雷公藤红素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中RANKL､OPG及炎性因子表达的影响

目的:观察雷公藤红素(Celastrol,Cel)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A细胞中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)?骨保护素(OPG)?白细胞介素-6(IL-6)?肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素-8(IL-8)表达的影响?方法:以白细胞介素-1β(IL-1β)刺激MH7A,不同浓度的Cel(0.1?0.5?1.0?2.0 μmol/L)干预细胞24 h后,采用real-time PCR和免疫荧光的方法检测RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8的表达?结果:IL-1β刺激MH7A细胞系24 h后,RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8 mRNA及RANKL免疫荧光明显增强,Cel呈剂量依赖性抑制MH7A中IL-1β诱导的RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8 mRNA水平(P < 0.05)和MH7A中RANKL免疫荧光表达,显著上调OPG/RANKL轴比值?结论:Cel能调节滑膜成纤维细胞中OPG/RANKL轴和抑制促炎因子?趋化因子的表达,可能在阻止类风湿关节炎“炎症”和“骨侵蚀”中发挥重要作用?     

lncRNA CASC2通过调控miR-218-5p表达对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞炎症反应及迁移与侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA肿瘤易感候选基因2(CASC2)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞炎症反应、迁移及侵袭的影响及其机制。方法 收集45例RA患者滑膜组织和18例健康对照者滑膜组织，采用qRT-PCR检测滑膜组织中CASC2和miR-218-5p的表达水平。ENCORI在线软件预测和双荧光素酶报告实验分析CASC2和miR-218-5p的靶向相互作用。将CASC2过表达质粒及miR-218-5p mimic转染至人RA滑膜成纤维细胞系MH7A中，qRT-PCR检测细胞中CASC2和miR-218-5p表达水平；CCK-8检测细胞的增殖水平；ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平；Transwell检测细胞迁移和侵袭能力；Western blot检测基质金属酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平。结果 RA患者滑膜组织中CASC2表达水平较健康对照者滑膜组织减少(P<0.05),而miR-218-5p表达水平则增加(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示，CASC2与miR-218...     

穿山龙水溶性总皂苷对RSC-364细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响

目的：观察穿山龙水溶性总皂苷对大鼠滑膜成纤维细胞系RSC-364细胞分泌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和MMP-9的影响。方法：应用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素17（IL-17）刺激RSC-364细胞建立类风湿性关节炎细胞模型,并以不同剂量穿山龙水溶性总皂苷进行干预,ELISA法检测细胞培养液上清MMP-2和MMP-9的水平。结果：穿山龙水溶性总皂苷各剂量组（10、20、30mg/L）在不同时间点（24、48、72h）均可明显降低TNF-α和IL-17刺激的RSC-364细胞分泌MMP-2、MMP-9水平的升高,并呈剂量依赖性（P＜0.05）。结论：穿山龙水溶性总皂苷可能通过抑制RSC-364细胞分泌MMP-2和MMP-9发挥抗类风湿性关节炎的作用。     

甲氨喋呤和雷公藤对类风湿关节炎滑膜细胞产生趋化因子的影响

目的:探讨甲氨喋呤(MTX)和雷公藤多甙(TG)对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞产生CC趋化因子受体5配体(CCL5)的影响. 方法:分离13例RA和7例骨关节炎(OA)的滑膜细胞行体外培养,并用细胞脂多糖(LPS)诱导CCL5产生,同时加入或不加入不同浓度的MTX或TG. 采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清液中的CCL5水平. 结果:RA滑膜细胞体外自发产生CCL5水平高于OA滑膜细胞(P<0.05);LPS刺激后,RA和OA滑膜细胞产生CCL5水平均较刺激前显著升高(P均<0.001),但二者间无显著性差异(P>0.05);MTX和TG均可显著抑制RA滑膜细胞产生CCL5,但二者抑制方式不同:MTX剂量在5～20 μg/L的剂量范围内呈现剂量依赖性效应,之后随剂量的增大,其抑制作用不再进一步增强. 而TG 未显示出剂量依赖性抑制效应,仅在剂量达到或超过40 μg/L时出现比MTX更显著的抑制作用. TG抑制CCL5产生与其所致的滑膜细胞死亡相关. 结论:RA滑膜细胞产生CCL5增高,MTX和TG均可显著抑制CCL5的产生,其中TG抑制CCL5产生与其细胞毒作用有关.     

