmol/L)体外用药,小鼠胸腺细胞增殖法测定CIA大鼠PMΦ分泌白细胞介素1(IL-1)的水平;化学法检测A771726对CIA大鼠PMΦ氧化应激的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测A771726对CIA大鼠PMΦ中TIR4mRNA表达的影响.结果 A771726(1、10μmol/L)体外用药,可有效降低CIA大鼠PMΦ的分泌功能;显著改善CIA大鼠PMΦ的氧化应激状态;RT-PCR结果表明,A771726(1、10μmol/L)体外用药可显著降低CIA大鼠PMΦ中TLR4mRNA的表达.结论 A771726(1、10 μmol/L)能调节LPS刺激的CIA大鼠PMΦ分泌功能与氧化应激,其机制是否与A771726抑制CIA大鼠PMΦ中TLR4 mRNA的表达水平有关值得进一步探讨.     

氯化钐,氯化镨对免疫功能上小鼠腹腔巨噬细胞的影响

目的：研究氯化钐、氯化镨对地塞米松（ＤＸ）所致免疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭ）的影响。方法：选用昆明小鼠连续肌注ＤＸ建立免疫功能低下模型后,腹腔注射０．０５ｍｇ／ｋｇ,０．５ｍｇ／ｋｇＳｍＣｌ３和ＰｒＣｌ３,连续７ｄ,采用定量细胞化学、电子显微镜吞噬实验方法观察ＰＭ的形态结构及功能。结果：两种剂量ＳｍＣｌ３和ＰｒＣｌ３对ＤＸ所致免疫功能低下小鼠ＤＭ,可使酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、α－醋酸萘酚酯酶（     

氯化钆对胰岛素原剪切的影响

【立论依据】 胰岛素是维持机体糖代谢平衡的最重要的激素。在胰岛β细胞中,胰岛素原需要经过激素原转化酶(PC3和PC2)的剪切才能生成真正具有降低血糖作用的胰岛素。因此,激素原转化酶对胰岛素的成熟具有决定作用。众多研究表明,糖尿病患者和动物胰岛中激素原转化酶的含量显著不足。而我们的前期实验提示,稀土化合物氯化钆(GdCl3)能够增加激素原转化酶的表达量,从而促进胰岛素原的剪切成熟。 【设计思路】 糖尿病小鼠经氯化钆治疗后,检测小鼠血清中胰岛素与胰岛素原的含量,以及胰岛中激素原转化酶的表达量。 【实验内容】 以高脂喂养的C57BL/6J糖尿病小鼠作为研究对象,随机分为两组,分别腹腔注射氯化钆(治疗组)和生理盐水(对照组)。注射4周后,抽取治疗组和对照组小鼠的血清,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰岛素原和胰岛素的含量,进而分析胰岛素的剪切成熟情况。同时,分离提纯两组小鼠的胰岛,通过实时定量PCR和Western方法检测胰岛中激素原转化酶(PC3和PC2)表达量的变化。 【材料】 C57BL/6J小鼠,高脂饲料,胰岛素原ELISA试剂盒,胰岛素ELISA试剂盒,PC3和PC2的引物及抗体。 【可行性】 该实验所需要的多项实验技术,如糖尿病小鼠模型的建立、小鼠胰岛的分离纯化、胰岛素及胰岛素原的检测等方法,均已成熟。设计实施该实验的团队,已经具备了一定的生理学、生物化学、分子生物学和细胞学等基础知识,并且参与过多项动物及分子生物学实验,在实验的基础操作方面已十分熟练,具备参加科研的基础知识和动手能力。同时,团队成员做事踏实认真,并能独立查阅国内外文献,具有较强的解决问题、设计实验的能力。此外,该团队的指导教师长期从事糖尿病治疗的相关研究,能够对该课题的实施进行必要的指导。 【创新性】 氯化钆对糖尿病的治疗作用鲜有报道,且作用机制尚未阐明。氯化钆对胰岛素的作用效果及机制尚无任何报道,本实验属首次。     

