全反式维甲酸致大鼠胚胎肛门直肠畸形的实验研究

目的 利用全反式维甲酸制作大鼠先天性肛门直肠畸形模型,并对其合伴神经嵴细胞发育异常进行检测.方法 妊娠SD大鼠经口饲全反式维甲酸,孕20 d剖宫取出胎鼠,进行形态学观察和伴发畸形统计.结果 对照组获胚胎62只;全反式维甲酸致畸组获胚胎95只,先天性肛门直肠畸形占54.7%(52/95),其中伴发其他畸形者占36.5%(19/52),主要为神经嵴源性器官畸形,占78.9%(15/19).肛门直肠畸形组织HE染色可见直肠末端未与外界相通;HNK-1免疫组化染色呈棕黄色颗粒,沿肠壁分布,末端膨大处明显减少.结论 全反式维甲酸可成功诱导大鼠先天性肛门直肠畸形,合伴畸形以神经嵴源性器官发育异常为主,提示视黄酸信号系统在消化道和神经嵴源性器官胚胎发育中起重要作用.     

全反式维甲酸诱导大鼠肠神经系统发育异常的实验研究

目的利用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)制作大鼠肠神经系统发育异常的动物模型,检测蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)及突触素(synaptophysin,SY)在胎鼠直肠肠壁胚胎发育过程中的分布,了解视黄酸(retinoie acid,RA)信号系统在鼠肠神经系统发育中的作用。方法妊娠SD母鼠共16只,随机分为两组,实验组在孕10d予ATRA一次性灌胃,对照组仅给等量橄榄油。孕20 d剖宫取出胎鼠,进行形态学观察和伴发畸形统计,HE染色和以PGP9.5、SY为肠神经系统(enteric nervous system,ENS)发育标志物的免疫组化SP法。结果对照组获胚胎70只,未见畸形,末端结肠及直肠壁内有神经节细胞,肠壁肌层及黏膜肌层PGP9.5及SY大量阳性表达,沿肠壁呈棕黄色颗粒分布;实验组获胚胎98只,可见先天性肛门直肠畸形及伴发畸形,直肠末端PGP9.5及SY阳性表达分布均比对照组减少。用QWIN3000生物图像分析软件测定随机选定切片视野内的平均阳性面积百分比,所有数据经秩和检验得出PGP 9.5及SY在对照组的表达高于实验组(PGP 9.5:W=1035.00,Z=-8.386,P=0.000<0.01;SY:W=820,Z=-8.121,P值=0.000<0.01),差异有统计学意义。结论 ATRA可成功诱导大鼠肠神经系统发育异常,提示视黄酸信号系统在消化道和神经嵴源性器官胚胎发育中起重要作用。     

先天性肛门直肠畸形胎鼠肠管BMP4表达及意义

目的研究先天性肛门直肠畸形（ARMs）胎鼠小肠、结肠和直肠骨形成蛋白4（BMP4）的表达情况,并探讨其在自身肠神经系统（ENS）发育过程中的作用。方法利用全反式维甲酸（ARTA）诱导大鼠产生肛门直肠畸形胚胎,孕20d剖宫取胎,选取对照组正常胎鼠12只,实验组ARMs胎鼠24只,在大体显微镜下解剖整个肠管,选取距盲肠10cm处小肠,距盲肠3cm处结肠,距肛门0.5cm处直肠各一段,应用SP免疫组化方法检测对照组和实验组小肠、结肠和直肠BMP4的表达情况。结果对照组肠壁肌间及粘膜下神经丛可见BMP4抗体染色阳性细胞,实验组胎鼠小肠阳性细胞的MOD值与对照组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;而实验组胎鼠直肠、结肠的阳性细胞的MOD值与对照组相比明显减小,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论ARMs胎鼠结肠、直肠BMP4表达水平减低,可能与其远端肠管ENS发育不良有关。     

人类肛门直肠畸形基因表达谱的研究

目的：研究肛门直肠畸形患儿直肠末端的基因表达谱，初步筛查肛门直肠畸形的差异表达基因。方法：应用基因表达谱芯片技术对3例先天性肛门直肠畸形患儿的直肠末端组织和3例正常直肠末端组织的基因表达进行检测。结果：在186个发育相关基因中，共发现差异表达基因54个，表达上调的52个，表达下调的2个。结论：先天性肛门直肠畸形的发生涉及多基因改变。基因表达谱芯片技术可同时定量研究大量基因表达水平，是一种快捷高效的方法。     

高、中位肛门直肠畸形手术方法探讨

先天性肛门直肠畸形是胚胎后肠末端发育异常的一类疾病总称,是小儿常见的消化道畸形,高、中位肛门直肠畸形,病理变化复杂,合并其它畸形多,手术难度大,风险高,并发症多,近年来对肛门直肠畸形的病理改变和肛门排便、控制排便的生理研究,以及腹腔镜手术器械的创新和改进,使该手术方法得到不断的改善[1].     