青藤碱对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的观察青藤碱对Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型大鼠（CIA）低氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）及基质金属蛋白9（MMP-9）的影响,探讨青藤碱对类风湿关节炎（RA）滑膜血管新生的作用机制。方法40 只远交群大鼠,随机选取10 只作为对照组,余30 只大鼠采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂的方法复制关节炎模型。15 d 后造模大鼠随机分为模型组、雷公藤组、青藤碱组,每组10 只。雷公藤组：雷公藤多甙片9.68 mg/（kg·d）灌胃给药;青藤碱组：青藤碱片100 mg/（kg·d）灌胃给药;模型组灌服等体积0.9%氯化钠注射液。1 次/d,共28 d。期间测量大鼠踝关节肿胀度。灌药28 d 后处死大鼠,免疫组织化学法检测关节滑膜组织HIF-1α水平,酶联免疫吸附试验测定血清中VEGF、MMP-9 水平。结果与模型组比较,青藤碱组和雷公藤组大鼠关节肿胀度减轻（p <0.05）;青藤碱组和雷公藤组滑膜组织中HIF-1α 表达降低（p <0.05）;青藤碱组和雷公藤组血清中VEGF、MMP-9 表达降低（p <0.05）。结论青藤碱可降低CIA 踝关节肿胀,疗效与雷公藤多甙相当。其机制可能是通过下调HIF-1α的表达及VEGF、MMP-9水平,从而减少滑膜新生血管生成。     

CCR5基因沉默对RA大鼠滑膜细胞炎症反应的影响

【摘要】 目的 探讨CCR5基因沉默对类风湿关节炎（RA）大鼠滑膜细胞炎症因子TNF-α、IL-6、MMP-1及MMP-3 的影响。方法 将SPF级Wistar雄鼠饲养一周后随机分为Control(WC)组与RA模型组,采用胶原诱导法构建RA大鼠模型,然后分离和培养RA大鼠滑膜细胞,再将细胞分为4组：RA组（RA大鼠滑膜细胞）、RA+NC组（加入脂质体包裹的NC siRNA）、RA+mock组（加入脂质体）、RA+siRNA组（加入脂质体包裹的CCR5 siRNA）。利用RNA干扰技术干扰大鼠滑膜细胞CCR5的表达,干扰后用qRT-PCR检测各组滑膜细胞CCR5及炎症因子TNF-α、IL-6、MMP-1及MMP-3 mRNA相对表达水平,用Western Blot检测其CCR5蛋白表达情况,并用ELISA方法检测各组滑膜细胞上清液中TNF-α、IL-6、MMP-1、MMP-3的水平。结果 干扰大鼠滑膜细胞CCR5的表达后,与RA组比较,RA+siRNA组CCR5 mRNA及TNF-α、IL-6、MMP-1、MMP-3 mRNA及蛋白水平均显著降低（P＜0.05）,而RA+NC组、RA+mock比较组差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 沉默CCR5可抑制CCR5 mRNA及其蛋白的表达,并有助于降低RA大鼠滑膜细胞的炎症因子TNF-α、IL-6、MMP-1及MMP-3的表达,减轻大鼠滑膜细胞的炎症反应,并为以后利用RNA干扰技术沉默CCR5用于RA的治疗提供新的方向。     

清热化瘀凝胶对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠炎症细胞因子表达的影响

目的通过观察清热化瘀凝胶对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜及血清细胞因子表达的影响,探讨清热化瘀凝胶外敷治疗类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的相关作用机制。方法 50只SD雌性大鼠随机分为清热化瘀凝胶外敷组、雷公藤多苷片口服组、扶他林外敷组、模型组和正常组,每组10只。观察大鼠关节肿胀度,关节病理切片,肝脏、肾脏组织病理切片,采用ELISA法检测血清及滑膜组织中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素1(Ang-1)和白介素1β(IL-1β)表达差异。结果清热化瘀凝胶外敷组CIA大鼠关节肿胀程度明显减轻;与模型组比较,清热化瘀凝胶组显著降低CIA大鼠血清中IL-1β(P 0. 01)、TNF-α(P 0. 001)和Ang-1(P 0. 01)的水平;滑膜组织中IL-1β(P 0. 001)、TNF-α(P 0. 01)、VEGF(P 0. 01)及Ang-1(P 0. 001)较模型组显著下降;关节病理切片显示清热化瘀凝胶可减少炎症细胞浸润、抑制滑膜组织增殖、延缓骨质破坏;肝脏、肾脏病理切片与正常组比较无异常变化。结论清热化瘀凝胶通过降低RA炎症细胞因子水平,抑制滑膜组织增殖,减少滑膜中血管新生和血管翳形成,进而控制RA病情,且安全性良好。     