三氯化钐、三氯化镨对小鼠腹腔巨噬细胞的影响

目的：探讨小剂量三氯化钐（ Ｓｍ Ｃｌ３）,三氯化镨（ Ｐｒ Ｃｌ３）对小鼠腹腔巨噬细胞（ Ｐ Ｍ ）形态结构及功能的影响。方法：选用雄性昆明小鼠,分别腹腔注射给予 ００５ ｍ ｇ·ｋｇ－ １,０５ ｍ ｇ·ｋｇ－ １ Ｓｍ Ｃｌ３和 Ｐｒ Ｃｌ３,连续７ ｄ。采用定量酶细胞化学、凝集素亲合细胞化学、透射电镜、扫描电镜及吞噬实验观察 Ｐ Ｍ 的结构和功能变化。结果：两种剂量 Ｓｍ Ｃｌ３ 、 Ｐｒ Ｃｌ３ 均使 Ｐ Ｍ 的酸性磷酸酶（ Ａ Ｃ Ｐ）、α 醋酸萘酚酯酶（ Ａ Ｎ Ａ Ｅ）含量明显增加;刀豆蛋白 Ａ 受体（ Ｃｏｎ Ａ Ｒ）数目增多,吞噬中性红能力增强。电镜下 Ｐ Ｍ 胞质内溶酶体增多,表面皱褶及微绒毛增多。结论：小剂量 Ｓｍ Ｃｌ３、 Ｐｒ Ｃｌ３ 对小鼠 Ｐ Ｍ 的形态结构和功能有明显的促进作用。     

小剂量氯化钐与氯化铈对大鼠血清生长激素水平的影响

本研究向大鼠腹腔内隔日分别注射四次不同剂量的氯化钐(SmCl_3)或氯化铈(Ce-Cl_3),末次注射后次日取血清用放射免疫法测定生长激素(GH)、甲状腺激素 T_3与 T_4水平。结果显示,SmCl_3在120mg/kg、CeCl_3在40mg/kg均致GH水平显著增高,但前者伴有严重的机体中毒症状,后者则无。各组T_3、T_4水平均无明显变化。     

三七总苷对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮的影响

[目的]研究三七总苷（PNS）对佐剂性关节炎（AA）大鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮（NO）的影响。[方法]大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠AA模型,采用硝酸还原酶法检测AA大鼠腹腔巨噬细胞释放的NO。[结果]体外给药PNS0．4mg／ml,作用4h时,增加AA大鼠NO释放（P〈0．05）;体外给药PNS0．2mg／ml及0．4mg／ml,作用8h时,抑制AA大鼠NO释放（P〈0．05,P〈0．01）;体外给药PNS0．8mg／ml及PNS1．6mg／ml,作用24h时,增加AA大鼠NO释放（P〈0．01,P〈0．05）。[结论]PNS体外给药随浓度及作用的时间变化,对AA大鼠释放NO有双向调节作用,PNS抑制AA大鼠腹腔巨噬细胞释放NO可能在AA治疗中起一定的作用。     

B型利钠肽对小鼠腹腔巨噬细胞MCP-1蛋白表达的双向调节作用

目的观察B型利钠肽（B type nalriuretic peptides,BNP）在小鼠腹腔巨噬细胞内介导单核细胞趋化蛋白一1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）蛋白的表达,探讨BNP在小鼠腹腔巨噬细胞中调节炎症反应的作用。方法原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,分别予不同剂量的BNP、BNP＋GC-A受体抑制剂（HS-142-1）、BNP＋肿瘤坏死因子-α（TNF-α）＋HS-142-1预处理细胞,设立空白对照组。提取培养细胞蛋白,采用Western blot法检测细胞内MCP-1蛋白表达。结果在小鼠巨噬细胞内BNP能够促进MCP-1蛋白表达,该作用可被BNP抑制剂HS-142-1所抑制;且TNF-α在巨噬细胞中促进MCP-1分泌的作用可以被BNP抑制。结论BNP能够促进巨噬细胞释放MCP-1,促进炎症反应的发生;同时BNP能够抑制TNF-α促进MCP-1蛋白分泌的作用,提示BNP具有炎症反应的双向调节作用。     