Notch-1及Jagged-2基因在肛门直肠畸形大鼠直肠发育过程中的表达及意义

目的 检测Notch-1及Jagged-2基因在肛门直肠畸形(ARM)胎鼠直肠肠壁的胚胎发育过程中的表达变化,探讨其与肠壁神经肌肉发育的关系.方法 应用免疫组化和Western blot方法检测正常与乙烯硫脲致畸的ARM胎鼠直肠末端组织Notch-1及Jagged-2蛋白的定位及定量表达,应用RT-PCR方法检测Notch-1及Jagged-2基因mRNA的表达差异.结果 Notch1/Jagged-2在正常大鼠胚胎直肠发育过程中,在肠壁肌间神经丛(MP)、肠壁平滑肌及黏膜层均有表达,随着胚胎发育,表达强度逐渐增强,胚胎晚期主要集中在肠壁平滑肌及神经丛处;ARM组E17～E21表达均较正常组减弱,E19-E21表达与正常组差异更为显著.正常胎鼠直肠末端壁内中Notch-1及Jagged-2总蛋白量及mRNA明显高于畸形组(P＜0.05).结论 Notch-1/Jagged-2基因在肛门直肠畸形的神经肌肉发育过程中表达下调,可能与其发育不良有一定关系.     

全反式维甲酸致先天性肛门直肠畸形胎鼠盆底肌肌肉、神经发育的形态学研究

目的 观察肛门直肠畸形（ARMs）大鼠胚胎盆底肌肌肉、神经发育的组织形态学变化,为寻找术后远期便秘和便失禁致病基因提供线索.方法 通过全反式维甲酸（ATRA）诱导大鼠胚胎产生ARMs动物模型,用电镜观察E20胎鼠正常组和ARMs大鼠胚胎盆底肌肌肉、神经及神经肌肉接头形态学变化.结果 取E20正常组、ARMs胎鼠盆底肌各20例,光镜下可见正常组胎鼠盆底肌肌纤维紧密相连,肌束间含有胶原纤维、成纤维细胞、血管及神经等结构,细胞核染色清楚;透射电镜见盆底肌肌纤维排列整齐,肌节清楚,肌丝明显,明带、暗带、M线、Z线清晰可辨,可见盆底肌神经、神经突触、线粒体.ARMs胎鼠盆底肌纤维明显萎缩,透射电镜见肌纤维排列紊乱、结构不清,部分核细胞明显增大,部分核固缩呈锯齿状,明带、暗带不清晰,M线、Z线有不规则改变、扭曲、断裂,肌膜之间满布成纤维细胞,神经及神经肌肉接头未找出.结论 ARMs胎鼠存在盆底肌肉的解剖缺陷及功能障碍,可能与ARMs存在骶髓、盆底及肛周神经发育不良有关.     

双向电泳-飞行时间串联质谱对先天性脊柱裂大鼠脊髓差异表达蛋白的鉴定

  应用双向电泳-飞行时间串联质谱技术筛查反式维甲酸致先天性脊柱裂大鼠脊髓组织与正常发育胚胎的差异表达蛋白,初步探讨先天性脊柱裂神经功能损伤的可能机制。     

PGP9.5、SYn和α-actin在先天性肛门直肠畸形动物模型盆底肌的表达及意义

目的检测PGP9.5、SYn和α-actin在胎鼠正常盆底肌和肛门直肠畸形(ARMs)中的蛋白表达,探讨其表达意义。方法通过全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠胚胎产生ARMs动物模型,应用免疫组化方法检测正常与ARMs胎鼠直肠末端组织PGP9.5、SYn、α-actin在E16、18、20胎鼠盆底肌发育过程中的表达。结果正常组共产胎鼠91只,未见畸形、死胎、吸收胎;ATRA诱导大鼠共产胎鼠126只,除无肛畸形外,短尾、无尾畸形58例,存在显性脊柱裂、脑膜膨出等神经发育缺陷有29例,ARMs发生率为74.60%。E16、18、20胎鼠盆底肌:正常组PGP9.5、SYn和α-actin呈阳性表达;ARMs组PGP9.5、SYn和α-actin呈弱阳性表达,分布稀疏。PGP9.5、SYn强阳性表达率除E16 2组间差异无统计学意义外(P﹥0.05),E18、20差异有统计学意义(P<0.05)。α-actin在E16、18、20两种组织间强阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PGP9.5、SYn和α-actin分布异常是ARMs动物模型直肠末端壁的重要病理改变之一。     

Ephrin B2基因在维甲酸诱导神经干细胞分化过程中的表达

目的　研究EphrinB2基因在全反式维甲酸诱导人胚胎神经干细胞的分化为神经元过程中的表达及其发挥的作用。方法　用 1μmol/L的维甲酸诱导人胚胎神经干细胞 ,诱导 7d后 ,做NSE免疫荧光染色 ,计数分化为神经元的比例。于ATRA诱导前、诱导 3d和诱导 7d ,提取细胞的总RNA。用半定量RT PCR法检测EphrinB2基因的表达情况。结果　与对照组相比 ,全反式维甲酸能显著提高人胚胎神经干细胞分化为神经元的比例 (P <0 .0 1)。EphrinB 2基因在维甲酸诱导后明显上调 (P <0 .0 0 1)。结论　EphrinB2基因在全反式维甲酸诱导人胚胎神经干细胞分化为神经元的过程中起正调控作用 ,EphrinB2基因与神经元的分化关系密切。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

十二指肠损伤的治疗体会

目的：提高十二指肠损伤的诊治水平，方法：回顾总结该院1999年－2001年间收治的十二指肠损伤7例临床经验。结果：合并其他腹部脏器损伤86％（6／7），单纯十二指肠损伤14％（1／7）。损伤部位以十二指肠降部为多占71％（5／7），水平部和球部各占14％（1／7），术后并发症发生率28％（2／7）、病死率14％（1／7）。结论：掌握十二指肠损伤的特点，早诊断、早手术、术中认真探查，掌握好检查指征，选择合理恰当术式，加强术后管理，可提高治愈率。