TNF-α刺激人牙周膜细胞表达MMP-9的研究

  目的 研究TNF-α对hPDLCs表达MMP-9的影响。方法 分别以1、2、5ng/mL浓度的TNF-α刺激hPDLCs 24h,以及2ng/mL浓度的TNF-α刺激hPDLCs 6h、12h、24h、48h,应用ELISA法测定细胞上清液中MMP-9的表达水平。结果 随着TNF-α浓度增大和作用时间延长,hPDLCs表达MMP-9均增加。结论 TNF-α能够以时间和剂量依赖的方式增强hPDLCs表达MMP-9。     

类风湿性关节炎患者血清血管内皮生长因子与炎性因子的表达水平及相关性分析

目的 探讨类风湿性关节炎（RA）患者血清血管内皮生长因子（VEGF）与炎性因子C-反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的表达水平及相关性分析.方法 37例RA患者分为RA活动期组（21例）和RA缓解期组（16例）,另采集20例健康体检者作为健康对照组.抽取所有受试者空腹静脉血离心取上清液,免疫比浊法测定CRP水平,酶联免疫吸附法测定VEGF、TNF-α和IL-6水平.结果 RA缓解期组和RA活动期组TNF-α、IL-6、CRP和VEGF水平较健康对照组均显著升高（P均＜0.05）.RA患者血清VEGF水平与TNF-α、IL-6、CRP均呈显著正相关（r分别为0.671、0.502、0.584,P均＜0.05）.结论 血清VEGF和TNF-α、IL-6、CRP水平高低能够反映RA患者病情活动变化,VEGF在类风湿性关节炎发病机制中可能和TNF-α、IL-6、CRP具有协同作用.     

血管内皮生长因子在早期脊柱关节病中的变化

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在早期脊柱关节病(SpA)外周关节病变发病机制中的作用以及与疾病活动性的相关性.方法:采用免疫组织化学及原位杂交方法检测SpA患者及类风湿关节炎(RA)外周膝关节滑膜组织VEGF mRNA及蛋白的表达,并将VEGF检测结果进一步与关节镜下滑膜形态学所见及部分实验室炎性指标进行相关性分析.结果:SpA组滑膜衬里层VEGF蛋白的表达与CRP呈正相关,早期RA滑膜血管周围VEGF蛋白的表达与CRP呈正相关;早期RA滑膜衬里层和衬里下层基质组织VEGF蛋白表达与外周血小板计数(PLT)呈正相关.SpA组滑膜衬里层VEGF蛋白表达与血管形态、直行血管走行方式呈正相关,SpA组血管周围VEGF蛋白表达与滑膜增生程度呈正相关;RA滑膜衬里层VEGF蛋白表达与血管形态、弯曲血管走行方式、血管密度呈正相关.结论:SpA滑膜组及RA滑膜组VEGFmRNA以及蛋白表达不同主要表现在血管周围,推测这可能是造成SpA与RA预后不同的原因之一.     

双胸蚯蚓溶栓酶对沙鼠缺血额叶皮质超微结构及离子的影响

采用结扎沙土鼠双颈总动脉20分钟后恢复血流制做脑缺血再灌注模型。应用透射电镜对额叶皮质超微结构进行观察,并采用电镜能谱技术对神经元随机检测Na~十Ca~卄等离子含量。结果表明,缺血的对照组神经元Na~十明显增高达16.43,而缺血后腹腔注入双胸蚯蚓溶栓酶的实验组显著下降为13.02,接近正常组的11.47;Ca~卄正常组为1.03,对照组增高达3.81,而实验组下降为2.44。同时实验组超微结构的损伤性改变明显轻于对照组。     