皮质酮对大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的 进一步明确天然糖皮质激素对巨噬细胞免疫功能的影响及其时效和量效关系.方法 收集大鼠腹腔巨噬细胞,分别用10～1 000 ng/ml的皮质酮(corticosterone,CORT)刺激,检测细胞的黏附、趋化和吞噬功能;使用ELISA试剂盒检测细胞培养上清中TNF-α的含量.结果 50 ng/ml的皮质酮显著增强巨噬细胞的黏附功能(P＜0.05),10 ng/ml和50 ng/ml的皮质酮刺激细胞后,其趋化功能均显著增加(P＜0.05).同时,50 ng/ml的皮质酮还可显著增强巨噬细胞的吞噬功能(P＜0.05)和促进巨噬细胞分泌TNF-α(P＜0.01),而使用高浓度皮质酮(500 ng/ml和1 000 ng/ml)处理时,巨噬细胞的上述功能增强趋势减弱或无增强;在0.5～5 h范围内,皮质酮处理1 h时细胞的吞噬功能和分泌TNF-α的功能增强最明显,刺激更长时间后其功能的增强趋势逐渐减弱.结论 一定剂量的天然糖皮质激素急性刺激可明显增强免疫功能.     

组织CD68+巨噬细胞与CD57+NK细胞对原发性食管癌生存状况的影响

目的：探究组织CD57+自然杀伤（natural killer,NK）细胞与CD68+巨噬细胞对原发性食管癌生存状况的影响。方法：回顾性分析2013年6月至2015年6月期间我院收治的96例原发性食管癌患者的临床资料。通过免疫组织化学染色法对患者CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞的浸润水平进行评估,分析96例患者CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润情况、细胞浸润水平与病理特征的关系、CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞与TNM分期的关系、细胞浸润对原发性食管癌患者生存状况的影响。结果：原发性食管癌患者上皮组织中CD57+NK细胞高度浸润程度为64.58％,CD68+巨噬细胞为51.04％。原发性食管癌患者上皮组织中CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润水平与患者的年龄、性别、肿瘤大小、N分期、T分期、TNM分期均无显著相关性（P＞0.05）。原发性食管癌患者CD57+NK细胞、CD68+巨噬细胞在TNM分期Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期上的比较,癌旁CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞计数无统计学差异（P>0.05）。Ⅰ-Ⅱ期患者癌中CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞计数分别为（8.35±5.36）个/HP和（39.43±14.05）个/HP,均明显高于Ⅲ-Ⅳ期患者[（5.34±4.55）个/HP、（20.18±9.62）个/HP],差异具有统计学意义（P<0.05）。采用 Cox模型（Forward：LR,引入α=0.05,剔除α=0.10）分析细胞浸润对原发性食管癌患者生存状况的影响。原发性食管癌患者肿瘤组织中CD57+NK细胞低浸润水平具有较高的死亡风险（P=0.046,RR=0.794,95％CI=0.633~0.996）;原发性食管癌患者肿瘤组织中CD68+巨噬细胞高浸润水平具有较高的死亡风险（P=0.000,RR=1.925,95％CI=1.364~2.717）。结论：CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润水平能够反映机体免疫状态,CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润水平检测在判断原发性食管癌患者的生存状况方面具有一定的临床价值。     

Effects of shenmai injection on expression of TNF- α mRNA in peritoneal macrophages of scald mice

Objective To explore the effect of shenmai injection (SI) on expression of TNF- α mRNA in peritoneal macrophages (pMΦs) of scald mice. Methods BALB/c mice were inflicted with 11% of body surface area Ⅲ degree scald and injected intraperitoneally (ip) with SI daily for 5 days, and expression of TNF- α mRNA in pMΦs was determined by semi- quantitative RT- PCR.Results In scald mice, the expression of TNF- α mRNA in pMΦs increased significantly, but it was reduced obviously (P&lt;0.01) after SI administration, while the livability was increased markedly (P&lt;0.05). Conclusions For scald mice, the cause of death at early stage might be related to the high expression of TNF- α mRNA in pMΦs and the use of SI can decrease the death rate.     