壮族健康成人血小板参数的检测

目的 :探讨壮族健康成人血小板参数是否与汉族成人有差异。方法 :应用SysmexSF - 30 0 0血细胞自动分析仪 ,检测 40 0名健康成人 (2 0 5名汉族人 ,195名壮族人 )抗凝全血的血小板参数。结果 :壮族、汉族成人血小板分别为 (2 38 5± 6 5 36 )× 10 9/L和 (2 2 0 7± 6 0 6 7)× 10 9/L ,平均血小板体积分别为 (8 32± 1 6 8)fl和 (8 6 7± 1 82 )fl,血小板分布宽度分别为 (14 6 2±0 6 9) %和 (14 5 1± 0 71) % ,血小板—大细胞比率分别为 (2 1 98± 4 2 1) %和 (2 1 77± 4 44 ) %。结论 :壮族健康成人血小板数明显高于汉族健康成人 (P =0 0 0 5 ) ,平均血小板体积比汉族人低 (P =0 0 46 6 ) ;血小板分布宽度及血小板—大细胞比率无明显差异。     

小气道功能检查的临床意义—101例分析

本文报告了无症状吸烟者和非吸烟健康人,以及慢阻肺患者测定CV、CC、SBN_2、MEFV、MMEF、FEV1.0、RV/TLC的结果,经统计处理,吸烟与非吸烟,慢阻肺与健康人之间有显著差异。资料分析表明,在检出小气道功能异常方面SBN_2最敏感,其次是CC/TLC%和V_(50)/H。尽管小气道功能检查用作个体诊断还有误差,但仍不失为研究小气道病理生理功能和慢阻肺发病机制的敏感方法,对于慢阻肺的早期防治有重要意义。     

雌激素替代对切卵巢大鼠基底前脑NGFR和学习记忆的影响

目的 探讨雌激素替代对切卵巢大鼠基底前脑胆碱能神经元神经生长因子表达的影响和对学习记忆的影响。方法 ５０只雌性切卵巢大鼠分成给雌激素组和对照组,分别用免疫组化方法测定给药后１周、２周、４周时基底前脑各部位神经生长因子受体（ＮＧＦＲ）阳性神经元数,用ＭＯＲＲＩＳ迷宫观察给药４周时大鼠逃避潜伏和搜索策略,并进行两组间比较。结果 给雌激素组与对照组ＮＧＦＲ阳性神经元数内侧隔核（ＭＳ）和Ｍｅｙｎｅｒｔ基     

呼吸道合胞病毒及腺病毒在小儿疾病中的病原探讨

应用间接免疫荧光技术(IIF)对呼吸适合胞病毒(RSV)及腺病毒(AdV)3型和7型在我区小儿疾病中的病原作用进行了2年观察,共观察311例。结果表明:ESV在毛细支气管炎中阳性检出率为50％;在普通肺炎中为36.5％;在重症肺炎中为37.5％;在哮喘患儿中为42％;在上感患儿中为20.3％。而AdV(3,7型)在毛细支气管炎中的阳性检出率为5.5％;在普通肺炎中为2.2％;在上感患儿中为6.3％;在败血症患儿中为33.3％。不同性别、不同族别患儿中RSV阳性检出率无明显统计学差异。而婴儿与幼儿组之间RSV阳性检出率有显著统计学差异。     

两种方法检测丙型肝炎病毒抗体的一致性比较

目的 用Kappa检验分析两种方法检测丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)抗体的一致性,为安全输血提供最佳的HCV抗体筛查方法.方法 选取2015年2月至2016年6月在我院就治而有可能需输血患者的丙型肝炎病毒抗体待检标本,用胶体金法HCV抗体检测试剂盒检测,将可疑结果和阳性结果标本再用酶联免疫吸附试验HCV抗体诊断试剂盒(ELISA)和化学发学测定法HCV抗体检测试剂盒CLIA)分别进行复检.用SPSS17.0软件分别对可疑和阳性结果、可疑结果、阳性结果进行Kappa分析一致性程度,并用U检验对Kappa系数进行统计分析.结果 胶体金法HCV抗体检测试剂盒检测全部标本共448例可疑阳性和阳性结果,其中112例为可疑结果,336例为阳性结果;用ELISA方法检测448例初检为可疑和阳性结果,结果为阴性、可疑和阳性的例数分别是54例(12%)、18例(4%)、376例(84%),用CLIA方法检测结果分别为42例(9.4%)、11例(2.5%)、395例(88.1%);用ELISA方法检测112例初检为可疑阳性结果,结果为阴性、可疑和阳性的例数分别是11例(9.8%)、30例(26.8%)、71例(63.4%),用CLIA方法检测结果分别为13例(11.6%)、21例(18.7%)、78例(69.7%);用ELISA方法检测336例初检为阳性结果,结果为阴性、可疑和阳性的例数分别是12例(3.6%)、28例(8.3%)、296例(88.1%),用CLIA方法检测结果分别为11例(3.3%)、19例(5.6%)、306例(91.1%).两种方法对可疑和阳性标本、可疑标本、阳性标本的Kappa系数分别为Kappa=0.730(u=16.22,P<0.01)、Kappa=0.497(u=6.81,P<0.05)、Kappa=0.705(u=11.56,P<0.01).结论 两种方法对可疑和阳性标本、阳性标本的检测结果有较好的一致性,而对可疑标本的检测结果一致性为中等,对可疑阳性结果应用更为敏感和特异的试验验证.     

MRI测量颞叶钩回间距在老年痴呆诊断上的应用

目的：本研究为验证ＭＲＩ上颞叶间距对于Ａｌｚｈｅｍｉｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ（ＡＤ）的诊断和鉴别诊断价值。方法：在１．５Ｔｅｓｌａ ＧＥ Ｓｉｇｎ Ｈｏｒｉｚｏｎ或Ｓｉｅｍｅｎｓ １．０Ｔｅｓｌａ上对４７６例，其中ＡＤ组６１例，ＶａｓｃｕｌａｒＤｅｍｅｎｔｉａ（ＶＤ）组５３例，健康老年对照组（ｈｅａｔｈｌｙ ｃｏｎｅｒｏｌ，ＨＣ）组１１１例，和其他健康成人对照组（ｏｔｈｅｒ ｈｅａｔｈｌｙ ｃｏｎｔｒ     

血栓调节蛋白在系膜增生性肾小球肾炎中的相关探讨

目的：探讨系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）患者血浆中血栓调节蛋白（PTM）的水平与肾功能、蛋白尿、凝血功能、血脂之间的关系。方法：54例经肾穿刺活检明确诊断的MsPGN患者,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆PTM水平。依照蛋白尿的程度将病人分为两组：（1）大量蛋白尿组,24h尿蛋白定量大于3.5 g。（2）少量蛋白尿组,24 h尿蛋白定量小于3.5 g。结果：大量蛋白尿组的PTM浓度、纤维蛋白原（Feb）、甘油三酯和总胆固醇均比少量蛋白尿组高,两组之间有统计学差异（P〈0.05）。而少量蛋白尿组的白蛋白比大量蛋白尿组高（P〈0.05）,两组CCr相比没有显著性差异。所有病人的PTM与其他指标的相关性分析显示PTM与Feb和蛋白尿呈正相关（r=0.371r、=0.505,P均〈0.05）,PTM随着Feb和蛋白尿的增加而增高。PTM与白蛋白呈负相关（r=-0.491,P〈0.05）,PTM随着白蛋白降低而增高。PTM与CCr、甘油三酯和总胆固醇无相关性（P〉均0.05）。结论：血浆PTM水平与蛋白尿的程度相关。血浆PTM与蛋白尿的水平不仅是（MsPGN）病变程度的指标,并且可为指导治疗和判断预后提供依据。     

短暂性脑缺血发作患者的预后与血清C反应蛋白水平的关系探讨

目的 :探讨短暂性脑缺血发作 (TIA)患者的预后与发病后的血清C反应蛋白 (CRP)的关系。 方法 :测定 5 7例TIA患者血清CRP水平 ,门诊复查调查患者的预后 (即 2年内缺血性卒中的复发情况 )。 结果 :缺血性卒中复发组CRP水平较无复发组显著增高 (P <0 0 1)。结论 :血清CRP水平与TAI患者的预后呈正相关。     

孕周与母儿血甲状腺激素含量的关系

目的：观察不同孕周与母儿血甲状腺激素的关系。方法：应用放射免疫分析法对67例中、晚期妊娠要求引产患者，10例早产及78例孕足月自然分娩患者进行了母血及胎儿脐静脉、脐动脉血中TSH、T3、T4的测定。结果：TSH值在母血及胎儿血中随着孕周的增加而增加．T3值在胎儿血中与母血中比较，显示低T3血症，T4值接近正常母体水平。结论：测定母血中的甲状腺激素，可动态观察不同孕周甲状腺激素变化，可及时发现胎儿低甲血症。