白黎芦醇对脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞活化的抑制作用

目的探讨脂多糖（LPS）诱导的大鼠腹腔巨噬细胞（PMA）活性变化及白黎芦醇（RESV）对它的抑制作用。方法分离大鼠PMA，随机分为对照组、LPS组和RESVI-V组。培养24h后，分别用免疫组化方法检测核网子-kB（NF-kB）活性，酶联免疫吸附法和硝酸还原法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）和一氧化氮（NO）水平。结果对照组仅有少量NF-kB的活化。LPS诱导后，PMA出现大量NF-kB的活化，继而细胞上清液中TNF-α、IL-1和NO的水平显著升高。RESV治疗后NF-kB的活性较PMA组逐渐降低，具有剂量依赖性，并且相应的细胞上清液中TNF-α、IL-1和NO水平明显降低。结论RESV可以抑制PMA中NF-kB的活化，从而减少TNF-α、IL-1和NO的过度分泌。     

淫羊藿甙对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

本实验根据小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力对巨噬细胞产生白细胞介素－１（ＩＬ－１）和肿瘤坏死因子的能力进行活测定。观察了淫羊藿甙对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。     

电离辐射对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响

本实验观察了不同剂量（０、５０、７５、１５０ｍＧｙ和２、４Ｇｙ）Ｘ线单次全身照射昆明系小鼠后腹腔巨噬细胞（Ｍ）对鸡红细胞（ＣＲＢＣ）吞噬消化功能的影响。其结果表明，５０和７５ｍＧｙ照射后３和５天Ｍ对ＣＲＢＣ的吞噬功能明显增加（Ｐ＜０．００１），７５ｍＧｙ照射后Ｍ消化功能更为显著（Ｐ＜０．０１），而２和４Ｇｙ照射后其吞噬和消化功能降低。提示，低剂量辐射能够刺激机体非特异性免疫功能，大剂量照射使之受抑制。     

Effects of Anti-inflammatory Agent No.6 for injection on the oxidative burst of rat peritoneal macrophages

Summary Anti-inflammatory Agent No.6 for injection (AI-6) is an effective anti-infective agent composed of four traditional Chinese medicinal herbs. It was demonstrated in our experiment that the agent was able to enhance oxidative burst of rat peritoneal macrophages as shown by the increased production of H₂O₂ and increased reduction of nitroblue tetrazolium (NBT). It seems likely that by these means AI-6 could promote the bactericidal function of macrophages. NBT reduction of macrophages was observed by both spectrophotometric quantification and electron microscopy. Project supported by the Science Fund of the Chinese Academy of Sciences.     

甘氨酸对大鼠腹腔巨噬细胞TNFα和IL-10表达的影响

目的 :观察甘氨酸对大鼠腹腔巨噬细胞产生TNFα和IL 10的影响。方法 :分离Wistar大鼠腹腔巨噬细胞后分别用RPMI 16 4 0或含 2mmol/L甘氨酸的RPMI 16 4 0培养液培养 ,测定脂多糖 (LPS) (5mg/L)刺激后 0h、3h、6h、12h、2 4h培养上清液中TNFα、IL 10水平及 12h 2者mRNA表达情况。结果 :①甘氨酸可明显降低LPS刺激后 3h、6h和 12hTNFα水平 (P分别 <0 .0 5 ,0 .0 5和 0 .0 1) ,并显著降低 12hTNFαmRNA表达量 (P <0 .0 1)。②甘氨酸明显增加 6h和 12hIL 10水平 (P分别 <0 .0 5和 0 .0 0 1)以及 12hIL 10mRNA表达量 (P <0 .0 5 )。结论 :甘氨酸可时间依赖性地在转录和翻译两个水平抑制LPS诱导的TNFα产生而增加IL 10表达